專利名稱：保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法
技術領域：
本發明涉及七種人參皂苷含量的測定方法，特別是涉及一種高效液相色譜測定保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法。
背景技術：
人參皂苷是人參的主要功效成分，目前通過科學、先進的工藝技術可以分離和精制出數十種人參皂苷單體，皆由苷元和糖組成，除R0的苷元是齊墩果酸外，其他的是原人參二醇和原人參三醇；其中人參中單體皂苷Rgl和Rbl是人參中益智作用的主要陳分，此外一些人參皂苷還具有抗衰老、抗疲勞、調節中樞神經系統、活化皮膚細胞、增強皮膚彈性，減少皺紋等作用，并且對于糖尿病，不同類型的神經衰弱癥、抗癌等均具有較好的功效。人參單體皂苷因具有優越的生理學、藥學特性，使之廣泛使用于保健食品中，同時又可用作醫藥行業的原料，是國內外保健食品研究的熱門領域。隨著人們生活水平的提高，對食品尤其是保健食品的檢測，提出了更高的要求，而目前現有的保健食品標準體系尚不健全、信息交流和應急反應體系建設緩慢，現有的檢測方法與食品工藝要求和食品安全要求，仍有較大的差距，并且因為人參皂苷單體種類繁多， 本底組分復雜，給日常檢測其中人參皂苷Rgl、Re、Rc、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量帶來了一定的困難。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是為了克服上述現有技術的缺陷，提供一種保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，該方法可以有效的測定保健食品中七種人參皂苷Rgl、 Re、Rc、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量，克服了現有《保健食品檢驗與評價技術規范》檢測方法技術存在的缺陷，增加了人參皂苷Rf的測定，能夠更好的分析保健食品中人參皂苷Rgl、Re、Rc、 Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量，更好的為西洋參和人參的判斷提供依據，填補了國內相關標準中關于此項內容的空白。本發明是通過下述技術方案來達到上述目的的一種保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，包括以下步驟1)樣品預處理；2)使用反相高效液相色譜柱進行色譜分析；3)紫外檢測器檢測；4)根據色譜峰的保留時間對其中的人參皂苷進行定性；5)用外標法對其中人參皂苷含量進行定量。其中，上述測定方法，所述七種人參皂苷為Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd。所述樣品預處理分固體試樣處理和液體試樣處理。所述固體試樣處理取試樣(片劑或膠囊內容物等)研成粉末，并過20目篩，精確取該粉末于磨口三角瓶中，準確加入35-45ml的乙醇/水溶液(體積比1 1)，50_60°C超聲30-60min，冷卻后加入少量的乙腈，二次水定容，離心后過0. 45 μ m膜，濾液進行色譜分析。所述液體試樣處理準確稱取試樣，加2.5ml的乙醇/水溶液(體積比1 1)，超聲溶解均勻，冷卻后加少量的乙腈，二次水定容，離心后過0. 45 μ m膜，濾液進行色譜分析。所述反相高效液相色譜分析參數分別為色譜柱=AgilentClS柱，4. 6X 150mm， 5μπι;柱溫30°C;進樣量10μ1 ；流動相乙腈和水。測定時，首先，配制人參皂苷Rgl、Re、 Rc、Rf、Rbl、Rb2、Rd 混合標準溶液，濃度分別為 0. 01,0. 05,0. 10,0. 20,0. 50mg/ml ；然后，采用梯度洗脫對目標物進行有效分離。所述紫外檢測是在波長205nm處進行檢測。所述人參皂苷定性是指采用人參皂苷標樣色譜峰的保留時間對樣品色譜峰來進行定性。所述人參皂苷含量采用外標法進行定量。本發明的檢測方法可以檢測市售任何一種含有人參制品的保健產品，例如袋泡茶、西洋參蜂王漿、養元益腎酒等。有益效果本發明為檢測保健食品中七種人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量提供了更準確、方便和經濟的檢測方法，更加有利于保健食品生產廠家監控七種人參皂苷的添加使用量，以及為西洋參和人參的判斷提供了重要依據，填補了國內相關標準中關于此項內容的空白。
