專利名稱：遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條及快速檢測(cè)方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及檢測(cè)試紙條技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及遲鈍愛德華氏菌檢測(cè)試紙條技術(shù)領(lǐng) 域，特別涉及一種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條及快速檢測(cè)方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
遲鈍愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)是目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中具有極大危害的 革蘭氏陰性病原菌，能夠感染包括海水魚和淡水魚在內(nèi)的多種魚類。它在世界不少國家和 地區(qū)都引起了不同程度的魚類災(zāi)害，近年來給我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了極大的危害。
建立遲鈍愛德華氏菌快速、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖遲鈍愛德華氏菌病 害控制具有重要的意義。目前傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，是對(duì)病原微生物富集，根據(jù)菌落形態(tài)特征和 生理生化特征或結(jié)合16S rDNA測(cè)序來判定病原種類。此外，免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)被廣泛的應(yīng)用 到病原微生物的檢測(cè)中。包括細(xì)菌凝集實(shí)驗(yàn)、免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)、免疫熒光技術(shù)、免疫印跡技術(shù)、 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)等。有人報(bào)道了以聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)或環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù) (LAMP)對(duì)遲鈍愛德華氏菌特異性基因進(jìn)行檢測(cè)。部分研究工作者采用免疫學(xué)檢驗(yàn)方法對(duì)遲 鈍愛德華氏菌進(jìn)行檢測(cè)，包括熒光抗體技術(shù)、應(yīng)用抗遲鈍愛德華氏菌的單克隆抗體建立的 免疫組化檢驗(yàn)方法、(間接)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)等。Swain等人將斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附 法(Dot-ELISA)用于遲鈍愛德華氏菌的檢測(cè)中。
傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)生理生化鑒定方法費(fèi)時(shí)繁瑣，而一般的免疫酶試驗(yàn)、免疫熒光法及 ELISA等方法雖然可以用于遲鈍愛德華氏菌的檢測(cè)，但其操作程序較復(fù)雜、檢測(cè)相對(duì)費(fèi)時(shí)費(fèi) 力。PCR技術(shù)簡(jiǎn)便、快速、敏感性高，但對(duì)儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)技能均要求較高，在水產(chǎn)養(yǎng)殖的基 層單位難以大面積推廣。
20世紀(jì)90年代初，膠體金免疫層析技術(shù)(GICA)逐漸發(fā)展起來。該方法是一種 以膠體金為標(biāo)記物的快速免疫結(jié)合分析技術(shù)，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、簡(jiǎn)便快速、肉眼判 讀、穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)。相比較傳統(tǒng)的幾種遲鈍愛德華氏菌的檢測(cè)方式，膠體金免疫技術(shù)在檢 測(cè)時(shí)間以及操作簡(jiǎn)便性上占了極大的優(yōu)勢(shì)，本發(fā)明將這項(xiàng)技術(shù)運(yùn)用于遲鈍愛德華氏菌的檢 測(cè)，建立簡(jiǎn)便、快速、敏感、準(zhǔn)確檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌的方法，就能夠在早期控制遲鈍愛德華 氏菌病的蔓延，在水產(chǎn)養(yǎng)殖遲鈍愛德華氏菌病害控制中具有重要的意義。