一株地衣芽孢桿菌及其應用的制作方法

專利名稱：：一株地衣芽孢桿菌及其應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及微生物采油領域，具體涉及一株地衣芽孢桿菌及其在采油工程中的應用。
背景技術：
：石油是一種不可再生能源，為了有效地利用石油資源，世界各國正在尋求能夠提高采收率的高效方法，以開采那些滯留于地層用常規采油方法難以開采的原油。自上世紀80年代開始，很多國家開展了用微生物方法提高原油采收率技術的研究，經過二十多年的努力，該技術取得了極大進展。大慶油田聚合物驅通過國家"八五"、"九五"重點科技攻關，取得了突破性的進展，已由先導性礦場試驗進入到工業性應用階段，采收率比水驅提高10%左右，年產量達1000萬噸以上。截止2007年底，聚合物工業區塊43個，動用面積達365.97Km2，動用地質儲量5.95億噸，成為大慶油田延長穩產期的重大技術措施。盡管如此，聚合物驅后油層中仍有近一半的原油未被采出。為解決上述問題，研究人員提出了聚合物驅后利用微生物進一步提高采收率的探索研究，以便最大限度地采出聚合物驅后的剩余油，進一步增加油田的可采儲量，提高油田的最終采收率。眾所周知，當聚合物經過儲層時，一部分被吸附和滯留在巖石孔隙及表面上，據資料報道，每立方英尺儲層滯留的聚合物達22.7-45.4公斤。將微生物注入含有聚合物的油層，微生物可以在地下代謝消耗聚合物，并在地下形成一個外源的微生物群落。因此，在聚合物驅的油層注入微生物有二個優點，一是微生物分解聚合物的過程可以有效地清除堵塞油的聚合物，二是注入利用聚合物的微生物后，由于微生物的生長和代謝過程中可產生有機酸、活性物質和提高原油酸值等有利于驅油的物質，并可釋放原油增加產量。因此，本項目的特點是微生物利用了油藏中的聚合物進行繁殖，并產生驅油的物質以達到提高采收率的目的。經過查新檢索和搜集資料，美國專利US4450908("降低聚合物驅生物降解的工藝")介紹了在生物聚合物驅后注入各種微生物，其缺陷是注入微生物的流度控制較難。另外一個是Phillips石油公司在俄克拉荷馬州Osage縣NorthBurbank開發區進行了微生物提高地層滲透率的先導性試驗，該油田井底溫度為45。C。選擇這個油田的原因之一是該油田80年代曾成功地實施過聚丙烯酰胺/檸檬酸聚合物處理，其增產量為9%。Pillips石油公司的微生物改善原油生產專利工藝是利用油層內本源微生物連續注入營養劑使其激活，但其結果沒有報道(Slowingproductiondeclineandextendingtheeconomiclifeofanoilfield:newMEORtechnology.BrownLR，VadieAA.SPE59306)。國內聚合物驅后利用微生物驅礦場試驗的實例僅為大港油田1995年10月至1999年3月期間在港西四區3注7采的聚合物驅后的井組進行了微生物驅的先導性礦場試驗，即先注入Micro-Bia菌種BB后再注入國產菌(大港油田微生物驅油探索研究項目進展，劉金峰，大港油田集團責任公司，1997.8)。分析國內外的調研資料，發現微生物采油技術從1926年至今已經過半個多世紀的發展。但是，聚合驅后利用微生物/化學驅進一步提高采收率探索研究仍然是比較尖端的前沿技術，無論室內研究還是現場試驗，僅僅是進行初步的探索，還沒有研究規律和可遵循的方法。
發明內容本發明的目的是提供一株可利用聚合物驅后的稠油以提高原油采收率的地衣芽孢桿菌。本發明所提供的地衣芽孢桿菌菌株是(&"W"7ic力e7i/b/7w's)U1-3，該菌株已于2008年06月06日保藏于位于中國北京朝陽區大屯路的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.2437。地衣芽孢桿菌(5aci7hs7ic/e"http://anw\s)U1-3CGMCCNo.2437是革蘭氏陽性桿菌，細胞直徑^1陶，形成芽孢，芽孢不膨大，且非圓形；其菌落呈乳白色，直徑0.6-1.5mm;該菌在兼性厭氧條件下生長，生長溫度范圍45-50°C，最適生長溫度45°C;生長酸堿度范圍pH=5-9，最適p^7.2;部分生化特性如表l所示表l地衣芽孢桿菌(5a"L"s7ic力e/^'/br肌i)U1-3CGMCCNo.2437的部分生化特性<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>注"+"表示反應陽性；"-"表示反應陰性。