專利名稱：尿碘快速定量檢測試劑盒及尿碘檢測方法
技術領域：
本發明屬于檢測試劑類，具體地屬于測定尿中碘含量的檢測試劑及檢測方法。
背景技術：
尿碘水平是評價人體碘營養狀況的重要指標。通過檢測尿碘含量可以診斷人體是否缺碘。
尿中碘含量甚微，只有百萬分之零點幾；尿液成分復雜，干擾碘測定的物質很多。因此，測定尿碘一般采用先排除干擾物質，然后利用碘催化幾種化學反應的性質，間接測定尿碘。
德國默克公司1998年提出了尿碘半定量檢測試劑盒，該試劑盒采用樹脂過濾尿樣，將干擾碘測定的有機物吸附在樹脂上，取濾液進行測定。測定方法采用碘催化四甲基聯苯二胺與雙氧水的反應，根據雙氧水將四甲基聯苯二胺氧化成四甲基聯苯二醌顯現黃色，比較黃色的深淺程度來半定量判斷尿碘含碘范圍，檢測分為＜100μg/L、100-300μg/L和＞300μg/L三檔。
發明內容
本發明的目的是根據上述現狀況，旨在提供一種能快速、準確檢測出尿中碘含量的尿碘快速定量檢測試劑盒及尿碘檢測方法。
本發明目的的實現方式為，尿碘快速定量檢測試劑盒，試劑盒由以下主要試劑成分組成，(1)消解液由過氧化酰氯、次氯酸鈉、二氧化氯復合組成或其中的單一成分組成，其總有效氯含量(以Cl2計)在0.3～1.2mol./L，(2)解析劑，為脲溶液，其濃度以脲計，為0.1～1mol/L，(3)中和劑硫酸、鹽酸或磷酸溶液，其酸度以氫離子濃度，計為1～10mol/L，
(4)還原劑由三氧化二砷溶于酸性溶液中制備成的亞砷酸溶液，其含量以三氯化二砷計，為1×10-3～0.5mol/L，(5)指示劑Ferroin(亞鐵靈)溶液，其濃度以Ferroin計，為5.0×10-3～1.0×10-2mol/L，(6)氧化劑硫酸鈰銨或硫酸鈰溶液，含量為5×10-4～5×10-2mol/L。
尿碘快速定量檢測試劑盒檢測尿碘的方法，具體步驟為(1)消解 準確移取50、100、200、300和400μg/L的系列碘標準溶液和尿樣各0.1-1ml于試管中，各加0.2-2ml消解液，室溫靜置5分鐘后劇烈振搖試管多次，致使反應產生的氣體(主要為N2、O2和少量Cl2)排盡為止，消解全過程約需10-15分鐘；(2)解析 每管加入0.2-2ml ml解析劑，室溫靜置2分鐘后劇烈振搖試管多次，排盡反應產生的氣體，全過程不得少于10分鐘；(3)中和 每管加入0.2-2ml中和劑，劇烈振搖試管多次，排盡反應產生的氣體，全過程不得少于10分鐘；(4)將處理好的樣品在測定處放置10分鐘，待溫度平衡后每管加入0.2-2ml還原劑，搖勻；(5)測定 每管加入0.2-2ml指示劑，搖勻，選定一管，一手用加樣器快速加入0.2-2ml氧化劑，另一手同時啟動秒表計時，并立即取出該試管搖勻，此時試液變為藍色，隨著反應的進行，試液將從藍色變為藍紫色，最后變為紅色，當試液變為藍紫色且剛出現紅色(突變點)時停止秒表，記錄反應時間(秒)，重復以上操作，測定并記錄其余樣品管反應時間；(6)尿碘含量的計算采用直線回歸方程法計算尿碘含量，因反應時間S(秒)的對數值lnS或lgS與碘濃度C(μg/L)的對數值lnC或lgC成線性關系，按雙回歸統計方法求出標準曲線的回歸方程，lnC＝a+blnS或lgC＝a+blgS。其中a，b分別是曲線的截距和斜率，為常數，由回歸統計方法求得，其在不同溫度下為不同的常數，將樣品管的反應時間(秒)代入標準曲線的回歸方程，計算出樣品碘含量(μg/L)。
