測(cè)試各種所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞培養(yǎng)的方法和試劑盒的制作方法

專利名稱：測(cè)試各種所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞培養(yǎng)的方法和試劑盒的制作方法
測(cè)試各種所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞培養(yǎng)的方法和
試劑盒在細(xì)胞培養(yǎng)中，與參與培養(yǎng)的細(xì)胞有任何類型接觸的材料，其影響起到關(guān)鍵作用。例如，在醫(yī)學(xué)工程、制藥和生物技術(shù)中，新型高分子材料的開發(fā)和應(yīng)用是作為檢測(cè)與原核和/或真核細(xì)胞的相容性的一個(gè)結(jié)果，該檢測(cè)通常是在新材料上生 長(zhǎng)(培養(yǎng))細(xì)胞。理想的狀態(tài)是提供一個(gè)細(xì)胞和/或組織培養(yǎng)的系統(tǒng)，在沒有外來其他材料的干擾的情況下，以重現(xiàn)性好，經(jīng)濟(jì)和快速的方式實(shí)現(xiàn)檢測(cè)聚合物基材料對(duì)細(xì)胞直接接觸的影響，其中，該系統(tǒng)要從根本上適合高通量的應(yīng)用。一次性無菌細(xì)胞培養(yǎng)載體(“多孔板”)常常用于細(xì)胞和組織培養(yǎng)工程領(lǐng)域。這些載體目前僅有少數(shù)材料可以制備以及出售，優(yōu)選為苯乙烯PS。商業(yè)上可獲得的多孔板有多種規(guī)格，在可能的情況下，它們是標(biāo)準(zhǔn)化的。細(xì)胞培養(yǎng)載體可以進(jìn)行消毒，最好可以適用于顯微鏡方法，旨在確保能夠進(jìn)行重復(fù)性測(cè)試。由于在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的新興應(yīng)用(例如細(xì)胞治療，組織工程，生物技術(shù)領(lǐng)域的生產(chǎn)工程)，對(duì)新材料方面的要求有所增加。為了測(cè)試全新的材料，包括就化學(xué)上或物理上派生參數(shù)而言的材料改性，如表面結(jié)構(gòu)，該材料被固定在細(xì)胞培養(yǎng)載體上并按照預(yù)定的時(shí)間與細(xì)胞共同孵育在液體細(xì)胞培養(yǎng)基中。為了將材料以一種穩(wěn)定的方式固定在細(xì)胞培養(yǎng)載體上，材料通常用輔助固定以支持和負(fù)重，輔助固定來自于一種不同于待測(cè)材料的材料和/或細(xì)胞培養(yǎng)載體用到的材料(其中包括瓊脂糖、玻璃、聚四氟乙烯、高鋼級(jí)，和聚酯)。因此，測(cè)試結(jié)果是多個(gè)不同的材料對(duì)細(xì)胞的影響的后果，已不能僅僅歸因于一種具體的材料。而且，由于輔助固定，在測(cè)試過程中不能排除材料的形狀不會(huì)改變的可能性。例如，薄膜的平面結(jié)構(gòu)可能會(huì)改變成一個(gè)起伏的結(jié)構(gòu)。材料微結(jié)構(gòu)和納米結(jié)構(gòu)的形貌是一個(gè)相當(dāng)大的變化，其可能因此而導(dǎo)致對(duì)細(xì)胞和材料之間的相互作用產(chǎn)生相當(dāng)大的影響。本發(fā)明的目的是克服或減輕現(xiàn)有技術(shù)中存在的一個(gè)或多個(gè)缺陷。具體地，本發(fā)明的目的是提供一種方法，所述方法能夠就培養(yǎng)細(xì)胞方面的適應(yīng)性平行測(cè)定不同的材料和表面。本發(fā)明提供一種檢測(cè)不同的所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞和/或微生物培養(yǎng)的方法，所述方法包括如下步驟i)提供以杯形插入物形式的待檢測(cè)的多個(gè)不同的所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)，其中，所述杯形插入物的尺寸以下述方式體現(xiàn)，即每一個(gè)杯形插入物能夠基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到多孔板的一個(gè)孔中來適合細(xì)胞培養(yǎng)，其中，所述每個(gè)杯形插入物具有壁、一個(gè)底部和一個(gè)與底部相對(duì)的一側(cè)的開口，其中，所述杯形插入物的壁和底部是不漏水的，以及，所述每一個(gè)杯形插入物包含所選材料和/或所選表面結(jié)構(gòu)，其至少包含在底部的內(nèi)表面； )將所述杯形插入物插入到尺寸合適的多孔板的孔中，使得杯底部的外表面指向多孔板的孔底的內(nèi)表面；iii)在杯形插入物的內(nèi)腔中培養(yǎng)細(xì)胞。