專利名稱：植物樣品中果膠含量的測定方法
技術領域：
本發明涉及植物組分的提取，尤其涉及一種植物樣品中果膠含量的測定方法。
技術背景
在植物中果膠含量的測定中，常需用到顯色法檢測，但在顯色法檢測時，由于色素 會有一定吸光度，從而對顯色法造成干擾，同時糖會與顯色劑反應形成有色物質，這也會對 顯色法造成干擾，所以在測定過程中，通常都需要先進行除糖、除色素的前處理。在植物中 果膠含量的測定中，常用的樣品前處理方法是將植物粉末樣品用濃度為80%的乙醇溶液 加熱回流1小時，去除濾液，余下濾渣再做進一步的提取處理，用于其它檢測，此種方法一 般稱為乙醇處理法，但這種乙醇處理法存在的問題是只能除去小分子水溶性糖，同時對色 素的提取也有一定局限性。而在濾渣處理時，有時候需要用酸液提取，這就造成之前來被提 取出來的多糖水解而被提取出來，而由于酸的作用破壞了細胞壁，使之前來能溶解出來的 色素也被提取出來，從而影響最終檢測結果。在進行完前處理后，要對經過前處理的樣品進 行檢測。現有的檢測方法有重量法，由于果膠不是單純半乳糖醛酸的聚合，在采用重量法檢 測時，支鏈上的中性糖和a-L-(l —2)鼠李糖，以及甲酯化基團、乙酰化基團同時被沉淀下 來，所以其重量必然高于對半乳糖醛酸累計量。因此，重量法檢測結果無法反映出樣品中的 半乳糖醛酸含量情況，即無法反映出樣品中表征果膠特性的半乳糖醛酸支鏈骨架的含量情 況。發明內容
本發明要解決的技術問題是克服現有技術存在的缺陷，提供一種植物樣品中果膠 含量的測定方法，檢測結果更加準確。
本發明提供的一種植物樣品中果膠含量的測定方法，包括如下步驟
1)在植物樣品中加入酸性醇溶液，隨后在水浴中加熱回流，再進行一次過濾；
2)將一次過濾得到的濾渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加熱回流，再進行二次過濾， 冷卻后定容，得到濾液待用；
3)往二次過濾后的濾渣加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液處理，再加入果膠酶溶液，在 水浴中加熱振蕩，然后進行三次過濾，得到濾液待用；
4)將步驟2、中得到的濾液依次加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液、果膠酶溶液，然后在 水浴中加熱振蕩，得到酶解液，在酶解液中合并步驟幻得到的濾液，定容，得到待測液；
5)將待測液吸入到連續流動分析儀中，所述待測液與吸入到連續流動分析儀中的 強酸性分解試劑反應，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應顯色，在490nm MOnm波長下進行檢測。
優選地，步驟1)中，以體積百分比計，酸性醇溶液的醇濃度為60% 80%;而氫離 子濃度為0. 005mol/L 0. 02mol/L，酸性醇溶液加入量為1克樣品加入約50 200mL酸性醇溶液。
優選地，步驟1)中，所述水浴中加熱回流的溫度為80°C 100°C，時間為10分 鐘 1小時。
優選地，所述酸溶液是濃度為0. 05mol/L 0. lmol/L的鹽酸，水浴中加熱回流的 溫度為80°C 100°C，時間為30分鐘 2小時，對于1克植物樣品，定容后濾液體積控制 在 200mL 250mLo
優選地，乙酸/乙酸鈉緩沖液和果膠酶溶液加入量為1克植物樣品，加入緩沖液 15mL 20mL、加入果膠酶溶液ImL 2mL，其中，每毫升果膠酶溶液的酶活性300個酶活力 單位以上；所述水浴中加熱振蕩的溫度為40°C 60°C，時間為1小時 2小時。
優選地，ImL濾液中加入緩沖液15 20mL、加入果膠酶溶液1 2mL，其中，每毫 升果膠酶溶液的酶活性為300個酶活力單位以上，所述水浴中加熱振蕩的溫度為40°C 60°C，時間為1小時 2小時。
優選地，步驟5)中將待測液與強酸性分解試劑通過螺旋管混合，在待測液與強酸 性分解試劑反應過程中加熱，而后冷卻。
優選地，所述植物樣品為粉末狀。
優選地，步驟1)中，所述植物樣品體積較大時，加入酸性醇溶液后先攪拌成槳，再 進行水浴加熱回流。
優選地，所述顯色劑為對羥基聯苯溶液，所述對羥基聯苯溶液中的各組分配比為 IOOOmL蒸餾水中溶解300mg 500mg對羥基聯苯及3g 5g氫氧化鈉。
