治療中風的膠囊制劑的質量控制方法

專利名稱：治療中風的膠囊制劑的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及藥品的質量控制方法，特別是一種治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，屬于藥品的技術領域。

背景技術：
中風又稱腦卒中、腦血管意外，腦卒中是一種嚴重威脅人類健康和生命的常見疾病，是由于缺血或出血引起的急性局部、短暫或持久性腦損害，通常包括腦出血、腦梗死、蛛網膜下腔出血在內的一組疾病。中風分為出學性中風和缺血性中風，其中缺血性中風占中風患者的70％左右。主要臨床表現為突然昏仆、半身不遂、眩暈頭痛、偏身麻木、語言無力、口舌渦斜等癥狀。腦卒中是腦血管疾病的一種類型。后者包括的范圍更廣，除了腦卒中外，還有血管性癡呆、高血壓性腦病、腦動脈炎等疾病。隨著經濟的發展，人民生活水平的提高，以及傳染病的良好控制，在許多國家，腦卒中成為三大死亡原因之一。有關資料表明，腦卒中在我國的死亡原因中居第二位，僅次于惡性腫瘤，在北方一些城市已上升為第一位。我國的腦卒中發病準繩約為120～180/10萬，死亡率約為60～120/10萬，也就是說，我國每年新發病例約150萬，每年死于卒中者近100萬，患病人數更是高達500萬以上。幸存者中約3/4不同程度喪失勞動能力，重度致殘者占40％以上。
上述數據中我們可以看出，腦卒中不僅發病率、死亡率高，并且致殘率也高，嚴重降低了患者的生活質量，給社會、家庭帶來極大負擔。近年來，隨著人口老年化程度的加劇，中風已成為一個備受關注的社會問題。中風發病率隨年齡隨年齡的增大而顯著升高，發達國家65歲以上的老年人口的比例增加，而發展中國家在今后20年內60歲以上的老年人口的比例將增加1倍，這種情況加劇了中風發病的增長。中風的病死率在近幾十年內雖略有下降，但仍然居高不下。在世界范圍內中風為第二大高病死率疾病，28天內病死率男性為15％～49％，女性為18％～57％，在中國病死率男性為28％，女性為37％。而在中風的存活者當中，只有10％的病人可完全恢復正常功能，48％的病人遺有偏癱，22％的病人無法行走，24％～53％的病人完全或部分生活不能自理，給患者家庭和社會帶來沉重負擔。因此，治療中風藥物具有較大的藥品需求市場。中醫藥及民族醫藥在中風先兆期、恢復期、后遺癥的康復治療及防止中風再次發作，減輕致殘機率和因殘疾所帶來的后果方面有獨特效果，使殘疾者的殘存功能和潛在能力在治療后獲得最大的發揮，獲得生活能力和工作能力，重返家庭和社會，平等地享受人類的各種權利，提高生活質量有其獨道療效和特色。由于該藥物是一種新藥，目前還沒有有效的質量控制方法。發明人對該藥物的膠囊制劑進行了研究，以期探索如何有效控制膠囊制劑的質量，以確保膠囊制劑的臨床療效。


發明內容
本發明所要解決的技術問題在于提供一種治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，包括性狀、鑒別、檢查和含量測定。所制定的質量控制方法能全面有效地控制膠囊制劑的質量，從而確保了該膠囊制劑的臨床療效。
為了解決上述技術問題，本發明采用如下的技術方案治療中風的膠囊制劑的質量控制方法。這種膠囊這樣制備藍布正200g、天麻150g、杜仲100g、紅禾麻200g、虎杖200g、鉤藤120g、丹參200g、黃芪200g、女貞子150g、雞血藤200g、苦丁茶80g、紅花80g、夏枯草200g、伸筋草80g、舒筋草80g，以上十五味藥材，取天麻，粉碎，過100目篩，備用；其余藍布正等十四味加水煎煮兩次，每次加水8倍，每次煎煮2小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過80目篩，加入上述天麻粉，以適量75％乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，其質量控制方法由性狀、鑒別、檢查和含量測定組成，其中鑒別是對天麻、藍布正、丹參、鉤藤、黃芪和虎杖的鑒別，含量測定是分別用紫外分光光度法對膠囊制劑中總黃酮的含量測定和用高效液相色譜法對膠囊制劑中天麻素的含量測定。
上述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法中，具體包括以下幾項 性狀本品為硬膠囊，內容物為棕褐色顆粒及粉末，氣微，味苦、微澀； 鑒別對制劑中天麻進行顯微鑒別；以藍布正對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別藍布正；以原兒茶醛對照品為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別丹參；以鉤藤對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別鉤藤；以黃芪對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑照薄層色譜法鑒別黃芪；以虎杖對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別虎杖； 檢查符合中國藥典2005年版一部附錄IL中膠囊劑項下的各項規定； 含量測定以無水蘆丁對照品為對照，在500nm波長處照紫外分光光度法測定膠囊制劑中總黃酮的含量；以天麻素對照品為對照，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.05％磷酸溶液為流動相照高效液相色譜法測定膠囊制劑中天麻素的含量。
