專利名稱：一種熱淋清制劑的質量檢測方法
技術領域：
本發明屬中藥成方制劑領域，具體來說涉及一種熱淋清制劑的質量檢測方法。
背景技術：
以頭花蓼制成的熱淋清制劑具有清熱解毒，利尿通淋。用于治療濕熱蘊結，小便黃赤、淋漓澀痛之癥，尿路感染、腎盂腎炎見上述證侯者，效果明顯。然而由于中藥成份比較復雜，含有許多未知成份，既能有效控制熱淋清制劑的產品質量，且操作方便的檢測方法，目前還未見報道。
發明內容
本發明的目的在于提供一種能有效控制熱淋清制劑質量，準確度高、技術先進的熱淋清制劑的質量檢測方法。
本發明的一種熱淋清制劑的質量檢測方法，取頭花蓼3333份，加10倍量水浸泡0.5小時，煎煮1.5小時，濾過，藥渣加8倍量水，煎煮1.5小時，濾過，合并兩次濾液，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.20(50□)的浸膏，取70％浸膏噴霧干燥，得噴霧粉，備用；剩余浸膏與噴霧粉沸騰制粒，干燥，過篩(20目)，加入羧甲基淀粉鈉11.4份和硬脂酸鎂1.0份混勻，壓成1000片，包薄膜衣，即得，其特征在于包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品10片，除去包衣層，精密稱定，研細，精密稱取0.3g，置于錐形瓶中，精密加入體積比為70∶4∶6的甲醇/硫酸/水的提取-水解溶液20ml，密塞，于80℃水浴回流提取2小時，放冷，用20％NaOH中和至PH4～5，轉移至50ml容量瓶中，用70％甲醇定容，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品適量，加甲醇制成每1ml含槲皮素18-22μg的對照品溶液；(3)含量測定方法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，計算樣品中槲皮素含量以控制熱淋清制劑質量。
(4)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動相，流速1.0ml/min，檢測波長360nm，柱溫25℃，理論塔板數按槲皮素峰計算應不低于3000。
本發明的熱淋清制劑的質量檢測方法，其中(2)對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品10.5mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含21.0μg的對照品溶液。
本發明的熱淋清制劑的質量檢測方法，取槲皮素對照品溶液進行UV光譜掃描，在360nm處有最大吸收，故選360nm作為檢測波長。
本發明的熱淋清制劑可以是常規的各種劑型。
本發明的方法是通過以下試驗優選出來的發明人根據“中藥新藥研究的技術要求”，試驗采用了按《中國藥典》2000版一部附錄重金屬、砷鹽檢查法，對熱淋清片十批中試樣品分別做了重金屬、砷鹽檢測，結果如下1、重金屬均小于百萬分之十。
2、砷鹽均小于百萬分之二。
根據以上的檢測結果，說明熱淋清片中重金屬、砷鹽的含量都很低，且都符合規定，因此不列入本發明的質量檢測方法。
含量測定為熱淋清制劑頭花蓼所含有效成分槲皮素的含量測定，參照頭花蓼藥材中槲皮素的含量測定方法，采用高效液相色譜法測定本品頭花蓼中槲皮素的含量。色譜條件如正文所述，槲皮素與其它組份分離度、重現性、精密度、回收率好，故采用高效液相色譜法測定本品中槲皮素的含量。
1、藥品與藥劑 甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，樣品由貴陽新天藥業股份有限公司提供，槲皮素對照品由中國生物制品鑒定所提供，批號10081-9905。
2、儀器分析條件儀器為Agilent 1100高效液相色譜儀，VWD檢測器，Agilent 1100化學工作站。
3、色譜條件用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，色譜柱Elite Hypersil C18，5μm，4.6×250mm，流動相采用甲醇-0.4％磷酸溶液(50∶50)，檢測波長360nm，柱溫為25℃，流速為1.0ml/min，理論塔板數以槲皮素峰計應不低于3000。
4、檢測波長選擇取槲皮素對照品溶液進行UV光譜掃描，在360nm處有最大吸收，故選360nm作為檢測波長。
5、對照品純度檢查采用高效液相法，以歸一化法計算測定對照品的純度。
槲皮素對照品的進樣濃度為0.21mg/ml，進樣量為10μl，純度為100％。
6、供試品溶液制備按正文含量測定方法中所述的樣品前處理方法，通過超聲提取1小時、2小時、3小時和回流提取1小時、2小時、3小時的比較證明，回流2小時能夠能得到滿意的實驗結果，又可以節省時間，提高效率，具體數據見表一。
表一 樣品前處理試驗
7、方法學考察7.1線性關系的考察精密稱取槲皮素對照品10.5mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含42.0μg的對照品溶液，分別精密吸取上述對照品溶液2ml、5ml、10ml、15ml、20ml置于20ml量瓶中，加甲醇至刻度。分別吸取上述對照品溶液10μl注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定。以槲皮素進樣量(μg)為橫坐標，相應的峰面積(A)為縱坐標，計算回歸方程為A＝3851.4C-45.446 r＝0.9999具體數據見表二表二 線性關系考察試驗
表明槲皮素進樣量在0.042～0.42μg范圍內線性關系良好。
7.2精密度試驗精密稱取槲皮素對照品10.5mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含21.0μg的對照品溶液。取此對照品溶液，重復進樣五次，每次10μl，測定槲皮素峰面積，結果RSD為0.9％，表明儀器的精密度良好。見表三。
表三 精密度試驗
7.3重現性試驗取同批(批號20030201)供試品5份，按正文含量測定方法制備供試品溶液并測定含量，有良好的重現性，結果見表四。
表四 重現性試驗
7.4穩定性試驗樣品穩定性試驗取同一份供試品溶液(批號20030201)按正文含量測定方法在不同時間分別測定峰面積，共測定6次。結果RSD為0.6％，表明供試品溶液在24h內穩定，見表五。
