專利名稱：：全血基體改進試劑及用其檢測全血中多元素含量的方法
技術領域：
：本發明涉及一種基體改進試劑和檢測方法，特別是涉及一種用于同時檢測全血中多元素含量的全血基體改進試劑及用其檢測全血中多元素含量的方法。
背景技術：
：原子吸收分光光度法是基于從光源發出的被測元素特征輻射通過被測樣品的原子蒸汽時被其基態原子吸收，由輻射的減弱程度測定被測樣品中含量的一種現代儀器分析方法，因為具有選擇性強，干擾較小，準確度高，分析速度快等優點成為微量、痕量元素經典光譜檢測方法之一。而在生物材料微量元素檢測中，臨床上最常見是檢測血液微量元素含量，通過對血液中相關元素含量測定，建立起大量的數據基礎平臺，對預防醫學、臨床醫學等都具有重要的價值。以往對人體全血中的銅、鋅、鈣、鎂、鐵、鉀、鈉等元素的檢測主要釆用火焰原子吸收光譜法，使用儀器為火焰原子吸收光譜儀，傳統儀器多為單通道原子吸收光譜儀，一次只能檢測一種元素。在樣品前處理方面，由于人體全血成分復雜，會對檢測產生干擾，需要對其進行基體改進，以提高檢測的準確度。另外，各個元素在人體全血中的濃度范圍與儀器的線性測量范圍不一致，通常情況下，在檢測前，需要對樣品分別按不同的比例進行多次稀釋，不同稀釋比例的樣品分別對應不同元素的檢測。因此，一個完整的釆用傳統的原子吸收光譜儀對人體全血中多元素進行檢測的過程，包含了對樣品進行基體改進、多次的稀釋的樣品前處理環節，以及對多個元素分別進行檢測的儀器測量環節。在樣品前處理環節，第一方面，在試樣的轉移、蒸發和原子化過程中，試樣溶液的6度、表面張力、密度的微小差異都將引起噴霧速度、氣溶膠大小及傳送效率的變化，進而引起吸收強度的變化，影響測量精度。第二方面，由于進行的是微量的檢測，前處理液的配比精度稍有誤差，將直接影響測量結果，因此要求有適宜的基體改進試劑和嚴格的一致性配比。第三方面，銅、鋅、鈣、鎂、鐵、鉀、鈉元素不僅存在于人體全血中，自然環境中這些元素也是普遍存在的，因此，在配制過程中如果環境控制不嚴，很容易混入溶液中，使測量結果發生大的誤差，因此前處理溶液的配制過程要求必須在一個非常潔凈的環境進行。綜上所述，樣品前處理過程對測量結果準確性的影響是決定性的，該環節上出現的問題將導致測量結果失真。為減少污染，保障測量精度，目前對于原子吸收光譜的檢測樣品前處理需要滿足以下條件(1)、建立高標準超凈化學實驗室；(2)、配備專業人員；(3)建立嚴格的管理制度和體系。而在實際工作中，臨床檢驗機構往往很難滿足上述條件。另外，由于需要對樣品進行不同倍數的多次稀釋，所以對樣品需求量相對也多，即取血量較大，一般在2mL以上。如何提高原子吸收光譜分析法的環境適應性，使其能夠在一般環境下實現準確測量是人們研究的重點之一。在儀器測量環節，由于傳統儀器只能對單元素進行檢測，并且每檢測一種元素都要重新調整儀器參數，因此，不但要做多次檢測，而且步驟繁瑣、耗時長、檢測效率低下。因此，綜上所述，在臨床檢測領域，由于取血量大、樣品前處理環節步驟繁瑣、要求高以及儀器測量環節耗時長、檢測效率低等因素，應用原子吸收光譜法檢測血液中的微量元素的方法難于普及推廣使用。為解決上述問題，本領域技術人員在儀器測量環節給出了多元素同時測量解決方案，如中國專利(01219460.3)敘述了一種多道原子吸收光譜儀，由二個燈架、銅鋅鈣三元素燈、鎂鐵二元素燈、透鏡、火焰吸收池、帶有樣品池的原子化器、帶光線孔的多道單色器、多道信息檢測器、單片機控制器及微機等構成，其主要改進是設在一燈架上的銅鋅鉤三元素燈與設在另一燈架上的鎂鐵二元素燈的位置排列呈小于90°的夾角。又如中國專利200510079883.0敘述了一種多元素同時測定的原子吸收裝置有光源系統、光路系統、原子化器、分光系統、光束編組系統、光電轉換系統、計算機，方法如下由多路交替發出的含有待測元素特征波長的復合輻射光東；將上述光東以平行于原子化器或與平行方向呈小于90°的夾角a通過原子化器后，再以與光柵的法線方向呈小于30°的入射夾角P射入光柵，經光柵分光后的多路含有單一元素特征波長的光束，通過光東編組系統后重新編組組合，每組光東組合使用同一光路交替進入多路光檢測系統進行檢測；并經數據處理與計算機系統計算出每種元素的濃度值。本發明多路單、復合輻射光束通過原子化器，多個元素同時測量，交替發出光東，不存在光譜干擾問題。在上述專利中，主要是通過改變輻射光源與原子化器的夾角的方法來改變測量光程，以此調整儀器對不同元素的線性測量范圍。這樣，雖然全血中不同元素的濃度范圍不同，但在一定稀釋倍數范圍內，只對樣品進行一次稀釋后進行多元素同時測量時，依然能夠達到所有的元素都在儀器的線性范圍內進行測量的目的。上述專利在儀器測量環節給出了多元素同時測量解決方案，解決了過去使用單通道儀器需進行多次檢測的難題，但前提是在一定稀釋倍數范圍內，還要對樣品進行基體改進和一次稀釋。因此，在樣品前處理環節，找到對所有元素檢測有利的最佳稀釋倍數范圍并在此范圍內對樣品進行基體改進是本發明要解決的問題之一。另外，如何將樣品前處理環節移出臨床檢測流程是本發明要解決的問題之二
