專利名稱：：調經活血膠囊的質量檢測方法
技術領域：
：本發明屬于中藥制劑的質量控制領域，特別涉及調經活血膠囊的質量檢測方法。
背景技術：
：調經活血膠囊是由木香41.67g、川芎41.67g、延胡索(醋制)41.67g、當歸125.0g、熟地黃83.33g、赤芍83.33g、紅花62.5g、烏藥62.5g、白術62.5g、丹參125.Og、香附(制)125.Og、菟絲子166.67g、澤蘭125.Og、雞血藤125.Og、吳茱萸(甘草水制)20.83g。以上十五味，將木香、川芎、延胡索及當歸83.33g粉碎成細粉，備用。將當歸41.67g與熟地黃等十一味分別加6倍、4倍量水煎煮兩次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.051.15(70°C)的清膏，噴霧干燥，所得噴霧粉與上述細粉混勻，制粒，干燥，粉碎，裝入膠囊，制成IOOO粒，每粒裝O.38g，包裝，即得。系由已有國家藥品標準的藥品"調經活血片"改劑型而得，現有的"調經活血片"質量標準僅對延胡索、木香進進行鑒別，且無含量測定，無法對質量實施有效控制。
發明內容本發明的目的在于克服上述缺點而提供的一種方法穩定、重現性好、有利于對產品質量進行控制的調經活血膠囊的質量檢測方法。本發明的一種調經活血膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟(1)鑒別:a、取本品內容物，置顯微鏡下觀察螺紋導管823iim，有的加厚壁互相連接，似網狀螺紋導管。薄壁細胞紡錘形，壁略厚，有極微細的斜向交錯紋理。細胞類多角形或略延長，壁稍彎曲，有的連珠狀增厚，紋孔細密。b、取本品內容物4g，加氨水3ml使濕潤，再加甲苯10ml，冷浸24h，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲苯lml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對照品適量，加乙醇制成每lml中含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10iU、對照品溶液2iU，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺(5:3:0.5:o.os)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸汽中熏，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。c、取本品內容物4g，加二氯甲烷10ml，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5g，同法制得對照藥材溶液。再取木香烴內酯對照品適量，加二氯甲烷制成每lml含O.5mg的對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各510iU，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-環己烷(5:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d、取本品內容物4g，加乙醇30ml，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)1小時，放冷至室溫，濾過，濾液揮干，殘渣加水20ml使溶解，轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上揮干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取赤芍對照藥材lg，同法制得對照藥材溶液；再取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各25ia，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。a、色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(25:75)為流動相；檢測波長為230nm;流速為1.Oml/min;柱溫為25°C。理論板數按芍藥苷峰計算應不低于3000。b、對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含50iig的溶液，即得。c、供試品溶液的制備取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。d、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ii1，注入液相色譜儀，測定，即得。上述的調經活血膠囊的質量檢測方法，其中本品每粒含赤芍以芍藥苷(C23H28On)計，不得少于O.55mg。上述的調經活血膠囊的質量檢測方法，其中還可設檢查步驟應符合膠囊劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。本發明與現有技術相比，具有明顯的有益效果，由以上技術方案可知同時對調經活血膠囊中延胡索、木香、赤芍同時進行鑒別，經多比樣品實驗，該方法穩定、重現性好，且陰性無干擾。通過色譜條件選擇、供試品溶液的制備選擇、系統適用性、線性關系、精密度、樣品穩定性、樣品重現性、樣品加樣回收率、樣品測定等試驗選擇芍藥苷為含量測定成份、并確定含量測定方法，使得調經活血膠囊質量更容易控制。具體實施例方式以下通過試驗例來進一步說明本發明方法的有益效果。—、鑒別1.鑒別1.1儀器、對照品、對照藥材、試劑和試藥儀器BYCDE薄層自動鋪板器；電子天平(萬分之一)BS-210S型。試劑二氯甲烷、氨水、乙醇、甲苯、正己烷、甲醇、二乙胺、碘、醋酸乙酯、石油醚(6090°C)、香草醛、硫酸、丙酮、石油醚(3060°C)、正丁醇、甲酸、乙醚、冰醋酸、三乙胺、環己烷均為分析純。對照品延胡索乙素對照品(批號110726-200409)、木香烴內酯對照品(批號11524-200402)、芍藥苷對照品(批號110736-200320)、熊果酸對照品(批號110742-200415)均由中國藥品生物制品檢定所提供。