專利名稱：一種檢測馬來酸氯苯那敏的方法
技術領域：
本發明涉及利用沉淀作用對非生物材料的檢測，具體涉及藥物中馬來酸氯苯那敏 的檢測。
背景技術：
馬來酸氯苯那敏(N，N-二甲基-gamma-(4-氯苯基)-2_吡啶丙胺順丁烯二酸 鹽)，其英文名為Chlorphenamine Maleate ；2- (p-chloro-alpha- (2- (dimethylamino) ethyl)benzyl)-pyridin maleate.馬來酸氯苯那敏的結構式如下式I所示，分子式為 C16H19ClN2 · C4H4O4，分子量為390. 87，CAS號為113_92_8。馬來酸氯苯那敏為白色結晶性粉 末，無臭，味苦，熔點為131-135°C ；易溶于水，乙醇，氯仿，微溶于乙醚。 馬來酸氯苯那敏可治療過敏性鼻炎對過敏性鼻炎和上呼吸道感染引起的鼻充血 有效，可用于感冒或鼻竇炎的治療。馬來酸氯苯那敏作為組織胺H1受體拮抗劑，能對抗過敏反應(組胺)所致的毛細 血管擴張，降低毛細血管的通透性，緩解支氣管平滑肌收縮所致的喘息，馬來酸氯苯那敏的 抗組胺作用較持久，也具有明顯的中樞抑制作用，能增加麻醉藥，鎮痛藥，催眠藥和局麻藥 的作用。馬來酸氯苯那敏本身可能引起嗜睡，口渴，多尿，咽喉痛，困倦，虛弱感，心悸，皮膚 瘀斑，出血傾向等副作用。尤其是患者在不知情的情況下過量使用，容易造成各種危險如 對馬來酸氯苯那敏過敏的患者使用含馬來酸氯苯那敏的中成藥和保健品后可能產生過敏 反應卻不知過敏源；高空作業者，車輛駕駛人員，機械操作人員在工作時間使用后如產生困 倦、嗜睡等反應，容易在作業中發生各種事故，危害生命安全；患者在不知情狀況下使用劑 量過大時，也容易出現中樞神經系統抑制癥狀。同時，雖然對于優鼻等噴霧劑中馬來酸氯苯 那敏的經鼻吸收率尚未明確，但患者若長期使用，除容易產生耐藥性外，仍有造成肝臟損害 和腦損害等長期毒性的危險。鼻炎，指的是鼻腔黏膜和黏膜下組織由病毒、細菌、過敏原的感染而引起的炎性改 變，是鼻腔免疫功能降低，使致病菌在鼻腔內聚集滋生所致。世界衛生組織通過一項全球 范圍的調查發現，鼻炎的發病率高的驚人，每10個人當中就有大多數人患有不同程度的鼻炎。近十年來，鼻炎的發病率更是以每年3% -5%的速度增加。隨著鼻炎發病率越來越高，這幾年，治療鼻炎的藥品市場銷售在不斷增長。近年來在中藥、苗藥和藏藥等抗炎類和鎮靜類中成藥和保健品中摻雜馬來酸氯苯那敏(胡青，崔 益伶，王柯等.液相色譜離子阱質譜聯用檢測中藥和保健食品中16種非法摻加抗炎類和抗 組胺類化學藥品的研究.藥物分析雜志.2008,28(12) =2065-2068 ；姚羽，田頌九，張正行 等.中成藥及中藥保健品中非法添加抗組胺藥物的檢測方法研究.中國藥物與臨床.2009， 9(8) :720-721)。而添加了馬來酸氯苯那敏的保健品中，未標明含馬來酸氯苯那敏及其含 量，嚴重誤導和欺騙了消費者。消費者在不知情的情況下購買和使用這些產品，直接給消費 者的健康和生命帶來巨大威脅。目前，檢測藥品和保健品中摻雜馬來酸氯苯那敏的方法主要有以下幾種1.薄層色譜法用無水乙醇提取樣品中的待測成分，所得的供試品溶液和對照品(標準品)溶液 點在同一塊硅膠G薄層色譜板上(薄層板通常用硅膠制成)，以氯仿甲醇濃氨溶液= 15 1 0.2的體積比為展開劑，展開后，取出，晾干，熏以碘蒸氣。不同的物質在薄層色譜 板不同的位置上以斑點的形式出現(原因是不同的物質有不同遷移的速度，常以色譜遷移 值表示展開后斑點到原點之間的距離)，根據待測樣品是否在與對照品(標準品)相應的位 置上出現斑點這一實驗所得的現象來判斷待測樣品是否含有目標成分。馬來酸氯苯那敏對 照品溶液和樣品提取所得的供試品溶液在同一塊薄層色譜板上點樣，展開劑展開，晾干后， 薄層色譜板在日光下檢示，如果供試品溶液薄層色譜圖在與馬來酸氯苯那敏對照品相應的 位置上出現呈現相同的黃色斑點，則提示樣品中可能含有馬來酸氯苯那敏(陳黃保.11種 中成藥中對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏的TLC鑒別.中國藥事.2002，16(1) :62_63)。