優選地，所述強酸性分解試劑為含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液，其中，四硼酸鈉與濃 硫酸的配比為1000mL濃度為92% 99%的濃硫酸中溶解3g 6g的四硼酸鈉。
優選地，在待測液與強酸性分解試劑反應過程中加熱的溫度為90°C 99°C。
優選地，冷卻采用匝數為20匝 50匝的冷卻管冷卻。
優選地，以體積百分比計，步驟幻、步驟4)中的果膠酶溶液的濃度為300u/mL 600u/mLo
與現有技術相比，本發明具有如下優點
一、由于在步驟1)中，采用酸性醇溶液處理取代現有技術的醇溶液處理，除糖效 果更高、處理時間更短，并有利于減少其后步驟2)中酸溶液浸泡、加熱回流處理的所需時 間。同時，整個處理過程，由于不需要離子色譜法中為適合于低含量樣品檢測的特點而對樣 品進行大量稀釋處理，所以也減少了多項稀釋定容等處理步驟，減少了操作的復雜程度，提 高了效率。
二、由于采用連續流動法對經過處理得到的待測液進行檢測，將待測液吸入連續 流動分析儀中，與強酸性分解試劑反應，對待測液中果膠進行腐化、分解，轉化為可以顯色 的衍生物，從而更便于光度檢測，因而使得檢測過程更加容易。
圖1是本發明植物中果膠含量的連續流動測定方法的流程圖2是本發明中利用連續流動分析儀的檢測流程圖3是半乳糖醛酸標準溶液顯色后的吸光度掃描譜圖4是樣品提取液顯色后的吸光度掃描譜圖5是分析儀吸光度掃描圖之一；
圖6是標準曲線描圖之一；
圖7是分析儀吸光度掃描圖之二 ；
圖8是標準曲線掃描圖之二。
具體實施方式
為使本發明的發明目的、技術方案更加清楚，以下通過實施例進行詳細說明。
參見圖1，本發明的植物樣品中果膠含量的測定方法，包括如下步驟
Si、在植物樣品中加入酸性醇溶液，隨后在水浴中加熱回流，再進行一次過濾；
S2、將一次過濾得到的濾渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加熱回流，再進行二次過 濾，冷卻后定容，得到濾液待用；
經過過濾得到的濾渣，再用酸溶液沖洗多次，可以將濾渣上附著的濾液極大程度 地去除；
通過此步驟，將大部分果膠組分提取到濾液中；
S3、往二次過濾后的濾渣中加入一定量的乙酸/乙酸鈉緩沖溶液處理，再加入一 定量的果膠酶溶液，在水浴中加熱振蕩，然后進行三次過濾，得到濾液待用；
通過此步驟，使得濾渣中來被提取的果膠被提取液提取出來，并分解為半乳糖醛 酸；
S4、將步驟S2中得到的濾液依次加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液、果膠酶溶液，然后在 水浴中加熱振蕩，得到酶解液，在酶解液中加入步驟S3得到的濾液，定容，得到待測液；
通過此步驟，使得酸液提取液中的果膠充分水解為半乳糖醛酸，并與濾渣中殘留 的果膠提取液混合，使提取得到的果膠能夠充分收集，得到待測液，以使最終檢測結果更加 準確；
S5、將待測液吸入到連續流動分析儀中，所述待測液與吸入到連續流動分析儀中 的強酸性分解試劑反應，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應顯色，在490 MOnm波長下進行檢測。
待測液通過與強酸性分解試劑反應，使得果膠腐化，轉化為可以顯色的衍生物，從 而更便于光度檢測；
其中，顯色劑為對羥基聯苯溶液，該對羥基聯苯溶液中的各組分配比為1000mL 蒸餾水中溶解300mg 500mg (優選400mg)對羥基聯苯及3g 5g氫氧化鈉(優選4g)。
其中，強酸性分解試劑為含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液，其中，四硼酸鈉與濃硫酸的 配比為1000mL濃度為92% 99%的濃硫酸中溶解3 6g (優選4. 8g)的四硼酸鈉。
其中，強酸性分解試劑采用兩根泵管或三根泵管并聯向連續流動分析儀進樣；單 泵管流量控制在0. 6ml/min 1. 2ml/min,總流量控制為1. 6ml/min 3. Oml/min,強酸性 分解試劑的流量與進樣量的比例關系是13. O 1 30 1(優選是16 1 20 1)。 以此克服，強酸性分解試劑粘度大，在流動分析管路中流動困難的問題。
下面通過具體的實施例對本發明進行進一步描述。
實施例一
