專利名稱：藥物中游離肼的檢測方法
技術領域：
本發明涉及藥物中雜質分析檢測技術領域，具體地說是氨氯地平類藥物中所含游離胼的檢測方法。
背景技術：
二氫吡啶類的鈣離子拮抗劑為當前一線的降壓藥物，最早應用的品種是硝苯地平。現在有不少新的品種，例如尼群地平，尼卡地平，氨氯地平，拉西地平等。其除降壓作用外還能治療心絞痛，應用廣泛。其中氨氯地平屬雙氫吡啶類中的長效品種，每天早餐后服一次，即能控制一天M 小時的血壓，服用方便，降壓平穩，血壓波動小，不良反應也少。伴有心力衰竭者也可應用， 不受影響。目前在我國已上市的氨氯地平有苯磺酸氨氯地平、馬來酸氨氯地平、甲磺酸氨氯地平與苯磺酸左旋氨氯地平、L-門冬氨酸氨氯地平等五種。氨氯地平類藥物因治療范圍廣， 藥效時間長，不良反應少，治療效果好受到廣大高血壓患者的青睞，在高血壓治療藥物中占據很高的市場份額。當前氨氯地平類藥物合成途徑中，普遍應用的是氨氯地平亞胺與水合胼反應，生成氨氯地平，見以下反應式。后添加各種基團，生成氨氯地平類藥物。此途徑步驟簡單，工藝易實施，收率高，是目前常用的氨氯地平藥物合成途徑。但因其合成工藝中引入水合胼， 胼是一種誘變劑和致癌物質，因此要對氨氯地平藥物中的胼進行方法學研究和控制。
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O氨氯地平亞胺水合胼氨氯地平中華人民共和國衛生部藥典委員會，衛生部藥品標準(化學藥品及制劑第一冊)， 1989年1月，描述用比濁法對藥物中游離胼進行檢測，但該方法專屬性差，準確度低，人為誤差大，放置時間過長會對結果造成較大影響。中華人名共和國藥典二部(2010版)中描述異煙胼原料和注射用異煙胼中游離胼的檢查均采用薄層色譜法，最大限度定為0. 02%。但該方法準確度和精密度差，靈敏度低， 人為誤差大。王潔，差示分光光度法應用于異煙胼注射液中游離胼的測定，現代食品與藥品雜質，2007年第17卷第5期中描述了采用差示分光光度法，以對二甲氨基苯甲醛為顯色劑，在參比溶液中加入3%丙酮消除干擾，在456nm檢測波長處，用紫外分光光度計測定游離胼的方法。該試驗采用多種溶劑，操作比較復雜。
發明內容
本發明采用分光光度計法測定氨氯地平類藥物中游離胼含量。原理為游離胼+ 對二甲氨基苯甲醛一黃色縮合物于456nm波長處有最大吸收，不含游離胼的氨氯地平對照品+對二甲氨基苯甲醛一縮合物于456nm波長處無吸收。本方法相比于已有的游離胼檢測方法，準確度好，靈敏度高，誤差小，且操作簡便， 易于實施。測定方法對二甲氨基苯甲醛試液取對二甲氨基苯甲醛適量，加鹽酸使溶解，用水稀釋至適宜濃度，即得對照品溶液制備精密稱取含游離胼化合物適量，制成胼標準液。供試品溶液制備稱取氨氯地平類藥物樣品適量，加水溶解制成適宜濃度的供試品溶液。測定精密吸取對照品溶液、供試品溶液適量，置量瓶中，加對二甲氨基苯甲醛試液適量，再加水稀釋至刻度，搖勻，反應2-5分鐘在456nm波長處測定吸光度，以含相應濃度的對二甲氨基苯甲醛試液的水溶液為空白。公式A對照品=EC對照品L ①A供試品=EC供試品L②根據公式①、②得出C供試品=A供試品女C對照品/A對照品胼含量％=供試品溶液濃度女供試品溶液體積/供試品稱樣量女100%由此可計算出氨氯地平藥物中游離胼含量。