前述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法中，所述鑒別由以下項組成 (1)天麻鑒別分別取本品0.4g，加水適量振搖洗至溶液幾近無色，殘渣裝片后置顯微鏡下觀察見棕色組織碎塊，加碘液(0.02mol/L)染色3～5分鐘，染成茶棕色，再用水洗除碘液，則部分組織碎塊邊緣或部分菲薄組織碎塊呈紫堇色或茶紫色； (2)藍布正鑒別取膠囊內容物5g，加醋酸乙酯20ml，超聲處理10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮1ml溶解，作為供試品溶液；另取藍布正對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10∶0.5∶0.05的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (3)丹參鑒別取膠囊內容物5g，加稀鹽酸20ml，超聲處理30min，離心，取上清液用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一聚酰胺板上，以體積比為10∶9∶1的苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液，檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (4)鉤藤鑒別取膠囊內容物5g，加乙醇20ml、25％鹽酸2.5ml，回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取鉤藤對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板或厚板上，以體積比為14∶6∶0.5的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下365nm檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (5)黃芪鑒別取膠囊內容物5g，加甲醇30ml，回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml加熱使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水層揮去乙醚，用水飽和正丁醇提取3次，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的1％氫氧化鉀溶液洗3次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10∶1∶1的醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃下顯色至斑點清晰，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (6)虎杖鑒別分別取虎杖對照藥材1g，照鑒別(4)供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取鑒別(4)供試品溶液及虎杖對照藥材溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15∶2∶1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
前述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法中，所述膠囊制劑中總黃酮、天麻素的含量測定為 (1)總黃酮的含量測定 對照品溶液的制備取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇70ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得對照品溶液； 標準曲線的制備精密量取對照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置25ml量瓶中，加水至6ml，加5％亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，加水至刻度，搖勻，放置15分鐘；以相應的溶液為空白，照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V A)，在500nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線； 測定法分別取裝量差異項下的本品，研細，取0.1g，精密稱定，精密加水100ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，稱定重量，用水補足減失重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液5ml，置25ml量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中無水蘆丁的量，計算； (2)天麻素的含量測定 色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為4∶96的乙腈-0.05％磷酸溶液作為流動相，檢測波長為220nm，理論板數按天麻素峰計算應不低于3000； 對照品溶液的制備精密稱取天麻素對照品，加流動相制成每1ml含50μg的溶液，制得對照品溶液； 供試品溶液的制備取裝量差異下本品內容物1.5g，精密稱定，精密加入50％乙醇50ml加流提取3小時，過濾，精密吸取20ml續濾液過中性氧化鋁柱(3g，200-300目，d＝2cm)，用80％甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，水浴揮干，殘渣加體積比為4∶96的乙腈-水混合溶液溶解，轉移至10ml量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液； 測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定。
前述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法中，每粒膠囊含總黃酮以無水蘆丁(C27H30O16)計，不得少于30mg；含天麻以天麻素(C13H18O7)計，不少于0.30mg。