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服了上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺點(diǎn)，提供一種遲鈍愛德華氏菌快速檢 測(cè)試紙條及快速檢測(cè)方法與應(yīng)用，該遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條可以簡(jiǎn)便、快速、敏 感、準(zhǔn)確檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌，能夠在早期控制遲鈍愛德華氏菌病的蔓延，在水產(chǎn)養(yǎng)殖遲鈍 愛德華氏菌病害控制中具有重要的意義，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，在本發(fā)明的第一方面，提供了 一種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè) 試紙條，其特點(diǎn)是，所述遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條是膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條，所 述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上吸附有遲鈍愛德華氏菌膠體金標(biāo)記抗體，所述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的分析膜上具有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述檢測(cè)線上包被有遲鈍愛德 華氏菌抗體，所述質(zhì)控線上包被有與所述遲鈍愛德華氏菌抗體免疫原相同的第二抗體。
較佳地，所述遲鈍愛德華氏菌抗體是遲鈍愛德華氏菌EIB202為免疫原獲得的抗 體。
較佳地，所述第二抗體是羊抗兔抗體或羊抗鼠抗體。
其中，遲鈍愛德華氏菌抗體的濃度可以為4. 77mg/ml, Iml膠體金標(biāo)記的遲鈍愛德 華氏菌抗體的量為6 25 μ g，最佳標(biāo)記量為18 μ g，最佳標(biāo)記PH為8. 0。
較佳地，所述分析膜是硝酸纖維素膜。
較佳地，所述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條還包括支撐板、樣品墊和吸水墊，所述樣 品墊、所述結(jié)合墊、所述分析膜和所述吸水墊設(shè)置在所述支撐板上并依次相互部分重疊。以 樣品墊為起始端，吸水墊為末端，支撐板位于底層，其上自起始端至末端依次為樣品墊、結(jié) 合墊、分析膜和吸水墊，相鄰兩部分交界處部分重疊。分析膜上包被有遲鈍愛德華氏菌抗體 的檢測(cè)線靠近起始端，包被有第二抗體的質(zhì)控線靠近末端。
更佳地，所述支撐板為PVC板，所述樣品墊為玻璃纖維素膜、聚酯膜或?yàn)V紙纖維， 所述吸水墊為濾紙纖維。
在本發(fā)明的第二方面，提供了一種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)方法，其特點(diǎn)是，采用 上述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條進(jìn)行檢測(cè)。
具體操作為在檢測(cè)時(shí)，將采集的樣品滴加至樣品墊，樣品在毛細(xì)作用下自起始端 向末端層析流動(dòng)。若檢測(cè)線和質(zhì)控線都顯色，結(jié)果為陽性，若檢測(cè)線不顯色而質(zhì)控線顯色則 為陰性，若檢測(cè)線與質(zhì)控線都不顯色或檢測(cè)線顯色而質(zhì)控線不顯色，則檢測(cè)結(jié)果無效。
在本發(fā)明的第三方面，提供了上述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條在檢測(cè)遲鈍 愛德華氏菌中的應(yīng)用。
應(yīng)用時(shí)，將采集的樣品用樣品稀釋液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂專缓髮⑾♂尩臉悠返渭又?檢測(cè)試紙條的樣品墊，樣品在毛細(xì)作用下自起始端向末端流動(dòng)，3 10分鐘判斷結(jié)果。
本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條是膠體金免疫 層析檢測(cè)試紙條，所述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上吸附有遲鈍愛德華氏菌膠體 金標(biāo)記抗體，所述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的分析膜上具有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述檢測(cè) 線上包被有遲鈍愛德華氏菌抗體，所述質(zhì)控線上包被有與所述遲鈍愛德華氏菌抗體免疫原 相同的第二抗體，從而可以簡(jiǎn)便、快速、敏感、準(zhǔn)確檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌，能夠在早期控制遲 鈍愛德華氏菌病的蔓延，在水產(chǎn)養(yǎng)殖遲鈍愛德華氏菌病害控制中具有重要的意義，適于大 規(guī)模推廣應(yīng)用。
采用上述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌，與傳統(tǒng)的檢測(cè) 方法相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)
a.操作簡(jiǎn)單，不需特殊設(shè)備，不需專業(yè)技術(shù)人員操作；
b.方便快捷，只需3 10分鐘即可得出結(jié)果，可迅速采取應(yīng)對(duì)措施；