實施例實施例1 用分光光度法測定煙酸氨氯地平中游離胼的含量。儀器島津UV1800紫外分光光度計試劑硫酸胼分析純北京金龍化學試劑有限公司對二甲氨基苯甲醛試液取對二甲氨基苯甲醛20g，加鹽酸172. 5ml使溶解，用水稀釋至1000ml，即得。溶液制備對照品溶液制備精密稱取硫酸胼40. 6mg(相當于胼IOmg)，加水溶解并稀釋至 IOOml ；精密量取1ml，用水稀釋至100ml，制成1 μ g/ml的胼標準液。供試品溶液制備取煙酸氨氯地平樣品適量，加少量甲醇溶解后加水制成60mg/ml 的溶液，后用水稀釋成6mg/ml的供試液。測定法精密吸取溶液適量，置50ml量瓶中，加對二甲氨基苯甲醛試液20ml，再加水稀釋至刻度，搖勻，反應2-5分鐘在456nm波長處測定吸光度，以含相應濃度的對二甲氨基苯甲醛試液的水溶液為空白。系統適用性試驗溶液穩定性試驗我們考察了對照溶液的穩定性。
對照溶液穩定性試驗精密稱取硫酸胼40. 6mg(相當于胼IOmg)，加水溶解并稀釋至IOOml ；精密量取 lml，用水稀釋至100ml，制成1 μ g/ml的胼標準液。精密吸取15ml胼標準液，置于50ml量瓶中，加20ml對二甲氨基苯甲醛試液，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。分別于0、0. 5、 1、1. 5、2、2. 5、3、4、小時時取對照溶液于456nm波長處測定吸光度。溶液穩定性試驗結果見表1表1 煙酸氨氯地平對照溶液穩定性試驗結果
權利要求
1.一種用于測定氨氯地平藥物中所含游離胼的檢測方法，其特征在于依據游離胼與對二甲氨基苯甲醛發生反應，生成的黃色縮合物于456nm波長處有最大吸收，不含游離胼的氨氯地平對照品中加入對二甲氨基苯甲醛在456nm波長處檢測無吸收的原理，通過紫外分光光度法測定游離胼。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于檢測用對二甲氨基苯甲醛試液配制方法為取對二甲氨基苯甲醛適量，加鹽酸使溶解，用水稀釋至適宜濃度，即得。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于游離胼檢測中所用對照品為可產生胼的化合物。
4.根據權利要求3所述的胼對照品可選自胼、水合胼、鹽酸胼、單乙酸胼、磷酸胼、硫酸胼等，優選鹽酸胼、單乙酸胼、磷酸胼、硫酸胼等鹽類。
5.根據權利要求4所述胼對照品溶液配制方法為精密稱取對照品適量，用適宜溶劑稀釋，制成適宜濃度的胼標準液。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所需檢測游離胼的氨氯地平類藥物，是通過氨氯地平亞胺與水合胼反應，生成氨氯地平，后與各種基團反應生成的氨氯地平類藥物。 例如苯磺酸氨氯地平、馬來酸氨氯地平、甲磺酸氨氯地平與苯磺酸左旋氨氯地平、L-門冬氨酸氨氯地平等。
全文摘要
本發明是一種應用紫外分光光度法對氨氯地平類藥物中所含游離肼的檢測方法，其特征在于游離肼與對二甲氨基苯甲醛發生反應，生成的黃色縮合物于456nm波長處有最大吸收，向不含游離肼的氨氯地平對照品中加入對二甲氨基苯甲醛在456nm波長處檢測無吸收的原理，通過紫外分光光度計測定游離肼。本方法相比于已有的游離肼檢測方法，準確度好，靈敏度高，誤差小，且操作簡便，易于實施。
文檔編號G01N21/78GK102478521SQ20101055794
公開日2012年5月30日 申請日期2010年11月25日 優先權日2010年11月25日
發明者劉京, 王晉, 閆春穎 申請人:北京瑞康醫藥技術有限公司