表五 樣品穩定性試驗
對照品穩定性試驗取同一份對照品溶液(21.0μg/ml)按正文含量測定方法在不同時間分別測定峰面積，共測定6次。結果RSD為1.4％，表明對照品溶液在24h內穩定，見表六。
表六 對照品穩定性試驗
7.5加樣回收率試驗精密稱取已知含量(4.73mg·g-1)的同一供試品(批號20030201)5份，精密加入槲皮素對照溶液(0.042mg·ml-1)5ml，按正文所述方法提取并按色譜條件進行測定，以下式計算回收率，結果見表七，說明本方法有良好的回收率。
表七 回收率實驗結果
8、供試品測定按正文含量測定項方法制備供試品和對照品溶液，分別吸取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測定峰面積，以下式計算樣品中槲皮素的含量，結果見表八。
As供試品溶液的峰面積；Ar對照品溶液的峰面積；Cs對照品濃度(mg/ml)；Ms供試品取樣量(g)； V定容體積(ml)表八 供試品測定結果
根據以上10批樣品的含量測定結果，并考慮藥材含量的波動，確定本品每片含頭花蓼以槲皮素(C15H10O7·2H2O)計，不得少于1.5mg。
具體實施例方式
實施例1(1)供試品溶液的制備取本品10片，除去包衣層，精密稱定，研細，精密稱取0.3g，置于錐形瓶中，精密加入體積比為70∶4∶6的甲醇/硫酸/水的提取-水解溶液20ml，密塞，于80℃水浴回流提取2小時，放冷，用20％NaOH中和至PH4～5，轉移至50ml容量瓶中，用70％甲醇定容，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品10.5mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含21.0μg的對照品溶液；(3)含量測定方法
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動相，流速1.0ml/min，檢測波長360nm，柱溫25℃，理論塔板數按槲皮素峰計算應不低于3000。
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，選360nm作為檢測波長，測定對照品溶液及供試品溶液的峰面積，按下式計算
As供試品溶液的峰面積；Ar對照品溶液的峰面積；Cs對照品濃度(mg/ml)；Ms供試品取樣量(g)； V定容體積(ml)重復上述步驟一次，計算出槲皮素含量為平均值為1.8mg/片。
實施例2-10質量檢測方法同1，結果見下表
權利要求
1.一種熱淋清制劑的質量檢測方法，取頭花蓼3333份，加10倍量水浸泡0.5小時，煎煮1.5小時，濾過，藥渣加8倍量水，煎煮1.5小時，濾過，合并兩次濾液，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.20、溫度為50□的浸膏，取70％浸膏噴霧干燥，得噴霧粉，備用；剩余浸膏與噴霧粉沸騰制粒，干燥，過20目篩，加入羧甲基淀粉鈉11.4份和硬脂酸鎂1.0份混勻，壓成1000片，包薄膜衣，即得，其特征在于包括以下步驟(1)供試品溶液的制備取本品10片，除去包衣層，精密稱定，研細，精密稱取0.3g，置于錐形瓶中，精密加入體積比為70∶4∶6的甲醇/硫酸/水的提取-水解溶液20ml，密塞，于80℃水浴回流提取2小時，放冷，用20％NaOH中和至PH4～5，轉移至50ml容量瓶中，用70％甲醇定容，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；(2)對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品適量，加甲醇制成每1ml含槲皮素18-22μg的對照品溶液；(3)含量測定方法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，計算樣品中槲皮素含量以控制熱淋清制劑質量。(4)色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，體積比為50∶50的甲醇-0.4％磷酸溶液為流動相，流速1.0ml/min，檢測波長360nm，柱溫25℃，理論塔板數按槲皮素峰計算應不低于3000。
2.如權利要求1所述的熱淋清制劑的質量檢測方法，其中(2)對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品10.5mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20ml至100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制成每1ml含21.0μg的對照品溶液。
3.如權利要求1或2所述的熱淋清制劑的質量檢測方法，其中每片含頭花蓼以槲皮素(C15H10O7·2H2O)計，不得少于1.5mg。
4.如權利要求3所述的熱淋清制劑的質量檢測方法，其中熱淋清制劑是常規的各種劑型。
全文摘要
本發明公開了一種熱淋清制劑的質量檢測方法，包括下述步驟供試品溶液的制備取本品10片，除去包衣層，精密稱定，研細，精密稱取0.3g，置于錐形瓶中，精密加入體積比為70∶4∶6的甲醇/硫酸/水的提取－水解溶液20ml，密塞，于80℃水浴回流提取2小時，放冷，用20％NaOH中和至pH4～5，轉移至50ml容量瓶中，用70％甲醇定容，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品適量，加甲醇制成每1ml含槲皮素18－22μg的對照品溶液；含量測定方法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，計算樣品中槲皮素含量以控制熱淋清制劑質量。本發明的方法準確度高、技術先進、操作快速簡便，能使產品質量得到更有效的控制。
文檔編號G01N30/06GK1614415SQ20041008138
公開日2005年5月11日 申請日期2004年11月29日 優先權日2004年11月29日
發明者董大倫 申請人:貴陽新天藥業股份有限公司