專利名稱：電鏡實驗用2.5%戊二醛固定液及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液及其制備方法，更具體的講是把 電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定劑產品化的方法。
背景技術：
目前，電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液多為實驗室自配，即根據實驗需要自行購 買原料配置，配置方法如下試劑以25%或50%的戊二醛為原料，用磷酸鹽緩沖液配制成 2. 5%的戊二醛，而用于免疫電鏡及細胞化學實驗需要的2. 5%戊二醛固定液，還需要另行 提純才能滿足實驗要求，而這一過程在實驗室操作起來非常煩瑣且很難實現；另外，由于電 鏡實驗用試劑用量一般很少，一個樣品lmL2. 5%戊二醛固定液就可滿足需要，而自配試劑 所購原料最小包裝25%戊二醛100mL，磷酸二氫鈉500g，磷本氫二鈉500g，這樣就會造成 自配的試劑，經實驗后還有大量剩余試劑，而這些剩余試劑由于保存期非常短，因此，用不 完的試劑最終只能被遺棄，這樣既浪費實驗者的實驗經費，又浪費資源，遺棄的試劑還要造 成環境污染；其次，在人工方面，自配試劑從容器清洗、容器干燥、稱量、配制約需要2天的 時間，這樣對實驗進程會造成影響，而戊二醛的毒性對配制者的身體健康也會造成不良影 響。有基于此，申請人作出本發明。
發明內容
針對現有技術存在的上述問題，本發明的主要目的是在于提供一種高質量、成本 低、環保性好、使用時間長的電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液。本發明采取的技術方案如下，一種電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液，其特征在于， 采用以下原料和方法配置而成(1)、采用磷酸氫二鈉溶液和磷酸二氫鈉溶液配置成磷酸鹽 緩沖液配制，配置時雙人核對，配置完成進行中間體檢驗；(2)、將步驟1配置好的磷酸鹽緩 沖液加入戊二醛、蒸鎦水，提純后進行PH值檢驗；(3)、將步驟2配置好的溶液用棕色安瓶進 行熔封分裝，包裝完畢進行成品檢驗后出庫。本發明中產品在制備中的pH值可為1 14范圍內的任意值。步驟1的中間體檢驗是指溶液的含量、pH值檢驗。步驟2中的提純方法可選自減壓蒸鎦法、活性炭純化法、碳酸鋇吸附法等提純方 法的任意一種。本發明的另一方面目的是提供一種電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液的制備方法， 包括以下步驟1、原、輔料檢驗將用于配置的原、輔料及設備按標準分別進行檢驗后備用；2、磷酸鹽緩沖液配制A液磷酸氫二鈉*12個結晶水71. 64克加蒸鎦水至1000ml ；B液磷酸二氫鈉*2個結晶水31. 21克加蒸鎦水至1000ml ；
將A液36ml+B液14ml配置成0. 2molpH7. 2的磷酸鹽緩沖液；3、戊二醛固定液配制將步驟1配置好的0. 2molpH7. 2磷酸鹽緩沖液50ml，加入50%戊二醛5ml，然后加 蒸鎦水至100ml，加入活性炭2g，避光、密閉攪拌lh ；然后進行pH檢驗pH7. 2士0. 1，濾球過 濾、濾膜過濾；4、包裝及檢驗將棕色安瓶清洗、干燥后，在熔封機進行分裝熔封，并進行燈檢后包裝，包裝完畢 進行成品檢驗即可出庫。本發明的有益效果如下1、本發明產品在制備過程中由雙人核對，分裝前進行關鍵項目(如含量、pH等) 中間體檢驗，包裝后再進行成品檢驗，從工藝控制角度，最大地避免了自配試劑可能出現的 失誤，保證了實驗質量的提高。2、本發明產品在生產中按批量專業化生產，有能力使用專業設備，可達到避光、無 菌等條件，保證產品化戊二醛的質量高于自配試劑。3、本發明產品已制定能完全滿足或高于其實驗需求的質量標準，生產工藝中加入 了活性炭純化步驟，產品的質量標準就制訂為必須滿足免疫電鏡實驗，產品化試劑既可以 保證提供高質量的試劑，也可以極大地減少自配試劑在人工、設備方面的成本。4、有效期考察自配試劑不可能一次性用完，放置期間由于儲存條件不同，試劑變 化差異很大，等下一次使用時，不能保證其是否能滿足實驗要求，而本發明的產品化試劑通 過工藝控制，有效實現了保質期的延長，實踐證明，棕色玻璃安瓶熔封可使內容物完全與外 界氧、二氧化碳等隔絕，有效避光，加之充氮、無菌操作等工藝控制，可使內容物的保質期大 大延長，保質期可達兩年；這就在技術上為延長試劑有效期、保證產品化試劑的生產奠定了 技術基礎。5、在制備安全方面由于電鏡實驗試劑大多具有毒性或放射性，各實驗室配制時 不可能針對不經常配制的試劑而給操作人員配備昂貴的勞動保護；而專業化生產企業必須 考慮安全生產。6、包裝規格產品化試劑可根據用戶需要，制備lml、2ml、10ml、不同規格的產品，