對照藥材紅花對照藥材(批號120907-200408)、吳茱萸對照藥材(批號120909-200307)香附對照藥材(批號121059-200404)、烏藥對照藥材(批號121096-200402)、白術對照藥材(批號120925-200407)、當歸對照藥材(批號120929-200512)川芎對照藥材(批號120918-200507)均由中國藥品生物制品檢定所提供。熟地黃藥材、木香藥材、赤芍藥材、雞血藤藥材、丹參藥材，經鑒定合格作為對照藥材使用，由貴陽新天藥業股份有限公司提供。試藥調經活血膠囊由貴陽新天藥業股份有限公司提供。1.2鑒別本鑒別為顯微鑒別參照調經活血片及2005版《中國藥典》一部附錄IIC藥材及成方制劑顯微鑒別法進行鑒別。取本品內容物研細，置顯微鏡下觀察螺紋導管823iim，有的加厚壁互相連接，似網狀螺紋導管。薄壁細胞紡錘形，壁略厚，有極微細的斜向交錯紋理。木纖維長梭形，直徑1624iim，壁稍厚，紋孔口橫裂縫狀、十字狀或人字狀。厚壁組織碎片綠黃色，細胞類多角形或略延長，壁稍彎曲，有的連珠狀增厚，紋孔細密。經過三批中試樣品顯微鑒別試驗，均未觀察到調經活血片質量標準鑒別(1)中所描述的"木纖維長梭形，直徑1624ym，壁稍厚，紋孔口橫裂縫狀、十字狀或人字狀。厚壁組織碎片綠黃色"，其余顯微特征明顯，故將其列入質量標準草案正文。1.3鑒別本鑒別為延胡索薄層鑒別。1.3.1提取條件的選擇參照調經活血片質量標準鑒別(2)。調經活血片質量標準鑒別(2)中提取溶劑為苯，而苯對人體傷害較大，因此將苯換成甲苯。其提取條件為取本品內容物4g，加氨水3ml使濕潤，再加甲苯10ml，冷浸24h，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲苯lml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品適量，加乙醇制成每lml中含lmg的對照品溶液。經過試驗，該方法分離效果較好，故列入正文。1.3.2吸附劑的選擇參照調經活血片質量標準鑒別(2)，選用硅膠G為吸附劑分離效果較好，故將其列入正文。1.3.3展開劑和顯色條件的選擇a、參照調經活血片質量標準鑒別(2)，以正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺(io:6:i:i滴)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏，在紫外燈下檢視，結果主斑點不能完全分開，且用苯、氯仿作為展開劑，對人體傷害較大，故對此展開糸統進行了調整，將苯換為甲苯、將氯仿換為二氯甲烷。b、以正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺(5:3:0.5:i滴)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏。結果各斑點之間分離效果好，且陰性對照無干擾，因此將該展開劑和顯色條件列入正文。綜上所述，確定了正文的延胡索TLC檢查方法，經3批中試樣品試驗，該方法穩定、重現性好，且陰性無干擾。1.4鑒別本鑒別為方中木香的薄層鑒別。1.4.1提取條件的選擇取本品內容物4g，加二氯甲烷10ml，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，濾6過，取續濾液，作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.5g，同法制得對照藥材溶液；再取木香烴內酯對照品適量，加二氯甲烷制成每lml含0.5mg的對照品溶液。經過試驗，該方法分離效果較好，故列入正文。1.4.2吸附劑的選擇采用羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板進行分離，效果較好，故將其列入正文。1.4.3展開劑和顯色條件的選擇以二氯甲烷-環己烷(5:l)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。結果各斑點之間分離效果好，且陰性對照無擾，因此將該展開劑和顯色條件列入正文。綜上所述，確定了正文的木香TLC檢查方法，經3批中試樣品試驗，該方法穩定、重現性好，且陰性無干擾。1.5鑒別本鑒別為方中赤芍的薄層鑒別。1.5.1提取條件的選擇取本品內容物4g，加乙醇30ml，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)lh，放冷至室溫，濾過，濾液揮干，殘渣加水20ml使溶解，轉移至分液漏中，用水飽和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上揮干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取赤芍對照藥材lg，同法制得對照藥材溶液；再取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。經過試驗，該方法分離效果較好，故將其列入正文。1.5.2吸附劑的選擇采用羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板進行分離，效果較好，故將其列入正文。1.5.3展開劑和顯色條件的選擇二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:o.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。結果各斑點之間分離效果好，且陰性對照無干擾，因此將該展開劑和顯色劑列入正文。綜上所述，確定了正文的赤芍TLC檢查方法，經3批中試樣品試驗，該方法穩定、重現性好，且陰性無干擾。除此之外，還對方中當歸、紅花、丹參、澤蘭、川芎、熟地黃、烏藥、香附、雞血藤、白術、吳茱萸、進行了TLC鑒別，結果方法不可行，所以未列入質量標準草案正文。二、檢查1.1—般檢查2.1.l裝量差異按(中國藥典2005年版一部附錄IL)膠囊劑項下規定，裝量差異限度應在標示裝量(或平均裝量)的±10%以內，超出裝量差異限度的不得多于2粒，并不得有l粒超出限度l倍。依法檢查，結果均符合規定。2.1.2崩解時限按(中國藥典2005年版一部附錄XI1A)崩解時限檢查法規定，各粒應在30分鐘內全部崩解。依法檢查，結果均符合規定。2.1.3微生物限度檢查按《中國藥典》2005年版一部"微生物限度標準"規定，膠囊劑細菌數每1克不得過10000個，霉菌、酵母菌數每1克不得超過100個，大腸埃希菌每1克不得檢出，大腸菌群每1克小于100個，活螨不得檢出。