專利名稱：臨床化學檢驗用液體質控血清的制作方法
技術領域：
本發明涉及用于臨床實驗室常規化學部分檢驗項目的液體質控血清。具體涉及乙 二醇和丙二醇的組合在制備液體質控血清中的用途，使用乙二醇和丙二醇的組合來穩定液 體質控血清的方法，使用乙二醇和丙二醇的組合來穩定的液體質控血清，以及制備所述液 體質控血清的方法。
背景技術：
在臨床實驗室檢驗特別是化學檢驗工作中，多年以來為了使不同實驗室、不同儀 器、不同方法學的化驗結果能在可靠、一致的基礎上有可比性，正確地評價實驗室間的工作 質量以及實驗室內的質量控制，就必須有良好的質控血清。質控血清(即，質量控制血清) 一般分為兩類一類有靶值，一類無靶值。在每次的常規檢驗中加入一份或數份，與患者標 本同時測定，通過所得結果來了解本次檢驗的情況。質控血清檢驗的結果如能控制其誤差 在一定范圍內，就說明該檢驗沒有發生不允許的誤差。如果出現超過允許誤差范圍的異常 結果，提示該檢驗不合格，應尋找原因，糾正后，重檢待測標本。因此質控血清在質控工作中 起重要作用。目前，國內臨床生化學室間評價和室內質控中大多使用凍干質控血清，而且大部 分是進口的。由于凍干質控血清在制作和使用過程中，因分裝、凍干及復溶時都會產生誤 差，而使整個質量質控和質量評價過程產生偏差。而由于液體質控血清避免了分裝、凍干和 復溶等操作過程所引起的誤差，所以在質量質控和質量評價過程中各項檢測指標的變異均 較小。因此，近年來國內外均對液體質控血清替代凍干血清的問題進行了研究。液體質控 血清由于其中加入了特定的成分，使血清的冰點大大降低，即使在-20C下也不會結冰，而 且在此低溫下血清中的成分特別是酶類成分比較穩定，從而使得質控血清在制備、保存、使 用過程中不必經歷分裝、冷凍干燥、復溶等可能引起誤差的操作過程，因此液體質控血清有 其獨特的優點。液體質控血清通常采用人或動物血清，經反復凍融后抽濾或透析等方法去 掉約1/3的水份，然后再加入約1/3的乙二醇作穩定劑補足水份來制備的(例如，參 見，林增文，等.陜西醫學檢驗.2000，15⑵47-48;滑艷，等.陜西醫學檢驗.2000， 15(3) 42 ；以及 P. Premachandra, et, al. Preparation and Stability of Low-cost LiquidQuality-control Serum Stabilized with Ethanediol. Clin. Chem. 1987,33(6) 851-852)。此外，CN1149772A(中國專利申請號95117435. 5，申請日:1995年11月9日，公 開日1997年5月4日)公開了一種多項液體質量控制豬血清及其制備方法，該血清選用新 鮮豬血為原料，經分離、冰凍、調整成分，加入乙二醇作為穩定劑，據說該發明的產品含有質 控血清所需的多項成分，克服了凍干豬血清分裝和復溶時的誤差，適用于醫學檢驗的需要。 另有文獻(CN1316521A，中國專利申請號=01107739. 5，申請日2001年1月11日，
公開日
2001年10月10日)報道了一種保護臨床化學用質量控制血清中酶活性的方法，該方法包 括以動物血清為原料制備所述血清的常規工藝步驟，在制備過程中液體血清冷凍或脫水之前加入海藻糖作為血清酶的穩定劑，按每升液體血清計，海藻糖的加入量為0. 10-0. 25mol, 由此得到的質控血清可作為血清成分例如血清酶的質量控制物，據該發明人說該質控血清 在血清酶檢驗結果的質量控制中使用效果良好，但是這種以海藻糖為保護劑的液體質控血 清產品并未見實際使用。雖然液體質控血清可以避免凍干質控血清的諸多缺點，但當前市場上液體質控血 清的商品并不多，目前國內市場僅能買到伯樂(BIO-RAD)公司生產的液體質控血清進口 品，該進口品價格昂貴，許多基層實驗室難以承受，因而影響了室內質控持續有效的開展。此外，本發明人發現，以乙二醇為保護劑制備的液體質控血清對于某些檢測項目 的穩定性并不理想，特別在是用于制備檢測ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA 等12項目的液體質控血清中，某些項目的穩定性在期望的有效期內仍存在波動。因此，提 供一種穩定的液體質控血清仍然是本領域技術人員所期盼的。
發明內容
本發明所要解決的問題是提供一種穩定的液體質控血清。本發明人令人驚奇地發 現，使用乙二醇和丙二醇組合作為保護劑來制備液體質控血清，通過一年的觀察，包括ALT、 AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA 等 12 項生化常規項目在 _20°C和 2 8°C下存 放，使用，其穩定性能完全可以滿足臨床要求，并且在某些項目的穩定性方面優于現有的液 體質控血清，本發明基于此發現而得以完成。為此，本發明第一方面提供了乙二醇和丙二醇的組合在制備液體質控血清中的用 途。根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約1 1.5 約1 2. 5(v/v，體積/體積，下文如未特別說明，均為ν/ν)。根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 1. 8 約 1 2. 2 (ν/ν)。根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 2 (ν/ν)。根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約30% 約40% (ν/ν，體積/體積，下文如未特別說明，均為ν/ν)。