杯型插入物使用使得普通多孔板為基礎(chǔ)的，關(guān)于某一材料和/或某一表面結(jié)構(gòu)的細(xì)胞效應(yīng)和/或細(xì)胞培養(yǎng)的檢測(cè)得以在沒有其它材料干擾的情況下實(shí)現(xiàn)。根據(jù)本發(fā)明問題的解決方案，主要是提供和插入一個(gè)杯形插入物，所述杯型插入物具有這樣一種尺寸，該尺寸能夠適合放入到市售可獲得的標(biāo)準(zhǔn)的多孔板中。杯形插入物包括一種所選材料和/或一種所選表面結(jié)構(gòu)，所述一種所選材料和/或一種所選表面結(jié)構(gòu)至少存在于杯形插入物的底部?jī)?nèi)表面。杯形插入物的幾何形狀能夠適應(yīng)細(xì)胞的需要，包括X-Y方向(例如形成一個(gè)圓形的，星形的或者不同形狀的插入物的區(qū)域)以及Z方向。所述X方向和Y方向描述插入物的在二維平面的擴(kuò)展平行于多孔板的孔的開口的平面，而在Z方向描述了多孔板的孔可以延伸的深度的方向。杯形插入物提供一種精確限定的表面，所述表面能夠通過化學(xué)和物理修飾的形式產(chǎn)生。因此，它能夠確保細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)專門僅僅暴露在一種材料下，所述材料即待檢測(cè)材料。在培養(yǎng)時(shí)，由于細(xì)胞在杯形插入物的管腔內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，所述杯形插入物不能夠在多孔板中浮動(dòng)。因?yàn)樗霰尾迦胛锏目梢苿?dòng)性，其能夠不費(fèi)吹灰之力的轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)載體中。由于所述杯形插入物適用于可市售獲得的標(biāo)準(zhǔn)多孔板的尺寸，以往實(shí)驗(yàn)室所具有的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備可以繼續(xù)使用，沒有任何限制。該系統(tǒng)具有適合滅菌、顯微鏡下檢測(cè)以及供應(yīng)繁殖的特點(diǎn)。不同的材料和/或表面結(jié)構(gòu)以杯形插入物的形式用于傳統(tǒng)的多孔板，因其能夠利用標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法或者系統(tǒng)，所以與采用輔助手段將材料固定在多孔板的孔腔內(nèi)的方法相比，更節(jié)省時(shí)間和節(jié)約成本。不同的材料和/或表面結(jié)構(gòu)以杯形插入物的 形式用于傳統(tǒng)的多孔板，能夠在高通量性質(zhì)的應(yīng)用范圍內(nèi)自動(dòng)利用。由于杯形插入物能夠簡(jiǎn)單的從第一個(gè)多孔板的孔中轉(zhuǎn)移到另外一個(gè)孔中，也可能另外一個(gè)，第二個(gè)多孔板，檢測(cè)程序能夠以多樣化的方式被延伸和/或改變。類似的細(xì)胞培養(yǎng)條件可以在單一的多孔板中進(jìn)行。這種方式能夠降低檢測(cè)運(yùn)行的系統(tǒng)誤差。在新聚合物系統(tǒng)發(fā)展的初期，僅有少量數(shù)目的新材料具有代表性地可利用。因?yàn)楸尾迦胛锏纳a(chǎn)的需求量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于整個(gè)多孔板的生產(chǎn)的需求量，基于本發(fā)明，極少量的新材料也能夠同樣有效地使用并供給檢測(cè)。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，其是一種檢測(cè)不同所選材料和/或所選結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞和/或微生物培養(yǎng)的方法。