含有地衣芽孢桿菌(5ac_z7/M乃'c力e/n'/br/w'5)Ul-3CGMCCNo.2437的菌劑也屬于本發明的保護范圍。所述菌劑含有地衣芽孢桿菌(Sac77JMh'c力e/^'/oraw'5)Ul-3CGMCCNo.2437和營養基，所述營養基由液體石蠟O.5%-2%，NaCl0.3%-7%，NH4C10.3%-1%，MgS。40.02-0.05%,KH鳳0.2%-0.8%，Na2HP040.4-1.4%,Na砂TA0.002%-0.0063%，酵母粉0.01%-0.08%，CaCl20.001%-0.007%。所述地衣芽孢桿菌(Ba""ush'cAe/7y/br則's)Ul-3CGMCCNo.2437和營養基重量份數比為1-10:100。特別的，所述菌劑中的營養基為水溶液，pH5.0-9.0。本發明的另一目的是將地衣芽孢桿菌(&"77"s"c力e/^'/b/7h^)Ul-3CGMCCNo.2437應用于采油工程領域中。具體的應用是地衣芽孢桿菌(Zfeci"ws力'c力e"i/br歷i5)Ul-3CGMCCNo.2437菌液可于聚合物驅、水驅后直接注入進行生物驅油；或在聚合物、水驅后直接注入地衣芽孢桿菌(Sa"77M72'c力OT2'/arai"Ul-3CGMCCNo.2437菌液，并用聚合物保護段塞進行生物驅油；或在聚合物、水驅后，直接注入地衣芽孢桿菌(feci〃"sJic力e/H'/b/7W's)U1-3CGMCCNo.2437菌液，并與化學驅相結合，再用聚合物保護段塞進行生物驅油。此外，地衣芽孢桿菌(萬aci"M乃'c力e"i/br/w、)Ul-3CGMCCNo.2437在采油工程領域中稠油降粘的應用也屬于本發明的保護范圍。本發明提供了地衣芽孢桿菌(^3w77m"'c力e/w'/biT邁is)Ul-3CGMCCNo.2437。該菌是從大慶采油廠聚合物驅塊取樣，經多次搖床實驗，平板劃線分離，再對菌種進行性能評價從中優選出的可利用聚合物和原油的菌種。該菌應用于生物驅油的原理為該菌能在聚合物和原油存在的條件下生長繁殖，并以原油和聚合物為生長的能源和碳源，同時利用細菌的自我復制和代謝的有機酸、有機溶劑、表面活性劑等活性物質改變原油的性質，增加原油產量。通過模擬在油層厭氧有聚合物和原油存在的條件下，對該菌種進行了18項分析評價實驗，實驗結果表明1)該菌種能利用聚合物和原油為碳源生長繁殖，并在油藏條件下生長良好；2)通過對該菌種發酵液的界面張力、發酵液有機酸含量等性能進行評價，確定該菌種能氧化降解原油和聚合物，具有產酸和產表面活性劑的能力，并使其粘度下降，經該菌種作用后原油性質發生了變化，色譜分析結果證明輕組份增加，重組份相對減少，￡(:21/1:(:22比值增加了32.i%，cvk:22/C28+C29比值增加了17.6%，油水間的界面張力由空白樣的35.38rnN/m降至8.14mN/m，菌種代謝的有機酸含量由300mg/L上升到1725mg/L，菌種作用后原油的酸值由0.015mg(K0H)/g增加到0.243mg(K0H)/g，酸值提高了15.2倍，含蠟量(降低了39.2%)、含膠量(降低了1.17%)、凝固點均下降(降低了34.15%)，恩氏蒸餾初流點降低了8(TC;3)用牛頓指數、粘度變化量、提高采收率指數評價了該菌種的特性，結果表明該菌種改變了原油性質，特別是有效地改變了原油的流動性能，使菌種作用后的原油的性質移向牛頓膠體，粘度變化量參數較高，相對的提高采收率指數也較高，可以認為該菌種利用原油的性能較好；4)為綜合評價該菌種適應油層的特性，還開展了與油層本源菌的兼容、pH值及毒性實驗，結果該菌種在聚合物存在的條件下，活菌數達1(T"個/mL，并將聚合物的粘度由18.6mPas降至1.10mPas;5)模型驅油實驗結果表明，在聚合物驅后用該菌驅油提高釆收率幅度達3-5%(OOIP)，在聚合物驅后用該菌驅加聚合物保護段塞驅油提高采收率幅度約達7