專利名稱：超靈敏毛細管電泳在線化學發光檢測儀的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種超靈敏毛細管電泳在線化學發光檢測儀。
背景技術：
在單分子水平進行超靈敏分析，在諸如化學分析、DNA測序、分子動力學、納米材料及疾病早期診斷等許多研究領域都有著廣闊的應用前景，已成為國際上研究的熱點領域。目前，激光誘導熒光(LIF)以其靈敏度高、應用范圍廣成為超高靈敏分析或單分子檢測的主要方法。然而激光誘導熒光除了價格昂貴外，對非熒光物質需采用柱前或柱后衍生引入熒光團，且該法也易受拉曼散射、瑞利散射和溶劑噪音的影響和限制。毛細管電泳是近些年來發展最迅速的分離技術之一，具有分離效率高、速度快、樣品耗量少等優點，其不足在于檢測能力不高。化學發光儀器設備簡單、無須外加光源、背景低，可提供與激光誘導熒光相當的靈敏度。化學發光的主要缺點是選擇性較差。
對于毛細管電泳分離在線化學發光檢測，Hara等人使用的混合模式是將化學發光試劑預先混合，然后從柱后加入；此外，高壓電源的陰極置于檢測區域后的陰極儲液槽中。該設計的缺點是易產生渦流擴散導致分離效率(柱效)低，且結果的重現性也不好。Zare研究小組將毛細管的陰極末端1-3cm聚酰亞胺涂層燒去，浸入含有電泳緩沖液和發光試劑的儲液槽中，在垂直方向上用光導纖維將信號傳遞到檢測器中。這種設計的優點是可降低渦流擴散的影響，缺點是檢測區域較大易導致峰變寬，同時用光導纖維搜集光信號有損失，降低了檢測靈敏度。
發明內容
本實用新型所要解決的問題是克服傳統儀器檢測靈敏度較低的缺點，進而提供一種超靈敏毛細管電泳分離在線化學檢測儀。
本實用新型提供的技術方案是一種超靈敏毛細管電泳在線化學發光檢測儀，包括與高壓電源陽級相通的貯液容器、檢測器和反應器通槽以及穿過反應器通槽的電泳毛細管和一端插入反應器通槽的反應毛細管，其特殊之處是電泳毛細管一端設在貯液容器內，另一端刻蝕后插入反應毛細管中，反應器通槽上設有通入通槽的化學發光試劑加入口，反應毛細管上設有除去毛細管涂層的檢測窗，檢測窗位于檢測器光電倍增管前。
上述檢測器的反應器通槽槽內可與高壓電源陰極相接通。
上述反應毛細管呈傾斜設置，入口端高、出口端低。
本實用新型采用以上結構，使用時將兩種化學發光試劑之一(如，魯米諾)作為電泳介質組份之一從柱前加入，另一種試劑從反應器通槽的試劑加入口加入；同時用光電倍增管檢測器直接從檢測窗檢測光信號，因而本實用新型的檢測靈敏度高，且制作簡單、成本低、操作簡便。另外，本實用新型將陰極從位于檢測區域后的陰極儲液槽中提至位于檢測區域前的反應器通槽(通常所說的四通)中，這樣反應毛細管就不再是電泳流路的一部分，電泳過程就僅限于分離毛細管即電泳毛細管中。反應毛細管中的氣泡以及發光試劑與分離毛細管中流出物的混合都不會影響電流的穩定性。這種獨特的檢測接口設計，極大地克服了傳統毛細管電泳化學發光檢測儀中電泳電流和基線不穩的缺點，進一步提高了檢測靈敏度。實驗證明，本實用新型性能優良，具有噪音低、靈敏度高的特點。可用于金屬離子等物質的超靈敏或單分子水平檢測及疾病早期分子診斷研究以及其它應用領域。
附圖為本實用新型的結構示意圖。
具體實施方式
參見附圖，本實用新型包括貯液容器2、檢測器9和反應器通槽4以及穿過反應器通槽4的電泳毛細管3和一端插入反應器通槽4內的反應毛細管7，貯液容器2與高壓電源1的陽級相接通，反應器通槽4上設有通入通槽4的化學發光試劑加入口5，反應毛細管7上設有除去毛細管涂層的檢測窗8，檢測窗8位于檢測器光電倍增管9前，電泳毛細管3一端設在貯液容器2內，另一端刻蝕后插入反應毛細管7中，其尾端置于反應毛細管7上檢測窗9中間位置，兩根毛細管3、7通過四通即反應器通槽4固定，分離電壓由高壓電源1提供，并通過兩電極構成回路組合成一個整體。
上述檢測儀的反應器通槽4槽內可與高壓電源1的陰極6相接通。
為了讓化學發光試劑順利通過反應毛細管7，可將上述反應毛細管7呈傾斜設置，將反應毛細管7的出口端與入口端相比向下傾斜2cm。
權利要求1.一種超靈敏毛細管電泳在線化學發光檢測儀，包括與高壓電源陽級相通的貯液容器、檢測器和反應器通槽以及穿過反應器通槽的電泳毛細管和一端插入反應器通槽的反應毛細管，其特征是電泳毛細管一端設在貯液容器內，另一端刻蝕后插入反應毛細管中，反應器通槽上設有通入通槽的化學發光試劑加入口，反應毛細管上設有除去毛細管涂層的檢測窗，檢測窗位于檢測器光電倍增管前。
2.根據權利要求1所述的檢測儀，其特征是反應器通槽槽內與高壓電源陰極相接通。
3.根據權利要求1或2所述的檢測儀，其特征是反應毛細管呈傾斜設置。
專利摘要本實用新型涉及一種超靈敏毛細管電泳在線化學發光檢測儀,包括與高壓電源陽級相通的貯液容器、檢測器和反應器通槽以及穿過反應器通槽的電泳毛細管和一端插入反應器通槽的反應毛細管,其特殊之處是電泳毛細管一端設在貯液容器內,另一端刻蝕后插入反應毛細管中,反應器通槽上設有通入通槽的化學發光試劑加入口,反應毛細管上設有除去毛細管涂層的檢測窗,檢測窗位于檢測器光電倍增管前。本實用新型的檢測靈敏度高,且制作簡單、成本低、操作簡便。實驗證明,本實用新型性能優良,具有噪音低、靈敏度高的特點。可用于金屬離子等物質的超靈敏或單分子水平檢測及疾病早期分子診斷研究以及其它應用領域。
文檔編號G01N27/447GK2493931SQ0125179
公開日2002年5月29日 申請日期2001年9月6日 優先權日2001年9月6日
發明者劉彥明, 劉二寶, 張穎, 黃波, 程介克 申請人:武漢大學