薄層色譜法的優點是不需要使用昂貴的分析儀器，但卻存在下述缺點(1)色譜 分辯率較低，中藥制劑成分復雜，干擾因素多，易將某些共存成分誤判為馬來酸氯苯那敏， 某些共存成分如果量較大且色譜遷移值與馬來酸氯苯那敏接近則會干擾目標成分的檢出。 (2)色譜展開和晾干的時間長，不能滿足快速測定的要求。(3)薄層色譜板需要自行鋪制， 烘干并干燥存放(預制的薄層色譜板需要干燥存放)，環境溫度和濕度對分離效果的影響 大。(4)要求實驗人員有較好的經驗。(5)需要有固定的實場所，不適合作流動性大的現場 檢測。2.高效液相色譜法高效液相色譜法是常用的現代分析方法。在相同的色譜條件下，不同的物質有不 同的色譜保留時間。在相同的色譜條件下，馬來酸氯苯那敏對照品溶液和樣品提取所得的 供試品溶液分別進樣，根據兩者的色譜峰保留時間可判斷待測樣品是否含有馬來酸氯苯那 敏(羅遠秀.HPLC法測定維C銀翹膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量.廣西中醫學院學報， 2009，12 (2) :60-62)。高效液相色譜法的優點是色譜分離效率高，色譜保留時間精度高，靈敏度高；缺點 是(1)儀器價格昂貴，樣品前處理時間長，色譜柱易受污染，分析成本高，不易推廣；(2)需 要使用昂貴的分析儀器，對環境要求高，需要固定擺放，不適合作流動性大的現場檢測。3.高效液相色譜_質譜法高效液相色譜與質譜檢測器結合可大大提高檢測結果的可靠性，這是因為物質的色譜峰保留時間以及其質譜裂解獲得的碎片離子、各離子與基峰離子的相對強度決定于物 質的內在性質，具有極高的專屬性。高效液相色譜-串聯質譜聯用法更適合于成分復雜、背 景干擾嚴重的樣品分析，這種分析方法可提高檢測靈敏度和結果的可靠性(凌霄，許竹梅， 譚會潔，陳青.HPLC-MS/MS鑒定哮喘類中藥制劑中添加的茶堿等化學藥品.藥物分析雜志， 2007,27(12) 1920-1923)。高效液相色譜_質譜聯用法是一種分析成本比高效液相色譜法更高、操作更復雜 的分析方法。儀器對使用的環境要求更高，需要固定擺放，不適合作流動性大的現場檢測。 因此，這類型檢驗只能在少數技術條件很好的實驗室中進行，不適合藥品監督部門在現場 快速排查。
發明內容
本發明的解決的技術問題是提供一種適用于藥品監督部門現場檢測治療鼻炎的 中成藥和保健品中是否非法摻雜馬來酸氯苯那敏的快速檢測方法。本發明為了解決上述技術問題技術方案如下所述一種藥品、中成藥和保健品中摻雜馬來酸氯苯那敏的快速檢測方法，該方法由以 下步驟組成(1)取固體樣品加入3-10倍重量的水振搖溶散得到提取液，然后取3mL提取液，力口 入2滴質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液振搖均勻作為待測液；或者取液體樣品3mL，然后 加入2滴質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液振搖均勻作為待測液；(2)在待測液中加入3mL乙酸乙酯萃取，靜置分層；(3)取上層乙酸乙酯萃取液2mL，加入2mL體積濃度為3 %的磷酸水溶液萃取，靜置 分層；(4)取下層磷酸水溶液反萃取液lmL，滴加1_2滴三硝基苯酚飽和水溶液，如果產 生黃色沉淀，則判斷樣品中含有馬來酸氯苯那敏。本發明所述的檢測馬來酸氯苯那敏的方法中的測量樣品可以是液體樣品或者固 體樣品，當測量樣品為固體樣品時，水是提取其中馬來酸氯苯那敏的最佳選擇，其原理如下 所述馬來酸氯苯那敏是N，N- 二甲基-gamma- (4-氯苯基)_2_吡啶丙胺順丁烯二酸鹽， 其結構中的N，N-二甲基-gamma-(4-氯苯基)-2_吡啶丙胺基團(簡稱馬來酸氯苯那敏母 核)的陽離子化傾向如下式II所示。 在式II中，馬來酸氯苯那敏母核中的N原子其最外層電子軌道為SP3雜化，軌道上 有一對孤對電子，由于其軌道的S成分(球形)較小，而P成分(紡錘形)較大，又由于其 軌道取向為正四面體結構，孤對電子裸露伸出在外，在水中易于與質子接近并有與之結合 形成銨正離子的傾向。而與N原子結合的烷基可以給電子，使形成的銨正離子正電荷分散 而穩定。質子化的氯苯那敏母核，由于氮原子的負電性，與之結合的氫可與水形成氫鍵，如 下式III所示，從而獲得溶劑化，因此馬來酸氯苯那敏易溶于水中。 