專利名稱：：婦科多項目干化學聯合檢測試紙條及測定方法
技術領域：
：本發明涉及的是一種用于體外測定婦女陰道分泌物中多項化學成分的試紙條以及測定方法，用于準確判斷細菌性陰道病(BactarialVaginosis),白色念珠菌(Candidaalbicans),滴蟲(Trichomoniasis)，淋球菌(gonorrhoeae)，和生殖道環境的損害程度(DegreeOfClean),屬于體外診斷試劑
技術領域：
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背景技術：
：細菌性陰道病(BactarialVaginosis簡稱BV)是一種在細菌學上表現為陰道正常菌群數量明顯減少，代之以一組厭氧菌群(類桿菌屬、莫比亞厭氧菌屬、加德納桿菌、消化鏈球菌屬以及人類支原體屬等)數量明顯增加，陰道分泌物中的乳酸減少，HA減少，PH增高使陰道環境發生明顯變化而導致臨床征候群。細菌性陰道病對婦女及妊娠可產生極大的危害性，因此對其的準確診斷及其陰道環境的損害程度的判斷具有十分重要的意義。臨床診斷的標準是Amsel金標準(l)ra〉4.5。(2)陰道分泌物增多，變稀有異味。(3)胺試驗陽性。(4)陰道分泌物中檢出線索細胞>20%。近年來科學證明唾液酸苷酶是細菌性陰道病的特異性酶之一，利用該酶獨特的催化機理，使用合適的顯色底物形成快速準確的顯色反應，進而可以準確的對細菌性陰道病進行診斷，結合PH、過氧化氫、白細胞酯酶、胺試驗，脯氨酸氨基肽酶檢測結果可以綜合判斷出細菌性陰道病及其損害程度。白色念珠菌(Candidaalbicans)和滴蟲(Trichomoniasis)是婦女常見的疾病，淋病(gonorrhoeae)是最常見的性病之一，現有的方法中均是單一測定的項目居多，檢驗工作相對繁瑣，不利于推廣。
發明內容本發明的目的在于提供一種多項目聯合測試并可用于儀器自動化分析的婦科多項目干化學聯合檢測試紙條及測定方法。利用本發明所述的試紙條，由此測出的結果可以準確判斷出細菌性陰道病(BactarialVaginosis),白色念珠菌(Candidaalbicans),滴蟲(Trichomoniasis),淋球菌(gonorrhoeae)，和生殖道環境的損害程度(DegreeOfClean);可以有效的評估出受檢者的生殖道環境，清潔度和細菌性陰道病，白色念珠菌，滴蟲，淋球菌的致病菌狀況。本發明的發明目的是通過如下技術方案來完成的，本發明所述的婦科白帶多項目干化學聯合檢測試紙條，它由細長形的塑料基體條和各種試劑固化在纖維素濾紙，玻璃纖維濾紙、層析紙、聚酯膜或尼龍膜后的試劑塊采用水平覆蓋或內置嵌入方法構成干化學測試條；塑料基體條由透明或不透明塑料材料構成,通過白帶標本與各種化學試劑塊的反應產生顏色的變化,從試紙條上面和下面檢測到顏色的變化而判斷結果。所述的化學測試條是由試劑固化過的干化學試劑塊粘貼于由PET、PVC、PE、PP或PS片材構成的塑料基體條上組成，干化學試劑塊包括PH測試試劑塊、乳酸試劑塊，過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊，脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊,氧化酶試劑塊，N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊中的任意三個試劑塊或三個以上的任意試劑塊增加,減少的組合采用水平覆蓋或內置嵌入方法構成。所述的ra測試試劑塊、乳酸試劑塊，過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊，脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊，氧化酶試劑塊，N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊，滴蟲特異性水解蛋白酶底物的試劑塊的基礎材料為纖維素濾紙、玻璃纖維濾紙、層析紙、聚酯膜或尼龍膜；所述試劑塊形狀為正方形，圓形,三角形，距形，菱形,梯形,大小為長l一20mm,優選4~6mm;寬l~20mm,優選4~6mm;厚度0.015mrn,優選0.1~5mm;所述多項試劑塊間距為lmm20mm，優選25mm;所述的PH測試試劑塊為將空白濾紙在由甲基橙和溴甲酚綠組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述甲基橙在溶液中的濃度為10500mg/L，所述溴甲酚綠在溶液中的濃度為10300mg/L;所述脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊的反應試劑為:將空白濾紙在L-脯氨酸-P-萘胺，L-脯氨酸-P-硝基苯及苯胺，濃度為:5-3000mg/L.的溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述的氧化酶試劑塊的反應試劑為將空白濾紙在四甲基對苯二胺,其濃度為:0.1-50g/L.溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4氯-3吲哚基-N-乙酰-氨基葡萄糖苷，4-甲基傘形酮-N-氨基半乳糖苷，硝基苯-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷，濃度為:0.1-20g/L的溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊為將空白濾紙在ZRRR-MNA,ZVR-MNA，ZLR-畫A,ZRR-顧A,BLRR國AMC,BLKR-AMC,VLK-麗A，ZKKR-AMC，VLR-顧A，濃度為:0.1-30g/L溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述過氧化氫濃度試劑塊為將空白濾紙在過氧化物酶、S-485表面活性劑和TMB組成的酶溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化物酶在酶溶液中的濃度為1.03.0x1C)SU/L，表面活性在酶溶液中的濃度為10500mg/L，TMB在酶溶液中的濃度為20腦0mg/L;所述白細胞酯酶濃度試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3』引哚乙酸鹽和海藻糖或蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-n引哚乙酸鹽在溶液中的濃度為451000mg/L，所述海藻糖或蔗糖在溶液中的濃度為200mg/L10000mg/L;所述唾液酸苷酶活性試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3』引哚祌經氨酸鹽、氯化硝基四氮唑藍、ADA,ACES，PIPES，MOPSO,IMIDAZOLE,MES緩沖鹽和海藻糖或蔗糖組成的PH在5.57.5溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽在溶液中的濃度為5200mg/L，所述氯化硝基四氮唑藍在溶液中的濃度為10500mg/L，所述海藻糖或蔗糖在溶液中的濃度為200mg/L10000mg/L，所述ADA，ACES，PIPES,MOPSO，IMIDAZOLE,MES任選其一的有機酸緩沖溶液中的濃度為50-300mg/L;所述乳酸濃度試劑塊為將空白濾紙在過氧化物酶、乳酸氧化酶、S-485表面活性劑、3、3'5、5'-四甲基聯苯胺(TMB)組成的酶溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化物酶在酶溶液中的濃度為2.03.0x1()SU/L,乳酸氧化酶在溶液濃度為0.52.0x105U/L，所述表面活性在酶溶液中的濃度為50500mg/L，TMB在酶溶液中的濃度為201000mg/L;所述胺試驗試劑塊為將氫氧化鉀溶液與空白濾紙浸泡后干燥處理后的試劑塊A粘貼于溴甲酚綠和TritonX-100溶液浸泡后的干燥處理的試劑塊B，其中A試劑塊中氫氧化鉀濃度為50010000mg/L，B試劑塊中溴甲酚綠濃度為100500mg/L，TritonX-100濃度為1001000mg/L。一種使用上述婦科多項目干化學聯合檢測試紙條的測定方法，它將稀釋后的樣本滴加到各試劑塊上，10-15分鐘后根據顏色的變化判斷結果，根據乳酸、過氧化氫(H202)和白細胞酯酶的半定量檢測結果，判斷陰道的理論清潔度計算等級(DOC)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>根據各測試塊結果由PH〉4.5，胺試驗陽性，脯氨酸氨基肽酶陽性和唾液酸苷酶陽性即可確診BV，由N-乙酰氨基己糖酶底物試驗陽性表明白色念珠菌的存在，由滴蟲特異性水解蛋白酶底物試驗的陽性表明滴蟲的存在，由脯氨酸氨基肽酶和氧化酶同時陽性表明淋球菌的存在。所述稀釋后的樣本采用的稀釋液是0.9。/。的NaCl、0.2%的表面活性劑和有機酸緩沖溶液混合配置而成；先用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；再用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入300-500ul的稀釋液稀釋分泌物，讓分泌物溶解到稀釋液中制成稀釋后的樣本，并分別將稀釋后的樣本滴加到各試劑塊上。所述的各項試劑塊的顯色反應結果可以通過正向或反向目測比色與標準色卡的比較來判斷結果，或通過專用婦科干化學分析儀測定。本發明主要包括樣品稀釋液及細菌性陰道病，白色念珠菌,滴蟲，淋球菌多項目聯合檢測試紙條；所述樣品稀釋液為生理鹽水和S-485表面活性劑和有機酸緩沖液組成的溶液；所述生理鹽水在溶液中的質量百分比濃度為0.9%:所述表面活性劑在溶液中的質量百分比濃度為0.13.0%;本發明使用的婦科干化學多項檢測試紙條可以同時測定PH、乳酸,過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、胺試驗，脯氨酸氨基肽酶,氧化酶,N-乙酰氨基己糖酶,滴蟲特異性水解蛋白酶,可以準確的反映婦女生殖道微生物環境和白帶分泌物的清潔度，白色念珠菌,滴蟲,淋球菌,細菌性陰道病的致病菌狀況、使得婦科白帶檢測更全面，操作簡便、快速。若配合婦科干化學分析儀讀取則會更方便快捷。圖1是本發明所述的一種試紙條的結構示意圖。圖2是本發明所述的另一種試紙條的結構示意圖。圖3是本發明所述的又一種試紙條的結構示意圖。圖4是本發明所述的再一種試紙條的結構示意圖。圖5是本發明所述的再一種試紙條的結構示意圖。圖6是本發明所述的再一種試紙條的結構示意圖。具體實施例方式下面將結合附圖及具體實施例對本發明作詳細的介紹本發明所述的婦科白帶多項目干化學聯合檢測試紙條，它由細長形的塑料基體條和各種試劑固化在纖維素濾紙，玻璃纖維濾紙、層析紙、聚酯膜或尼龍膜后的試劑塊采用水平覆蓋或內置嵌入方法構成干化學測試條；塑料基體條由透明或不透明塑料材料構成，通過白帶標本與各種化學試劑塊的反應產生顏色的變化，從試紙條上面和下面檢測到顏色的變化而判斷結果。所述的化學測試條是由試劑固化過的干化學試劑塊粘貼于由PET、PVC、PE、PP或PS片材構成的塑料基體條上組成，干化學試劑塊包括PH測試試劑塊、乳酸試劑塊,過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊,脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊，氧化酶試劑塊,N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊，滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊中的任意三個試劑塊或三個以上的任意試劑塊增加，減少的組合采用水平覆蓋或內置嵌入方法構成。