%(OOIP)，而利用該菌產生的有機酸和表面活性劑與化學表面活性劑一堿復配的方法，可以獲得較低的界面張力，因此利用微生物驅和化學驅相結合的方法為探索聚合物驅后提高采收率提出了一條新途徑，并通過物理模擬實驗進一步驗證聚合物驅后利用微生物與化學驅結合進一步提高采收率的幅度，物理模擬實驗結果表明聚合物驅后采用適宜的微生物驅油可以達到提高采收率的目的，在聚合物驅后利用該菌與化學驅相結合的方法驅油提高采收率幅度可達6-13%(00IP)，模型實驗表現出較好的重復性；6)該菌種的擴大發酵實驗結果證明了該菌種能達到設計的生產指標，能保證該菌種的批量生產。上述實驗結果表明該菌株可廣泛應用于采油工程領域特別是微生物強化采油領域，適合大面積推廣和應用。下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細說明。圖1A為地衣芽孢桿菌(萬a"7化sh'c力e;n'/br/w's)U1-3CGMCCNo.2437的電鏡圖片圖1B為地衣芽孢桿菌(Sac/〃"sh'cAe/3//araw's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后的原油色譜圖圖1為地衣芽孢桿菌("3"77m7ic力6y7/Zb/7w's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油中正烷烴碳數的分布情況圖2為地衣芽孢桿菌(^sci"〃s力'c力朋j'/br則's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油凝固點的變化情況圖2A為地衣芽孢桿菌(&cj'W"sh'c力eyn'/araw's)m-3CGMCCNo.2437作用前、后原油各餾份油含量變化情況的恩氏蒸餾實驗結果圖2B為地衣芽孢桿菌(&c/"ush'c/e/n'/br/w's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油的飽和烴、芳烴色質分析結果圖3為地衣芽孢桿菌(^scj77ws7/c力e/n'/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油的表觀粘度隨剪切速率的變化情況圖3A為地衣芽孢桿菌(&cj77〃sh'c力e77/Zb/7zu's)Ul-3CGMCCNo.2437在上述不同碳源條件下的菌濃度曲線圖3B為地衣芽孢桿菌(^acj77"sh'c力e/H'/arau's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后對聚合物粘度的影響圖4為將地衣芽孢桿菌(Ascj77〃s7ic力e/n'/b2^^)U1-3CGMCCNo.2437注入人造膠結巖心模型前、后驅油實驗的原油的流變曲線圖圖4A為地衣芽孢桿菌(^fec/J7ws^c/e/^'/or肌;s)U1-3CGMCCNo.2437的聚合物驅后微生物的驅油效果圖具體實施例方式下述實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法，所有百分比濃度均為質量百分比濃度，如無特殊說明，水指蒸餾水或自來水。實施例1、地衣芽孢桿菌(萬a"77wsh'c/e/w'/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437的篩選、培養及保藏細菌富集培養基K2HP040.卜O.5%，NaH2P040.1-0.5%，(NH4)2S040.05-0.2%，MgS04*7H200.01-0.5%,FeCl20.001-0,01%，CaCl20.001-0.01%，酵母浸粉0.02-0.2%，原油1-10%，聚合物(分子量1500萬)0.05-0.l%;pH6.8-7.5121°C，滅菌15-20min。45°C120rpm搖床培養5-7天。