專利名稱：基于下丘腦－垂體－腎上腺軸異常的非潰瘍性消化不良的診斷和處置的制作方法
技術領域：
本發明涉及診斷和治療患有幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)感染和不患此感染的患者的非潰瘍性消化不良(NUD)。
非潰瘍性消化不良的狀況不均一，按病候群被劃分為類蠕動不良性消化不良、類胃腸管倒流消化不良、吞氣癥和基本消化不良(Talley，N.J.和Philips，S.F.，Ann.Inter.Med.(1988)108，865-9)。NUD是胃腸病臨床治療安排的最常見原因。迄今為止為確定其病因的系統努力是失敗的。沒有表明一致的生化或生理異常，并且許多胃腸病學家將這種癥狀描述為沒有器質性基礎的機能性消化不良。
幽門螺桿菌在消化性潰瘍生成的成因中所起的作用現已被確定(Marshall，B.J.等，柳葉刀(Lancet)(1988)2，1437-42)。一些通過診斷NUD確定的病人具有幽門螺桿菌感染的證據。但是，即使當幽門螺桿菌被根除時，這些病人有許多仍舊抱怨有病狀(Fisher，R.S.和Parkman，H.P.，(1998)同上)。在這些病人中，癥狀的持續與慢性感染無關(TallyN.J.等，BMJ(1999)318，833-837)。
應力在病癥的成因中起著有力的作用長期以來受到懷疑，因此機能性消化不良的名稱也受到懷疑。
人的中心應力軸是下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA)。該軸在使有機體能夠承受物理或生理自然應力方面起重要作用。軸響應于應力而被激活，并且沒有這樣的激活有機體不能生存。在受到應力的情況下，患有阿狄森氏癥(Addison’s disease)的病人(以腎上腺皮質不足為特征)需要增加糖皮質激素的補給量。
促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH)在下丘腦的室旁核中產生，是軸的主要肽調節劑(Scott，L.V.和Dinan，T.G.，生命科學(LifeSciences)(1998)62，1985-98)。在慢性應力的情況下，室旁核中的一些神經元共同表達加壓素。在這些情況下，認為加壓素在控制軸方面發揮主導作用。兩種肽在刺激從垂體前葉釋放ACTH方面協合起作用。而這又刺激了從腎上腺皮質中產生和釋放皮質醇。一系列的負反饋環路調控軸。這些反饋環路按時限定義為立即型、中間型和延遲型。
大量與應力有關的狀況與HPA中的異常有關聯。主要抑郁癥是這些狀況的最好特征。患有主要抑郁癥的病人過度分泌皮質醇，且通常不能抑制響應地塞米松攻擊的皮質醇(Dinan T.G.，Brit.Journal ofPsychiatry(1994)21，813-29)。據報道，當對患有主抑郁癥的病人靜脈給藥CRH時，其ACTH的產出量減少。
動物研究顯示，慢性感染增加加壓素的產量，并且隨CRH的注入導致ACTH減少。這些發現說明HPA紊亂可能是由生理應激物或物理應激物導致的。
到目前為止，所研究的與HPA活性有關的唯一一種腸病癥是慢性過敏性腸綜合癥，一種以腹絞痛和大便習慣改變而沒有明顯的病狀為特征的疾病。過敏性腸綜合癥(IBS)和NUD習慣上被視為是獨立的臨床實體。病人可能同時患有IBS和NUD。Fukudo，S等(Gut(1998)42，845-9)報道說，隨CRH的注入，這樣的病人表現出增強的或擴大的ACTH應答。
EP-A 0 720 850記載并要求用于診斷NUD的體外法，該方法包括通過估計從所述的患者采取的血液成分試樣中促乳激素的濃度，鑒定患者的中央5HT 1A受體的機能障礙，該機能障礙的特征是患者對氮雜螺癸烷二酮誘導的促乳激素產生有答應，條件是當患者為有月經的雌性時，診斷在月經的卵泡期進行。
本發明的方法可用來診斷感染了幽門螺桿菌和沒有感染該類菌的病人的NUD。
優選CRH以單一劑量給藥，給藥量為100μg級。
另外，優選CRH靜脈內給藥。當CRH通過靜脈內給予病人時，給用hCRH或oCRH，hCRH是該分子的人類變體，oCRH是綿羊變體。
優選CRH為oCRH。
優選綿羊變體是因為它在人體中產生更持久的內分泌應答。
血液成分優選血漿。
ACTH應答適宜通過免疫測定法進行測定，更具體地是通過免疫放射測定法進行測定。
該測定法使用的標記試劑可通過常規方法制備或可以從合適的供應商購買。
本發明還提供進行上述方法的試劑盒，該試劑盒包括一定量的CRH，用于給予一個或多個被調查NUD的患者，該量足以引發作為CRH受體機能障礙特征的ACTH應答。
該試劑盒優選包括進行ACTH估計的必要成分/組分。
因此，本文所述的CRH/ACTH試驗對于無論對患有幽門螺桿菌感染或無患此感染的NUD都是適宜的診斷試驗。因此將理解，CRH拮抗劑在NUD的控制中將是有效的。