根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約30% 約38% (ν/ν) 0根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約32% 約36% (ν/ν) 0根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約32% 約35% (ν/ν) 0根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約33% 約35% (ν/ν) 0根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述液體質控血清的被檢測項目包 括，但不限于，下列生化常規檢測項目的至少一種ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、 TCJP TBA。
根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述液體質控血清的被檢測項目包 括下列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA0根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述液體質控血清是包括，但不限 于，下列生化常規檢測項目的至少一種的高值質量控制血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、 P、K、ΝΑ、TC、禾口 TBA0根據本發明第一方面任一項所述的用途，其中所述液體質控血清的血清原料對于 ALT指標顯示正常并且對于以下指標呈陰性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-AbdP RPR。本發明第二方面提供了使用乙二醇和丙二醇的組合來穩定液體質控血清的方法。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 1. 5 約 1 2. 5 (ν/ν)。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 1. 8 約 1 2. 2 (ν/ν)。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 2 (ν/ν)。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約30% 約40% (ν/ν)。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約30% 約38% (ν/ν) 0根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約32% 約36% (ν/ν) 0根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約32% 約35% (ν/ν) 0根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約33% 約35% (ν/ν) 0根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清的被檢測項目包 括，但不限于，下列生化常規檢測項目的至少一種ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、 TCJP TBA。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清的被檢測項目包 括下列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA0根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清是包括，但不限 于，下列生化常規檢測項目的至少一種的高值質控血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、 K、NAU TBA。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清的血清原料對于 ALT指標顯示正常并且對于以下指標呈陰性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-AbJn RPR。根據本發明第二方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清在制備過程中使 用蔗糖透析脫水。本發明第三方面提供一種液體質控血清，其中包含乙二醇和丙二醇。其中所述的乙二醇和丙二醇可以作為保護劑存在于該液體質控血清中。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的 用量比為約1 1.5 約1 2. 5(v/v)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的 用量比為約1 1.8 約1 2. 