由上面的描述可見，水對固體樣品具有很好的滲透性和對馬來酸氯苯那敏具有良 好的溶解性，可高效地提取樣品中的馬來酸氯苯那敏。本發明所述的快速檢測方法的檢出待測品中馬來酸氯苯那敏的過程是，先使用強 堿將含馬來酸氯苯那敏溶液(當待測品為固體時，采用水浸提獲得)堿化，再用有機溶劑萃 取，然后用無機酸溶液反萃取，使馬來酸氯苯那敏從有機相萃取進入無機相，最后，以三硝 基苯酚溶液作為檢測劑，使馬來酸氯苯那敏可與之反應形成黃色沉淀物。根據上述檢測過程的設計思想，在每個步驟的試劑的選擇上進行了如下大量的考 查和探索。堿化采用無機堿溶液進行堿化。無機堿溶液可以是氫氧化鉀和氫氧化鈉水溶液其中一種或者混合物，最好是氫氧化鈉水溶液。萃取所需要的萃取劑是正己烷、環己烷、乙酸乙酯、苯、二氯甲烷其中一種或者兩 種以上，最好是乙酸乙酯。 反萃取所需要的無機酸水溶液可以是硫酸，鹽酸，硝酸和磷酸其中一種或者兩種 以上，最好是磷酸。本發明所述在反萃取的步驟中，加入無機酸溶液后，大量的質子使馬來 酸氯苯那敏母核質子化。一方面，質子化的馬來酸氯苯那敏母核極性增大了，與乙酸乙酯極 性差別變大，與之結合作用減弱。另一方面，質子化的馬來酸氯苯那敏母核在無機酸溶液中 與水形成結合力強的氫鍵，并進一步溶劑化，從而離開有機相進入到無機酸溶液中。檢測劑可選擇能與叔胺產生沉淀反應的各種試劑，其中2，4，6_三硝基苯酚溶液 最優，其原理如下所述氯苯那敏有可接受質子的氮原子，接受質子后生成帶正電荷、呈游離態的陽離子 (以R+表示)。2，4，6_三硝基苯酚(俗稱苦味酸)，由于受三個硝基的吸電子效應影響，其 酚羥基容易進行酸式電離，生成游離態的H+和游離態的[(NO2) 3C6H20]_。游離態陽離子的 (R+)正電荷密度高，能與游離態的[(NO2)3C6H2OF發生離子反應，生成在水介質中不易溶解 的有機鹽(黃色不溶物產物)。離子反應式為R++[ (NO2)3C6H2CT] —R[ (NO2)3C6H2O] I。為了便于實施本發明的檢測方法，可以采用常規方法將所述的各種試劑制成快速 檢驗試劑盒，也可以制成適合藥品檢測車上使用的馬來酸氯苯那敏的快速檢測套裝。與現有技術相比，本發明具有如下有益效果1、本發明的檢測方法，通過提取堿 化、萃取、反萃取和檢測4步即可檢驗出樣品中是否含有馬來酸氯苯那敏，且所用提取液、 堿化液、萃取液、反萃取和檢測劑均為普通的化學試劑，操作簡便，分析成本低；2、本發明的 檢測方法中各步物質的用量小，整個檢測方法在IOmL的樣品瓶或試管中即可進行，不需要 使用貴重分析儀器；3.本發明的檢測方法中，所用提取液、萃取液、反萃取和檢測劑的專屬 性強，通過提取、萃取和反萃取過程中利用不同物質的溶解性差異分離除去干擾物質，使得 顯色反應的靈敏度高，檢驗結果正確率高，同時顯色反應的反應迅速，現象明顯，因此本發 明適用于現場快速檢測藥物、中成藥和保健品中是否摻入馬來酸氯苯那敏。
具體實施例方式以下的實例將有助于本領域的普通技術人員進一步理解本發明，但不以任何形式 限制本發明。實施例1樣品UB優鼻噴霧劑(噴霧劑，標示貴州苗仁堂生物醫藥科技有限責任公司生產， 批號20091012，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 7mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；
(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1滴，立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定UB優鼻噴霧劑中含有馬來酸氯苯那敏。實施例2樣品UB優鼻噴霧劑(噴霧劑，標示貴州苗仁堂生物醫藥科技有限責任公司生產， 批號20091020，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 8mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液2滴，立刻 產生明顯的黃色不溶物，即判定UB優鼻噴霧劑中含有馬來酸氯苯那敏。