專利名稱：唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質和含量的檢驗方法
技術領域：
本發明涉及唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質和含量的檢驗方法。
背景技術：
惡性高鈣血癥是一種由癌癥引起的可危及生命的骨代謝性并發癥。約有10％的癌癥患者患有高鈣血癥或骨鈣水平升高，唑來磷酸為諾華公司開發的治療高鈣血證的藥物，2000年在加拿大首次上市，目前在美國、英國等國家已上市銷售。
唑來膦酸是異環型第三代的雙膦酸類藥物，是目前為止臨床試驗中顯示作用最強的雙膦酸鹽化合物。本品能方便地靜注，把帕米膦酸二鈉靜注所需的時間由2小時縮短到5分鐘，所需的臨床護理時間短、作用空間小及病人耗時短，因而優于帕米膦酸二鈉的長時間靜脈給藥。其臨床劑量僅為4mg，每月一次，卻能產生比其它雙膦酸類藥物更明顯更長久地抑制骨質吸收作用、降低疼痛中值百分數、降低腫瘤骨轉移的發生率。開發商諾華公司(Novartis)認為本品療效優于同類治療藥帕米膦酸二鈉，并具有同等耐受性，與帕米膦酸二鈉相比，本品能更快、更持久地使血鈣水平恢復正常，因此有望在臨床上替代帕米膦酸二鈉。
本品傳統的色譜檢驗系統基本上是全水相，其中不含有機相，平衡時間太長，而且對傳統的色譜柱損傷很大，耗費成本較大，必須摸索出一種合理的色譜系統，制訂出簡便、快速、穩定的有關物質和含量的檢驗方法，以便有效地控制本品質量。
發明內容
本發明就是提供唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質和含量的檢驗方法。
本發明是這樣實現的，唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質和含量的檢驗方法以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；0.03％氫氧化四丁基銨水溶液-乙腈(100∶20)為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500，流動相的配制為取10％氫氧化四丁基銨水溶液0.3ml，加至100ml水中，以磷酸調節pH＝2.55；其含量測定方法為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-四氫呋喃-0.05mol/L磷酸二氫銨(4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55)為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。
本發明能有效控制唑來膦酸原料、凍干及其注射液的質量，而且可以縮短檢驗時間，減輕對色譜柱的損傷，降低測試成本，滿足企業生產的需要。
具體實施例方式
本發明是這樣來實現的，唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質檢測方法為以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；0.03％氫氧化四丁基銨水溶液[取10％氫氧化四丁基銨水溶液0.3ml，加至100ml水中](磷酸調節pH＝2.55)-乙腈(100∶20)為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。其含量測定方法為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-四氫呋喃-0.05mol/L磷酸二氫銨(4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55)為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。
唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質檢測方法1、儀器Agilent 1100高效液相色譜儀、AG285電子分析天平；2、試劑唑來膦酸對照品、10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸、乙腈；3、測定方法①唑來膦酸取本品25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法試驗(中國藥典2000年版二部附錄VD)，以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；0.03％四丁基氫氧化銨水溶液[取10％四丁基氫氧化銨水溶液0.3ml，加至100ml水中](磷酸調節pH＝2.55)-乙腈(100∶20)為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。取對照溶液20μl注入液相色譜儀中，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10％～25％；再分別取供試品溶液和對照溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。供試品溶液中如有雜質峰，量取各雜質峰面積之和，應不大于對照溶液主峰面積(1.0％)，單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1/2(0.5％)。
②注射用唑來膦酸取本品內容物適量(約相當于唑來膦酸25mg)，精密稱定，置25ml量瓶中，加流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法試驗(中國藥典2000年版二部附錄VD)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，0.03％四丁基氫氧化銨水溶液[取10％四丁基氫氧化銨水溶液0.3ml，加至100ml水中](磷酸調節pH＝2.55)-乙腈(100∶20)為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。取對照溶液20μl注入液相色譜儀中，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10％～25％；再分別取供試品溶液和對照溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。供試品溶液中如有雜質峰(輔料峰除外)，量取各雜質峰面積之和，應不大于對照溶液主峰面積(1.0％)，單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1/2(0.5％)。
③唑來膦酸注射液取本品，作為供試品溶液；量取供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法試驗(中國藥典2000年版二部附錄VD)，以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；0.03％四丁基氫氧化銨水溶液[取10％四丁基氫氧化銨水溶液0.3ml，加至100ml水中](磷酸調節pH＝2.55)-乙腈(100∶20)為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。取對照溶液20μl注入液相色譜儀中，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10％～25％；再分別取供試品溶液和對照溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。供試品溶液中如有雜質峰(輔料峰除外)，量取各雜質峰面積之和，應不大于對照溶液主峰面積(1.0％)，單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1/2(0.5％)。
唑來膦酸原料、凍干及其注射液含量檢測方法1、儀器Agilent1100高效液相色譜儀、AG285電子分析天平；2、試劑唑來膦酸對照品、10％四丁基氫氧化銨水溶液、磷酸、乙腈；3、測定方法①唑來膦酸取本品適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含50μg的唑來膦酸溶液，作為供試品溶液。另取120℃下干燥至恒重的唑來膦酸對照品，同法制成對照品溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VD)測定，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，乙腈-四氫呋喃-0.05mol/L磷酸二氫銨(4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55)為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。精密量取供試品及對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積，按外標法計算即得。
②注射用唑來膦酸取本品內容物適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含50μg的唑來膦酸溶液，作為供試品溶液。另取120℃下干燥至恒重的唑來膦酸對照品，同法制成對照品溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VD)測定，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，乙腈-四氫呋喃-0.05mol/L磷酸二氫銨(4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55)為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。精密量取供試品及對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積，按外標法計算即得。
③唑來膦酸注射液精密量取本品3ml，置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取120℃干燥至恒重的唑來膦酸對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并制成每1ml約含50μg的溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2000年版二部附錄VD)測定，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，乙腈-四氫呋喃-0.05mol/L磷酸二氫銨(4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55)為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。精密量取供試品及對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積，按外標法計算即得。
權利要求
1.唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質和含量的檢驗方法以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；0.03％氫氧化四丁基銨水溶液-乙腈100∶20為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500，流動相的配制為取10％氫氧化四丁基銨水溶液0.3ml，加至100ml水中，以磷酸調節pH＝2.55；其含量測定方法為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-四氫呋喃-0.05mol/L磷酸二氫銨4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。
全文摘要
本發明公開了唑來膦酸原料、凍干及其注射液有關物質和含量的檢驗方法。以十八烷基鍵合硅膠為填充劑； 0.03％氫氧化四丁基銨水溶液－乙腈(100∶20)為流動相，檢測波長為218nm，理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500，流動相的配制為取10％氫氧化四丁基銨水溶液0.3ml，加至100ml水中，以磷酸調節pH＝2.55；其含量測定方法為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈－四氫呋喃－0.05mol/L磷酸二氫銨(4∶1∶100，磷酸調節pH＝2.55)為流動相，檢測波長為218nm。理論板數以唑來膦酸峰計算應不低于2500。它簡便、快速、穩定的有關物質和含量的檢驗方法，以便有效地控制生產質量。
文檔編號G01N30/88GK1693891SQ20051004009
公開日2005年11月9日 申請日期2005年5月16日 優先權日2005年5月16日
發明者蔡偉, 張玉斌, 曹燕鋒, 劉江華, 戚蘇明, 王喜習, 尹必喜 申請人:揚子江藥業集團有限公司