c.經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，可用于對(duì)大量樣品進(jìn)行篩選。
本發(fā)明的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條的所有這些性能特征都為其商品化提 供了現(xiàn)實(shí)的開發(fā)和應(yīng)用前景。
圖1是本發(fā)明的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條的一具體實(shí)施例的主視示意圖。
圖2是圖1所示的具體實(shí)施例的側(cè)視示意圖。
圖3是采用圖1所示的具體實(shí)施例進(jìn)行檢測(cè)的陽性檢測(cè)結(jié)果示意圖，T、C線同時(shí) 顯色。
圖4是采用圖1所示的具體實(shí)施例進(jìn)行檢測(cè)的陰性檢測(cè)結(jié)果示意圖，僅C線顯色。
圖5是采用圖1所示的具體實(shí)施例進(jìn)行檢測(cè)的無效檢測(cè)結(jié)果示意圖，C線不顯色。
圖6是采用圖1所示的具體實(shí)施例進(jìn)行特異性檢測(cè)的結(jié)果示意圖。
圖7是采用圖1所示的具體實(shí)施例進(jìn)行靈敏度檢測(cè)的結(jié)果示意圖。
圖8是采用圖1所示的具體實(shí)施例進(jìn)行模擬現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的結(jié)果示意圖。
其中，1為支撐板，2為樣品墊，3為金標(biāo)墊，4為分析膜(T 包被有遲鈍愛德華氏菌 多克隆抗體的檢測(cè)線，C 包被有羊抗兔IgG的質(zhì)控線)，5為吸水墊。
具體實(shí)施方式
為了能夠更清楚地理解本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容，特舉以下實(shí)施例詳細(xì)說明。
實(shí)施例1 多克隆抗體的制備
1)用TSB培養(yǎng)基將遲鈍愛德華氏菌EIB202 (CCTCC-M 208068)培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期后期， 取菌液于4°C,4000r · mirT1離心5min，用0. 05mol · Γ1的PBS緩沖液(ρΗ 7. 4)洗滌三次 后，PBS緩沖液重懸，加入0. 4%的甲醛滅活48h ；
2)將滅活菌液與等量完全弗氏佐劑充分乳化后，經(jīng)背部皮內(nèi)多點(diǎn)注射成年新西蘭 雌兔，抗原劑量2 X IO7CFU/只；
幻2周后將滅活菌液與等量不完全弗氏佐劑充分乳化，經(jīng)背部皮內(nèi)多點(diǎn)注射免疫， 之后每隔2周加強(qiáng)免疫一次，3次加強(qiáng)免疫后采血制備血清，并用間接酶聯(lián)免疫法(ELISA) 測(cè)定血清效價(jià)；
4)采血前3天，耳靜脈加強(qiáng)免疫，劑量為IO7CFU/只，頸動(dòng)脈插管放血，分離血 清，-20°C保存?zhèn)溆茫?br>
5)用蛋白G親和純化血清制備多克隆抗體，純化后IgG含量為4. 77mg/ml，純度達(dá) 到98. 7% 99%，效價(jià)達(dá)IO6以上。
實(shí)施例2 膠體金的制備及遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條組裝
1.采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金溶液
1)取250ml三角瓶一個(gè)，加99ml超純水及Iml 氯金酸，加熱沸騰；
2)取1. SmL的檸檬酸鈉加入上述溶液中，迅速混合均勻，再保持沸騰lOmin，自 然冷卻后蒸餾水恢復(fù)至IOOmL體積；
3)膠體金溶液用硅化過的試劑瓶4°C保存，備用。
2.金標(biāo)抗體的制備
1)將遲鈍愛德華氏菌多克隆抗體用PBS緩沖液(ρΗ 7. 4)稀釋，與膠體金溶液(ρΗ 8. 0)混合，電磁攪拌Ih ；
2)加入PBSTB封閉液(含0. 05%吐溫20和5% BSA的PBS緩沖液)封閉Ih ；
3) 40C，16000r/min 離心 40min，棄上清；5
4)沉淀加入封閉液，40C，16000r/min離心40min，棄上清；
5)用封閉液重懸，并調(diào)至適當(dāng)濃度，4°C保存。
3.遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條的組裝
1)將金標(biāo)抗體均勻涂布于經(jīng)處理過的玻璃纖維素膜上，置于4°C環(huán)境中干燥，制 備出金標(biāo)墊。
2)用噴金劃線儀將遲鈍愛德華氏菌多克隆抗體和羊抗兔抗體以2 μ L/cm噴涂于 硝酸纖維素膜上的預(yù)定檢測(cè)線和質(zhì)控線上，置于4°C環(huán)境中干燥，制備出分析膜。
3)首先將分析膜粘貼在支撐板上預(yù)定位置，再將結(jié)合物墊和吸水墊粘貼到支撐板 上，結(jié)合物墊和吸水墊在上與分析膜部分重疊，然后將樣品墊粘貼至預(yù)定位置，在上方與結(jié) 合物墊部分重疊。組裝妥當(dāng)后用切片機(jī)將其切成4mm寬的試紙條，即為本發(fā)明的遲鈍愛德 華氏菌快速檢測(cè)試紙條。成品請(qǐng)參見圖1和2所示。
實(shí)施例3 遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條特異性檢測(cè)