1)在植物樣品中加入乙醇體積百分比為60%、鹽酸濃度為0. Olmol/L的酸性醇溶6液，隨后在90°C水浴中加熱回流20分鐘，再進行一次過濾；
2)將一次過濾得到的濾渣用0. 05mol/L的鹽酸溶液浸泡，并在90°C的水浴中加熱 回流30分鐘，再進行二次過濾，冷卻后定容到250mL，得到濾液待用；
3)往二次過濾后的濾渣加入20mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸鈉緩沖溶液 處理，再加入ImL的300u/mL的果膠酶溶液，在55°C的低溫水浴中加熱振蕩1小時，然后進 行三次過濾，得到濾液待用；
4)將步驟2)中得到的濾液移取lmL，依次加入20mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸 /乙酸鈉緩沖溶液，ImL的300u/mL的果膠酶溶液，然后在55°C的低溫水浴中加熱振蕩1小 時，得到酶解液，在酶解液中合并步驟幻得到的濾液，以質量百分比為0. 苯甲酸溶液定 容到100mL，得到待測液；
5)將待測液(試樣)吸入到連續流動分析儀中，與吸入到連續流動分析儀中的含 有十水四硼酸鈉的濃硫酸溶液一同經過螺旋管混合，然后加熱至90°C，待測液與含有十水 四硼酸鈉的濃硫酸溶液發生反應，分解轉變為糠醛堿的衍生物，而后冷卻，與加入的顯色劑 通過螺旋管混勻，與顯色劑反應顯色，在500nm波長下進行檢測。
其中，所有過濾處理都不能采用普通濾片，而需要采用玻璃纖維濾片，也可采用其 它不含植物纖維的濾片代替。
其中，步驟5)中的檢測流程參見圖2。
其中，步驟幻中的顯色劑為對羥基聯苯溶液，該對羥基聯苯溶液中的各組分配比 為1000mL蒸餾水中溶解400mg對羥基聯苯及4g氫氧化鈉。
其中，含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液中，四硼酸鈉與濃硫酸的配比為1000mL濃度 為93%的濃硫酸中溶解3. 5g的四硼酸鈉。
其中，步驟幻中加熱采用的加熱器，其內部設置的加熱螺旋管匝數為64匝。
其中，步驟5)中采用水浴冷卻，冷卻管匝數為30匝(冷卻水入口直接連接到水龍 頭處，冷卻水流量和螺旋管匝數的設置，以使冷卻后流程管路溫度接近室溫為適宜)。
實施例二
1)在植物樣品中加入乙醇體積百分比為80%、鹽酸濃度0. 01mol/L的酸性醇溶 液，隨后在89°C的水浴中加熱回流25分鐘，再進行一次過濾；
2)將一次過濾得到的濾渣用0. lmol/L的鹽酸溶液浸泡，并在92°C的水浴中加熱 回流30min，再進行二次過濾，得到濾液待用；
3)往二次過濾后的濾渣加入20mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸鈉緩沖溶液 清洗，再加入ImL的400u/mL的果膠酶溶液，在50°C的低溫水浴中加熱振蕩1.證，然后進行 三次過濾，得到濾液待用；
4)將步驟2)中得到的濾液移取lmL，依次加入20mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸 /乙酸鈉緩沖溶液，ImL的400u/mL的果膠酶溶液，然后在55°C低溫水浴中加熱振蕩lh，得 到酶解液，在酶解液中合并步驟幻得到的濾液，以質量百分比為0. 苯甲酸溶液定容到 250mL，得到待測液；
5)將待測液(試樣)吸入到連續流動分析儀中，與吸入到連續流動分析儀中的含 有十水四硼酸鈉的濃硫酸溶液一同經過螺旋管混合，然后加熱至95°C，待測液與含有十水 四硼酸鈉的濃硫酸溶液發生反應，分解轉變為糠醛堿的衍生物，而后冷卻，與加入的顯色劑通過螺旋管混勻，與顯色劑反應顯色，在530nm波長下進行檢測。
其中，步驟5)中的檢測流程參見圖2。
其中，步驟幻中的顯色劑為對羥基聯苯溶液，該對羥基聯苯溶液中的各組分配比 為1000mL蒸餾水中溶解300mg對羥基聯苯及3g氫氧化鈉。
其中，含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液中，四硼酸鈉與濃硫酸的配比為1000mL濃度 為92%的濃硫酸中溶解3g的四硼酸鈉。
其中，步驟幻中加熱采用的加熱器，其內部設置的加熱螺旋管匝數為35匝。
其中，步驟5)中采用水浴冷卻，冷卻管匝數為25匝。