為了研究治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，發明人進行了大量的實驗以篩選最佳方案，具體如下 一、性狀的研究 根據樣品的試驗結果擬定，三批中試樣品均與擬定結果描述一致，列入質量控制方法正文。
二、鑒別方法的研究 2.1處方中天麻的顯微鑒別 分別取本品0.4g，加水適量振搖洗至溶液幾近無色，殘渣裝片后置顯微鏡下觀察見棕色組織碎塊，加碘液(0.02mol/L)染色3-5分鐘，染成茶棕色，再用水洗除碘液，則部分組織碎塊邊緣或部分菲薄組織碎塊呈紫堇色或茶紫色。經3批中試樣品驗證，此方法重復性好，專屬性強，故將其收入質量控制方法正文。
2.2處方中藍布正的薄層色譜鑒別 藍布正鑒別取膠囊內容物5g，加醋酸乙酯20ml，超聲處理10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮1ml溶解，作為供試品溶液。另取藍布正對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10∶0.5∶0.05的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。供試品色譜與對照藥材色譜對應整齊，斑點分離清晰，陰性對照無干擾。經3批中試樣品驗證，此方法重復性好，故將其收入質量控制方法正文。
2.3處方中丹參的薄層色譜鑒別 取膠囊內容物5g，加稀鹽酸20ml，超聲處理30min，離心，取上清夜用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一聚酰胺板上，以體積比為10∶9∶1的苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液，檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；主斑點分離圓正、清晰，陰性對照無干擾。經3批中試樣品驗證，此方法重復性好，故將其收入質量控制方法正文。
2.4處方中鉤藤的薄層色譜鑒別 取膠囊內容物5g，加乙醇20ml 25％鹽酸2.5ml，回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取鉤藤對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板(厚板)上，以體積比為14∶6∶0.5的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下365nm檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；主斑點分離圓正、清晰，陰性對照無干擾。經3批中試樣品驗證，此方法重復性好，故將其收入質量控制方法正文。
2.5處方中黃芪的薄層色譜鑒別 取膠囊內容物5g，加甲醇30ml，回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml加熱使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水層揮去乙醚，用水飽和正丁醇提取3次，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的1％氫氧化鉀溶液洗3次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10∶1∶1的醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃下顯色至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。主斑點分離圓正、清晰，陰性對照無干擾。經3批中試樣品驗證，此方法重復性好，故將其收入質量控制方法正文。
三、檢查項的研究 3.1崩解時限 按《中國藥典》2005年版一部“附錄XII A崩解時限檢查法”測定，規定本品應在30分鐘內全部崩解，本品三批檢測結果見表1，均符合規定。
3.2水分檢查 按《中國藥典》2005年版一部“附錄IX H水分測定法第一法”測定，測定結果見表1，3批樣品均符合規定。
3.3裝量差異檢查 依據《中國藥典》2005年版一部“附錄I L膠囊劑”項下進行檢查，結果見表1，3批樣品均符合規定。
3.4重金屬檢查 照《中國藥典》2005年版一部附錄IX E重金屬檢查法第二法操作。
3.4.1標準鉛溶液的制備精密稱取在105℃干燥至恒重的硝酸鉛0.160g，置1000ml容量瓶中，加硝酸5ml，水50ml，溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，即得標準鉛貯備液。
臨用時，精密量取前貯備液10ml，置100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當于10ug的鉛)。
3.4.2供試品溶液的制備精密稱取本品內容物1g，置坩鍋中，電爐上緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸1ml，使恰濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡，加硝酸0.5ml，蒸干，放冷，馬弗爐中500～600℃熾灼使完全灰化，放冷加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至酚酞指示劑顯中性，再加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，微熱溶解后，移至納氏比色管中，加水稀釋成25ml。
3.4.3陽性對照液的制備將配制供試品溶液的試劑，置另一坩鍋中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加入標準鉛溶液1ml，再加水稀釋成25ml。
3.4.4空白對照液的制備將配制供試品溶液的試劑，置另一坩鍋中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，再加水稀釋成25ml。
