專利名稱：金蓮花清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及金蓮清熱膠囊的質(zhì)量控制方法，具體地說是涉及金蓮花清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法。
背景技術(shù)：
金蓮清熱顆粒質(zhì)量標準中金蓮花的鑒別采用《中華人民共和國衛(wèi)生部部標準》WS3-263(Z-44)-96(Z)所述的紙層析法，該方法靈敏度低，分離效果差，且需要二次展開，操作繁瑣，重復性差。
金蓮清熱顆粒質(zhì)量標準中苦杏仁苷的鑒別沒有統(tǒng)一標準，一般借鑒《中國藥典》2000年版一部中苦杏仁項下方法，具體方法為取本品內(nèi)容物4g，研細，加甲醇25ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml溶解，再以水飽和正丁醇提取三次(10ml，10ml，5m1)，合并正丁醇層，蒸干，加正丁醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取苦杏仁苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)于5～10℃放置12小時的下層溶液為展開劑，分二次展開，第一次展至5cm處，取出，晾干，第二次展至8cm處，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸溶液(磷鉬酸2g，加水20ml使溶解，再緩緩加入硫酸30ml，混勻)，于105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點。但是上述方法用于鑒別金蓮花清熱膠囊中的苦杏仁苷時，背景雜質(zhì)干擾嚴重，分離效果較差。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作簡便，分離效果好的金蓮花清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案為一種金蓮花清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征在于均采用薄層色譜法；上述金蓮花采用薄層色譜法進行鑒別的具體過程為取金蓮花清熱膠囊樣品和金蓮花對照藥材，分別加入有機醇，超聲提取，濾過，濾液作為供試品溶液和對照品溶液；分別吸取上述供試品溶液和對照品溶液，點于同一聚酰胺薄膜上，以3～15∶1～2∶1～2的乙醇-乙酸-水或6～12∶1的甲醇∶水為展開劑，展開，取出，熱風吹干，噴以三氯化鋁試液，熱風吹干，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同的黃綠色熒光斑點即可確定金蓮清熱膠囊中有金蓮花的存在；所述的有機醇為甲醇、乙醇、正丁醇、異丙醇或丙酮；所述超聲提取時間為10～20分鐘；上述苦杏仁苷采用薄層色譜法進行鑒別的具體過程為(1)供試品溶液的準備取樣品，研細，加有機醇，超聲提取，過濾，濾液蒸干，殘渣加水微熱使溶解，放冷，通過大孔吸附樹脂柱，用稀氨液洗脫，棄去氨液，再用水洗脫，棄去水液，繼用20％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加丙酮使溶解，取上清液，濃縮作為供試品溶液；(2)對照品溶液的準備取杏仁苷對照品，加有機醇溶解，作為對照品溶液；(3)分別吸取上述兩種溶液，點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水為展開劑，分二次展開，第一次展至5cm處，取出，晾干，第二次展至8cm處，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，于加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點即可確定金蓮清熱膠囊中有苦杏仁苷的存在，所述有機醇為甲醇、乙醇、正丁醇、異丙醇或丙酮；上述超聲提取時間為25～40分鐘；所述大孔吸附樹脂柱為D10型；所述稀氨液濃度為4％。
本發(fā)明采用薄層色譜法作為金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的定性鑒別方法，經(jīng)反復試驗，該方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作簡便，斑點清晰，分離效果好，經(jīng)陰性對照，陰性樣品無干擾，證明此方法具專屬性及可行性，故可以列入金蓮清熱膠囊質(zhì)量標準。
圖1為金蓮清熱膠囊金蓮花薄層鑒別圖譜，其中1為金連清熱膠囊樣品000308，2為樣品000309，3為樣品000310，4為金蓮花對照藥材，5為金蓮花陰性對照品。
圖2為金蓮清熱膠囊苦杏仁苷薄層鑒別圖譜，其中1為金蓮清熱膠囊樣品000308，2為樣品000309，3為樣品0003104，4為苦杏仁苷對照品，5為缺苦杏仁陰性對照品。
具體實施例方式
一、金蓮清熱膠囊中金蓮花的鑒別1、供試品溶液的準備分別取批號為000308、000309、000310的三批金蓮清熱膠囊各3g，加乙醇50ml，超聲提取15分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。
2、對照品溶液的準備取金蓮花對照藥材1g，加乙醇50ml，超聲提取15分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。
3、缺金蓮花陰性對照品的準備另按處方量稱取除金蓮花以外的六味藥材及輔料，依照質(zhì)量標準“制法”項制成1000粒膠囊，即為缺金蓮花陰性對照品，稱取該品2.4g，同供試品溶液制備方法制成缺金蓮花陰性對照品溶液。
4、鑒別過程照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液及缺金蓮花陰性對照品溶液各3μl，對照品溶液2μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，乙醇-乙酸-水(12∶1∶1)為展開劑，展開，取出，熱風吹干，噴以三氯化鋁試液，熱風吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。