術(shù)語“細(xì)胞”被理解為單個(gè)細(xì)胞和一種類型的多個(gè)細(xì)胞或不同類型的細(xì)胞的混合物，以及聯(lián)合細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組織部分和/或器官部分。原生起源或細(xì)胞系、細(xì)胞群或其他類型的混合物的細(xì)胞都可以使用。細(xì)胞可以包括或者由真核細(xì)胞組成，但也可以包括或者由原核細(xì)胞組成。本發(fā)明中，微生物被理解為單細(xì)胞生物，特別是細(xì)菌和真菌，例如酵母菌和藻類。所述不同的所選材料在加工形式上基本不能溶于水，所述材料在正常細(xì)胞培養(yǎng)的條件下是以固體形式存在，例如在0° C到60° C的溫度范圍內(nèi)。所述材料優(yōu)選為聚合物材料，例如均聚物或共聚物，其中，所述聚合物材料能夠聚合后進(jìn)一步處理和/或修飾。所述不同的所選的表面結(jié)構(gòu)其固體表面不同，例如就材料組成來說，三維的形式、表面電壓、多孔性、微結(jié)構(gòu)和/或宏觀結(jié)構(gòu)、疏水性、親水性和/或提供功能基團(tuán)。所述固體可以是已知的固體材料，也可以是新種類的固體材料。例如，所選的表面結(jié)構(gòu)可以通過修飾已存在的表面獲得。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，待測(cè)試的材料和/或表面結(jié)構(gòu)是以杯形插入物的形式提供的。杯形插入物的尺寸是以下述方式體現(xiàn)，即每一個(gè)杯形插入物能夠基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到多孔板的一個(gè)孔來適合細(xì)胞培養(yǎng)。一個(gè)適合細(xì)胞培養(yǎng)的多孔板可以理解為，它每一個(gè)載體上都擁有多個(gè)獨(dú)立地用來接納和培養(yǎng)細(xì)胞的小隔間，其中，所述載體為商業(yè)可獲取的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)載體。一個(gè)多孔板通常有一個(gè)底部和一個(gè)蓋子，所述底部包括用來培養(yǎng)細(xì)胞的大量獨(dú)立的孔，所述蓋子通常用以蓋住多孔板的所有孔。所述多孔板通常是由聚合物制成，具體地為聚本乙纟布。多孔板優(yōu)選設(shè)計(jì)為4_孔、6_孔、12_孔、24_孔、48_孔、96-孔或者384-孔，更優(yōu)選地，為24-孔的多孔板。所述多孔板的孔可以有一個(gè)底部，所述底部可以是平面的也可以是曲面的，優(yōu)選地，所述多孔板的孔為平面底部。有大量的商業(yè)廠家在提供和售賣合適的多孔板，例如康寧公司，BD生物科技，Biochrom AG, Greiner GmbH,以及 Nunc GmbH & Co. KG。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少杯形插入物的一部分能夠以如下方式體現(xiàn)，即杯形插入物能夠基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到4-孔、6-孔、12-孔、24-孔、48-孔、96-孔或者384-孔多孔板的孔中，優(yōu)選為嵌入到24-孔多孔板的孔中。所述杯形插入物是以這種方式形成和限定的，即杯形插入物可以基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到孔多孔板的孔中。準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入可以理解為所述杯形樣式可以以如下方式嵌入孔中，即杯形插入物在孔中沒有過多的間隙以至于一般的晃動(dòng)不會(huì)打 翻。具體地，所述杯形插入物的尺寸具有如下特征，即垂直的在孔中排放。杯形插入物的外壁和孔側(cè)壁內(nèi)表面的空隙不要大于5毫米，優(yōu)選地，最小處不超過I毫米，且杯形插入物的外壁在某個(gè)區(qū)域接觸到孔壁的內(nèi)表面更好，所述區(qū)域可能會(huì)徑向膨脹。所述杯形插入物的實(shí)際樣式和尺寸是由所使用的多孔板的孔的樣式和尺寸決定的。