所述的PH測試試劑塊、乳酸試劑塊，過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊，脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊，氧化酶試劑塊,N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊，滴蟲特異性水解蛋白酶底物的試劑塊的基礎材料為纖維素濾紙、玻璃纖維濾紙、層析紙、聚酯膜或尼龍膜；所述試劑塊形狀為正方形，圓形，三角形，距形，菱形，梯形，大小為長1~20mm,優選46mrn;寬120mm,優選46mrn;厚度0.01~5mm,優選0.15mm;所述多項試劑塊間距為lmm20mm，優選25mm;所述的PH測試試劑塊為將空白濾紙在由甲基橙和溴甲酚綠組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述甲基橙在溶液中的濃度為10500mg/L，所述溴甲酚綠在溶液中的濃度為10300mg/L;所述脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊的反應試劑為:將空白濾紙在L-脯氨酸-P-硝基苯及苯胺,濃度為:53000mg/L.的溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述的氧化酶試劑塊的反應試劑為將空白濾紙在四甲基對苯二胺,其濃度為0.150g/L.溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊為將空白濾紙在N-乙酰氨基己糖酶底物:5-溴-4氯-3吲哚基-N-乙酰-氨基葡萄糖苷,4-甲基傘形酮-N-氨基半乳糖苷，硝基苯-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷，濃度為:0.1-20g/L的溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊為將空白濾紙在滴蟲特異性水解蛋白酶底物ZRRR-畫A,ZVR-MNA,ZLR-MNA，ZRR隱畫A,BLRR-AMC，BLKR-AMC,VLK-固A,ZKKR-AMC,VLR-MNA，濃度為:0.1-30g/L溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述過氧化氫濃度試劑塊為將空白濾紙在過氧化物酶、表面活性劑和TMB組成的酶溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化物酶在酶溶液中的濃度為1.03.0xl()Su/L,表面活性在酶溶液中的濃度為10500mg/L，TMB在酶溶液中的濃度為201000mg/L;所述白細胞酯酶濃度試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3』引哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為451000mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為20010000mg/L;所述唾液酸苷酶活性試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽、氯化硝基四氮唑藍、.IMIDAZOLE緩沖鹽和海藻糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-H引哚神經氨酸鹽在溶液中的濃度為5200mg/L，所述氯化硝基四氮唑藍在溶液中的濃度為10500mg/L，所述海藻糖在溶液中的濃度為20010000mg/L，所述有機酸IMIDAZOLE緩沖溶液中pH值為6.5，濃度為50300mg/L;所述乳酸濃度試劑塊為將空白濾紙在過氧化物酶、乳酸氧化酶、S-485表面活性劑、3、3'5、5一-四甲基聯苯胺(TMB)組成的酶溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化物酶在酶溶液中的濃度為2.03.0x10511丄,乳酸氧化酶在溶液濃度為0.52.0x105U/L，所述S-485表面活性在酶溶液中的濃度為50500mg/L，TMB在酶溶液中的濃度為201000mg/L;所述胺試驗試劑塊為將氫氧化鉀溶液與空白濾紙浸泡后干燥處理后的試劑塊A粘貼于溴甲酚綠和TritonX-100溶液浸泡后的干燥處理的試劑塊B，其中A試劑塊中氫氧化鉀濃度為50010000g/L，B試劑塊中溴甲酚綠濃度為100500mg/L，TritonX-100濃度為1001000mg/L。一種使用上述婦科多項目干化學聯合檢測試紙條的測定方法，它將稀釋后的樣本滴加到各試劑塊上，10-15分鐘后根據顏色的變化判斷結果，根據乳酸、過氧化氫(H202)和白細胞酯酶的半定量檢測結果，判斷陰道的理論清潔度計算等級(DOC)(1)乳酸H202白細胞酯酶DOCC2)++++++-，±I(3)+++++II")++++m(5)-,±-,±+++IV根據各測試塊結果由PH>4.5，胺試驗陽性，脯氨酸氨基肽酶陽性和唾液酸苷酶陽性即可確診BV，由N-乙酰氨基己糖酶底物試驗陽性表明白色念珠菌的存在，由滴蟲特異性水解蛋白酶底物試驗的陽性表明滴蟲的存在，由脯氨酸氨基肽酶和氧化酶同時陽性表明淋球菌的存在。