實施例三
1)在植物樣品中加入乙醇體積百分比為80%、鹽酸濃度0. 005mol/L的酸性醇溶 液，隨后在88°C的水浴中加熱回流35分鐘，再進行一次過濾；
2)將一次過濾得到的濾渣用0. OSmol/L的酸溶液浸泡，并在89°C的水浴中加熱回 流lh，再進行二次過濾，得到濾液待用；
3)往二次過濾后的濾渣加入25mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸鈉緩沖溶液 清洗，再加入ImL的400u/mL的果膠酶溶液，在45°C的低溫水浴中加熱振蕩池，然后進行三 次過濾，得到濾液待用；
4)將步驟2)中得到的濾液移取lmL，依次加入25mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸/ 乙酸鈉緩沖溶液，ImL的400u/mL的果膠酶溶液，然后在低溫水浴中加熱振蕩池，得到酶解 液，在酶解液中合并步驟3)得到的濾液，以質量百分比為0. 苯甲酸溶液定容到250mL， 得到待測液；
5)將待測液(試樣)吸入到連續流動分析儀中，與吸入到連續流動分析儀中的含 有十水四硼酸鈉的濃硫酸溶液一同經過螺旋管混合，然后加熱至96°C，待測液與含有十水 四硼酸鈉的濃硫酸溶液發生反應，分解轉變為糠醛堿的衍生物，而后冷卻，與加入的顯色劑 通過螺旋管混勻，與顯色劑反應顯色，在520nm波長下進行檢測。
其中，步驟5)中的檢測流程參見圖2。
其中，步驟幻中的顯色劑為對羥基聯苯溶液，該對羥基聯苯溶液中的各組分配比 為1000mL蒸餾水中溶解360mg對羥基聯苯及5g氫氧化鈉。
其中，含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液中，四硼酸鈉與濃硫酸的配比為1000mL濃度 為94%的濃硫酸中溶解6g的四硼酸鈉。
其中，步驟幻中加熱采用的加熱器，其內部設置的加熱螺旋管匝數為35匝。
其中，步驟5)中采用水浴冷卻，冷卻管匝數為40匝。
實施例四
1)將植物樣品加入乙醇體積百分比為80%、鹽酸濃度為0. 02mol/L酸性的醇溶 液，先攪拌成槳，隨后在91°C的水浴中加熱回流21分鐘，再進行一次過濾；
2)將一次過濾得到的濾渣用0. OlOmol/L的酸溶液浸泡，并在86°C的水浴中加熱 回流1小時，再進行二次過濾，得到濾液待用；
3)往二次過濾后的濾渣加入25mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸鈉緩沖溶液 清洗，再加入ImL的300u/mL的果膠酶溶液，在48°C低溫水浴中加熱振蕩1. 8小時，然后進 行三次過濾，得到濾液待用；8
4)將步驟2)中得到的濾液移取lmL，依次加入25mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸/ 乙酸鈉緩沖溶液，ImL的300u/mL的果膠酶溶液，然后在低溫水浴中加熱振蕩lh，得到酶解 液，在酶解液中合并步驟3)得到的濾液，以質量百分比為0. 苯甲酸溶液定容到250mL， 得到待測液；
5)將待測液(試樣)吸入到連續流動分析儀中，與吸入到連續流動分析儀中的含 有十水四硼酸鈉的濃硫酸溶液一同經過螺旋管混合，然后加熱至93°C，待測液與含有十水 四硼酸鈉的濃硫酸溶液發生反應，分解轉變為糠醛堿的衍生物，而后冷卻，與加入的顯色劑 通過螺旋管混勻，與顯色劑反應顯色，在490nm波長下進行檢測。
其中，步驟5)中的檢測流程參見圖2。
其中，步驟幻中的顯色劑為對羥基聯苯溶液，該對羥基聯苯溶液中的各組分配比 為1000mL蒸餾水中溶解400mg對羥基聯苯及4. 5g氫氧化鈉。
其中，含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液中，四硼酸鈉與濃硫酸的配比為1000mL濃度 為95%的濃硫酸中溶解5g的四硼酸鈉。
其中，步驟幻中加熱采用的加熱器，其內部設置的加熱螺旋管匝數為64匝。
其中，步驟5)中采用水浴冷卻，冷卻管匝數為30匝。
以下通過實驗證明本發明植物樣品中果膠含量的測定方法的效果。
一、萃取試樣基底顏色的干擾
前處理準確稱取0. Ig植物粉末樣品，用IOOmL氫離子濃度為0. Olmol/L、醇含量 80%的鹽酸-乙醇溶液，在90°C水浴條件下加熱回流20min，過濾除去糖類組分和色素，將 濾渣供下一步提取待測組分用。