所述杯形插入物有一個(gè)開口，杯壁和一個(gè)底部，其中，所述杯壁和底部限定了所述插入體的內(nèi)腔，所述內(nèi)腔的通過開口進(jìn)入。所述杯形插入物的杯壁和底部是不漏液體的，因此，所形成的內(nèi)腔以用來控制液體只能通過開口注入和/或移出。所述杯形插入物的杯壁和/或底部的厚度是以如下方式選擇，即所述杯形插入物有足夠的穩(wěn)定性以自支撐方式保持其形狀，且能夠提供足夠的管腔以便于細(xì)胞培養(yǎng)。所述底部的外表面和內(nèi)表面的形狀可以基本上是平面的或者曲面的，相互之間獨(dú)立。就這一點(diǎn)而言，“基本上”的意思是至少75%的所述表面有相應(yīng)的屬性。優(yōu)選地，內(nèi)表面和和外表面這兩者基本上平的。所述底部的內(nèi)表面和/或外表美同樣在邊緣區(qū)域是曲面的，也就是說，杯形插入物的底部和壁之間是接觸的。所述杯形插入物可以有不同的基本形狀，且可以(但不是必須)和相對(duì)應(yīng)的孔的形狀相同，只要所述杯形插入物可以基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入即可。例如，所述杯形插入物的開口、杯體和/或底部可以是圓形，橢圓形，星形或者其它形狀，規(guī)則或者不規(guī)則，對(duì)稱或者不對(duì)稱的都可以。所述杯形插入物需要有一定的深度，一方面由所采用的多孔板的孔的深度決定，另一方面，要確保所述杯形插入物有足夠的管腔，以便能夠在管腔中培養(yǎng)細(xì)胞。所述杯形插入物的底部深度和樣式最好選擇和匹配下述所說的相應(yīng)的深度，這樣一旦成功插入，杯形插入物的底部能夠以平面的方式擱在孔的底部。該設(shè)計(jì)中，如果所述杯形插入物和所述多孔板是透明的，提供和確保顯微鏡下觀察所述杯形插入物底部的內(nèi)表面具有最佳的實(shí)施性。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分所述杯形插入物優(yōu)選為透明的。所述杯形插入物的杯體可以選用如下方式，其內(nèi)部尺寸(如直徑、高度和體積)對(duì)應(yīng)具有大于該數(shù)值的多孔板的孔的尺寸。因此，所述可利用的細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)域以及表面積與體積的比例可直接與具有大于該數(shù)值的尺寸的多孔板的孔相比較。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分杯形插入物可以是透明的。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少一部分所述杯形插入物是以下述方式體現(xiàn)的，一旦杯形插入物嵌入到多孔板的孔中，每個(gè)插入物的杯底平行位于孔底的上部。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，所述杯形插入物的使用要以下述手段實(shí)現(xiàn)，即確保所述杯形插入物固定在多孔板的一個(gè)孔中。所述固定可以理解為，一旦成功地插入到孔中，插入物保持大致的位置且不能再移動(dòng)，至少是在一個(gè)方位不能移動(dòng)。為此，所述杯形插入物可以在其上邊沿有突出物，所述突出物接觸到孔的上邊沿，一旦杯形插入物插入，阻止進(jìn)一步的穿過或者下沉到孔中。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分所述杯形插入物能夠具有一些特征，該特征可以確保所述杯形插入物固定在多孔板的孔中，且至少有部分所述杯形插入物優(yōu)選在杯的上邊沿有突出物，一旦杯形插入物插入之后，突出物就能夠接觸到孔的上邊沿。
所述每一個(gè)杯形插入物都包括一個(gè)所選材料和/或一個(gè)所選表面結(jié)構(gòu)，至少在所述插入物的底部的內(nèi)表面。在杯形插入物中，所述杯形插入物的整個(gè)內(nèi)表面或所述杯形插入物的表面優(yōu)選通過相應(yīng)的選擇材料和/或相應(yīng)的選擇表面結(jié)構(gòu)抹蓋插入物腔體提供。無論如何，所述杯形插入物只有杯底部包含或由相應(yīng)的選擇材料和/或相應(yīng)的選擇表面結(jié)構(gòu)組成。優(yōu)選地，整個(gè)杯形插入物由待檢測(cè)的所選材料組成。