所述稀釋后的樣本采用的稀釋液是0.9%的NaCl、0.2%的S-485表面活性劑和有機酸IMIDAZOLE緩沖溶液混合配置而成；先用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；再用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入300500ul的稀釋液稀釋分泌物，讓分泌物溶解到稀釋液中制成稀釋后的樣本，并分別將稀釋后的樣本滴加到各試劑塊上。所述的各項試劑塊的顯色反應結果可以通過正向或反向目測比色與標準色卡的比較來判斷結果，或通過專用婦科干化學分析儀測定。使用本發明婦科干化學多項聯合檢測試紙進行婦科疾病多項聯合檢測的操作步驟如下(1)用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；P)用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入300500n的稀釋液稀釋分泌物；讓分泌物溶解到稀釋液中；(3)分別在乳酸試劑塊,過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊,脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊,氧化酶試劑塊,N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊上滴加一滴稀釋白帶液，每滴約20(4)將試紙條在室溫靜置10-20分鐘或37°C恒溫箱中靜置10-20分鐘后目視比色,也可用杭州健寶醫療器械有限公司研制的婦科干化學分析儀自動讀取結果。(5)判讀結果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例1該實施例的干化學多項試紙條中的PH、乳酸，過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶底物、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶底物,氧化酶底物，N-乙酰氨基己糖酶底物,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊的試劑塊濾紙材料為3M濾紙和Pall公司的Nylon66B,底卡使用的材料為白色PVC片。PH測試試劑帶制作將濾紙浸泡在甲基橙濃度為300mg/L、溴甲酚綠濃度為200mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；過氧化氫濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在氧化物酶濃度為2.0xl()Su/L、S-485表面活性濃度為400mg/L、TMB濃度為500mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；白細胞酯酶濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽濃度為300mg/L、蔗糖濃度為2000mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長條；唾液酸苷酶活性試劑帶制作將濾紙浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽濃度為200mg/L、氯化硝基四氮唑藍濃度為400mg/L、海藻糖濃度為2000mg/L、有機酸IMIDAZOLE緩沖鹽PH值為6.5、濃度為300mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；乳酸濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在過氧化物酶濃度為3.0xl()Su/L、乳酸氧化酶溶液濃度為2.0x105U/L、S-485表面活性濃度為300mg/L、TMB濃度為500mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；胺試驗試劑帶制作A將濾紙浸泡在氫氧化鉀濃度為10%的溶液中，烘干。B將尼龍膜浸泡在溴甲酚綠濃度為500mg/L、TritonX-100濃度為800mg/L的溶液中，烘干。將A濾紙和B膜使用雙面膠粘合后使用切割機切成5mm寬的長帶；脯氨酸氨基肽酶活性試劑帶制作:將濾紙浸泡在L-脯氨酸-P-硝基苯及苯胺,濃度為:3000mg/L.的溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；氧化酶試劑帶制作將濾紙浸泡在四甲基對苯二胺，其濃度為:10g/L.溶液中，浸泡后烘干使用切割機切成5rrnn寬的長帶；N-乙酰氨基己糖酶底物試劑帶制作將濾紙浸泡在4-甲基傘形酮-N-氨基半乳糖苷濃度為:5g/L的溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑帶制作將濾紙浸泡在滴蟲特異性水解蛋白酶底物VLR-MNA的試劑濃度為:6g/L溶液中,浸烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；分別將PH、乳酸,過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶活性、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶活性,氧化酶活性,N-乙酰氨基己糖酶活性,滴蟲特異性水解蛋白酶活性試劑帶按圖1順序粘貼固定于80mm寬的白色PVC片上，試劑條間距4mm，切成5mm寬的試紙條即成。稀釋液0.9°/。的NACL，0.2%的S-485表面活性劑和有機酸IMIDAZOLE緩沖溶液混合配置而成。