3.4.5比色供試品溶液、陽性對照液和空白對照液的3支納氏比色管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，供試品液顯出的顏色與陽性對照液比較，顏色更淺，空白對照無干擾。結果見表1。
結果表明，3批樣品重金屬含量均小于10ppm，故未列入正文。
3.5砷鹽檢查 照《中國藥典》2005年版一部附錄IXF砷鹽檢查法第一法操作。
3.5.1標準砷溶液的制備稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20％氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當于1μg的As)。
3.5.2供試品溶液的制備精密稱取本品內容物1g，置坩堝中，加入氫氧化鈣0.5g，混勻，加水濕潤，烘干，在小火上小心熾灼，(注意不使內容物濺出)至煙霧除盡，移入馬弗爐中在500～600℃熾灼至灰化，放冷，加鹽酸5ml和水23ml，水浴上加熱溶解，作為供試品溶液。
3.5.3陽性對照液的制備精密量取標準砷溶液2ml，置坩鍋中，同3.5.2方法制得陽性對照液。
3.5.4空白對照液的制備另取坩鍋一只，加入氫氧化鈣0.5g，同供試品溶液的制備方法制得空白對照液。
3.5.5砷斑的制備將供試品溶液、陽性對照液、空白對照液分別移至測砷瓶中，再分別加碘化鉀試液5ml，酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，30℃水浴中反應45分鐘，取出溴化汞試紙，觀察砷斑顏色，結果供試品溶液砷斑淺于標準砷斑顏色。結果見表1。
結果表明，3批樣品砷鹽含量均小于2ppm，故未列入正文。
表1三批樣品檢查結果表 3.6微生物檢查方法驗證 實驗材料生化培養箱、立式壓力蒸汽消毒器、雙筒實目顯微鏡。陽性對照菌及常規微生物檢驗用化學試劑和玻璃儀器等。
營養瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂、曙紅亞甲藍瓊脂、膽鹽乳糖增菌培養基、膽鹽乳糖發酵培養基(以上均為中國北京三科科技開發公司生產，按CP05版規定配制及滅菌)、四甲基傘形酮葡萄糖苷酸(中國北京牛牛基因技術有限公司)； 大腸埃希菌[CMCC(B)44102]、金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢桿菌[CMCC(B)63501]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]，以上菌種均來源于貴州省藥品檢驗所。
供試液制備按規定取膠囊內容物，充分搖勻后混合，取膠囊內容物10g，加入pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，即為1∶10供試液。驗證結果見表2至表5。
表2細菌、霉菌及酵母菌計數方法驗證回收試驗記錄
回收率＝(試驗組平均菌落數-供試品對照組平均菌落數)/菌液組平均菌落數×100％ 表3采用培養基稀釋法0.2mL/皿

表4控制菌檢查方法驗證記錄(大腸埃希菌)
表5控制菌檢查方法驗證記錄(大腸菌群)

由驗證試驗 可知，本品可采用常規法進行霉菌和酵母菌、大腸埃希菌、大腸菌群檢驗，用培養基稀釋法(0.2mL/皿)對細菌進行檢驗。按驗證方法對本品的三批樣品微生物限度進行了檢查，結果均符合規定。
結論由以上實驗可知，可采用常規方法對膠囊制劑進行檢查項下的各項檢查。
四、膠囊制劑中總黃酮、天麻素含量測定的研究 本品中多味藥含有總黃酮，主藥天麻含有天麻素，現代研究表明，總黃酮具有降低血壓作用；天麻素具有鎮靜、催眠、阻止血栓形成、增強免疫和抗遺忘抗衰老的藥理作用，因此，它是天麻有效成分，本品采用紫外分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V A)測定總黃酮的含量，高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定天麻素含量，總黃酮測定方法參照藥材槐花中總黃酮測定方法；天麻素測定方法參照藥材天麻中天麻素測定方法進行。
4.1總黃酮的含量測定 4.1.1儀器與試藥紫外分光光度計(北京普析通用)；AUW220D(十萬分之一)天平(日本)；水(重蒸餾，臨用前制備)；亞硝酸鈉(分析純，重慶川江)；硝酸鋁(分析純，汕頭西隴)；氫氧化鈉(分析純，成都金山)；無水蘆丁(中檢所，批號100080-200307)。樣品三批(批號20051112、20051113、20051114)。
4.1.2標準溶液的制備精密稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對照品0.0528g，置于25ml量瓶中，加甲醇適量，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。
4.1.3檢測波長選擇精密量取標準溶液3ml，置25ml量瓶中，加水至6ml，加5％亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘，作為對照品溶液。取上述溶液適量，在400-600nm波長范圍內掃描，對照品溶液在500nm處有最大吸收，因此我們選擇500nm為本品中總黃酮檢測波長。
4.1.4精密度試驗取“標準曲線”項下3號對照品溶液(0.0253ug/ml)適量，依法重復測定5次，記錄吸收度值，求出相對標準偏差，結果表明，對照品無水蘆丁吸收度測定精密度良好，RSD＝0.03％，結果見表6。
表6精密度試驗結果
4.1.5穩定性試驗分別取裝量差異項下的本品，研細，取0.1g，精密稱定，精密加水100ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，用水補足減失重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液5ml，置25ml量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起，制備成供試品溶液，在室溫下每隔一段時間依法測定吸收度，求相對標準偏差；結果表明，該方法測定樣品中總黃酮吸收度在40分鐘內基本穩定，RSD＝0.04％，結果見表7。