結(jié)果供試品色譜中，在與金蓮花對照藥材色譜相應的位置上，分別顯相同黃綠色的熒光主斑點；缺金蓮花陰性對照品色譜中，在與金蓮花對照藥材色相對應的位置上，無黃綠色斑點。說明金蓮清熱膠囊中有金蓮花存在。
二、金蓮清熱膠囊中苦杏仁苷的鑒別過程1、供試品溶液的準備分別取批號為000308、000309、000310的三批金蓮清熱膠囊內(nèi)容物各4g，研細，加甲醇25ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水5ml微熱使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1.5cm，長8cm，加水20ml預洗一次，棄去水液)，用稀氨液(4→100)30ml洗脫，棄去氨液，再用水20ml洗脫，棄去水液，繼用20％乙醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加丙酮10ml使溶解，取上清液，濃縮至約2ml，作為供試品溶液。
2、對照品溶液的準備取苦杏仁苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。
3、缺苦杏仁陰性對照品另按處方量稱取除苦杏仁以外的六味藥材及輔料，依照質(zhì)量標準“制法”項制成1000粒膠囊，即為缺苦杏仁陰性對照品，稱取該品3.4g，同供試品溶液制備方法制成缺苦杏仁陰性對照品溶液。
4、鑒別過程照薄層色譜法(附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液、缺苦杏仁陰性對照品溶液及苦杏仁苷對照品溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)于5～10℃放置12小時的下層溶液為展開劑，分二次展開，第一次展至5cm處，取出，晾干，第二次展至8cm處，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，于105℃烘約10min至斑點顯色清晰。
結(jié)果供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的灰褐色斑點。缺苦杏仁陰性對照品，在與對照品色譜相應的位置上無相同顏色的斑點。具體結(jié)果見圖4。說明金蓮清熱膠囊中含有苦杏仁苷。
權(quán)利要求
1.一種金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征在于均采用薄層色譜法。
2.按照權(quán)利要求1所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征在于上述金蓮花采用薄層色譜法進行鑒別的具體過程為取金蓮清熱膠囊樣品和金蓮花對照藥材，分別加入有機醇，超聲提取，濾過，濾液作為供試品溶液和對照品溶液；分別吸取上述供試品溶液和對照品溶液，點于同一聚酰胺薄膜上，以3～15∶1～2∶1～2的乙醇—乙酸—水或6～12∶1的甲醇水為展開劑，展開，取出，熱風吹干，噴以三氯化鋁試液，熱風吹干，置紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同的黃綠色熒光斑點即可確定金蓮清熱膠囊中有金蓮花的存在。
3.按照權(quán)利要求2所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征是所述的有機醇為甲醇、乙醇、丙酮、異丙醇或它們的水溶液。
4.按照權(quán)利要求2所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征是所述超聲提取時間為10～20分鐘。
5.按照權(quán)利要求1所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征在于上述苦杏仁苷采用薄層色譜法進行鑒別的具體過程為(1)供試品溶液的準備取樣品，研細，加有機醇，超聲提取，過濾，濾液蒸干，殘渣加水微熱使溶解，放冷，通過大孔吸附樹脂柱，用稀氨液洗脫，棄去氨液，再用水洗脫，棄去水液，繼用20％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加丙酮使溶解，取上清液，濃縮作為供試品溶液；(2)對照品溶液的準備取杏仁苷對照品，加有機醇溶解，作為對照品溶液；(3)分別吸取上述兩種溶液，點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10的氯仿—醋酸乙酯—甲醇—水為展開劑，分二次展開，第一次展至5cm處，取出，晾干，第二次展至8cm處，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點即可確定金蓮清熱膠囊中有苦杏仁苷的存在。
6.按照權(quán)利要求5所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征是上述有機醇為甲醇、乙醇、正丁醇、異丙醇或丙酮。
7.按照權(quán)利要求5所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征是上述超聲提取時間為25～40分鐘。
8.按照權(quán)利要求5所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征是所述大孔吸附樹脂柱為D10型。
9.按照權(quán)利要求5所述的金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，其特征是所述稀氨液濃度為4％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的鑒別方法，本發(fā)明采用薄層色譜法作為金蓮清熱膠囊中金蓮花和苦杏仁苷的定性鑒別方法，經(jīng)反復試驗，該方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作簡便，斑點清晰，分離效果好，經(jīng)陰性對照，陰性樣品無干擾，證明此方法具專屬性及可行性，故可以列入金蓮清熱膠囊質(zhì)量標準。
文檔編號G01N21/64GK1996008SQ200610146020
公開日2007年7月11日 申請日期2006年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月2日
發(fā)明者丁建寶, 李艷萍, 張建民, 格日勒 申請人:寧夏啟元藥業(yè)有限公司