本制劑檢測結果均符合規定。2.2重金屬及砷鹽檢查2.2.1重金屬檢查按《中國藥典》2005版一部附錄IXE重金屬檢查法第二法檢查。結果小于百萬分之十。2.2.2砷鹽檢查按《中國藥典》2005版一部附錄IXF砷鹽檢查法第一法檢查。結果小于百萬分之二。根據以上的檢驗結果，說明本品中重金屬、砷鹽的含量都很低，且都符合規定，因此不列入質量標準草案。三、含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)測定。3.1儀器、對照品、試劑和試藥3.1.1儀器Agilent1100型高效液相色譜儀、VWD檢測器、Agilent化學工作站；超聲波清洗器CX-250型(頻率29-34KHz，功率250W，北京醫療設備二廠)；電子天平(萬分之一)BS-210S型(塞多利斯公司)；電子天平(十萬分之一)AE240型(Mettler公司)；島津2500紫外掃描儀。3.1.2對照品芍藥苷對照品(批號110736-200320)供含量測定用，購于中國藥品生物制品檢定所。3.1.3試劑甲醇為色譜純；水為重蒸餾水。3.1.4試藥調經活血膠囊樣品由貴陽新天藥業股份有限公司提供。3.2對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品12.5mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取lml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含50.Oiig的溶液。3.3色譜條件試驗色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(EliteHypers250mmX4.6mm，5ym)流速1.0ml/min柱溫25。C檢測波長230nm3.3.l流動相的選擇取本品內容物O.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。以甲醇-水(25:75)為流動相，分別精密吸取對照品溶液(C=50.Oiig/ml)和供試品溶液各lOia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果從供試品圖譜中可以看出，芍藥苷峰與其它峰之間有良好的分離，且峰形好、柱效高，表明該流動相及相關色譜條件可作為本實驗的色譜條件。3.4供試品溶液的制備選擇方法l:取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。方法2:取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。方法3:取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定8重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。方法4:取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。分別精密吸取對照品溶液(C=50.0iig/ml)和4個供試品溶液各10y1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結果見表1。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>結論從以上試驗結果可以看出，各方法中，芍藥苷峰與其它峰之間均有良好的分離，方法1、2含量較低，方法4含量最高，綜合考慮故將方法4列入正文，即為取本品內容物O.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲處理(功率250W，頻率34KHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。3.5系統適用性試驗取本品內容物O.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲(功率250W，頻率34KHZ)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液；另取陰性樣品同法制成陰性樣品溶液。精密吸取對照品溶液(50.0iig/ml)、陰性樣品溶液和供試品溶液各10ii1注入液相色譜儀，記錄色譜圖。從色譜圖中可看出，供試品在與對照品保留時間相應的位置上有峰，且峰形好，而陰性樣品在相應的位置上無峰，說明陰性樣品對樣品測定無干擾。樣品在圖譜中的芍藥苷峰的理論板數為4500，與其它物質有良好的分離，峰形好，綜合考慮，規定本實驗的理論塔板數按芍藥苷峰計算，應不得低于3000。3.6線性關系試驗對照品貯備液的制備精密稱取芍藥苷對照品12.50mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.50mg的溶液。對照品溶液①精密吸取上述對照品貯備液lml置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含10.0iig的溶液。對照品溶液②精密吸取上述對照品貯備液lml置20ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含25.Oiig的溶液。對照品溶液③精密吸取上述對照品貯備液2ml置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含40.Oiig的溶液。對照品溶液④精密吸取上述對照品貯備液lml置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml含50.0iig的溶液。對照品溶液⑤精密吸取上述對照品貯備液2ml置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml含100.0g的溶液。精密吸取上述5個對照品溶液各10ia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結果表2。