酸溶液處理方案和酶解提取方案與前述實施例相同，在此不再詳細敘述。
實驗方案將待測液(即提取了果膠的提取液)作為試樣注入連續流動分析儀中， 在不加入顯色劑的情況下，用紫外-可見分光光度計對分析儀流出(與除顯色劑外的其他 溶劑混合后)的溶液進行吸光度掃描，檢測結果見表1。
表1 待測試驗流經分析儀后的吸光度掃描結果
樣品不同測定波長下的吸光度值，A500nm510nm520nm530nm540nm1#0.00030.00020.00030.00060.00112#0.00050.00060.00080.00110.0013
由表2的實驗數據可知，待測液中所含色素極少，待測液的本底顏色在果膠檢測 波長范圍附近對顯色檢測法的干擾很小，不會對擬采用的光度檢測法造成干擾。這說明酸 性醇溶液除色素效果理想。
二、測定波長的設定
實驗方案1 移取ImL半乳糖醛酸標準溶液(半乳糖醛酸濃度為50mg/L)置于20mL 具塞試管，加入四硼酸鈉-硫酸溶液6mL，待冷卻后用移液槍加入ImL間羥基聯苯溶液(顯 色劑)，混勻后超聲振搖5min除去氣泡。以ImL蒸餾水同上操作制得空白液調零，用紫外可 見分光光度計在350nm SOOnm波長范圍內掃描。掃描結果如圖3所示。
實驗方案2 按照前述實施例所述的方法提取果膠，得到待測液。分別取Iml兩種 不同的待測液，置于20mL具塞試管中。而后分別加入6ml四硼酸鈉-硫酸溶液，待其冷卻 后，加入Iml間羥基聯苯溶液，混勻后超聲振搖5min除去氣泡。以ImL蒸餾水同上操作制 得空白液調零，用紫外可見分光光度計在400-650nm波長范圍內掃描，確定最大吸收波長， 掃描結果見圖4。
由圖3可見半乳糖醛酸標準溶液顯色后最大吸收波長為520. 89nm ；參見圖4，曲 線B為采取酸醇溶液除糖的樣品掃描結果，曲線C為采取醇溶液除糖的樣品掃描結果，由 圖4可見，不論何種前處理方式，待測液中果膠組分顯色后的最大吸收波長約為510nm(分 別為507. 90nm和508. 03nm)。而在490nm MOnm波長范圍內，測定波長變動5nm，樣品 顯色出峰值波動小于5%。因此，合適的測定波長范圍是490nm MOnm，優選波長范圍是 5IOnm 520nmo
三、糖含量對檢測結果的干擾
經過試驗檢測，待測液(即提取了果膠的提取液)中，糖的含量低干2.5%。試驗 方案與結果如下
試驗方案采用烤煙(1#)和白肋煙(2#)兩個樣品，按照本發明的方法進行處理， 制得待測液，將待測液采用連續流動分析法測定其中的水溶性總糖含量。
表2 酸解樣品的糖含量檢測結果
權利要求
1.一種植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，包括如下步驟1)在植物樣品中加入酸性醇溶液，隨后在水浴中加熱回流，再進行一次過濾；2)將一次過濾得到的濾渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加熱回流，再進行二次過濾，冷卻 后定容，得到濾液待用；3)往二次過濾后的濾渣加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液處理，再加入果膠酶溶液，在水浴 中加熱振蕩，然后進行三次過濾，得到濾液待用；4)將步驟幻中得到的濾液依次加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液、果膠酶溶液，然后在水浴 中加熱振蕩，得到酶解液，在酶解液中合并步驟幻得到的濾液，定容，得到待測液；5)將待測液吸入到連續流動分析儀中，所述待測液與吸入到連續流動分析儀中的強 酸性分解試劑反應，分解成糠醛堿的衍生物，而后與加入的顯色劑反應顯色，在490nm MOnm波長下進行檢測。
2.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟1)中， 以體積百分比計，酸性醇溶液的醇濃度為60% 80% ；而氫離子濃度為0. 005mol/L 0. 02mol/L，酸性醇溶液加入量為1克樣品加入約50mL 200mL酸性醇溶液。