1)將水體常見細(xì)菌以及魚類常見病原菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鰻弧菌、哈氏 弧菌、ATCC來源的遲鈍愛德華氏菌ATCC15947、ATCC23692以及鯰魚愛德華氏菌ATCCA33202 分別于最適培養(yǎng)條件培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期。
2)以PBS緩沖溶液重懸菌體并稀釋至105CFU/ml。
3)各取100μ 1以遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條檢測(cè)，確定試紙條的特異性。結(jié) 果見圖6。從圖中看出，所有的遲鈍愛德華氏菌均呈陽性，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、哈氏 弧菌和鰻弧菌呈陰性，可見該試紙條對(duì)遲鈍愛德華氏菌具有較好的特異性，對(duì)水體常見細(xì) 菌交叉反應(yīng)呈陰性。
實(shí)施例4 遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條靈敏度檢測(cè)
用遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條檢測(cè)濃度為分別為105CFU/ml至109CFU/ml同 數(shù)量級(jí)的遲鈍愛德華氏菌懸液，觀察試紙條檢測(cè)細(xì)菌最低濃度，同時(shí)與PCR方法對(duì)比檢測(cè)， 觀察對(duì)比結(jié)果。以膠體金免疫層析試紙條檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌，陰性對(duì)照為無菌PBS，由圖 7可見，該試紙條對(duì)遲鈍愛德華氏菌的敏感度為105CFU/ml，104CFU/ml在IOmin內(nèi)檢測(cè)線未 出現(xiàn)條帶。
實(shí)施例5 遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)
將遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條用于山東煙臺(tái)漁場(chǎng)罹患遲鈍愛德華氏菌病的 大菱鲆檢測(cè)。
1)取疑似感染遲鈍愛德華氏菌病大菱鲆腹水1ml，其中100μ 1以遲鈍愛德華氏菌 快速檢測(cè)試紙條檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在檢測(cè)線顯色，對(duì)照PBS并不顯色(圖8)。
2)取100μ 1涂布DHL培養(yǎng)基，長出均一的遲鈍愛德華氏菌特有的黑心菌落，進(jìn)行 菌落計(jì)數(shù)，同時(shí)挑取單菌落進(jìn)行生理生化及16S rDNA測(cè)序驗(yàn)證。
3)經(jīng)生理生化及16S rDNA測(cè)序結(jié)果證明引起大菱鲆腹水的感染菌為遲鈍愛德華 氏菌，且在腹水中含量為4. 7X105cfu/ml，與試紙條檢測(cè)結(jié)果相符。證明該試紙條可以應(yīng)用 于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
本發(fā)明根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理，利用膠體金標(biāo)記技術(shù)，免疫層析 技術(shù)和銀染技術(shù)建立起快速檢測(cè)體系，研制出遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，與酶聯(lián)免 疫法(ELISA)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附法(Dot-ELISA)等已經(jīng)建立的檢測(cè)方法相比，操作更簡(jiǎn)單，速度更快，3 IOmin即可得出檢測(cè)結(jié)果，無需特殊設(shè)備和專業(yè)技 術(shù)人員操作，可隨時(shí)現(xiàn)場(chǎng)用于漁場(chǎng)對(duì)遲鈍愛德華氏菌感染的診斷與監(jiān)測(cè)。
該遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條包含支撐板、樣品墊、吸附有遲鈍愛德華氏菌 膠體金標(biāo)記抗體的結(jié)合墊、含有檢測(cè)線(T)和質(zhì)控線(C)的分析膜、以及吸水墊。在檢測(cè)線 上包被有遲鈍愛德華氏菌抗體，質(zhì)控線上包被有與遲鈍愛德華氏菌抗體免疫原相同的羊抗 鼠，羊抗兔等第二抗體。應(yīng)用免疫層析雙抗體夾心法原理檢測(cè)樣品中的遲鈍愛德華氏菌。
本發(fā)明中，分析膜檢測(cè)線上吸附的抗體和結(jié)合墊上膠體金標(biāo)記抗體可以都為抗遲 鈍愛德華氏菌多克隆抗體，可以分別為抗遲鈍愛德華氏菌多克隆抗體和單克隆抗體，也可 以是針對(duì)兩個(gè)不同抗原決定簇的抗遲鈍愛德華氏菌單克隆抗體。
本發(fā)明所研制的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條靈敏度高，檢測(cè)限不高于 105CFU/ml，特異性好，用其它常見細(xì)菌檢測(cè)時(shí)，不出現(xiàn)陽性反應(yīng)。在檢測(cè)之前進(jìn)行一定時(shí)間 的富集培養(yǎng)或檢測(cè)之后與分析膜上滴加銀增強(qiáng)溶液，則可進(jìn)一步提高檢測(cè)的靈敏度。較高 的靈敏度和很好的特異性及其良好的操作性使其可以大面積推廣，用于漁場(chǎng)等單位對(duì)遲鈍 愛德華氏菌感染的監(jiān)測(cè)與早期預(yù)警，防控遲鈍愛德華氏菌的蔓延，減小和避免其在水產(chǎn)養(yǎng) 殖中造成的巨大經(jīng)濟(jì)損失。