實施例3樣品UB優鼻噴霧劑(噴霧劑，標示貴州苗仁堂生物醫藥科技有限責任公司生產， 批號20091115，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 7mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定UB優鼻噴霧劑中含有馬來酸氯苯那敏。實施例4樣品苗爽苗大夫鼻通爽(噴霧劑，標示鄭州永信醫藥科技有限公司，貴州平安民 族制藥有限公司，貴州健盛醫藥科技有限公司聯合生產，批號20090201，高效液相色譜法 測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 8mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定UB優鼻噴霧劑中含有馬來酸氯苯那敏。
實施例5樣品苗靈鼻爽(噴霧劑，標示貴州苗仁堂生物醫藥科技有限責任公司生產，批 號20091021，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 8mg/ml)。檢測步驟 (1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定苗靈鼻爽中含有馬來酸氯苯那敏。實施例6樣品苗爽鼻通(噴霧劑，標示鄭州永信醫藥科技開發有限公司；貴州安平民族制 藥有限公司；廣州健盛醫藥科技有限公司生產，批號20090201，高效液相色譜法測定結果 本品含馬來酸氯苯那敏0. 9mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定苗爽鼻通中含有馬來酸氯苯那敏。實施例7樣品鼻通爽(噴霧劑，標示貴州安平民族制藥有限公司生產，批號2009040117， 高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 8mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定鼻通爽中含有馬來酸氯苯那敏。實施例8樣品濞通靈(噴霧劑，標示西安奇草堂醫藥科技有限公司生產，批號20090221，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏1. 2mg/ml)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定濞通靈中含有馬來酸氯苯那敏。實施例9樣品鼻暢舒通(噴霧劑，標示陜西強森藥業有限公司生產，批號20090615，高效 液相色譜法測定結果本品不含馬來酸氯苯那敏)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 未觀察到不溶物產生，即判定鼻暢舒通中不含有馬來酸氯苯那敏。實施例10樣品苗嶺鼻通生態液(噴霧劑，標示黔東南州苗嶺苗族醫藥技術有限公司生產， 批號20090901，高效液相色譜法測定結果本品不含馬來酸氯苯那敏)。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 未觀察到不溶物產生，即判定苗嶺鼻通生態液中不含有馬來酸氯苯那敏。實施例11樣品感冒靈膠囊(膠囊劑，標示三九醫藥股份有限公司生產，批號1001191s，高 效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏1. 7mg/粒)。檢測步驟(1)取樣品1粒，將其內容物(0. 3g)置于IOml樣品瓶I中，加入10倍樣品重量的水，即3ml，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘； (2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定感冒靈膠囊中含有馬來酸氯苯那敏。實施例12樣品感冒靈顆粒(顆粒劑，標示廣東在田藥業有限公司生產，批號9113014，高 效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏4. 4mg/包)。