2(v/v)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述的乙二醇和丙二醇的 用量比為約1 2 (ν/ν) 0根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的總 量占所述液體質控血清的約30% 約40% (ν/ν)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的總 量占所述液體質控血清的約30% 約38% (ν/ν)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的總 量占所述液體質控血清的約32% 約36% (ν/ν)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的總 量占所述液體質控血清的約32% 約35% (ν/ν)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述乙二醇和丙二醇的總 量占所述液體質控血清的約33% 約35% (ν/ν)。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述液體質控血清的被檢 測項目包括，但不限于，下列生化常規檢測項目的至少一種ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、 P、K、NAU TBA0根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述液體質控血清的被檢 測項目包括下列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其中所述液體質控血清是包 括，但不限于，下列生化常規檢測項目的至少一種的高值質量控制血清ALT、AST、CK、Glu、 BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其對于ALT指標顯示正常并且 對于以下指標呈陰性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-Ab、和 RPR。根據本發明第三方面任一項所述的液體質控血清，其在制備過程中使用蔗糖透析 脫水。進一步的，本發明第四方面提供制備本發明第三方面任一項所述液體質控血清的 方法，其包括在血清脫水之后加入保護劑的乙二醇和丙二醇的步驟。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 1. 5 約 1 2. 5 (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 1. 8 約 1 2. 2 (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為 約 1 2 (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的血清脫水量為原血清總量的 約 30% 約 40% (ν/ν)。
根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的血清脫水量為原血清總量的 約 30% 約 38% (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的血清脫水量為原血清總量的 約 32% 約 36% (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的血清脫水量為原血清總量的 約 32% 約 35% (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述的血清脫水量為原血清總量的 約 33% 約 35% (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約30% 約40% (ν/ν)。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約30% 約38% (ν/ν) 0根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約32% 約36% (ν/ν) 0根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約32% 約35% (ν/ν) 0根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述 液體質控血清的約33% 約35% (ν/ν) 0根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清的被檢測項目包 括，但不限于，下列生化常規檢測項目的至少一種ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、 TC、和 TBA。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清的被檢測項目包 括下列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其中所述液體質控血清是包括，但不限 于，下列生化常規檢測項目的至少一種的高值質量控制血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、 P、K、NA、TC、禾口 TBA。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其對于ALT指標顯示正常并且對于以下 指標呈陰性HBsAg、HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其在制備過程中使用蔗糖透析脫水。根據本發明第四方面任一項所述的方法，其包括以下步驟a)取ALT指標顯示正常并且以下指標呈陰性的動物(特別是人)的血清HBsAg、 HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR，備用；b)對透析袋按常規方法進行預處理，將血清裝入透析袋中，捆緊，記錄血清初始體 積(Vo，ml)；c)將蔗糖放入器皿中，然后將裝有混合血清的透析袋放在蔗糖中進行脫水；d)待血清脫去約30% 約40% (ν/ν)(例如，約30% 約38%、約32% 約36%、 約32% 約35%、約33% 約35% )的水分時，取出，計算脫水量(Vw，ml)；e)向以上脫水血清中加入與步驟d)所述脫水量(Vw，ml)相當的乙二醇和丙二醇 或其混合物(V印，ml)，混勻，任選加入有效量的防腐劑疊氮化鈉，分裝，即得。