其婦科白帶多項聯合檢測的操作步驟如下(1)、用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；(2)、用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入500ul的稀釋液稀釋分泌物；讓分泌物溶解到稀釋液中；(3)、分別在乳酸試劑塊,過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊,脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊,氧化酶試劑塊,N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊上滴加一滴稀釋白帶液，每滴約25ul;(4)、將試紙條在室溫靜置20分鐘或37°C恒溫箱中靜置15分鐘后目視比色,也可用杭州健寶醫療器械有限公司研制的婦科干化學分析儀自動讀取結果；(5)、本發明判讀結果PH過氧化氫白細胞酯酶唾液酸苷酶乳酸胺試驗正常<4.5(紅色或淺綠)藍色氧化酶N-乙酰氨基己糖酶滴蟲特異性水解蛋白酶不正常〉4.5(深綠色)不顯色藍色或綠色紫色或褐色不顯色綠色黃色黃色紅色或紫色不顯色不顯色藍色不顯色不顯色不顯色不顯色不顯色實施例2:該實施例的干化學多項試紙條中的PH、乳酸，過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶底物、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶底物,氧化酶底物,N-乙酰氨基己糖酶底物,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊的試劑塊濾紙材料為硝酸纖維素濾紙，底卡使用的材料為白色PVC片。PH測試試劑帶制作將濾紙浸泡在甲基橙濃度為300mg/L、溴甲酚綠濃度為200mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；過氧化氫濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在氧化物酶濃度為2.0x105U/L、表面活性濃度為300mg/L、TMB濃度為300mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；白細胞酯酶濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽濃度為200mg/L、蔗糖濃度為2000mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長條；唾液酸苷酶活性試劑帶制作將濾紙浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽濃度為200mg/L、氯化硝基四氮唑藍濃度為200mg/L、海藻糖濃度為2000mg/L、有機酸IMIDAZOLE緩沖鹽PH值為6.5、濃度為300mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；乳酸濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在過氧化物酶濃度為3.0x1()SU/L、乳酸氧化酶溶液濃度為2.0x105U/L、表面活性濃度為200mg/L、TMB濃度為400mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；胺試驗試劑帶制作A將濾紙浸泡在氫氧化鉀濃度為10%的溶液中，烘干。B將尼龍膜浸泡在溴甲酚綠濃度為400mg/L、TritonX-100濃度為800mg/L的溶液中，烘干。將A濾紙和B膜使用雙面膠粘合后使用切割機切成5mm寬的長帶；脯氨酸氨基肽酶活性試劑帶制作:將濾紙浸泡在L-脯氨酸-P-硝基苯胺,濃度為:2500mg/L.的溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；氧化酶試劑帶制作將濾紙浸泡在四甲基對苯二胺，其濃度為:10g/L.溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；N-乙酰氨基己糖酶底物試劑帶制作:將濾紙浸泡在N-乙酰氨基己糖酶底物試劑濃度為:3g/L的溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑帶制作將濾紙浸泡在滴蟲特異性水解蛋白酶底物ZRR-MNA的試劑濃度為3g/L溶液中，浸烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；分別將PH、乳酸,過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶活性、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶活性,氧化酶活性,N-乙酰氨基己糖酶活性,滴蟲特異性水解蛋白酶活性試劑帶按圖1順序粘貼固定于80mm寬的白色PVC片上，試劑條間距4mm，切成5mm寬的試紙條即成。稀釋液0.9%的NACL，0.2%的S-485表面活性劑和有機酸頂IDAZOLE緩沖溶液混合配置而成。