具體實施例方式以下結合具體實施例對本發明的技術方案進一步解釋說明。實施例11)取袋泡茶的內容物研成粉末，并過20目篩，精確稱取0. 2g該粉末于磨口三角瓶中，準確加入35-45ml乙醇/水溶液(體積比1 1)，50-60°C超聲30-60min，冷卻后加入少量的乙腈，二次水定容至50ml，離心后過0. 45 μ m膜，濾液進行色譜分析。2)使用反相高效液相色譜柱進行色譜分析。色譜柱為；AgilentClS柱， 4.6父150讓，5“111;柱溫301；進樣量10 μ 1 ；流動相乙腈和水。a.配制人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd混合標準溶液，濃度分別為0. 01、 0.05、0·10、0. 20,0. 50mg/ml。b.采用梯度洗脫對目標物進行有效分離。3)試樣進行HPLC分析，用峰面積對濃度做各單體皂苷的標準回歸曲線。在波長 205nm處進行紫外檢測。4)將人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、RbU Rb2, Rd標準溶液和處理好的樣品按相同色譜測定條件進行檢測，用工作站記錄系統記錄各色譜峰的保留時間和峰面積，用人參皂苷 Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd標樣色譜峰的保留時間對樣品色譜峰進行定性。5)采用外標法對樣品色譜峰定量。測定樣品中人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、 Rb2、Rd的含量，從而計算出人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量，具體數據參見表 1 (KH-1600 型薄層色譜掃描儀和 WatersACQUITYUPLC)。
注若樣品為西洋參蜂王漿、養元益腎酒等，則按照前述液體樣品的前處理方式進行操作，其他步驟均相同。表 權利要求
1.一種保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，包括以下步驟1)樣品預處理；2)使用反相高效液相色譜柱進行色譜分析；3)紫外檢測器檢測；4)根據色譜峰的保留時間對其中人參皂苷進行定性；5)用外標法對其中人參皂苷含量進行定量。
2.如權利要求1所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述七種人參皂苷為 Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd0
3.如權利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述樣品預處理分固體試樣處理和液體試樣處理。
4.如權利要求3所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述固體試樣處理如下取片劑或膠囊內容物研成粉末，并過20目篩，精確取該粉末于磨口三角瓶中，準確加入35-45ml體積比為1 1的乙醇/水溶液，50_60°C超聲30-60min，冷卻后加入少量的乙腈，二次水定容，離心后過0. 45 μ m膜，濾液進行色譜分析。
5.如權利要求3所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述液體試樣處理如下準確稱取試樣，加2.5ml體積比為1 1的乙醇/水溶液，超聲溶解均勻，冷卻后加少量的乙腈，二次水定容，離心后過0. 45 μ m膜，濾液進行色譜分析。
6.如權利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述反相高效液相分析參數分別為色譜柱:AgilentC18柱，4. 6X 150mm，5 μ m ；柱溫:30°C ； 進樣量10μ 1 ；流動相乙腈和水。
7.如權利1或2或6所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述反相高效液相分析包括以下步驟首先，分別配制七種人參皂苷混合標準溶液，濃度分別為0. 01,0. 05,0. 10,0. 20,0. 50mg/ml ；然后再采用梯度洗脫對目標物進行有效分離。
8.如權利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述紫外檢測是在205nm處進行檢測。
9.如權利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于， 將人參皂苷標準溶液和處理好的樣品按相同色譜測定條件進行檢測，用工作站記錄系統記錄各色譜峰的保留時間和峰面積，用人參皂苷標樣色譜峰的保留時間對樣品色譜峰進行定性。
10.如權利要求1所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，其特征在于，所述人參皂苷含量采用外標法進行定量。
全文摘要
本發明公開了一種保健食品中七種人參皂苷含量的測定方法，所述七種人參皂苷為Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd。所述測定方法包括以下步驟1)樣品預處理；2)使用反相高效液相色譜柱進行色譜分析；3)紫外檢測器(UV)檢測；4)根據色譜峰的保留時間對其中人參皂苷進行定性；5)用外標法對其中人參皂苷含量進行定量。本發明有效克服了現有檢測技術存在的缺陷，增加了人參皂苷Rf的測定，能夠更好的分析保健食品中人參皂苷的含量，并能更好的為西洋參和人參的判斷提供依據，填補了國內相關標準中關于此項內容的空白。
文檔編號G01N30/02GK102183588SQ20101011881
公開日2011年9月14日 申請日期2010年3月5日 優先權日2010年3月5日
發明者宋薇 申請人:上海譜尼測試技術有限公司