根據實驗需求自行組合選購，使用戶得到經濟、高質量的產品；自配試劑則每次配制量遠遠 高于產品化規格，造成試劑浪費和環境污染。以下結合具體實施方式
對本發明作進一步說明。
具體實施例方式本發明的一種電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液的制備方法，具體工藝流程如下 原、輔料檢驗_專業配制_中間體檢驗_過濾_分裝、熔封_燈檢_包裝-成品檢驗。1、原、輔材料檢驗本實施例中涉及原、輔材料及設備如表一所示。表一原、輔材料及設備檢驗一覽表
原、輔材料、設備質量標準、型號50%戊二醛(進口)化學純 2、配制工藝1)、磷酸鹽緩沖液配制配置時雙人核對，配置完成進行中間體檢驗。A液磷酸氫二鈉*12個結晶水71. 64克加蒸鎦水至1000ml ；B液磷酸二氫鈉*2個結晶水31. 21克加蒸鎦水至1000ml ；0. 2molpH7. 2 緩沖液:A 液 36ml+B 液 14ml。2)、戊二醛固定液配制0. 2molpH7. 2緩沖液50ml+50%戊二醛5ml+蒸鎦水至 100ml+活性炭2g ；3)、避光、密閉攪拌lh ；4)、pH 檢驗pH7. 2 士 0. 1 ；5)、濾球過濾、濾膜過濾；6)、安瓶清洗、干燥；7)、熔封機分裝熔封；8)、燈檢在有黑色背景的燈光下，觀察熔封過的產品，去除泡頭、癟頭、炭化點等 的不合格品；9)、印字包裝；10)、成品檢驗成品檢驗標準如表2所示。表2、成品檢驗標準一覽表 本發明生產的產品，目前使用過的用戶浙江大學華家池電鏡室、浙江省腎病研究 中心、浙江大學紫金崗電鏡室、紹興文理學院電鏡室等，經反映產品質量高、實驗成本和程 序大大減少。
權利要求
一種電鏡實驗用2.5％戊二醛固定液，其特征在于，采用以下原料和方法配置而成(1)、采用磷酸氫二鈉溶液和磷酸二氫鈉溶液配置成磷酸鹽緩沖液配制，配置時雙人核對，配置完成進行中間體檢驗；(2)、將步驟1配置好的磷酸鹽緩沖液加入戊二醛、蒸鎦水后，提純，pH值檢驗；(3)、將步驟2配置好的溶液用棕色安瓶進行熔封分裝，包裝完畢進行成品檢驗后出庫。
2.根據權利要求1所述的一種電鏡實驗用2.5%戊二醛固定液，其特征在于配置過程 中的PH值為1 14范圍內的任意值。
3.根據權利要求1所述的一種電鏡實驗用2.5%戊二醛固定液，其特征在于步驟1的 中間體檢驗是指溶液的含量、PH值檢驗。
4.根據權利要求1所述的一種電鏡實驗用2.5%戊二醛固定液，其特征在于步驟2中 的提純方法選自減壓蒸鎦法、活性炭純化法、碳酸鋇吸附法的任意一種。
5.一種電鏡實驗用2. 5%戊二醛固定液的制備方法，包括以下步驟(1)、原、輔料檢驗將用于配置的原、輔料及設備按標準分別進行檢驗后備用；(2)、磷酸鹽緩沖液配制A液磷酸氫二鈉*12個結晶水71. 64克加蒸鎦水至1000ml ；B液磷酸二氫鈉*2個結晶水31. 21克加蒸鎦水至1000ml ；將A液36ml+B液14ml配置成0. 2molpH7. 2的磷酸鹽緩沖液；(3)、戊二醛固定液配制將步驟1配置好的0.2molpH7.2磷酸鹽緩沖液50ml，加入 50 %戊二醛5ml，然后加蒸鎦水至100ml，加入活性炭2g，避光、密閉攪拌Ih ；然后進行pH檢 驗pH7. 2 士 0. 1，濾球過濾、濾膜過濾；(4)、包裝及檢驗將棕色安瓶清洗、干燥后，在熔封機進行分裝熔封，并進行燈檢后包 裝，包裝完畢進行成品檢驗即可出庫。
全文摘要
本發明公開了一種電鏡實驗用2.5％戊二醛固定液及其制備方法，包括以下步驟1、磷酸鹽緩沖液配制A液磷酸氫二鈉*12個結晶水71.64克加蒸鎦水至1000ml；B液磷酸二氫鈉*2個結晶水31.21克加蒸鎦水至1000ml；將A液36ml+B液14ml配置成0.2molpH7.2的磷酸鹽緩沖液；2、固定劑戊二醛配制將步驟1配置好的0.2molpH7.2磷酸鹽緩沖液50ml，加入50％戊二醛5ml，然后加蒸鎦水至100ml，加入活性炭2g，避光、密閉，檢驗后包裝本發明具有高質量、節約實驗時間和實驗成本、減少過期試劑污染環境、避免配制試劑給實驗者帶來健康損害、保質期長等優點。
文檔編號G01N33/531GK101865915SQ201010185630
公開日2010年10月20日 申請日期2010年5月28日 優先權日2010年5月28日
發明者張樹成, 王秀珍 申請人:紹興文理學院