表7穩定性試驗結果
4.1.6重復性試驗分別取裝量差異項下的本品，研細，分別取0.1g，共5份，精密稱定，分別精密加水100ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，用水補足減失重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液5ml，置25ml量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起，制備成供試品溶液，依法測定吸收度，求相對標準偏差；結果表明，該方法測定樣品中；蘆丁含量重復性良好，回歸方程為A＝0.01449C+0.02091(r＝0.9995)；RSD＝0.53％，結果見表8。
表8重復性試驗結果 4.1.7回收率試驗采用加樣回收試驗，取已知含量的重復性試驗的同一批樣品(總黃酮平均含量為108.4282mg/g)共5份，精密稱取0.05g，分別加入無水蘆丁對照品適量，按供試品溶液制備方法制備成供試品溶液，照上述條件測定吸光度，計算含量，求相對標準偏差，回歸方程為A＝0.01701C+0.00821(r＝0.9998)；RSD＝0.34％，結果表明，此方法具有較好的加樣回收率，結果見表9。
表9供試品中天麻素加樣回收試驗結果 4.1.8三批樣品測定及成品含量限度制定按質量標準草案總黃酮測定項下制備供試品溶液和對照品溶液，測定吸光度，計算其中總黃酮的含量，結果見表10。
表10三批樣品中總黃酮含量測定結果
本品處方多味藥均含總黃酮，考慮到生產工藝的波動和檢測操作誤差等因素的影響，根據三批本品含量測定結果，暫定本方每粒含總黃酮含量為30mg。
4.2天麻素的含量測定 4.2.1儀器與試藥高效液相色譜儀島津2010(日本)；AUW220D(十萬分之一)天平(日本)；乙腈(色譜純，天津大茂)；水(重蒸餾，臨用前制備)，磷酸(分析純，天津大茂)，天麻素(中檢所，批號110807-200307)。樣品三批(批號20051112、20051113、20051114)。
4.2.2色譜條件DiamonsilC18柱(5μm)，流動相乙腈-0.05％磷酸溶液(4∶96)，波長220nm，流速1ml/min，柱溫35℃。
4.2.3系統適用性試驗分別取天麻素對照品溶液、供試品溶液及缺天麻的陰性對照溶液各10μl注入液相色譜儀，記錄色譜。從圖譜可知，在此色譜條件下，天麻素與其他組分峰分離完全，在與天麻素峰相同的保留時間處，陰性對照無干擾。
4.2.4供試品溶液的制備 本試驗對供試品處理方法作了以下考察 取本品內容物1.5g，精密稱定，置回流瓶中，精密加入50％乙醇50ml回流提取3小時，過濾，精密吸取20ml續濾液過中性氧化鋁柱(3g，200～目，d＝2cm)，分別用不同量的80％甲醇洗脫，收集洗脫液，水浴揮干。殘渣加乙腈-水(4∶96)混合溶液溶解，轉移至10ml容量瓶中，稀釋至刻度。搖勻，濾過，取續濾液即得。結果見表11。
表11洗脫量考察結果 試驗結果表明，本品采用80％甲醇100ml與120ml含量無明顯變化，根據不同洗脫量考察結果，確定洗脫量為100ml。
4.2.5線性關系考察精密稱取天麻素對照品15.49mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，得0.06196mg/ml的天麻素對照品溶液，分別精密吸取天麻素對照品溶液2.5μl、5μl、10μl、15μl、20μl，注入色譜儀，記錄色譜圖，測定峰面積積分值，測定結果見表12，并以對照品進樣量X(μg)為橫坐標，峰面積值Y(mv.s)為縱坐標，繪制標準曲線，結果表明，天麻素在0.1549～1.2392μg范圍內線性關系良好。
表12天麻素線性關系考察
4.2.6精密度試驗精密吸取天麻素對照品溶液10μl(濃度為0.06196mg/ml)，重復進樣5次，測定天麻素峰面積積分值，求出相對標準偏差，結果表明精密度良好，結果見表13。
表13精密度實驗結果
4.2.7穩定性試驗取一供試品(批號20051112)，按質量控制方法正文中供試品溶液的制備方法制備供試液。在室溫下每隔一段時間進樣10μl，測定天麻素峰面積值，求相對標準偏差，結果表明，天麻素在12小時內基本穩定(RSD＝0.77％)，結果見表14。
表14穩定性試驗結果
4.2.8重復性試驗精密取本品(批號20051112)各1.5g，共5份，按質量質量控制方法正文中供試品溶液的制備方法制備供試液。精密吸取供試品溶液各10μl，測定天麻素峰面積積分值，計算含量，求相對標準偏差，結果表明，重復性良好(RSD＝0.77％)。見表15。
表15重復性試驗結果
4.2.9中間精密度取同一批樣品(批號20051112)，分兩組由不同操作人員在不同設備上對本品進行含量測定，結果表明，中間精密度良好(RSD＝0.12％)。結果見表16。
A組LC-2010A高效液相色譜儀；B組SSI高效液相色譜儀。
表16中間精密度試驗結果
4.2.10回收率試驗采用加樣回收法試驗，取已知含量的同一批樣品(批號20051112)6份，精密稱取各約0.75g，精密加入天麻素對照品適量，按供試品溶液制備方法制備成供試品溶液，精密吸取供試品溶液各10μl，照上述色譜條件測定，記錄色譜圖，計算含量，結果表明，天麻素的回收率良好，結果見表17。
表17加樣回收試驗結果
4.2.11樣品測定取3批中試樣品，按質量控制方法正文測定其中天麻素含量(結果見表18)。按下式計算含量
式中A樣-供試品天麻素峰面積積分值 A對-天麻素對照品峰面積積分值 C對-天麻素對照品濃度(mg/ml) M樣-供試品取樣量(g) M裝量-平均裝量(g) 50、10、20-供試品稀釋體積(ml) 表183批樣品中天麻素的含測結果