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分所述杯形插入物在其整個(gè)內(nèi)表面包含相應(yīng)的所選材料和/或相應(yīng)的所選表面結(jié)構(gòu)。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分所述杯形插入物可以由如下方式構(gòu)成，即只有杯底包含或者由相應(yīng)的所選材料和/或相應(yīng)的所選表面結(jié)構(gòu)組成。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分所述杯形插入物可以由相應(yīng)的所選材料組成。取決于要測(cè)試的材料的類型和性質(zhì)，所述杯形插入物可以通過已知的方法制造。所述方法包括用于可塑成型的方法。例如，可以使用熱成型方法，以及噴射造型法、壓鑄法、壓縮成型法、熱成型法以及發(fā)泡成型法。也可以使用合金的成型的方法，例如浸潰、真空鑄造和/或鍍層。其它成型方法也同樣適用，比如固體材料的機(jī)械加工。不同的制作方法也可以組合，例如噴射-壓縮造型法、內(nèi)部氣壓法、結(jié)構(gòu)泡沫塑性法、微發(fā)泡成型法以及夾物模壓法。假如待測(cè)試的材料不適合整個(gè)杯形插入物的制造，只要面向內(nèi)腔的杯底的內(nèi)表面包含待測(cè)試的材料和/或待測(cè)試的表面結(jié)構(gòu)就足夠了。為此，待測(cè)試的材料可以提供給所述杯形插入物，如通過反向注射的方式。原則上，杯形插入物的制造類型與本發(fā)明所述的方法不相關(guān)。所述杯形插入物的制造方法優(yōu)選為不使用溶劑。例如，這類方法包括熱成型方法或者熔融處理，如噴射模塑法，壓鑄法，壓縮成型法以及熱成型法。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少部分所述杯形插入物可以通過反注入的方法制造。例如，根據(jù)本發(fā)明所述的方法，杯形插入物可能受其在制造之后表面改性的影響，因此，提供表面結(jié)構(gòu)的測(cè)試是必須的。所述表面的改性可能包括化學(xué)反應(yīng)引起的修飾，比如通過引入官能團(tuán)改變至少一種所處理表面的性質(zhì)，以及等離子體處理和/或其它會(huì)引起物理表面修飾的方法。物理方法包括如下方法,其中,所述插入物至少一種內(nèi)腔表面通過一種組分處理，所述組分為作為一種溶劑用于溶解所述插入物用到的材料，隨后通過添加一種組分組成沉淀劑用于產(chǎn)生溶液。這種加工方法不僅改變了杯皿的表面形態(tài)，同時(shí)必要時(shí)也可以進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)表面改性，例如通過后續(xù)的化學(xué)修飾。所述方法同時(shí)也包括超臨界狀態(tài)氣體的使用，優(yōu)選為超臨界態(tài)CO2,例如通過發(fā)泡處理法以實(shí)現(xiàn)表面改性。表面結(jié)構(gòu)同樣可以僅僅通過制造杯形插入物的方法來制造，例如在反向注射的情況下。最后，這些方法也包含不同表面改性方法的組合。杯形插入物的表面具有可變參數(shù)，比如，就表面材料的組成而言，表面勢(shì)能、孔隙率、微觀結(jié)構(gòu)和/或宏觀結(jié)構(gòu)、疏水性、親水性和/或所提供的官能團(tuán)，其可以由表面修飾提供以用于測(cè)試。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，至少一個(gè)所述杯形插入物的杯皿的內(nèi)表面包含表層結(jié)構(gòu)，所述表層結(jié)構(gòu)僅在杯形插入物成型后形成。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，所述杯形插入物分別插入到具有相應(yīng)尺寸的多孔板的孔 中，以便使得杯底部的外表面指向其對(duì)應(yīng)的多孔板的孔底部的內(nèi)表面。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，每個(gè)所述杯形插入物都單獨(dú)插入到具有合適尺寸的多孔板中一個(gè)孔中，以至杯底的外表面指向?qū)?yīng)的多孔板孔的底部的內(nèi)表面。