檢測步驟(1)取樣品lg，置于IOml樣品瓶I中，加入3倍樣品重量的水，即3ml，旋緊瓶蓋， 振搖半分鐘；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定感冒靈顆粒中含有馬來酸氯苯那敏。實施例13樣品新康泰克美撲偽麻片(片劑，標示中美天津史克制藥有限公司生產，批號 09120819，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏1. 9mg/粒)。檢測步驟(1)取樣品1片(0.3g)，研細，置于IOml樣品瓶I中，加入10倍樣品重量的水，即 3ml，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定新康泰克美撲偽麻片中含有馬來酸氯苯那敏。實施例14樣品感康復方氨酚烷胺片(片劑，標示吉林省吳太感康藥業有限公司生產，批 號09120819，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏1. 6mg/片)。檢測步驟(1)取樣品2片(0.6g)，研細，加入6倍樣品重量的水，振搖半分鐘，取3ml提取液，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻； (3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定感康復方氨酚烷胺片中含有馬來酸氯苯那敏。實施例15樣品維C銀翹片(片劑，標示佛山德眾藥業有限公司生產，批號20100126，高效 液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏1. 2mg/片)。檢測步驟(1)取樣品1片(0.3g)，研細，置于IOml樣品瓶I中，加入10倍樣品重量的水，即 3ml，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定維C銀翹片中含有馬來酸氯苯那敏。實施例16樣品美敏偽麻口服溶液[口服溶液劑，標示雅柏藥業(中國)有限公司生產，批 號20090221，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏0. 16mg/ml]。檢測步驟(1)取樣品3ml，置于IOml樣品瓶I中；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 立刻產生明顯的黃色不溶物，即判定美敏偽麻口服溶液中含有馬來酸氯苯那敏。實施例17樣品清火膠囊(膠囊劑，標示浙江泰康藥業集團有限公司生產，批號20091208， 高效液相色譜法測定結果本品不含馬來酸氯苯那敏)。檢測步驟(1)取樣品1粒，將其內容物(0. 3g)置于IOml樣品瓶I中，加入10倍樣品重量的 水，即3ml，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘；
(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 未觀察到不溶物產生，即判定清火膠囊中不含有馬來酸氯苯那敏。實施例18樣品鼻炎寧膠囊(膠囊劑，標示甘肅金維沙藥業有限公司生產，批號090616，高 效液相色譜法測定結果本品不含馬來酸氯苯那敏)。檢測步驟(1)取樣品1粒，將其內容物(0.3g)置于IOml樣品瓶I中，加入10倍樣品重量的 水，即3ml，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘；(2)向樣品瓶I中滴加質量濃度為2%的氫氧化鈉水溶液2滴，搖勻；(3)向樣品瓶I加入乙酸乙酯3ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，上 層液體呈無色澄明；(4)用吸管吸取上層液體2ml，置于IOml樣品瓶II中，加入體積濃度為3%的磷酸 水溶液2ml，旋緊瓶蓋，振搖使兩相混合接觸，靜置分層，下層液體呈無色澄明；(5)用吸管吸取下層溶液Iml置試管中，滴加三硝基苯酚的飽和水溶液1 2滴， 未觀察到不溶物產生，即判定鼻炎寧膠囊中不含有馬來酸氯苯那敏。