樣品中含量限規定本品處方中天麻藥材150g，天麻素含量限度為0.20％，按下式計算本品每粒膠囊天麻素含量限 含量限(mg/粒)＝藥材量×藥材含量限×轉移率/制成量 即含量限(mg/粒)＝150g×0.2％×100％/1000粒＝0.30mg/粒 考慮到生產和貯存過程對藥品的影響，規定本品每粒含天麻以天麻素(C13H18O7)計，不得少于0.30mg。
五、質量控制方法中所用到的標準物質 蘆丁對照品購于中國藥品生物制品檢定所，批號100080-200307，供含量測定用。
天麻素對照品購于中國藥品生物制品檢定所，批號110807-200205，供含量測定用。
原兒茶醛對照品購于中國藥品生物制品檢定所，批號110810-200506，供含量測定用。
藍布正對照藥材購于中國藥品生物制品檢定所，批號121380-200401，供鑒別用。
鉤藤對照藥材購于中國藥品生物制品檢定所，批號121190-200402，供鑒別用。
黃芪對照藥材購于中國藥品生物制品檢定所，批號121462-200203，供鑒別用。
虎杖對照藥材購于中國藥品生物制品檢定所，批號120980-200304，供鑒別用。
本發明的有益效果與現有技術相比，本發明建立了治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，對膠囊制劑的性狀、鑒別、檢查和含量測定進行了研究和篩選，所采用的質量控制方法科學合理，準確度高，重現性好，能全面有效地控制質量中風的膠囊制劑的質量，確保該制劑的臨床療效。
下面結合具體實施方式
對本發明進行進一步的說明。

具體實施例方式 實施1。治療中風的膠囊制劑的質量控制方法如下 性狀本品為硬膠囊，內容物為棕褐色顆粒及粉末，氣微，味苦、微澀； 鑒別(1)天麻鑒別分別取本品0.4g，加水適量振搖洗至溶液幾近無色，殘渣裝片后置顯微鏡下觀察見棕色組織碎塊，加碘液(0.02mol/L)染色3-5分鐘，染成茶棕色，再用水洗除碘液，部分組織碎塊邊緣或部分菲薄組織碎塊呈紫堇色或茶紫色。
(2)藍布正鑒別取膠囊內容物5g，加醋酸乙酯20ml，超聲處理10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮1ml溶解，作為供試品溶液。另取藍布正對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10∶0.5∶0.05的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)丹參鑒別取膠囊內容物5g，加稀鹽酸20ml，超聲處理30min，離心，取上清夜用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一聚酰胺板上，以體積比為10∶9∶1的苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液，檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)鉤藤鑒別取膠囊內容物5g，加乙醇20ml 25％鹽酸2.5ml，回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取鉤藤對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板(厚板)上，以體積比為14∶6∶0.5的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下365nm檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(5)黃芪鑒別取膠囊內容物5g，加甲醇30ml，回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml加熱使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水層揮去乙醚，用水飽和正丁醇提取3次，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的1％氫氧化鉀溶液洗3次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10∶1∶1的醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃下顯色至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(6)虎杖鑒別分別取虎杖對照藥材1g，照鑒別(4)供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取鑒別(4)供試品溶液及虎杖對照藥材溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15∶2∶1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查符合中國藥典2005年版一部附錄I L中膠囊劑項下的各項規定； 含量測定 (1)總黃酮的含量測定 對照品溶液的制備取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇70ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得(每1ml中含無水蘆丁0.2mg)。
標準曲線的制備精密量取對照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置25ml量瓶中，加水至6ml，加5％亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，加水至刻度，搖勻，放置15分鐘；以相應的溶液為空白。照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V A)，在500nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線。