本發明用消解液(過氧化酰氯、次氯酸鈉、二氧化氯或其中的混合物)在試管內分解尿中有機物來排除干擾物質；再通過解析劑分解過量的消解液和調節酸度；通過中和劑來調解酸度，并進一步分解殘存的消解液；然后通過碘催化亞砷酸與硫酸鈰反應，使用指示劑(Ferroin)指示反應終點，記錄反應從開始到終點所需要的時間(秒)。
本發明在檢測中，先對碘標準溶液、尿樣進行消解、解析、中和的前處理過程，這些過程建議在室外通風處或通風櫥中進行，以避免刺激性氣體的吸入。將處理好的樣品在測定處放置10分鐘，待溫度平衡后，每管加入0.2-2ml還原劑，搖勻。
測定時，每管加入0.2-2ml指示劑，搖勻。因指示劑在溶液中時間過長易鈍化，一次加入的管數不要過多，以20管為宜。準備好秒表、記錄本和一張白紙，以下進行單管操作。選定一管，一手用加樣器快速加入0.2-2ml氧化劑，另一手同時啟動秒表計時，并立即取出該試管搖勻，試液變為藍色。以白紙為背景，觀察試管內顏色的變化。隨著反應的進行，試液將從藍色變為藍紫色，最后變為紅色。當試液變為藍紫色且剛出現紅色(突變點)時停止秒表，記錄反應時間(秒)。突變點的確定根據操作者的觀察習慣，只要一致即可。
尿碘含量的計算，采用直線回歸方程法計算尿碘含量。因反應時間S(秒)的數值lnS或lgS與碘濃度C(μg/L)的對數值lnC或lgC成線性關系，將標準溶液濃度的對數對應其反應時間的對數輸入函數計算器，按雙回歸統計方法求出標準曲線的回歸方程，lnC＝a+blnS或lgC＝a+blgS。式中a、b分別是曲線的截距和斜率，在不同溫度下為不同的常數。將樣品管的反應時間(秒)代入標準曲線的回歸方程，計算樣品碘含量(μg/L)。本試劑盒靈敏度為5μg/l。
本發明檢測過程可以簡化，解析劑和中和劑可以選擇性加入，即碘標準溶液、尿樣經消解后，先加入解析劑或中和劑，再加還原劑進行還原。中和劑、還原劑、指示劑可預先三者或其中二者混合后加入，同時進行中和、還原、指示過程或其中兩過程。
具體實施例方式
以下舉出
具體實施例方式試劑成分及含量消解液有效氯含量為0.6mol/l；解析劑脲含量為0.25mol/l；中和劑硫酸濃度為2.5mol/L；還原劑三氧化二砷含量為6.0×10-2mol/L；指示劑Ferroin含量為3.6×10-2mol/L；氧化劑硫酸鈰銨的含量為7.0×10-3mol/L。
檢測結果按本發明的檢測方法進行檢測。其中，標準溶液和尿樣各取0.2ml，每管其他6種試劑的用量均為0.5ml，在室溫17℃下測得一組數據如下標準及樣品(μg/L) 50 100 200 300400 樣品1 樣品2反應時間(S)案78.03 50.91 31.43 25.24 20. 45.96 32.32用函數計算器求得標準曲線的回歸方程為lnc＝10.759-1.571lns將樣品1和樣品2反應時間代入回歸方程，得出樣品l的碘含量為115.1μg/L，樣品2的碘含量為200.1μg/L。
權利要求