這樣一旦成功插入，所述杯形插入物的內(nèi)腔能夠保持通過開口與外界接觸，從而使得試劑可以通過這里供給細(xì)胞培養(yǎng)。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，進(jìn)一步，細(xì)胞隨后在插入到相應(yīng)孔中的杯形插入物的管腔里進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)的條件以及對(duì)所獲測(cè)試結(jié)果的參數(shù)的評(píng)估依賴于相應(yīng)研究問題。根據(jù)本發(fā)明所述的方法，其不限于特定細(xì)胞的培養(yǎng)，或者特殊材料的測(cè)試，或選擇的環(huán)境，而是適用于多樣應(yīng)用。本發(fā)明涉及一種試劑盒，所述試劑盒用以實(shí)施根據(jù)本發(fā)明所述的方法，氣質(zhì)，所述試劑盒的特征在于，其包括大量不同的上述詳細(xì)描述的杯形插入物。優(yōu)選地，一個(gè)試劑盒中包括杯形插入物的數(shù)目可以被多孔板的孔數(shù)整除，所述杯形插入物與所述多孔板的尺寸相匹配。所述試劑盒還包括試劑盒中杯形插入物所用到材料和/或表面結(jié)構(gòu)的說明書。附圖
圖I顯示了用于由美國康寧公司制造的24-孔的多孔板的杯形插入物的一種裝置，其中，立體圖見圖示(A)，側(cè)視圖見圖示(B)，A-A剖視圖見圖示(C)，而順著A-A剖視圖的剖面示意圖見圖示(D)。以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)現(xiàn)進(jìn)行詳細(xì)描述。
實(shí)施例應(yīng)用于美國康寧公司生產(chǎn)的24-孔多孔板的杯形插入物的設(shè)計(jì)所述杯形插入物由圖(A)到(D)示意說明，其具有一個(gè)開口 1，外壁2和底部3。插入物具有截頂圓錐的基本形狀，其中開口 I的面積比底部3的面積大。在插入物遠(yuǎn)離底部3的一端，插入物有一個(gè)突出物，用來在孔中固定插入體。底部3大致平坦，且有一個(gè)磨光的外表面。在面向內(nèi)腔的內(nèi)表面上，底部3包含了一種待測(cè)試的材料。插入物的深度由以下方式選擇，即一旦插入物成功地插入到由康寧公司生產(chǎn)的24-孔多孔板的一個(gè)孔中，插入物的底部3以平面的方式支撐在孔的底部上。如果插入物和多孔板均是透明的，在插入物底部?jī)?nèi)表面生長(zhǎng)的細(xì)胞可以使用傳統(tǒng)的顯微鏡檢測(cè)，所述顯微鏡是在細(xì)胞制備中通常用的顯微鏡(例如倒置顯微鏡 )。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)不同的所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞和/或微生物培養(yǎng)的方法，所述方法包括如下步驟 i)提供以杯形插入物形式的待檢測(cè)的多個(gè)不同的所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)，其中，所述杯形插入物的尺寸以下述方式體現(xiàn)，即每ー個(gè)杯形插入物能夠基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到多孔板的一個(gè)孔中來適合細(xì)胞培養(yǎng)，其中，所述每個(gè)杯形插入物具有壁、一個(gè)底部和一個(gè)與底部相対的ー側(cè)的開ロ，其中，所述杯形插入物的壁和底部是不漏水的，以及，所述每ー個(gè)杯形插入物至少在底部的內(nèi)表面上具有所選材料和/或所選表面結(jié)構(gòu)； ii)將所述杯形插入物插入到尺寸合適的多孔板的孔中，使得杯底部的外表面指向多孔板的孔底的內(nèi)表面； iii)在杯形插入物的內(nèi)腔中培養(yǎng)細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，至少一部分所述杯形插入物具有如下尺寸，即所述杯形插入物能夠基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到4-孔、6-孔、12-孔、24-孔、48-孔、96-孔或者384-孔多孔板的孔中，優(yōu)選嵌入到24-孔多孔板的孔中。