下面對本發明作進一步的描述。本發明所引述的所有文獻，它們的全部內容通過引用并入本文，并且如果這些文 獻所表達的含義與本發明不一致時，以本發明的表述為準。此外，本發明使用的各種術語和 短語具有本領域技術人員公知的一般含義，即便如此，本發明仍然希望在此對這些術語和 短語作更詳盡的說明和解釋，提及的術語和短語如有與公知含義不一致的，以本發明所表 述的含義為準。本文中使用的術語“丙二醇”是指1，2_丙二醇。根據本發明，其中所述的乙二醇和丙二醇可以是以任意的先后次序加至脫水血清 中的，也可以是以此二者的混合物加至脫水血清中的。本文中使用的術語“約”，例如在修飾乙二醇和丙二醇的用量比為時，例如在短語 “約1 1.5 約1 2. 5(v/v)”中使用的，是指本領域允許的誤差范圍，例如士 10%，例如 士5%，例如 士2%。本文中使用的術語“質控血清”，具有本領域技術人員公知的含義，該術語有時亦 稱為“質量控制血清”。此外，本文中使用的術語“液體質控血清”，具有本領域技術人員公 知的含義，其是相對于“凍干質控血清”，其在制備、保存、使用過程中呈液態，特別是由于其 中加入了保護劑而使其熔點大大降低，在長時間(例如1年)保存條件(例如，"20 0C )下 仍然呈液態，從而避免冷凍干燥、復溶等操作對質控血清的檢測穩定性造成影響。本文中使用的短語“乙二醇和丙二醇的總量占所述液體質控血清的約30% 約 40%",是指所在本發明終產品液體質控血清中，所加入的乙二醇和丙二醇二者量之和占本 發明終產品液體質控血清的體積百分數。本文中使用的術語“保護劑”，例如在指代乙二醇和丙二醇時所使用的，是指使血 清特別是本發明液體質控血清保持穩定的物質，特別是使本發明液體質控血清中的待檢測 成分保持穩定的物質，所述的待檢測物質包括但不限于ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、 NA、TC、和TBA。該術語“保護劑”有時也可稱為“穩定劑”。本發明液體質控血清可以用于檢測包括(但不限于)下列生化常規檢測項目的至 少一種ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA。尤其是可以用于檢測包括下列 生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA。根據本發明的液體質控血清，其還可以用于例如但不限于下列指標的高值質控血 清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA。本文中使用的術語“高值質控血清”，是指病理狀態下血清中被檢測項目的濃度， 例如ALT高值質控血清一般情況下是正常參考范圍上限的2 3倍。在本發明中，制備所述液體質控血清的血清原料，該血清原料對于ALT指標顯示 為本領域技術人員公知的正常范圍(例如在定量時大于40U/L)；并且該血清原料對于以下 指標呈陰性HBsAg、HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR。此外，該血清原 料的其它質量標準也是優選需要控制的，例如該原料血清采自排除了傳染病、常見病的健 康人，并且無溶血、無黃疸等，外觀清澈透明。本發明的目的是提供臨床化學常規檢測項目使用的液體質控血清，其檢測項目包 括ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA等12項。針對反復凍融血清進行脫水 方法易使血清中酶活性失活的問題，本發明人選用了非滲透性冷凍保護劑-蔗糖脫去收集的正常人血清(也可以是動物例如豬的血清)中約30% 約40% (ν/ν)(例如，約30% 約38 %、約32 % 約36 %、約32 % 約35 %、約33 % 約35 % )的水分，此方法脫水簡單、 快速、穩定。此外，本發明人發現采用乙二醇和丙二醇組合用作保護劑可以有效地提供液體 質控血清。乙二醇和丙二醇同屬低分子中性物質，是一種滲透性冷凍保護劑，目前國內外尚 未見將這兩種保護劑組合使用于液體質控血清。本發明人將乙二醇和丙二醇結合起來補充 脫去的水份，并與乙二醇單獨使用以及市售品的穩定性做了對比研究，發現本發明乙二醇 和丙二醇組合使用作保護劑可以獲得更好的穩定效果。本發明的研究結果表明，根據本發 明制備的液體質控血清在_20°C下保存穩定性可達至少1年，在2 8°C下保存使用穩定性 至少達2周，在室溫存放下能穩定4小時。此外，根據本發明制備的液體質控血清，其中的 某些質控指標優于現有技術制備的或者市售的液體質控血清。在本發明中使用的縮寫具有下面
ALT丙氨酸氨基轉移酶
AST天門冬氨酸氨基轉移酶
CK肌酸激酶
Glu葡萄糖
BUN尿素氮
CR肌酐
CA鈣
P無機磷
K鉀
NA鈉
TC總膽固醇
TBA總膽汁酸
HBsAg乙型肝炎表面抗原
HBsAb乙型肝炎表面抗體
HBeAg乙型肝炎e抗原
HBeAb乙型肝炎e抗體
HBcAb乙型肝炎核心抗體
HCV-Ab丙型肝炎抗體
HIV-Ab艾滋病病毒抗體
RPR梅毒反應素試驗
