專利名稱：碳的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種檢測試劑，具體地說涉及一種用于檢測肝臟儲備功能的試劑，特別是碳13核素標記的利多卡因及其鹽。
背景技術：
利多卡因為局部麻醉藥及抗心律失常藥，在臨床上已經廣泛使用。近年來被作為試劑，用于肝臟儲備功能的檢測。其基本原理是，利多卡因進入體內后，在肝內經P450系統代謝生成單乙基甘氨酰二甲苯胺(monoethylglycinedixylidide，MEGX)。通過檢測血液中MEGX的含量，從而檢測肝臟儲備功能。檢測方法有熒光偏振法，高效毛細管電泳法和高效液相色譜法。上述幾種檢測方法時間長，價格昂貴，復雜的樣品處理，因此在應用上有一定的局限性。
為了克服利多卡因上述的缺陷，中國專利申請號02112477.9采用碳13核素或碳14核素取代利多卡因的四個碳原子，披露了一種碳13核素和碳14核素標記的利多卡因。由于制備碳13核素或碳14核素標記的利多卡因需要碳13核素或碳14核素標記的試劑，該試劑十分昂貴，因此，中國專利申請號02112477.9公開的技術生產成本較高，同時該技術沒有提供相關的理化數據，無法確認，工業生產具有一定困難。
發明內容
本發明需要解決的技術問題之一是公開一種碳13核素標記的利多卡因及其鹽，以克服現有技術存在的上述缺陷；本發明需要解決的技術問題是提供上述碳13核素標記的利多卡因及其鹽的制備方法。
本發明再一個需要解決的技術問題是公開所述碳13核素標記的利多卡因及其鹽的應用。
本發明的構思是這樣的發明人認為，利多卡因及其鹽在肝內經P450系統代謝首先生成MEGX與乙醛后，乙醛再經代謝生成CO2，并通過呼吸排出體外。用碳13核素標記利多卡因及其鹽分子中乙基的碳原子后，以13C呼氣質譜儀定時定量檢測呼出氣體中13CO2的量，即可判斷肝臟的儲備功能，無需對利多卡因及其鹽的四個碳原子全部進行標記，不僅可大幅度降低生產成本，而且制備更為簡單，易于工業化生產。
本發明的碳13核素標記的利多卡因為具有如下結構通式的化合物 式中，*C表示碳13核素標記部位。
所說的碳13核素標記的利多卡因的鹽包括無機鹽和有機鹽，優選鹽酸鹽、硫酸鹽、檸檬酸鹽或琥珀酸鹽中的一種。
本發明的碳13核素標記的利多卡因及其鹽的制備方法包括如下步驟(1)將溶解于有機溶劑的13C標記的乙胺溶液與含有13C標記的醋酸的有機溶劑，在催化劑的存在下反應0.1～1小時，從反應產物中收集N-13C乙基13C乙酰胺。
所說的有機溶劑優選四氫呋喃，苯，己烷.，環己烷或乙醚中的一種；所說的催化劑優選雙環已基碳二亞胺(DCC)或4-二甲基胺基吡啶(DMAP)中的一種及其混合物；其反應式如下
(2)將上述的N-13C乙基13C乙酰胺在溶劑中與LIAlH4室溫攪拌反應2～6小時，常壓蒸鎦，收集鎦液，通入HCl氣體至pH＝1～3，冷卻至-70～-30℃，收集析出的白色固體，13C二乙胺鹽酸鹽。反應式為
所說的溶劑包括四氫呋喃或乙醚中的一種；Mp225-60C，MS M+51；(3)將上述的13C二乙胺鹽酸鹽與2，6-二甲基氯代乙酰苯胺在溶劑中堿性催化劑的存在下，回流反應1～5小時，冷卻至-5～5℃，收集產物，即獲得13C利多卡因。
所說的溶劑包括苯、甲苯，己烷，環己烷或乙醚中的一種；所說的堿性催化劑包括氫氧化鈉、碳酸鉀，吡啶或三乙胺中的一種；反應式為 收率75％Mp 68-69℃，MS M+236。
(4)將上述的13C利多卡因在溶劑中以酸性物質進行成鹽，調節pH為1～3，加熱回流，采用常規的方法，收集反應產物，即獲得13C利多卡因鹽。
所說的溶劑包括乙醇、異丙醇、丙酮，四氫呋喃或乙醚中的一種及其混合物；所說的酸性物質包括HCl、H2SO4、檸檬酸或琥珀酸中的一種，反應后可獲得相應的鹽。
上述制備過程所涉及的原料均可采用市售產品。
本發明的碳13核素標記的利多卡因及其鹽可應用于肝臟儲備功能的檢測，其使用方法與常規的技術相同。13C為穩定性同位素，無放射性，因此對患者無不良反應。
本發明的特點，檢測方法簡單，不需要價格昂貴的檢測設備，檢測結果正確，不受到肝病病人常見的膽紅素異常干擾，13C為穩定性同位素，無放射性，因此對患者無不良反應，13C利多卡因及其鹽的合成方法簡便，制備成本大大低于現有技術，原料容易獲得，適合于工業化生產。
具體實施例方式