根據本發明的進一步的方面，提供在制造用于處置非潰瘍性消化不良的藥劑中使用CRF(1)受體拮抗劑。
優選CRF(1)受體拮抗劑選自3-苯基吡唑并[1，5-a]嘧啶和吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
另外，優選CRF(1)受體拮抗劑是4-(1，3-二甲氧基丙-2-基氨基)-2，7-二甲基-8-(2，4-二氯苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
術語CRH和CRF(促皮質激素釋放因子)可互換使用。但是，CRF僅當用作激素時應稱為CRH。在特定的情況下，CRF在內分泌系統外起作用。
本文所述的結果說明，對于僅以幽門螺桿菌根除為形式的NUD的外周應答不可能產生長期的癥狀減輕。本文所述結果在緩解NUD癥狀中強調腦和HPA。
盡管不想受到本發明的任何理論解釋束縛，但提出下面的解釋下丘腦-垂體軸和可能腦中CRH受體超敏性對于NUD的病理生理狀況是重要的。提出在生理應力通過神經遞質輸入下丘腦的情況下，以及在幽門螺桿菌的情況下，通過細胞因子的產生和室旁神經元刺激引起反應性的變化。細胞因子IL-1和IL-6是HPA的最強有力的刺激物。
將通過下面的實施例進一步說明本發明。
開始根除治療6個月后，再次檢查幽門螺桿菌呈陽性的病人。在所有病例中，都在1400小時開始內分泌檢查。檢查程序如下將18g重的套管在1330小時的時候插入前臂靜脈內，讓患者放松30分鐘，然后取出用于ACTH檢查的基線血液。此時，靜脈內給用綿羊CRH100μg，并在15、30、45、60、90和120分鐘時采集用于ACTH測定的另外的血液。
使用雙位未提取免疫放射測定法(two-site unextractedimmunoradiometric assay)，用Nichols Institute(San Juan Capistrano，CA)供應的市售試劑盒，測定血漿ACTH。測定的靈敏度為5ng/l。測定實驗內和測定實驗間的偏差系數分別為3％和6％。
從附圖
可以看出，相對于健康志愿者，患有NUD的病人顯示極大增強的ACTH應答。這種增強在患有幽門螺桿菌感染和無此感染的病人中均可看到。另外，根除治療后，顯而易見的是CRH/ACTH增強還持續。該發現可有助于解釋為何如此眾多的病人在根除治療后繼續抱怨癥狀。
權利要求
1.一種用于診斷疑患有非潰瘍性消化不良(NUD)的患者的NUD的體外方法，所述的方法包括通過估計相對于對照從所述的患者獲得的血液或血液成分試樣中的促腎上腺皮質激素(ACTH)濃度，鑒定所述患者的促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH)受體的機能障礙，所述的機能障礙的特征是患者對CRH誘導的ACTH產生有應答。
2.根據權利要求1的方法，其中CRH以單一劑量、100μg級的給用量給藥。
3.根據權利要求1或2的方法，其中所述的血液成分是血漿。
4.根據權利要求1的方法，其基本上如說明書的描述和例示。
5.一種用于進行根據權利要求1-4的任一項的方法的試劑盒，所述的試劑盒包括一定量的CRH，用于給予一個或多個被調查NUD的患者，該量足以引發作為CRH受體機能障礙特征的ACTH應答。
6.CRF(1)受體拮抗劑在制造用于處置非潰瘍性消化不良的藥劑中的應用。
7.根據權利要求6的應用，其中CRF(1)受體拮抗劑選自3-苯基吡唑并[1，5-a]嘧啶和吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
8.根據權利要求6或7的應用，其中CRF(1)受體拮抗劑為4-(1，3-二甲氧基丙-2-基氨基)-2，7-二甲基-8-(2，4-二氯苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
9.根據權利要求6的應用，其基本上如說明書所述。
全文摘要
用于診斷疑患有非潰瘍性消化不良(NUD)的患者的NUD的一種體外方法和一種試劑盒，所述的方法包括通過估計相對于對照從所述的患者獲得的血液或血液成分試樣中的促腎上腺皮質激素(ACTH)濃度，鑒定所述患者的促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH)受體的機能障礙，所述的機能障礙的特征是患者對CRH誘導的ACTH產生有應答。該方法可用來診斷感染了幽門螺桿菌的病人和沒有感染的病人的NUD。
文檔編號G01N33/74GK1446316SQ01813862
公開日2003年10月1日 申請日期2001年7月30日 優先權日2000年8月2日
發明者蒂莫西·杰勒德·迪南, 保羅·威廉·拿破侖·基林 申請人:瑪洛普有限公司