測定法分別取裝量差異項下的本品，研細，取0.1g，精密稱定，精密加水100ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，稱定重量，用水補足減失重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液5ml，置25ml量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中無水蘆丁的量，計算，即得。
(2)天麻素的含量測定 色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為4∶96的乙腈-0.05％磷酸溶液作為流動相，檢測波長為220nm，理論板數按天麻素峰計算應不低于3000； 對照品溶液的制備精密稱取天麻素對照品，加流動相制成每1ml含50μg的溶液，制得對照品溶液； 供試品溶液的制備取裝量差異下本品內容物1.5g，精密稱定，精密加入50％乙醇50ml加流提取3小時，過濾，精密吸取20ml續濾液過中性氧化鋁柱(3g，200-300目，d＝2cm)，用80％甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，水浴揮干。殘渣加乙腈-水(4∶96)混合溶液溶解，轉移至10ml量瓶中，稀釋至刻度。搖勻，濾過，取續濾液即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含黃酮以無水蘆丁(C27H30O16)計，不得少于30mg。含天麻以天麻素(C13H18O7)計，不少于0.30mg。
功能主治活血祛瘀，通脈活絡，用于缺血性腦血栓、腦栓塞；腦動脈粥樣硬化等腦血管疾病。用法用量口服。一次3粒，一日3次。規格每粒裝0.40g。貯藏密封，防潮。
權利要求
1.一種治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，這種膠囊這樣制備藍布正200g、天麻150g、杜仲100g、紅禾麻200g、虎杖200g、鉤藤120g、丹參200g、黃芪200g、女貞子150g、雞血藤200g、苦丁茶80g、紅花80g、夏枯草200g、伸筋草80g、舒筋草80g，以上十五味藥材，取天麻，粉碎，過100目篩，備用；其余藍布正等十四味加水煎煮兩次，每次加水8倍，每次煎煮2小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.25的浸膏，減壓干燥，粉碎，過80目篩，加入上述天麻粉，以適量75％乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，其特征在于質量控制方法由性狀、鑒別、檢查和含量測定組成，其中鑒別是對天麻、藍布正、丹參、鉤藤、黃芪和虎杖的鑒別，含量測定是分別用紫外分光光度法對膠囊制劑中總黃酮的含量測定和用高效液相色譜法對膠囊制劑中天麻素的含量測定。
2.根據權利要求1所述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，其特征在于
性狀本品為硬膠囊，內容物為棕褐色顆粒及粉末，氣微，味苦、微澀；
鑒別對制劑中天麻進行顯微鑒別；以藍布正對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別藍布正；以原兒茶醛對照品為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別丹參；以鉤藤對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別鉤藤；以黃芪對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑照薄層色譜法鑒別黃芪；以虎杖對照藥材為對照、以羧甲基纖維素鈉為黏合劑、以甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑照薄層色譜法鑒別虎杖；
檢查符合中國藥典2005年版一部附錄I L中膠囊劑項下的各項規定；
含量測定以無水蘆丁對照品為對照，在500nm波長處照紫外分光光度法測定膠囊制劑中總黃酮的含量；以天麻素對照品為對照，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.05％磷酸溶液為流動相照高效液相色譜法測定膠囊制劑中天麻素的含量。
3.根據權利要求1或2所述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，其特征在于所述鑒別由以下項組成
(1)天麻鑒別分別取本品0.4g，加水適量振搖洗至溶液幾近無色，殘渣裝片后置顯微鏡下觀察見棕色組織碎塊，加碘液染色3～5分鐘，染成茶棕色，再用水洗除碘液，部分組織碎塊邊緣或部分菲薄組織碎塊呈紫堇色或茶紫色；
(2)藍布正鑒別取膠囊內容物5g，加醋酸乙酯20ml，超聲處理10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮1ml溶解，作為供試品溶液；另取藍布正對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10∶0.5∶0.05的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
(3)丹參鑒別取膠囊內容物5g，加稀鹽酸20ml，超聲處理30min，離心，取上清液用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一聚酰胺板上，以體積比為10∶9∶1的苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液，檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