其婦科白帶多項聯合檢測的操作步驟如下(1)、用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；(2)、用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入500ul的稀釋液稀釋分泌物；讓分泌物溶解到稀釋液中；(3)、分別在乳酸試劑塊，過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊,脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊,氧化酶試劑塊,N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊上滴加一滴稀釋白帶液，每滴約25^1;(4)、將試紙條在室溫靜置20分鐘或37°C恒溫箱中靜置15分鐘后目視比色,也可用杭州健寶醫療器械有限公司研制的婦科干化學分析儀自動讀取結果；1(5)、本發明判讀結果:正常不正常PH<4.5(紅色或淺綠)>4.5(深過氧化氫藍色不顯色白細胞酯酶不顯色藍色或綠色唾液酸苷酶不顯色紫色或褐色乳酸藍色不顯色胺試驗不顯色綠色脯氨酸氨基肽酶不顯色黃色氧化酶不顯色黃色N-乙酰氨基己糖酶不顯色黃色滴蟲特異性水解蛋白酶不顯色紅色或紫色實施例3:該實施例的干化學多項試紙條中的PH、乳酸,過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶底物、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶底物,氧化酶底物,N-乙酰氨基己糖酶底物,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊的試劑塊濾紙材料為玻璃微纖維濾紙，底卡使用的材料為白色PVC片。PH測試試劑帶制作將濾紙浸泡在甲基橙濃度為300mg/L、溴甲酚綠濃度為200mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；過氧化氫濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在氧化物酶濃度為2.0x105U/L、表面活性濃度為400mg/L、TMB濃度為500mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；白細胞酯酶濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽濃度為300mg/L、海藻糖濃度為2000mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長條；唾液酸苷酶活性試劑帶制作將濾紙浸泡在5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽濃度為150mg/L、氯化硝基四氮唑藍濃度為400mg/L、蔗糖濃度為2000mg/L、有機酸IMIDAZOLE緩沖鹽PH值為6.5、濃度為300mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；乳酸濃度試劑帶制作將濾紙浸泡在過氧化物酶濃度為3.0x10511/1^、乳酸氧化酶溶液濃度為2.0x105U/L、表面活性濃度為300mg/L、TMB濃度為500mg/L的溶液中，烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；胺試驗試劑帶制作A將濾紙浸泡在氫氧化鉀濃度為10%的溶液中，烘干。B將尼龍膜浸泡在溴甲酚綠濃度為500mg/L、TritonX-100濃度為800mg/L的溶液中，烘干。將A濾紙和B膜使用雙面膠粘合后使用切割機切成5mm寬的長帶；脯氨酸氨基肽酶活性試劑帶制作:將濾紙浸泡在L-脯氨酸-P-硝基苯胺,濃度為:1500mg/L.的溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；氧化酶試劑帶制作將濾紙浸泡在四甲基對苯二胺,其濃度為:5g/L.溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；N-乙酰氨基己糖酶底物試劑帶制作:將濾紙浸泡在4-甲基傘形酮-N-氨基半乳糖苷試劑濃度為:2g/L的溶液中,浸泡后烘干使用切割機切成5mm寬的長帶；滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑帶制作將濾紙浸泡在滴蟲特異性水解蛋白酶底物BLRR-AMC的試劑濃度為:2g/L溶液中,浸烘干后使用切割機切成5mm寬的長帶；分別將PH、乳酸,過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶活性、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶活性,氧化酶活性,N-乙酰氨基己糖酶活性,滴蟲特異性水解蛋白酶活性試劑帶按圖1順序粘貼固定于80mm寬的白色PVC片上，試劑條間距4mm，切成5mm寬的試紙條即成。稀釋液0.9%的NACL,0.2%的S-485表面活性劑和有機酸IMIDAZOLE緩沖溶液混合配置而成。其婦科白帶多項聯合檢測的操作步驟如下(1)、用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；(2)、用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入500ul的稀釋液稀釋分泌物；讓分泌物溶解到稀釋液中；(3)、分別在乳酸試劑塊,過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊，脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊,氧化酶試劑塊,N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊,滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊上滴加一滴稀釋白帶液，每滴約25^1;(4)、將試紙條在室溫靜置20分鐘或37°C恒溫箱中靜置20分鐘后目視比色,也可用杭州健寶醫療器械有限公司研制的婦科干化學分析儀自動讀取結果；(5)、本發明判讀結果正常不正常PH<4.5(紅色或淺綠)>4.5(深綠色)過氧化氫藍色不顯色白細胞酯酶不顯色藍色或綠色唾液酸苷酶不顯色紫色或褐色乳酸藍色不顯色胺試驗不顯色綠色脯氨酸氨基肽酶不顯色黃色氧化酶不顯色黃色N-乙酰氨基己糖酶不顯色黃色滴蟲特異性水解蛋白酶不顯色紅色或紫色過氧化氫(H202)和白細胞酯酶的半定量檢測結果，判斷陰道的理論清潔度計算等級(DOC)C1)乳酸H202白細胞酯酶DOC(2)++++++-,±I(3)+++++II(4)++++III(5)-，±陽,±+++IV根據各測試塊結果由PH〉4.5,胺試驗陽性，脯氨酸氨基肽酶陽性和唾液酸苷酶陽性即可確診BV,由N-乙酰氨基己糖酶底物試驗陽性表明白色念珠菌的存在，由滴蟲特異性水解蛋白酶底物試驗的陽性表明滴蟲的存在,由脯氨酸氨基肽酶和氧化酶同時陽性表明淋球菌的存在。本發明使用的婦科干化學多項檢測試紙條可以同時測定PH、乳酸,過氧化氫濃度、白細胞酯酶濃度、唾液酸苷酶活性、胺試驗,脯氨酸氨基肽酶活性,氧化酶活性,N-乙酰氨基己糖酶活性,滴蟲特異性水解蛋白酶活性,可以準確的反映婦女白帶分泌物中細菌性陰道病，白色念珠菌，滴蟲,淋球菌和生殖道微生物環境，陰道環境的損害程度和白帶分泌物的清潔度，使得婦科白帶檢測更全面，操作簡便、快速。若配合婦科干化學分析儀讀取則會更方便快捷。權利要求1、一種婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在于由細長形的塑料基體條和各種試劑固化在纖維素濾紙，玻璃纖維濾紙、層析紙、聚酯膜或尼龍膜后的試劑塊采用水平覆蓋或內置嵌入方法構成干化學測試條；塑料基體條由透明或不透明塑料材料構成，通過白帶標本與各種化學試劑塊的反應產生顏色的變化，從試紙條上面和下面檢測到顏色的變化而判斷結果。2、根據權利要求1所述婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在干化學測試條是由試劑固化過的干化學試劑塊粘貼于由PET、PVC、PE、PP或PS片材構成的塑料基體條上組成，干化學試劑塊包括PH測試試劑塊、乳酸試劑塊,過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊,脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊，氧化酶試劑塊，N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊，滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊中的任意三個試劑塊或三個以上的任意試劑塊增加，減少的組合采用水平覆蓋或內置嵌入方法構成。3、根據權利要求i所述婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在于所述ra測試試劑塊、乳酸試劑塊，過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊,脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊，氧化酶試劑塊，N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊,滴蟲特異性水解蛋白酶底物的試劑塊的基礎材料為纖維素濾紙、玻璃纖維濾紙、層析紙、聚酯膜或尼龍膜；所述試劑塊形狀為正方形，圓形,三角形，距形，菱形,梯形,大小為長120mrn,優選46imn;寬120mrn，優選46mm;厚度0.01~5mm,優選0.1~5mm;所述多項試劑塊間距為lmm20mm，優選25mm。4、根據權利要求1所述的婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在于所述的塑料基體條(11)為PET、PVC、PE、PP或PS片材中的一種，其大小為長10200mm，優選70110mm;寬220mm，優選46mm;厚度0.11.5mm，優選0.20.8mm。5、根據權利要求1或2所述的婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在于所述的PH測試試劑塊為將空白濾紙在由甲基橙和溴甲酚綠組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述甲基橙在溶液中的濃度為10500mg/L，所述溴甲酚綠在溶液中的濃度為10300mg/L;所述脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊的反應試劑為:將空白濾紙在L-脯氨酸-P-硝基苯，L-脯氨酸-P-萘氨及苯胺，濃度為:5-3000mg/L.的溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述的氧化酶試劑塊的反應試劑為將空白濾紙在四甲基對苯二胺,其濃度為:0.1-50g/L.溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊為將空白濾紙在發色性N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷的衍生物，如5-溴-4氯-3噴哚基-N-乙酰-氨基葡萄糖苷，4-甲基傘形酮-N-氨基半乳糖苷，硝基苯-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷，試劑濃度為:0.1-20g/L的溶液中浸泡后干燥處理制備而成；所述滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊為將空白濾紙在ZRRR-MNA,ZVR-MNA,ZLR-MNA,ZRR-MNA,BLRR-AMC,BLKR-AMC，VLK-MNA,ZKKR-AMC，VLR-MNA之一，試劑濃度為:0.1-30g/L溶液中干燥處理制備而成；所述過氧化氫濃度試劑塊為將空白濾紙在過氧化物酶、S-485表面活性劑和TMB組成的酶溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化物酶在酶溶液中的濃度為1.03.0x1()SU/L，表面活性在酶溶液中的濃度為10500mg/L，TMB在酶溶液中的濃度為201000mg/L;所述白細胞酯酶濃度試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和海藻糖或蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為451000mg/L，所述海藻糖或蔗糖在溶液中的濃度為200mg/L10000mg/L;所述唾液酸苷酶活性試劑塊為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽、氯化硝基四氮唑藍、ADA，ACES,PIPES,MOPSO，IMIDAZOLE,MES緩沖鹽和海藻糖或蔗糖組成的pH在5.57.5溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸鹽在溶液中的濃度為5200mg/L，所述氯化硝基四氮唑藍在溶液中的濃度為10500mg/L，所述海藻糖或蔗糖在溶液中的濃度為200mg/L10000mg/L，所述ADA,ACES,PIPES,MOPSO,IMIDAZOLE,MES任選其一的有機酸緩沖溶液中的濃度為50-300mg/L。6、根據權利要求1或2所述的婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在于所述乳酸濃度試劑塊為將空白濾紙在過氧化物酶、乳酸氧化酶、表面活性劑、3、3,5、5'-四甲基聯苯胺TMB組成的酶溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化物酶在酶溶液中的濃度為2.03.0x10511/1,乳酸氧化酶在溶液濃度為0.52.0x105U/L，所述表面活性在酶溶液中的濃度為50500mg/L，TMB在酶溶液中的濃度為201000mg/L。7、根據權利要求1或2所述的婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，其特征在于所述胺試驗試劑塊為將氫氧化鉀溶液與空白濾紙浸泡后干燥處理后的試劑塊A粘貼于溴甲酚綠和TritonX-100溶液浸泡后的干燥處理的試劑塊B，其中A試劑塊中氫氧化鉀濃度為50010000mg/L，B試劑塊中溴甲酚綠濃度為100500mg/L，TritonX-100濃度為1001000mg/L。8、一種使用婦科多項目干化學聯合檢測試紙條的測定方法，它將稀釋后的樣本滴加到各試劑塊上，10-15分鐘后根據顏色的變化判斷結果，根據乳酸、過氧化氫和白細胞酯酶的半定量檢測結果，判斷陰道的理論清潔度計算等級DOC;<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>根據各測試塊結果由ra〉4.5，胺試驗陽性，脯氨酸氨基肽酶陽性和唾液酸苷酶陽性即可確診BV，由N-乙酰氨基己糖酶底物試驗陽性表明白色念珠菌的存在，由滴蟲特異性水解蛋白酶底物試驗的陽性表明滴蟲的存在，由脯氨酸氨基肽酶和氧化酶同時陽性表明淋球菌的存在。9、根據權利要求14所述的使用婦科多項目干化學聯合檢測試紙條的測定方法，其特征在于所述稀釋后的樣本采用的稀釋液是0.9。/。的NaCl、0.2%的表面活性劑和有機酸緩沖溶液混合配置而成;先用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第一管先直接涂在PH試劑塊；再用棉簽從陰道后穹窿取分泌物第二管加入300-500vtl的稀釋液稀釋分泌物，讓分泌物溶解到稀釋液中制成稀釋后的樣本，并分別將稀釋后的樣本滴加到各試劑塊上。10、根據權利要求14或15所述的使用婦科多項目干化學聯合檢測試紙條的測定方法，其特征在于各項試劑塊的顯色反應結果可以通過正向或反向目測比色與標準色卡的比較來判斷結果，或通過專用婦科干化學分析儀測定。全文摘要一種用于婦科多項目干化學聯合檢測試紙條，包括干化學多項目檢測試條和樣本稀釋液；干化學檢測試條由塑料基體條和固化后的各種試劑塊構成；干化學試劑塊包括pH測試試劑塊、乳酸試劑塊，過氧化氫濃度試劑塊、白細胞酯酶濃度試劑塊、唾液酸苷酶活性試劑塊、胺試驗試劑塊，脯氨酸氨基肽酶底物試劑塊，氧化酶底物試劑塊，N-乙酰氨基己糖酶底物試劑塊，滴蟲特異性水解蛋白酶底物試劑塊之中的至少任意三塊或三塊以上的任意項目增加，減少的組合。本發明使用的婦科多項目干化學聯合檢測試紙條可以同時測定白帶樣品中的pH、乳酸，過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、胺試驗，脯氨酸氨基肽酶，氧化酶，N-乙酰氨基己糖酶，滴蟲特異性水解蛋白酶，可以準確的反映婦女生殖道微生物環境和白帶分泌物的清潔度，白色念珠菌，滴蟲，淋球菌，細菌性陰道病的致病菌狀況、使得婦科白帶檢測更全面，操作簡便、快速。若配合婦科干化學分析儀讀取則會更方便快捷。文檔編號G01N21/77GK101320040SQ20081006317公開日2008年12月10日申請日期2008年7月18日優先權日2008年7月18日發明者俞連琴,卜勁松,盧文波,徐衛紅,戎奇吉,林自力,樓正清,王春明,邢建明,菁陳,陳建偉申請人:杭州健寶醫療器械有限公司