對比實驗1 堿化液加入量優化試驗堿化液的加入量對萃取效率影響較大，為了獲得較高的萃取率對堿化液的加入量 進行的優化。處理方法稱取馬來酸氯苯那敏片(批號20091101，生產廠家廣東順峰藥業有 限公司，高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏51. 5mg/g) 0. 03g，精密稱定，加入 水5mL，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘。分別加入2% NaOH溶液2滴、5滴、10滴，搖勻。精密加入乙 酸乙酯5mL，旋緊瓶蓋，將樣品瓶從正立至顛倒翻轉5次，靜置。精密吸取上層液體0. 5mL,置 5mL容量瓶，加流動相稀釋置刻度，搖勻，過濾后進液相色譜儀測定。結果見表1，表明當2 % NaOH溶液為2 10滴時，萃取效率均達到高點，為了操作方便，本方法選擇加入2% NaOH 溶液2滴。表1堿化液加入量優化試驗結果 對比實驗2 快檢方法轉移效率考察取馬來酸氯苯那敏片20片(批號20091101，生產廠家廣東順峰藥業有限公司， 高效液相色譜法測定結果本品含馬來酸氯苯那敏51. 5mg/g)，稱重，共1. 50403g。將上述20片研碎，混勻。分別精密稱取6份樣品，取樣量如下( 1) 0. 0389 1 g (2) 0. 03887g (3) 0. 03877g (4) 0. 03850g (5)0. 03900g(6)0. 03930g將以上六份樣品置于IOmL的樣品瓶中，加入水5mL，旋緊瓶蓋，振搖半分鐘，再加 入2% NaOH溶液2滴，搖勻。加入乙酸乙酯5mL，旋緊瓶蓋，將樣品瓶從正立至顛倒翻轉5
次，靜置。(1)取上層液體ImL置IOmL的容量瓶中，用流動相稀釋定容至刻度，搖勻，經濾頭 過濾，續濾液進液相色譜儀，同法測定6份。(2)另取上層液體3mL置IOmL的樣品瓶中，加入3% H3PO4溶液3mL，旋緊瓶蓋，將 樣品瓶從正立至顛倒翻轉5次，靜置。精密吸取下層溶液2mL，置IOmL的容量瓶中，加流動 相至刻度，搖勻，經濾頭過濾，續濾液進液相色譜儀，同法測定6份。測定結果見表2，表明本方法的用乙酸乙酯作為萃取液的萃取效率到100% (由于 有部分乙酸乙酯溶解到水中，致使其總體積變小，而計算萃取液中馬來酸氯苯那敏含量時 仍按5ml算，故萃取率略高于100% )，而采用3% H3PO4溶液作為反萃取液的萃取率則均超 過90%，方法的轉移效率比較高。表2方法的轉移效率測定結果
權利要求
一種藥品、中成藥和保健品中摻雜馬來酸氯苯那敏的快速檢測方法，該方法由以下步驟組成(1)取固體樣品，加入3-10倍重量的水振搖溶散得到提取液，然后取3mL提取液，加入2滴質量濃度為2％的氫氧化鈉水溶液振搖均勻作為待測液；或者取液體樣品3mL，然后加入2滴質量濃度為2％的氫氧化鈉水溶液振搖均勻作為待測液；(2)在待測液中加入3mL乙酸乙酯萃取，靜置分層；(3)取上層乙酸乙酯萃取液2mL，加入2mL體積濃度為3％的磷酸水溶液萃取，靜置分層；(4)取下層磷酸水溶液反萃取液1mL，滴加1-2滴三硝基苯酚飽和水溶液，如果產生黃色沉淀，則判斷樣品中含有馬來酸氯苯那敏。
全文摘要
本發明公開一種藥品、中成藥和保健品中摻雜馬來酸氯苯那敏的快速檢測方法。該方法由以下步驟組成(1)取固體樣品加入3-10倍重量的水振搖溶散，然后取3mL提取液加入2滴2％(w/v)氫氧化鈉溶液振搖均勻作為待測液；或者取3mL液體樣品，然后加入2滴2％(w/v)氫氧化鈉溶液振搖均勻作為待測液；(2)在待測液中加入3mL乙酸乙酯萃取，靜置分層；(3)取上層乙酸乙酯萃取液2mL，加入2mL體積濃度為3％的磷酸水溶液萃取，靜置分層；(4)取下層磷酸水溶液反萃取液1mL，滴加1-2滴三硝基苯酚飽和水溶液，如果產生黃色沉淀，則判斷樣品中含有馬來酸氯苯那敏。本發明的檢測方法操作簡便，專屬性強，顯色反應迅速，可適用于現場快速檢測藥品、中成藥和保健品中是否摻雜馬來酸氯苯那敏。
文檔編號G01N21/82GK101865857SQ201010183729
公開日2010年10月20日 申請日期2010年5月20日 優先權日2010年5月20日
發明者李楊杰, 梁祈, 謝艷康, 邱蘊綺, 雷毅 申請人:廣東省藥品檢驗所