(4)鉤藤鑒別取膠囊內容物5g，加乙醇20ml、25％鹽酸2.5ml，回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取鉤藤對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板或厚板上，以體積比為14∶6∶0.5的氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下365nm檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
(5)黃芪鑒別取膠囊內容物5g，加甲醇30ml，回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30ml加熱使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水層揮去乙醚，用水飽和正丁醇提取3次，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的1％氫氧化鉀溶液洗3次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘渣加1ml甲醇溶解，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、對照藥材溶液和對照品溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10∶1∶1的醋酸乙酯-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃下顯色至斑點清晰，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
(6)虎杖鑒別分別取虎杖對照藥材1g，照鑒別(4)供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取鑒別(4)供試品溶液及虎杖對照藥材溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15∶2∶1的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
4.根據權利要求1或2所述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，其特征在于所述膠囊制劑中總黃酮、天麻素的含量測定為
(1)總黃酮的含量測定
對照品溶液的制備取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加70％乙醇70ml，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得對照品溶液；
標準曲線的制備精密量取對照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分別置25ml量瓶中，加水至6ml，加5％亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，加水至刻度，搖勻，放置15分鐘；以相應的溶液為空白；照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄V A)，在500nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線；
測定法分別取裝量差異項下的本品，研細，取0.1g，精密稱定，精密加水100ml，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，稱定重量，用水補足減失重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液5ml，置25ml量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中無水蘆丁的量，計算；
(2)天麻素的含量測定
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為4∶96的乙腈-0.05％磷酸溶液作為流動相，檢測波長為220nm，理論板數按天麻素峰計算應不低于3000；
對照品溶液的制備精密稱取天麻素對照品，加流動相制成每1ml含50μg的溶液，制得對照品溶液；
供試品溶液的制備取裝量差異下本品內容物1.5g，精密稱定，精密加入50％乙醇50ml加流提取3小時，過濾，精密吸取20ml續濾液過中性氧化鋁柱，用80％甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，水浴揮干，殘渣加體積比為4∶96的乙腈-水混合溶液溶解，轉移至10ml量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定。
5.根據權利要求1、2或4所述的治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，其特征在于每粒膠囊含總黃酮以無水蘆丁(C27H30O16)計，不得少于30mg；含天麻以天麻素(C13H18O7)計，不少于0.30mg。
全文摘要
本發明公開了一種治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，該質量控制方法是由性狀、鑒別、檢查和含量測定組成，其中鑒別是對天麻、藍布正、丹參、鉤藤、黃芪和虎杖的鑒別，含量測定分別是用紫外分光光度法對膠囊制劑中總黃酮的含量測定和用高效液相色譜法對膠囊制劑中天麻素的含量測定。與現有技術相比，本發明建立了治療中風的膠囊制劑的質量控制方法，對膠囊制劑的性狀、鑒別、檢查和含量測定進行了研究和篩選，所采用的質量控制方法科學合理，準確度高，重現性好，能全面有效地控制質量中風的膠囊制劑的質量，確保該制劑的臨床療效。
文檔編號G01N30/00GK101745035SQ200910310880
公開日2010年6月23日 申請日期2009年12月4日 優先權日2009年12月4日
發明者周強, 皮海燕, 羅陽洋 申請人:貴陽春科藥業技術研發有限公司