表2序號12345對照品溶液濃度(ug/ml)10.025.040.050.0100.0峰面積136.64156353.08981561.16827705.785951387.72986以峰面積為縱坐標，以濃度(mg/ml)為橫坐標作線性關系圖得線性方程Y=13.873x+4.5912R=0.9999擬合過原點的直線方程為Y=13.943xR=0.9999將對照品峰面積代入上述兩式計算，相對標準偏差小于1.0%，故可認為標準曲線過原點，回歸方程截距為零，由此含量測定可采用外標一點法計算。對照品溶液濃度在10.0iig/ml100.0iig/ml之間線性關系良好。3.7精密度試驗精密吸取芍藥苷對照品溶液(C=50.0g/ml)10y1，注入液相色譜儀，連續進樣5次，記錄色譜圖，結果見表3:表3序號12345峰面積709.85071711.53357701.44183718.21570709.64862平均峰面積710.1381RSD0.8%實驗結果表明，該方法有良好的精密度。3.8樣品穩定性試驗取本品內容物約0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲(功率240W，頻率45KHZ)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜(0.45iim)濾過，取續濾液，即得供試品溶液。分別精密吸取對照品溶液(濃度為50.Oiig/ml)和供試品溶液各10ia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并在供試品溶液放置0、1、2、4、12小時后，精密吸取供試品溶液10iU進樣測定，記錄色譜圖，結果見表4:表410<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>1.1%從上述試驗結果得出，供試品溶液在12小時內穩定性良好。3.9樣品重復性試驗取本品內容物0.7g，精密稱定(平行稱取5份)，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲(功率240W，頻率45KHZ)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取對照品溶液(濃度為50.0iig/ml)和五份供試品溶液各10ii1進樣測定，結果見表5:表5序<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>通過上述試驗結果得出，該方法的樣品重現性好。3.IO樣品加樣回收率試驗取本品內容物約(批號20051201)0.35g，精密稱定(平行樣6份)，精密加入芍藥苷甲醇溶液(C=0.50mg/ml)lml，再精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲(功率240W，頻率45KHZ)處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取芍藥苷對照品溶液(C=50.0iig/ml)及上述6份供試品溶液各10iU，分別進樣測定，結果見表6:M測得總量一M樣品中含芍藥苷量回收率(％)=-x100%M對照品加入量表6編號123456稱樣量(g)0.34730.33900.33320.33910.34750.3373樣品含量(mg/g)1.67加入芍藥苷對照品的量(mg)0.5對照品峰面積709.14014供試品峰面積588.62726580.65985576.25055580.51697588.21301579.22455回收率(％)99.8198.6799.9499.5899.6099.71平均回收率(％)99.7RSD%0.14從上述實驗結果得出，該方法有良好的回收率。3.ll樣品測定三批中試樣品含量測定結果見表7:表7批號含量1(mg/粒)含量2(mg/粒)平均含量(mg/粒)200512010.650.660.66200512020.670.680.68200512030.680.670.68含量限度計算公式赤芍藥材中芍藥芬最低含量x赤芍藥材處方量x1000-x44.47%IOOO粒根據上述計算公式計算結果為0.56mg，因此規定本品每粒含赤芍以芍藥苷(C23H28On)計，不得少于0.55mg。實施例—種調經活血膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟(1)鑒別:a、取本品內容物，置顯微鏡下觀察螺紋導管823iim，有的加厚壁互相連接，似網狀螺紋導管。薄壁細胞紡錘形，壁略厚，有極微細的斜向交錯紋理。細胞類多角形或略延長，壁稍彎曲，有的連珠狀增厚，紋孔細密。b、取本品內容物4g，加氨水3ml使濕潤，再加甲苯10ml，冷浸24h，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲苯lml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對照品適量，加乙醇制成每lml中含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10iU、對照品溶液2iU，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺(5:3:0.5:0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸汽中熏，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。c、取本品內容物4g，加二氯甲烷10ml，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5g，同法制得對照藥材溶液。