專利名稱：同時測定雞肝中磺胺類、喹諾酮類、苯并咪唑類藥物及其代謝物殘留的分析方法
技術領域：
本發明涉及一種QuEChERS-UPLC-MS/MS同時測定雞肝中磺胺類、喹諾酮類、苯并 咪唑類藥物及其代謝物殘留的分析方法。
背景技術：
磺胺類(Sulifonamides，SAs)和喹諾酮類(quinolones，QNs)藥物為廣譜抑菌 藥，因其具有抗菌譜廣、高效、低毒、價格低廉等特點，在畜牧、水產等養殖生產中廣泛使用。 但過量使用有可能在人體內蓄積，蓄積濃度超過一定值時對人體有害，并導致病原體產生 耐藥性。特別是磺胺二甲基嘧啶等磺胺類藥物可能導致致癌、致畸、致突變；奈啶酸已經 被證實有干擾繁殖系統，影響光敏感性、致癌和致突變作用等。因此，國際食品法典委員會 (CAC)、美國、歐盟、日本及我國都規定，食品中磺胺類藥物總量以及磺胺二甲基嘧啶等單個 磺胺的最大殘留限量(MRLs)為100μ g/kg ；根據不同品種、組織和藥物種類，食品中喹諾酮 藥物的最大殘留限量(MRLs)為10 6000 μ g/kg。苯并咪唑(Benzimidazoles，BMZs)是一類在農業和水產養殖中廣泛使用的獸藥， 主要用于防治寄生蟲感染。有些苯并咪唑可用作采前和采后殺菌劑，用于控制田間作物、貯 藏水果和蔬菜的真菌感染。研究表明苯并咪唑類藥物在實驗動物中顯示致畸與致突變作 用，因此中國、美國、歐盟、日本等國家或地區將苯并咪唑類藥物列入限制使用的藥物和動 物源性食品殘留檢測的監控對象，并制訂了最大殘留限量(MRLs)。苯并咪唑類藥物在肝臟 中最大殘留限量(MRLs)為50 1000 μ g/kg。測定磺胺類藥物、喹諾酮類藥物及苯并咪唑類藥物及其代謝物的檢測方法主要有 液相色譜法(HPLC)和液相色譜法-質譜/質譜法(HPLC-MS/MQ。HPLC的靈敏度較低且無 法提供結構信息，一般常作為篩選方法，HPLC-MS/MS靈敏度高，選擇性和特異性好，抗干擾 能力強，能夠對低濃度的樣品進行很好的定性確認，是目前較為先進和常用的動物源性食 品中藥物殘留檢測方法。同時測定雞肝中磺胺類藥物、喹諾酮類藥物及苯并咪唑類藥物及 其代謝物殘留的的檢測方法未見報道。2003年，美國農業部農業研究服務中心的Anastassiades等開發了一種快速 (Quick)、簡單 asy)、廉價(Cheap)、高效(Effective)、耐用(Rugged)、安全(Safe)的樣 品前處理方法(簡稱QuChERQ，已被許多國家和美國公職分析化學家協會等多個國際農藥 殘留分析機構廣泛采納。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種同時測定雞肝中磺胺類、喹諾酮類、苯并 咪唑類藥物及其代謝物殘留的分析方法。本發明技術方案如下一種同時測定雞肝中磺胺類、喹諾酮類、苯并咪唑類藥物及其代謝物殘留的分析方法，待測樣品用乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附劑凈化，正己烷脫脂；然后用Kromasil Eternity C-18色譜柱分離，以0. 1 %甲酸和甲醇作為流動相進行梯度洗脫，電噴霧正離子 模式電離，多反應監測模式檢測，內標法定量。所述的分析方法，所述色譜柱的色譜條件為Kromasil Eternity C-18色譜柱為 10(toimX2. 1 讓，2. 5μπι ；柱溫:35°C;樣品室溫度7°C;進樣量5μ L ；流速為 0. 25mL/min ；流 動相A :0. 甲酸；流動相B 甲醇；磺胺類藥物和苯并咪唑類藥物梯度洗脫程序見表1，喹 諾酮藥物梯度洗脫程序見表2。表1磺胺類藥物和苯并咪唑類藥物梯度洗脫程序
權利要求
1.一種同時測定雞肝中磺胺類、喹諾酮類、苯并咪唑類藥物及其代謝物殘留的分析方 法，其特征在于，待測樣品用乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附劑凈化，正己烷脫脂；然后用 Kromasil Eternity C-18色譜柱分離，以0. 1 %甲酸和甲醇作為流動相進行梯度洗脫，電噴 霧正離子模式電離，多反應監測模式檢測，內標法定量。
2.根據權利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述色譜柱的色譜條件為=Kromasil Eternity C-18色譜柱為10(toimX2. 1讓，2. 5μπι;柱溫35°C ；樣品室溫度7°C ；進樣量 5 μ L ；流速為0. 25mL/min ；流動相A :0. 甲酸；流動相B 甲醇；磺胺類藥物和苯并咪唑類 藥物梯度洗脫程序見表1，喹諾酮藥物梯度洗脫程序見表2。表1磺胺類藥物和苯并咪唑類藥物梯度洗脫程序
3.根據權利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述質譜條件為電噴霧離子源(ESI+)；毛細管電壓為3. 2kV ；萃取電壓為4. OV ；預六極桿電壓為0. IV ；源溫為120°C ；脫溶 劑溫度為380°C ；脫溶劑氣速為800L/h ；錐孔反吹氣速為60L/h ；采用多反應監測(MRM)模 式，其他質譜分析參數見表3。表全文摘要
本發明公開了一種QuEChERS提取凈化-超高效液相色譜-串聯質譜法(QuEChERS-UPLC-MS/MS)同時測定雞肝中12種磺胺類，19種喹諾酮類和8種苯并咪唑類藥物及其代謝物殘留的分析方法。樣品用1％乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附劑凈化，正己烷脫脂。然后用Kromasil Eternity C18色譜柱(100mm×2.1mm，2.5μm)分離，以0.1％甲酸和甲醇作為流動相進行梯度洗脫，電噴霧正離子(ESI+)模式電離，多反應監測(MRM)模式檢測，內標法定量。39種藥物在5～100μg/kg的空白添加濃度范圍內線性良好(r＞0.98)，在10～50μg/kg的添加水平范圍內，平均回收率為72％～121％，相對標準偏差(RSD)為1.5％～23.4％，39種藥物的檢出限(LOD)為5μg/kg，測定低限(LOQ)為10μg/kg。該方法簡便、快速、靈敏、準確、耐用，適合雞肝中磺胺類、喹諾酮類和苯并咪唑類藥物殘留的確證和定量測定。
文檔編號G01N30/02GK102128891SQ201010595298
公開日2011年7月20日 申請日期2010年12月20日 優先權日2010年12月20日
發明者姚偉琴, 張萬權, 張紅霞, 李曉巖, 李鋒格, 竇輝, 蘇敏 申請人:新疆出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心