3.根據(jù)上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在干，至少一部分所述杯形插入物具有確保所述杯形插入物固定在多孔板的孔中的方法，優(yōu)選地，至少一部分所述杯形插入物在杯的上邊沿有突出物，一旦杯形插入物嵌入，所述突出物與孔的上邊沿接觸。
4.根據(jù)上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在干，至少一部分所述杯形插入物是透明的。
5.根據(jù)上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，至少一部分所述杯形插入物的尺寸以下述方式體現(xiàn)，即一旦插入物嵌入到多孔板的孔中，所述杯形插入物的底部平行位于孔底的上部。
6.根據(jù)上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，至少一些所述杯形插入物包括相應(yīng)的所選材料和/或相應(yīng)的所選表面結(jié)構(gòu)，其中，所述相應(yīng)的所選材料和/或相應(yīng)的所選表面結(jié)構(gòu)覆蓋所述杯形插入物的內(nèi)表面。
7.根據(jù)上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，至少一些所述杯形插入物由相應(yīng)的所選材料組成。
8.根據(jù)權(quán)利要求I 5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在干，至少ー些所述杯形插入物的組成具有如下特點(diǎn)，即僅所述杯底包括或由所述相應(yīng)的可選材料和/或可選表面結(jié)構(gòu)組成。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，至少一部分所述杯形插入物通過反向注射的方法獲得。
10.根據(jù)上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其特征在于，至少一個(gè)所述杯形插入物在其杯的內(nèi)表面具有ー種表層結(jié)構(gòu)，所述表層結(jié)構(gòu)僅在杯形插入物成型后形成。
11.一種用以實(shí)施根據(jù)權(quán)利要求I 10任一項(xiàng)所述的方法的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括多種不同的杯形插入物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)不同的所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)用于細(xì)胞和/或微生物培養(yǎng)的方法，所述方法包括如下步驟i)提供以杯形插入物形式的待檢測(cè)的多個(gè)不同的所選材料和/或表面結(jié)構(gòu)，其中，所述杯形插入物的尺寸以下述方式體現(xiàn)，即每一個(gè)杯形插入物能夠基本上準(zhǔn)確地以匹配的方式嵌入到多孔板的一個(gè)孔中來適合細(xì)胞培養(yǎng)，其中，所述每個(gè)杯形插入物具有壁、一個(gè)底部和一個(gè)與底部相對(duì)的一側(cè)的開口，其中，所述杯形插入物的壁和底部是不漏水的，以及，所述每一個(gè)杯形插入物包含所選材料和/或所選表面結(jié)構(gòu)，其至少包含在底部的內(nèi)表面；ii)將所述杯形插入物插入到尺寸合適的多孔板的孔中，使得杯底部的外表面指向多孔板的孔底的內(nèi)表面；iii)在杯形插入物的內(nèi)腔中培養(yǎng)細(xì)胞。本發(fā)明還涉及一種實(shí)施該方法的試劑盒。
文檔編號(hào)G01N33/50GK102803960SQ201080050744
公開日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2010年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月9日
發(fā)明者弗蘭克·克萊, 托馬斯·魏格爾, 卡爾·克拉茲, 弗朗茨·鄭, 本哈德·希布爾, 安德魯·蘭德萊, 卡羅拉·呂佐夫, 安德里亞斯·庫爾茲, 佩特拉·雷因克, 安迪·呂梅爾德 申請(qǐng)人:亥姆霍茲-中心蓋斯塔赫中心材料海岸研究有限公司