再取木香烴內酯對照品適量，加二氯甲烷制成每lml含O.5mg的對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各510iU，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-環己烷(5:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d、取本品內容物4g，加乙醇30ml，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)1小時，放冷至室溫，濾過，濾液揮干，殘渣加水20ml使溶解，轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上揮干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取赤芍對照藥材lg，同法制得對照藥材溶液；再取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各25ia，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)含量測定應符合膠囊劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。(3)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。a、色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇_水(25:75)為流動相；檢測波長為230nm;流速為1.Oml/min;柱溫為25°C。理論板數按芍藥苷峰計算應不低于3000。b、對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含50iig的溶液，即得。c、供試品溶液的制備取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。d、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含赤芍以芍藥苷(C23H28On)計，不得少于O.55mg。權利要求一種調經活血膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟(1)鑒別a、取本品內容物，置顯微鏡下觀察螺紋導管8～23μm，有的加厚壁互相連接，似網狀螺紋導管；薄壁細胞紡錘形，壁略厚，有極微細的斜向交錯紋理；細胞類多角形或略延長，壁稍彎曲，有的連珠狀增厚，紋孔細密；b、取本品內容物4g，加氨水3ml使濕潤，再加甲苯10ml，冷浸24h，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲苯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品適量，加乙醇制成每1ml中含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比5∶3∶0.5∶0.05的正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸汽中熏，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；c、取本品內容物4g，加二氯甲烷10ml，功率250W、頻率34KHZ超聲處理30分鐘，濾過，取續濾液，作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.5g，同法制得對照藥材溶液；再取木香烴內酯對照品適量，加二氯甲烷制成每1ml含0.5mg的對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比的5∶1二氯甲烷-環己烷為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d、取本品內容物4g，加乙醇30ml，功率250W、頻率34KHZ超聲處理1小時，放冷至室溫，濾過，濾液揮干，殘渣加水20ml使溶解，轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上揮干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取赤芍對照藥材1g，同法制得對照藥材溶液；再取芍藥苷對照品適量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2～5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比40∶5∶10∶0.2的二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)含量測定照高效液相色譜法測定；a、色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比的25∶75甲醇-水為流動相；檢測波長為230nm；流速為1.0ml/min；柱溫為25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于3000；b、對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得；c、供試品溶液的制備取本品內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放置1小時，功率250W，頻率34KHZ超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；d、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。2.如權利要求l所述的調經活血膠囊的質量檢測方法，其中本品每粒含赤芍以芍藥苷計，不得少于O.55mg。3.如權利要求2所述的調經活血膠囊的質量檢測方法，其中檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規定。全文摘要本發明公開了一種調經活血膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟鑒別延胡索、木香、赤芍TLC檢查；含量測定照高效液相色譜法測定；a、色譜條件與系統適用性試驗b、對照品溶液的制備c、供試品溶液的制備d、測定法。檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規定。本方法穩定、重現性好、有利于對產品質量進行控制。文檔編號G01N30/90GK101703656SQ200910102908公開日2010年5月12日申請日期2009年11月30日優先權日2009年11月30日發明者董大倫申請人:貴陽新天藥業股份有限公司