1.尿碘快速定量檢測試劑盒，其特征在于試劑盒由以下主要試劑成分組成，(1)消解液由過氧化酰氯、次氯酸鈉、二氧化氯復合組成或其中的單一成分組成，其總有效氯含量(以Cl2計)在0.3～1.2mol./L，(2)解析劑，為脲溶液，其濃度以脲計，為0.1～1mol/L，(3)中和劑硫酸、鹽酸或磷酸溶液，其酸度以氫離子濃度，計為1～10mol/L，(4)還原劑由三氧化二砷溶于酸性溶液中制備成的亞砷酸溶液，其含量以三氯化二砷計為1×10-3～0.5mol/L，(5)指示劑Ferroin(亞鐵靈)溶液，其濃度以Ferroin計，為5.0×10-3～1.0×10-2mol/L，(6)氧化劑硫酸鈰銨或硫酸鈰溶液，含量為5×10-4～5×10-2mol/L。
2.尿碘快速定量檢測試劑盒檢測尿碘的方法，其特征在于具體步驟為(1)消解 準確移取50、100、200、300和400μg/L的系列碘標準溶液和尿樣各0.1-1ml于試管中，各加0.2-2ml消解液，室溫靜置5分鐘后劇烈振搖試管多次，致使反應產生的氣體(主要為N2、O2和少量Cl2)排盡為止，消解全過程約需10-15分鐘，(2)解析 每管加入0.2-2ml ml解析劑，室溫靜置2分鐘后劇烈振搖試管多次，排盡反應產生的氣體，全過程不得少于10分鐘，(3)中和 每管加入0.2-2ml中和劑，劇烈振搖試管多次，排盡反應產生的氣體，全過程不得少于10分鐘(4)將處理好的樣品在測定處放置10分鐘，待溫度平衡后每管加入0.2-2ml還原劑，搖勻，(5)測定 每管加入0.2-2ml指示劑，搖勻，選定一管，一手用加樣器快速加入0.2-2ml氧化劑，另一手同時啟動秒表計時，并立即取出該試管搖勻，此時試液變為藍色，隨著反應的進行，試液將從藍色變為藍紫色，最后變為紅色，當試液變為藍紫色且剛出現紅色(突變點)時停止秒表，記錄反應時間(秒)，重復以上操作，測定并記錄其余樣品管的反應時間，(6)尿碘含量的計算采用直線回歸方程法計算尿碘含量，因反應時間S(秒)的對數值lnS或lgS與碘濃度C(μg/L)的對數值lnC或lgC成線性關系，按雙回歸統計方法求出標準曲線的回歸方程，lnC＝a+blnS 或 lgC＝a+blgS。其中a，b分別是曲線的截距和斜率，為常數，由回歸統計方法求得，其在不同溫度下為不同的常數，將樣品管的反應時間(秒)代入標準曲線的回歸方程，計算出樣品碘含量(μg/L)。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于碘標準溶液、尿樣經消解后，加入解析劑或者中和劑，再加還原劑進行還原。
4.根據權利要求2所述的方法，中和劑、還原劑、指示劑預先三者或其中二者混合后加入，同時進行中和、還原、指示過程或其中兩過程。
全文摘要
尿碘快速定量檢測試劑盒及尿碘檢測方法,試劑盒由消解液、解析劑、中和劑、還原劑、指示劑、氧化劑和碘系列標準溶液組成。檢測時先用由過氧化酰氯、次氯酸鈉、二氧化氯按一定比例組成的消解液在常溫下消解尿樣,分解尿中干擾碘測定的物質,再使用脲解析劑和酸中和劑分解殘余的消解液和調節酸度,然后通過碘催化還原劑(亞砷酸)與氧化劑(硫酸鈰或硫酸鈰銨)反應,選用指示劑(Ferroin亞鐵靈)指示反應終點,采用秒表記錄反應時間。因反應時間(S)的對數值與碘含量(C)的對數值成線形定量關系,即lnC=a+blnS或lgC=a+blgS,由此來計算尿碘含量。本試劑盒檢測快速、準確、靈敏度高
文檔編號G01N31/22GK1348097SQ0113368
公開日2002年5月8日 申請日期2001年11月16日 優先權日2001年11月16日
發明者劉列鈞 申請人:劉列鈞