發明內容本發明的目的是基于上述多元素同時測量原子吸收裝置，在樣品前處理環節提供一種環境適應性好、測量精度高，操作簡捷的全血基體改進試劑及其制備和使用方法。一種全血基體改進試劑，包括如下組分質量濃度為3-7%。的氯化鑭，體積濃度為0.5-1.5%。的聚乙二醇辛基苯基醚，體積濃度為0.5-1.5%。的濃硝酸，其余為超純水。本發明的全血基體改進試劑，還可以包括體積濃度為0.5-1.5%。的小牛血清。本發明的全血基體改進試劑，其中所述基體改進試劑優選由如下組分組成質量濃度為5%。的氯化鑭，體積濃度為1%。的聚乙二醇辛基苯基醚，體積濃度為0.75%。的濃硝酸，體積濃度為1%。的小牛血清，其余為超純水。上述全血基體改進試劑的制備方法，包括以下步驟(1)稱取200.00克優級純氯化鑭，置于1000mL容量瓶中加超純水溶解，定容至刻度，備用；(2)吸取10mL優級純聚乙二醇辛基苯基醚，移入100mL容量瓶中，加超純水溶解，定容至刻度，備用；(3)取步驟(1)制得的氯化鑭溶液50mL，與步驟(2)制得的聚乙二醇辛基苯基醚溶液20mL、濃硝酸1.5mL、小牛血清2.0mL分別加入2000mL的容量瓶中，加超純水定容至刻度，搖勻、按規格分裝即得成品。本發明還提供一種用所述的全血基體改進試劑同時檢測多元素的方法，釆用所述全血基體改進試劑將全血稀釋至原濃度的二十六分之一到三十五分之一，靜置后上多元素同時測量原子吸收裝置檢測。其中多元素同時測量原子吸收裝置優選為多道原子吸收光譜儀，其又優選申請人(北京博暉創新光電技術股份有限公司)生產的BH5100S/T型原子吸收光譜儀(可同時測除鉀、鈉之外的5種元素)、BH7100S/T型原子吸收光譜儀(可測含鉀、鈉在內的7種元素)或BH5300S型原子吸收光譜儀(可同時測全血或血清中除鉀、鈉之外的5種元素)。這些原子吸收光譜儀的結構和工作原理和工作過程均記載在中國專利01219460.3和中國專利200510079883.0中。或根據中國專利200510079883.0中記載的方法設計得到的其他原子吸收光譜儀也可以用于本發明中。上述技術方案具有如下優點1、取血量少。與傳統方法相比，僅需要取10-50|aL全血，即可同時測量樣品中銅、鋅、鈣、鎂、鐵、鉀、鈉7種或7種以下元素的含量，減少了臨床檢測機構的取血量，減少患者痛苦，有利于推廣使用。2、由于釆用優選的比例配制后的基體改進劑已按標準規格分裝入離心管中。因此，在臨床檢測時，只需將微量全血加入基體改進劑即可上機分析，從而省去了樣品前處理環節，簡化了操作步驟，提高了檢測效率，防止了樣品污染，保證了分析結果準確。且不需在高標準實驗室內進行溶液配制，對環境和操作人員的要求降低。3、釆用統一的原料、工序制備、灌裝，各稀釋液之間誤差小，減小了在血液稀釋中存在的系統誤差，不需進行檢測前的溶液配制等過程，操作方法便捷、安全。具體實施例方式下面結合實施例，對本發明的具體實施方式作進一步詳細描述。以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。實施例1全血基體改進試劑及其制備和使用方法全血基體改進試劑配方氯化鑭3%。、聚乙二醇辛基苯基醚0.5%。、濃硝酸0.5%。，其余為超純水。制備方法包括以下步驟(1)、稱取200.00克優級純氯化鑭，置于1000mL容量瓶中加超純水溶解，定容至刻度，備用；(2)、吸取10mL優級純聚乙二醇辛基苯基醚，移入lOOmL容量瓶中，加超純水溶解，定容至刻度，備用；(3)、取步驟(1)制得的氯化鑭溶液30mL,與步驟(2)制得的聚乙二醇辛基苯基醚溶液10mL、濃硝酸1.0mL分別加入2000mL的容量瓶中，加超純水定容至刻度，搖勻、按規格分裝至離心管即得成品。用其檢測全血中多元素的方法(1)取裝有0.25mL全血基體改進試劑的離心管，備用；(2)在10-3(TC下，向裝有全血基體改進試劑的離心管中加入10pL全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的二十六分之一，靜止待檢；(3)上機檢測，.