綜上，本發(fā)明的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條可以簡(jiǎn)便、快速、敏感、準(zhǔn)確檢測(cè) 遲鈍愛德華氏菌，能夠在早期控制遲鈍愛德華氏菌病的蔓延，在水產(chǎn)養(yǎng)殖遲鈍愛德華氏菌 病害控制中具有重要的意義，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。
在此說明書中，本發(fā)明已參照其特定的實(shí)施例作了描述。但是，很顯然仍可以作出 各種修改和變換而不背離本發(fā)明的精神和范圍。因此，說明書和附圖應(yīng)被認(rèn)為是說明性的 而非限制性的。
權(quán)利要求
1.一種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè) 試紙條是膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條，所述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上吸附有 遲鈍愛德華氏菌膠體金標(biāo)記抗體，所述膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的分析膜上具有檢測(cè)線 和質(zhì)控線，所述檢測(cè)線上包被有遲鈍愛德華氏菌抗體，所述質(zhì)控線上包被有與所述遲鈍愛 德華氏菌抗體免疫原相同的第二抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述遲鈍愛 德華氏菌抗體是遲鈍愛德華氏菌EIB202為免疫原獲得的抗體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述第二抗 體是羊抗兔抗體或羊抗鼠抗體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述分析膜 是硝酸纖維素膜。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述膠體金 免疫層析檢測(cè)試紙條還包括支撐板、樣品墊和吸水墊，所述樣品墊、所述結(jié)合墊、所述分析 膜和所述吸水墊設(shè)置在所述支撐板上并依次相互部分重疊。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述支撐板 為PVC板，所述樣品墊為玻璃纖維素膜、聚酯膜或?yàn)V紙纖維，所述吸水墊為濾紙纖維。
7.—種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)方法，其特征在于，采用根據(jù)權(quán)利要求1 6任一所述 的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條進(jìn)行檢測(cè)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1 6任一所述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條在檢測(cè)遲鈍愛德華 氏菌中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條，其是膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條，膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的結(jié)合墊上吸附有遲鈍愛德華氏菌膠體金標(biāo)記抗體，膠體金免疫層析檢測(cè)試紙條的分析膜上具有檢測(cè)線和質(zhì)控線，檢測(cè)線上包被有遲鈍愛德華氏菌抗體，質(zhì)控線上包被有與遲鈍愛德華氏菌抗體免疫原相同的第二抗體。還提供了一種遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)方法，及上述的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條在檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌中的應(yīng)用。本發(fā)明的遲鈍愛德華氏菌快速檢測(cè)試紙條可以簡(jiǎn)便、快速、敏感、準(zhǔn)確檢測(cè)遲鈍愛德華氏菌，能夠在早期控制遲鈍愛德華氏菌病的蔓延，在水產(chǎn)養(yǎng)殖遲鈍愛德華氏菌病害控制中具有重要的意義，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)G01N33/544GK102033128SQ20101056882
公開日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2010年12月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月1日
發(fā)明者劉和松, 劉琴, 張?jiān)d, 王啟要, 肖婧凡 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué)