專利名稱：一種含有農藥2,4-滴的樣品測定前的處理方法
技術領域：
本發明屬于農藥殘留量的測定技術領域，涉及玉米、大白菜中2，4_滴殘留量的測 定方法。特別是一種含有農藥2，4-滴的樣品測定前的處理方法。
背景技術：
農藥殘留指的是在農業生產中施用農藥后一部分農藥直接或間接殘存于谷物、蔬 菜、果品、畜產品、水產品中以及土壤和水體中的現象。農藥殘留問題是隨著農藥大量生產 和廣泛使用而產生的。目前使用的農藥，有些在較短時間內可以通過生物降解成為無害物 質，而一些有機氯類農藥卻難以降解，是殘留性強的農藥。蔬菜農藥殘留超標，會直接危及 人體的神經系統和肝、腎等重要器官。同時殘留農藥在人體內蓄積，超過一定量度后會導致 一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至會誘發血管疾病、糖尿病和癌癥等。由于農藥殘留 對人類和生物危害很大，各國對農藥的施用都進行嚴格的管理，并對食品中農藥殘留容許 量作了規定。植物的生長發育過程受外界環境條件，如水分、陽光、棉花、溫度等的影響和內部 遺傳因素的控制，而調節控制植物生理活動的是某些代謝物質，即植物激素。植物激素的發 現，是生物學領域中的巨大進步。它推動了 “化學調控”在農業中的應用，使人們有可能通 過化學調控而改變植物生長、發育的固有模式。研究植物激素的目的，不僅是為了揭示其在 調節植物生長發育過程中的作用機制及調節控制的規律性，更重要的是探索植物生長物質 的應用技術，使之能按生產需要，調控植物的生長發育，提高作物的品質與產量。目前化學 調控技術，已在農、林、牧、園藝、花卉、育種、栽培管理、提高植物抗性等領域中廣泛應用，并 取得了一定的效果，受到了生物、化工科技工作者與栽培、育種工作者的重視。在某些情況 下，合理地應用植物生長物質的生產效果甚至比栽培與育種快得多。2，4-滴Q，4-D)是一種常用的除草劑，其化學名2，4-二氯苯氧基乙酸，有毒，該 藥在大劑量下為除草劑，低劑量使用為植物生長調節劑。一般居民的接觸主要是通過含有 2，4-D殘留的食物，同時也通過2，4-D在水中的殘留，較易揮發的2，4-D酯類的蒸汽漂移可 以導致空氣污染和損害莊稼，引起環境污染。是否能準確的檢測出微量的殘留其關鍵是樣品的前處理方法，樣品處理的好，可 以減少雜質干擾，減少雜質對儀器的污染，提高分析結果的靈敏度和準確度。本專利所建立 的樣品前處理方法為我單位自行研制的方法。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足提供一種含有農藥2，4_滴的樣品 測定前的處理方法，它是精確稱取樣品15g，精確到0. OlgJn 30mL乙腈振蕩30-60min，過 濾，加4mL lmol/L鹽酸溶液振搖l_3min，加5_12g氯化鈉振搖2_5min，靜置5-lOmin，通 過液液分配分離出有機溶劑層，并利用旋轉蒸發將分離出的有機溶劑層完全濃縮至干并定 容；最后采用超高效液相/質譜/質譜聯用儀(UPLC/MS/MQ檢測。
本發明優選的測定前處理方法，是精確稱取樣品15g，精確到0. OlgJn 30mL乙腈 振蕩30min，過濾至分液漏斗，再加5mL乙腈，洗滌殘渣，洗滌液過濾至分液漏斗中，加4mL lmol/L鹽酸溶液振搖IminJn IOg氯化鈉振搖2min，靜置5min，待分層后棄去下層水相，取 上層乙腈相減壓濃縮至干，用甲醇定容至2mL，渦旋lmin，過0. 22 μ m濾膜，轉移至進樣小 瓶，采用超高效液相-質譜/質譜聯用儀測定樣品中2，4-滴殘留量。其中的樣品為玉米、大白菜、番茄。本發明通過樣品中2，4-滴添加回收率研究，采用超高效液相-質譜/質譜聯用儀 (UPLC/MS/MS)法，建立簡捷可行的2，4-滴殘留量的檢測方法。為了評價2，4-D在玉米、大白菜等中使用后的安全性，本發明建立了使用超高效 液相-質譜/質譜聯用儀(UPLC/MS/MQ法測定樣品中2，4_滴殘留量的方法。