3.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟1)中，所 述水浴中加熱回流的溫度為80°C 100°C，時間為10分鐘 1小時。
4.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟幻中， 所述酸溶液是濃度為0. 05mol/L 0. lmol/L的鹽酸，水浴中加熱回流的溫度為80°C IOO0C，時間為30分鐘 2小時，對于1克植物樣品，定容后濾液體積控制在200mL 250mL。
5.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟幻中，乙 酸/乙酸鈉緩沖液和果膠酶溶液加入量為1克植物樣品，加入緩沖液15mL 20mL、加入果 膠酶溶液ImL 2mL，其中，每毫升果膠酶溶液的酶活性300個酶活力單位以上；所述水浴 中加熱振蕩的溫度為40°C 60°C，時間為1小時 2小時。
6.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟4)中， ImL濾液中加入緩沖液15 20mL、加入果膠酶溶液1 2mL，其中，每毫升果膠酶溶液的酶 活性為300個酶活力單位以上，所述水浴中加熱振蕩的溫度為40°C 60°C，時間為1小 時 2小時。
7.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟幻中將 待測液與強酸性分解試劑通過螺旋管混合，在待測液與強酸性分解試劑反應過程中加熱， 而后冷卻。
8.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，所述植物樣 品為粉末狀。
9.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，步驟1)中，所 述植物樣品體積較大時，加入酸性醇溶液后先攪拌成槳，再進行水浴加熱回流。
10.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，所述顯色劑 為對羥基聯苯溶液，所述對羥基聯苯溶液中的各組分配比為1000mL蒸餾水中溶解300 500mg對羥基聯苯及3g 5g氫氧化鈉。
11.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，所述強酸性 分解試劑為含有四硼酸鈉的濃硫酸溶液，其中，四硼酸鈉與濃硫酸的配比為1000mL濃度為92% 99%的濃硫酸中溶解3g 6g的四硼酸鈉。
12.根據權利要求7所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，在待測液與 強酸性分解試劑反應過程中加熱的溫度為90°C 99°C。
13.根據權利要求7所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，冷卻采用匝 數為20匝 50匝的冷卻管冷卻。
14.根據權利要求1所述的植物樣品中果膠含量的測定方法，其特征在于，以體積百分 比計，步驟幻、步驟4)中的果膠酶溶液的濃度為300u/mL 600u/mL。
全文摘要
本發明公開一種植物樣品中果膠含量的測定方法，包括如下步驟1)在植物樣品中加入酸性醇溶液，隨后在水浴中加熱回流，再進行一次過濾；2)將一次過濾得到的濾渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加熱回流，再進行二次過濾，冷卻后定容，得到濾液待用；3)往二次過濾后的濾渣中加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液處理，再加入果膠酶溶液，在水浴中加熱振蕩，然后進行三次過濾，得到濾液待用；4)將步驟2)中得到的濾液依次加入乙酸/乙酸鈉緩沖溶液、果膠酶溶液，然后在水浴中加熱振蕩，得到酶解液，在酶解液中加入步驟3)得到的濾液，定溶，得到待測液；5)將待測液吸入到連續流動分析儀中進行檢測。本發明具有檢測結果準確的優點。
文檔編號G01N5/04GK102033050SQ20111000705
公開日2011年4月27日 申請日期2011年1月13日 優先權日2011年1月13日
發明者孔浩輝, 金保鋒, 黃翼飛 申請人:廣東中煙工業有限責任公司