實施例1于反應瓶中，加入13C醋酸(3g，0.05mol)，THF(25ml)，DCC(10.3g，0.05mol)DMAP(0.3g)攪拌，然后于此溶液中滴加13C乙胺(2.15g，0.05mol)-THF(10ml)溶液，約需半小時，滴畢，室溫攪拌過夜，過濾，濾濃縮至干，得N-13C乙基13C乙酰胺的粗品5g；于反應瓶中，加入THF20ml及氫化鋁鋰(1.9g，0.05mol)，攪拌，慢慢加入N-13C乙基13C乙酰胺(4.35g，0.05mol)，加畢，室溫攪拌4小時，常壓蒸鎦至無鎦液滴出，于鎦液中，通入HCl氣體至pH＝1后，冷卻至-5℃，析出白色固體，過濾，濾餅真空干燥，得13C二乙胺鹽酸鹽3.85g，收率70％。
Mp225-60C，MS M+51；于反應瓶中加入2.6-二甲基氯代乙酰苯胺(9.85g，0.05mol)及苯(30ml)，混合后，加入13C二乙胺鹽酸鹽(5.5g，0.05mol)，于此反應液中滴加40％NaOH(4g.0.06mol)，滴畢。室溫攪拌15分鐘后，升溫至回流，回流3小時，冷卻至0℃，過濾，濾餅水洗，干燥，得13C利多卡因8.8g；收率75％Mp 68-69℃，MS M+236。
實施例2于反應瓶中，加入13C利多卡因5g及乙醇20ml攪拌溶解，通入HCl氣體至PH為2.5，通畢。加熱回流并加入少許活性炭脫色，過瀘，瀘液冷卻結晶。過瀘，瀘餅以少許丙酮洗滌，抽干，干燥得白色13C鹽酸利多卡因4.8g，收率83％，Mp78-90C。
實施例313C鹽酸利多卡因呼氣試撿用于肝功能評估13C鹽酸利多卡因溶于蒸餾水中，配制成0.1％濃度溶液，即每毫升含13C鹽酸利卡因1mg；將小鼠用乙醚麻醉后，于小鼠腹腔內按體重1mg/kg注射13C鹽酸利卡因水溶液，以13C呼氣質譜儀測定13CO2，檢測結果表明正常小鼠13CO2峰值為1.5-2小時，而在肝損害或被切除肝葉的小鼠試驗中13CO2峰值下降與滯后，從而表明，13C鹽酸利多卡因可應用于肝臟儲備功能的檢測。
權利要求
1.一種碳13核素標記的利多卡因及其鹽，其特征在于，所說的碳13核素標記的利多卡因為具有如下結構通式的化合物 式中，*C表示碳13核素標記部位。
2.根據權利要求1所述的碳13核素標記的利多卡因及其鹽，其特征在于，所說的的鹽包括無機鹽或有機鹽。
3.根據權利要求2所述的碳13核素標記的利多卡因及其鹽，其特征在于，所說的鹽包括酸鹽、硫酸鹽、檸檬酸鹽或琥珀酸鹽中的一種。
4.根據權利要求1、2或3所述的碳13核素標記的利多卡因及其鹽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(1)將溶解于有機溶劑的13C標記的乙胺溶液與含有13C標記的醋酸的有機溶劑，在催化劑的存在下反應，從反應產物中收集N-13C乙基13C乙酰胺；所說的催化劑為雙環已基碳二亞胺(DCC)與4-二甲胺基吡啶(DMAP)中的一種及其混合物；(2)將N-13C乙基13C乙酰胺在溶劑中與LIAlH4室溫攪拌反應，蒸鎦，收集鎦液，通入HCl氣體至pH＝1～3，冷卻，收集析出的白色固體，即13C二乙胺鹽酸鹽；(3)將13C二乙胺鹽酸鹽與2，6-二甲基氯代乙酰苯胺在溶劑中堿性催化劑的存在下，回流反應，冷卻，收集產物，即獲得13C利多卡因；所說的堿性催化劑包括氫氧化鈉、碳酸鉀、吡啶或三乙胺中的一種。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述及的有機溶劑包括四氫呋喃、苯，己烷，環己烷或乙醚中的一種。
6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(2)所述及的有機溶劑包括四氫呋喃或乙醚中的一種。
7.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(3)所述及的有機溶劑包括苯、甲苯、己烷或環己烷中的一種。
8.根據權利要求4～7任一項所述的方法，其特征在于，還包括如下步驟將上述的13C利多卡因在溶劑中與酸性物質進行反應，調節pH為1～3，加熱回流，采用常規的方法，收集反應產物，即獲得13C利多卡因鹽。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所說的溶劑包括乙醇、異丙醇、丙酮，四氫呋喃或乙醚中的一種及其混合物；所說的酸性物質包括HCl、H2SO4、檸檬酸或琥珀酸中的一種。
10.權利要求1～3任一項碳13核素標記的利多卡因及其鹽作為肝臟儲備功能檢測試劑的應用。
全文摘要
本發明公開了碳
文檔編號G01N33/534GK1490306SQ03150579
公開日2004年4月21日 申請日期2003年8月26日 優先權日2003年8月26日
發明者曹音, 曹 音 申請人:上海開聞藥業有限公司