具體是使用 有機溶劑提取樣品中2，4-滴，然后在提取液中加入鹽酸和氯化鈉，通過液液分配分離出有 機溶劑層，并利用旋轉蒸發將分離出的有機溶劑層完全濃縮至干并定容，最后采用超高效 液相/質譜/質譜聯用儀(UPLC/MS/MS)檢測。本發明更加詳細的制備方法如下1.前處理稱樣15g(精確到0. Olg)，加30mL乙腈振蕩30min，過濾至分液漏斗，再加5mL乙 腈洗滌殘渣，洗滌液過濾至分液漏斗中。加4mL lmol/L鹽酸溶液振搖lmin，加IOg氯化鈉 振搖2min，靜置5min，待分層后棄去下層水相，取上層乙腈相減壓濃縮至干，用甲醇定容至 2mL,渦旋lmin，過0. 22 μ m濾膜，轉移至進樣小瓶待測。2.儀器條件色譜系統Waters Acquity Ultra Performance LC色譜柱AcquityBEH C18 O. 1讓X 50讓，1· 7 μ m)；柱溫 30°C ；進樣量 5 μ L ；流動 相乙腈/水(體積比80/20)；流速0. 2mL/min，運行2. 5min。質譜系統Waters Quattro Premier XE0離子源ESI (負離子模式)；毛細管電壓3. 0KV;離子源溫度110°C ；脫溶劑氣溫 度400°C ；錐孔反吹氣流量50L/h ；脫溶劑氣流量550L/h ；檢測方式為多反應監測掃描模式 (MRM)(見表 1)。進樣量和峰面積相關性見表2，添加回收結果見表3，方法最低定量限為0. 02mg/
kg ο表1多反應監測表
母離子(m/z)子離子(m/z)駐留時間(S)錐孔電壓(V)碰撞電壓(V)219124. 60. 151826219160. 7*0. 151814注標“*”為定量離子。表2進樣量和峰面積相關性
進樣量(ng)1052. 510. 5峰面積3449918628674718971192 y = 18095X-1159. 9, r = 0. 997
表3添加回收結果
權利要求
1.一種含有農藥2，4_滴的樣品測定前的處理方法，其特征在于樣品的前處理精確 稱取樣品15g，精確到0. Olg,加30mL乙腈振蕩30_60min，過濾，加4mLlmol/L鹽酸溶液振搖 l-3min，加5-12g氯化鈉振搖2-5min，靜置5-lOmin，通過液液分配分離出有機溶劑層，并利 用旋轉蒸發將分離出的有機溶劑層完全濃縮至干并定容；最后采用超高效液相/質譜/質 譜聯用儀(UPLC/MS/MS)檢測。
2.權利要求1所述的測定前處理方法，其中精確稱取樣品15g，精確到0.01g，W 30mL 乙腈振蕩30min，過濾至分液漏斗，再加5mL乙腈洗滌殘渣，洗滌液過濾至分液漏斗中，加 4mL lmol/L鹽酸溶液振搖lmin，加IOg氯化鈉振搖2min，靜置5min，待分層后棄去下層水 相，取上層乙腈相減壓濃縮至干，用甲醇定容至2mL，渦旋lmin，過0. 22 μ m濾膜，轉移至進 樣小瓶，采用超高效液相-質譜/質譜聯用儀測定樣品中2，4-滴殘留量。
3.權利要求1或2所述的測定方法，其中的樣品為玉米、大白菜、番茄。
全文摘要
本發明公開了一種含有農藥2，4-滴的樣品測定前的處理方法。它是精確稱取樣品15g，精確到0.01g，加30ml乙腈振蕩30-60min，過濾，加4ml1mol/l鹽酸溶液振搖1-3min，加5-12g氯化鈉振搖2-5min，靜置5-10min，通過液液分配分離出有機溶劑層，并利用旋轉蒸發將分離出的有機溶劑層完全濃縮至干并定容；最后采用超高效液相/質譜/質譜聯用儀(UPLC/MS/MS)檢測。本發明公開的樣品中2，4-滴測定前的處理方法具有測定速度快，設備簡單、測定成本低，準確度、穩定性和可靠性高的特點。
文檔編號G01N30/12GK102121932SQ20101059729
公開日2011年7月13日 申請日期2010年12月20日 優先權日2010年12月20日
發明者劉磊, 張玉婷, 李娜, 李輝, 邵輝, 郭永澤 申請人:天津市農業科學院中心實驗室