具體實施例方式下面通過具體的實施例和實驗例進一步說明本發明，但是，應當理解為，這些實施 例和實驗例僅僅是用于更詳細具體地說明之用，而不應理解為用于以任何形式限制本發 明。本發明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖 然為實現本發明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的，但是本發明仍然在此 作盡可能詳細描述。本領域技術人員清楚，在下文中，如果未特別說明，本發明所用材料和操作方法是本領域公知的。實施例1、液體質控血清的制備a)取血清原料1000ml，該血清原料來自健康人志愿者，其ALT指標顯示正常(40U/ L 以下)，并且以下指標呈陰性HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR， 這些血清均是用帶分離膠的真空采血管取血離心后取得，將這些血清充分混勻，將此混合 血清置-20°C冰箱保存，使用之前將-20°C存放的混合血清置2 8°C冰箱過夜融化后，在室 溫中充分混勻，備用；b)對透析袋按常規方法進行預處理，將2 3cm寬的透析袋放入燒杯，用無離子水 浸泡約半小時，然后將燒杯置電磁爐上煮沸10分鐘，用無離子水清洗3次，再煮10分鐘，再 清洗3次后備用；將血清裝入透析袋中，捆緊，記錄血清初始體積(Vo，ml)；c)將蔗糖放入搪瓷盤中，然后將裝有混合血清的透析袋放在蔗糖中進行脫水；d)待血清原料脫去約34%水分時，取出，將袋中血清倒入量筒，記下體積，計算脫 去的水分量(Vw，ml)；e)向以上脫水血清中加入與步驟d)所述脫水量(Vw，ml)相當的乙二醇和丙二醇 的混合物(其中乙二醇為1/3，1，2_丙二醇為2/3)，混勻，加入0. 的防腐劑疊氮化鈉；f)使步驟e)的混合物置室溫混勻2小時，置2 8°C冰箱平衡3天，每天混勻數 次；再將該混合物分裝成Iml/管，即得本發明的液體質控血清。將由此制得的液體質控血清置-20°C冰箱保存。實施例2、液體質控血清的制備參考實施例1的方法制備本實施例的液體質控血清，但不同的以以下操作過程中 采用以下參數1)步驟d)中血清原料脫去約30%水分；2)步驟e)使用與步驟d)所述脫水量相當的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 1.5 (ν/ν)。將由此制得的液體質控血清置-20°C冰箱保存。實施例3、液體質控血清的制備參考實施例1的方法制備本實施例的液體質控血清，但不同的以以下操作過程中 采用以下參數1)步驟d)中血清原料脫去約35%水分；2)步驟e)使用與步驟d)所述脫水量相當的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 1.8 (ν/ν)。將由此制得的液體質控血清置-20°C冰箱保存。實施例4、液體質控血清的制備參考實施例1的方法制備本實施例的液體質控血清，但不同的以以下操作過程中 采用以下參數1)步驟d)中血清原料脫去約38%水分；2)步驟e)使用與步驟d)所述脫水量相當的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 2. 2 (ν/ν)。將由此制得的液體質控血清置-20°C冰箱保存。
實施例5、液體質控血清的制備參考實施例1的方法制備本實施例的液體質控血清，但不同的以以下操作過程中 采用以下參數1)步驟d)中血清原料脫去約40%水分；2)步驟e)使用與步驟d)所述脫水量相當的乙二醇和丙二醇的混合物，其中乙二 醇丙二醇=1 2. 5 (ν/ν)。將由此制得的液體質控血清置-20°C冰箱保存。試驗例1、液體質控血清的穩定件考察1、測試樣品a)不同保存條件下、不同保存時間的實施例1的液體質控血清b)參照實施例1方法，僅用乙二醇作為保護劑制備的液體質控血清；c)市售品液體質控血清(BIO-RAD)產品，進口品，商品名為Liquichek Unassayed Chemistry Control(Human)JlI^S 10mL，批號為 16390)。2、樣品保存條件和取樣時間點參見下文各試驗結果表。3、測試方法使用OLYMPUS 2700自動生化分析儀測定各測試樣品的以下生化項目ALT、AST、 CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、TBA04、測試結果使實施例1制備的液體制控血清分別與乙二醇法和進口的BIO-RAD液體質控血清 穩定性進行了比對試驗，結果分別見表1至表5。5、穩定性統計方法采用SPSS 11. 0軟件(例如，參見《統計基礎和SPSS 11. 0入門與提高》，清華大學 出版社，東方人華等編，2004年11月出版，ISBN7-302-09645-7/TP. 6688)統計，以測定濃度 (Y)相對測定時間(X)進行直線回歸分析，當斜率的95%可信區間包括“0”時，認為該分析 物的濃度隨時間沒有發生變化。說明該質控血清項目是穩定的。斜率為正數，表明分析物 濃度隨時間增高，斜率為負數，表明分析物濃度隨時間下降。6、結論本發明實施例1的12項檢測指標在一年內穩定，乙二醇補充水份的液體質控血清 在一年內alt、BUN、TBA升高，BIO-RAD液體質控血清在一年內Glu、P下降。此外，本發明人還發現，根據以上試驗例1的液體質控血清的穩定性考察方法，本 發明其它實施例制備的液體質控血清(包括實施例2至5的樣品)的穩定性結果與實施例 1的結果相同或相類。本發明不僅僅局限于以上實施例，本發明也可以根據本發明的精神和范圍獲得本 發明的其它變型實施方案中，而不會脫離本發明的精神和范圍。表1 本發明液體質控血清室溫穩定性
1權利要求
1.乙二醇和丙二醇的組合在制備液體質控血清中的用途。