所用儀器為北京博暉創新光電技術股份有限公司生產的BH5100S/T型原子吸收光譜儀。實施例2全血基體改進試劑及其制備和使用方法配方氯化鑭5%。、聚乙二醇辛基苯基醚1%。、濃硝酸0.75%。，其余為超純水。制備方法同實施例1。用其檢測全血中多元素的方法(1)取裝有0.30mL全血基體改進試劑的離心管，備用；(2)在10-3(TC下，向裝有全血基體改進試劑的離心管中加入10pL全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的三十一分之一，靜止待檢；(3)上機檢測，所用儀器為北京博暉創新光電技術股份有限公司生產的BH7100S/T型原子吸收光譜儀。實施例3全血基體改進試劑及其制備和使用方法配方氯化鑭7%。、聚乙二醇辛基苯基醚1.5%。、濃硝酸1.5%。，其余為超純水。制備方法同實施例1。用其檢測全血中多元素的方法(1)取裝有0.34mL全血基體改進試劑的離心管，備用；(2)在10-30。C下，向裝有全血基體改進試劑的離心管中加入10pL全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的三十五分之一，靜止待檢；(3)上機檢測，所用儀器為北京博暉創新光電技術股份有限公司生產的BH5300S型原子吸收光譜儀。實施例4全血基體改進試劑及其制備和使用方法全血基體改進試劑配方氯化鑭3%。、聚乙二醇辛基苯基醚0.5%。、濃硝酸0.5%。、小牛血清0.5%。，其余為超純水。制備方法包括以下步驟(1)、稱取200.00克優級純氯化鑭，置于1000mL容量瓶中加超純水溶解，定容至刻度，備用；(2)、吸取10mL優級純聚乙二醇辛基苯基醚，移入100mL容量瓶中，加超純水溶解，定容至刻度，備用；(3)、取步驟(1)制得的氯化鑭溶液30mL，與步驟(2)制得的聚乙二醇辛基苯基醚溶液10mL、濃硝酸l.OmL、小牛血清l.OmL分別加入2000mL的容量瓶中，加超純水定容至刻度，搖勻、按1.OOmL規格分裝至離心管即得成品。用其檢測全血中多元素的方法(1)取裝有l.OOmL全血基體改進試劑的離心管，備用；(2)在10-30。C下，向裝有全血基體改進試劑的離心管中加入40pL全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的二十六分之一，靜止待檢；(3)上機檢測，所用儀器為北京博暉創新光電技術股份有限公司生產的BH5100S/T型原子吸收光譜儀。實施例5全血基體改進試劑及其制備和使用方法配方氯化鑭5%。、聚乙二醇辛基苯基醚1%。、濃硝酸0.75%。、小牛血清1.0%。，其余為超純水。制備方法同實施例4。用其檢測全血中多元素的方法(1)取裝有1.20mL全血基體改進試劑的離心管，備用；(2)在10-30。C下，向裝有全血基體改進試劑的離心管中加入40pL全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的三十一分之一，靜止待檢；(3)上機檢測，所用儀器為北京博暉創新光電技術股份有限公司生產的BH7100S/T型原子吸收光譜儀。實施例6全血基體改進試劑及其制備和使用方法配方氯化鑭7%。、聚乙二醇辛基苯基醚1.5%。、濃硝酸1.5%。、小牛血清1.5%。，其余為超純水。制備方法同實施例4。用其檢測全血中多元素的方法.-(1)取裝有1.36mL全血基體改進試劑的離心管，備用；(2)在10-3(TC下，向裝有全血基體改進試劑的離心管中加入40^L全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的三十五分之一，靜止待檢；(3)上機檢測，所用儀器為北京博暉創新光電技術股份有限公司生產的BH5300S型原子吸收光譜儀。試驗例1:釆用實施例2的基體改進試劑分別對全血稀釋不同比例后上BH7100S/T型原子吸收光譜儀(其中S為塑殼，T為鐵殼)檢測多元素含量，檢測結果分別見下表l-5:表1:銅的檢測結果(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表2:鋅的檢測結果(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表3:鈣的檢測結果(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表4:鎂的檢測結果(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表5:鐵的檢