2.根據權利要求1的用途，其中所述的乙二醇和丙二醇的用量比為約1 1.5 約 1 2. 5，優選為約 1 1.8 約 1 2. 2 (ν/ν)，優選為約 1 2 (ν/ν)。
3.根據權利要求1或2的用途，其中所述乙二醇和丙二醇的總量占所述液體質控血清 的約30% 約40% (ν/ν)，優選為約30% 約38% (ν/ν)，優選為約32% 約36% (ν/ν), 優選為約32% 約35% (ν/ν)，優選為約33% 約35% (ν/ν)。
4.根據權利要求3的用途，其中所述液體質控血清的被檢測項目包括下列生化常規檢 測項目的至少一種ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA，優選的，其中所述液 體質控血清的被檢測項目包括下列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、 ΝΑ、TC、禾口 TBA。
5.根據權利要求3的用途，其中所述液體質控血清是包括下列生化常規檢測項目的至 少一種的高值質量控制血清ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA。
6.使用乙二醇和丙二醇的組合來穩定液體質控血清的方法。
7.根據權利要求6的方法，其特征在于以下一項或任意多項所述的乙二醇和丙二醇的用量比為約1 1.5 約1 2. 5 (ν/ν)，優選為約1 1.8 約 1 2. 2 (ν/ν)，優選為約 1 2 (ν/ν)；所述乙二醇和丙二醇的總量占所述液體質控血清的約30% 約40% (ν/ν)，優選為約 30% 約38% (ν/ν)，優選為約32% 約36% (ν/ν)，優選為約32% 約35% (ν/ν)，優選 為約33% 約35% (ν/ν)；所述液體質控血清的被檢測項目包括下列生化常規檢測項目的至少一種ALT、AST、 CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA，優選其中所述液體質控血清的被檢測項目包括下 列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA ；所述液體質控血清的血清原料對于ALT指標顯示正常并且對于以下指標呈陰性 HBsAg, HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-AbjP RPR ；禾口 其中所述液體質控血清在制備過程中使用蔗糖透析脫水。
8.一種液體質控血清，其中包含乙二醇和丙二醇。
9.根據權利要求8的液體質控血清，其特征在于以下一項或任意多項所述的乙二醇和丙二醇的用量比為約1 1.5 約1 2. 5 (ν/ν)，優選為約1 1.8 約 1 2. 2 (ν/ν)，優選為約 1 2 (ν/ν)；所述乙二醇和丙二醇的總量占所述液體質控血清的約30% 約40% (ν/ν)，優選為約 30% 約38% (ν/ν)，優選為約32% 約36% (ν/ν)，優選為約32% 約35% (ν/ν)，優選 為約33% 約35% (ν/ν)；所述液體質控血清的被檢測項目包括下列生化常規檢測項目的至少一種ALT、AST、 CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和TBA，優選其中所述液體質控血清的被檢測項目包括下 列生化常規檢測項目ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、和 TBA ；所述液體質控血清是包括下列生化常規檢測項目的至少一種的高值質量控制血清 ALT、AST、CK、Glu、BUN、CR、CA、P、K、NA、TC、禾口 TBA ；所述液體質控血清對于ALT指標顯示正常并且對于以下指標呈陰性HBsAg、HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, HCV-Ab, HIV-Ab、和 RPR ；禾口所述液體質控血清在制備過程中使用蔗糖透析脫水。
10.制備權利要求8或9所述液體質控血清的方法，該方法包括在血清脫水之后加入保 護劑的乙二醇和丙二醇的步驟；優選地，該方法包括以下步驟a)取ALT指標顯示正常并且以下指標呈陰性的動物(特別是人)的血清HBsAg、 HBsAb、HBeAg, HBeAb、HBcAb、HCV-Ab、HIV-Ab、和 RPR，備用；b)對透析袋按常規方法進行預處理，將血清裝入透析袋中，捆緊，記錄血清初始體積 (Vo, ml)；c)將蔗糖放入器皿中，然后將裝有混合血清的透析袋放在蔗糖中進行脫水；d)待血清脫去約30% 約40%(ν/ν)(例如，約30% 約38%、約32% 約36%、約 32% 約35%、約33% 約35%)的水分時，取出，計算脫水量(Vw，ml)；e)向以上脫水血清中加入與步驟d)所述脫水量(Vw，ml)相當的乙二醇和丙二醇或其 混合物(V印，ml)，混勻，任選加入有效量的防腐劑疊氮化鈉，分裝，即得。
全文摘要
本發明涉及臨床化學檢驗用液體質控血清。具體地說，本發明涉及乙二醇和丙二醇的組合在制備液體質控血清中的用途，使用乙二醇和丙二醇的組合來穩定液體質控血清的方法，包含作為保護劑的乙二醇和丙二醇的液體質控血清，以及制備所述液體質控血清的方法。根據本發明制備的液體質控血清在-20℃下保存穩定性可達至少1年，在2～8℃下保存使用穩定性至少達2周，在室溫存放下能穩定4小時并且某些質控指標優于現有技術制備的或者市售的液體質控血清。
文檔編號G01N33/96GK101995476SQ20091016574
公開日2011年3月30日 申請日期2009年8月10日 優先權日2009年8月10日
發明者宋耀虹, 齊志宏 申請人:中國醫學科學院北京協和醫院