測結果(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>試驗例2:采用實施例5的基體改進試劑分別對全血稀釋不同比例后上BH7100S/T型原子吸收光譜儀(其中S為塑殼，T為鐵殼)檢測多元素含量，檢測結果分別見下表6-12:表6:銅的檢測結果(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>從以上各表可以看出，本發明提供的基體改進試劑可以準確地測量出全血中多元素的含量，其中如果試劑包含有小牛血清，測量效果更好；釆用本發明提供的基體改進試劑，將全血稀釋至原濃度的二十六分之一至三十五分之一，可使血液中多元素的含量符合測定時校正曲線的限度范圍，可一次性同時測量出多元素的含量，并且測量精度高，其中尤以稀釋至原濃度的三十一分之一為最佳。本發明為一種用于火焰原子吸收光譜檢測的全血基體改進試劑，本發明釆用優化的試劑，以及取裝有25-34體積份數的全血基體改進試劑的離心管，在10-30。C下，加入l體積份數的全血，蓋緊離心管蓋，迅速振蕩混勻，使全血稀釋至原濃度的二十六分之一到三十五分之一，靜止待檢；本發明方法因采用標準化規格分裝，具有環境適應性好、實際操作便捷，系統誤差小的特點。以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明技術原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。權利要求1、一種全血基體改進試劑，其特征在于，所述基體改進試劑包括如下組分質量濃度為3-7‰的氯化鑭，體積濃度為0.5-1.5‰的聚乙二醇辛基苯基醚，體積濃度為0.5-1.5‰的濃硝酸，其余為超純水。2、如權利要求1所述的全血基體改進試劑，其特征在于，所述基體改進試劑還包括體積濃度為0.5-1.5%。的小牛血清。3、如權利要求2所述的全血基體改進試劑，其特征在于，所述基體改進試劑由如下組分組成質量濃度為5%。的氯化鑭，體積濃度為1%。的聚乙二醇辛基苯基醚，體積濃度為0.75%。的濃硝酸，體積濃度為1%。的小牛血清，其余為超純水。4、權利要求1-3任一項所述的全血基體改進試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)按所述比例稱取優級純氯化鑭，置于容量瓶中加超純水溶解，定容至刻度，備用；(2)吸取優級純聚乙二醇辛基苯基醚，移入容量瓶中，加超純水溶解，定容至刻度，備用；(3)取步驟(1)制得的氯化鑭溶液，與步驟(2)制得的聚乙二醇辛基苯基醚溶液、濃硝酸或濃硝酸和小牛血清分別加入容量瓶中，加超純水定容至刻度，搖勻、按規格分裝即得成品。5、權利要求4所述的全血基體改進試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)稱取200.00克優級純氯化鑭，置于1000mL容量瓶中加超純水溶解，定容至刻度，備用；(2)吸取10mL優級純聚乙二醇辛基苯基醚，移入100mL容量瓶中，加超純水溶解，定容至刻度，備用；(3)取步驟(1)制得的氯化鑭溶液50mL,與步驟(2)制得的聚乙二醇辛基苯基醚溶液20mL、濃硝酸1.5mL、小牛血清2.0mL分別加入2000mL的容量瓶中，加超純水定容至刻度，搖勻、按規格分裝即得成品。6、一種用權利要求1-3任一項所述的全血基體改進試劑同時檢測多元素的方法，其特征在于，釆用所述全血基體改進試劑將全血稀釋至原濃度的二十六分之一到三十五分之一，靜置后上多元素同時測量原子吸收裝置檢測。7、如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述多元素同時測量原子吸收裝置為多道原子吸收光譜儀。全文摘要本發明公開了一種全血基體改進試劑，包括如下組分質量濃度為3-7‰的氯化鑭，體積濃度為0.5-1.5‰的聚乙二醇辛基苯基醚，體積濃度為0.5-1.5‰的濃硝酸，其余為超純水；本發明還提供了一種用所述的全血基體改進試劑同時檢測多元素的方法，采用所述全血基體改進試劑將全血稀釋至原濃度的二十六分之一到三十五分之一，靜置后上多元素同時測量原子吸收裝置檢測。本發明的方法能夠同時測定全血中多種微量元素，環境適應性好、測量精度高，操作簡捷。文檔編號G01N21/31GK101592657SQ200910087948公開日2009年12月2日申請日期2009年6月25日優先權日2009年6月25日發明者奇楊申請人:北京博暉創新光電技術股份有限公司