油平板培養基K2HP040.1-0.5%，KH2P040.l-O.5%，,030.1-0.2%，MgS04*7H200.01-0.1%,FeS040.001-0.01%，CaCl20.001-0.01%，ZnS040.01-0.02%，CuS04,0.0005-0.001%,尿素0.01-0.1%，酵母浸粉0.02-0.2%，原油1-10%，聚合物(分子量1500萬)0.05-0.1%，瓊脂1.5-2%，pH6.8-7.5，121°C，滅菌15-20min。斜面培養基蛋白胨1%，牛肉膏0.3%，氧化鈉0.5%，其余為水，pH7.2。所要篩選的菌種不僅必須適應油藏的溫度、壓力、PH、礦化度和厭養等環境條件，還必須具有突出的降解聚合物和利用原油的能力，用下述方法對地衣芽孢桿菌(&^77ws7i'c力e/2y/araw's)Ul-3CGMCCNo.2437進行篩選、培養及保藏，具體方法包括以下步驟1、菌株的篩選從大慶油田的各采油廠聚合物驅塊取樣256個，用淘汰等方法測定了菌種利用原油及聚合物的能力和油層水中本源菌兼容等特性，最后優化出能在油藏、聚合物溶液和原油存在的條件下存活、生長繁殖，并可代謝產生有機酸、活性物質、降解原油以提高采收率的菌株，具體方法為先用富集培養基進行富集培養，在45'C下培養7天，然后利用微生物能夠乳化原油的特性，將富集培養物用劃線分離的方法接種于油平板上，在45'C下置于400型厭氧箱中培養3-5天，然后觀察菌落的形態，挑選溶油(具有排油活性)的單菌落做進一步的研究，結果經300多次搖床實驗，平板劃線后初步分離出142株菌，然后將從油平板上挑選的單菌落接種于斜面培養基上，在45。C下置于瑞士conc印t400型厭氧培養箱中培養3-5天，篩選出目的菌株，均屬兼性厭氧菌。其中一株命名為Ul-3，經鑒定，其16SrDNA具有序列表中序列1的核苷酸序列，證明該菌株為地衣芽孢桿菌菌株(5aciLwsh'c力e/n'/or歷is)，是革蘭氏陽性桿菌，電鏡觀察結果見圖1A，細胞直徑《lMm，形成芽孢，芽孢不膨大，且非圓形；其菌落呈乳白色，直徑0.6-1.5nm;該菌在兼性厭氧條件下生長，生長溫度范圍45-50°C，最適生長溫度45°C;生長酸堿度范圍pH=5-9，最適pH4.7;部分生化特性如表l所示。2、地衣芽孢桿菌(5acj77wh'c力e/^'/or肌's)U1-3CGMCCNo.2437的培養及保藏地衣芽孢桿菌(5sw7^s7ic力ew'/br肌's)U卜3的搖瓶培養基與富集培養基相同，培養條件為在45"C、150rpm下振蕩培養7-15天。在搖床培養中可采用兩種方法，將裝有培養基的三角瓶在無菌間制備后，一種是在搖床振蕩培養觀察細菌的生長情況與乳化原油的程度，另一種是將培養液放入厭氧培養箱中每天定時用手振蕩讓細菌與原油充分接觸，同時觀察細菌作用原油和發酵液的顏色變化情況。結果該菌種能在上述兩種培養方法下生長，進一步證明所篩選的地衣芽孢桿菌(53CJ'27ws"c力e/w'/ar肌's)Ul-3菌株屬兼性厭氧菌。該菌株已于2008年06月06日保藏于位于中國北京朝陽區大屯路的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCCNo.2437。實施例2、地衣芽孢桿菌(Saci77"sh'c力朋i/anzw's)U1-3CGMCCNo.2437的性能評價從下述幾方面對實施例1獲得的地衣芽孢桿菌(&"Wwsh'c力e"i/br邁is)U1-3CGMCCNo.2437的性能進行評價1、菌種發酵液的表面活性測定用下述方法對地衣芽孢桿菌(勘ci"wsh'c力e/7i/br肌's)Ul-3CGMCCNo.2437產生的生物表面活性劑的排油活性進行測定取一培養皿，加水，水面上加0.1-0.2mL正垸烴形成油膜(在45'C下進行)，然后在油膜中心加上實施例1步驟二的獲得的發酵液。結果中心油膜被擠向四周形成一圓圈，圓圈的直徑與表面活性劑的含量和活性成正比，經測量該菌株作用產生的圓圈直徑大于3cm，說明地衣芽孢桿菌(Aaw7^Ash'c/e/w'/araw:)U1-3CGMCCNo.2437發酵液中具有較高的表面活性。2、菌種發酵液的界面張力測定采用LADAR公司生產的TVT2滴體積張力計檢測地衣芽孢桿菌(&"Wwsh'c力e/w'/b2^'s)Ul-3CGMCCNo.2437發酵液的界面張力。結果如表2所示，分析界面張力的數據，與作用前的樣品相比，經地衣芽孢桿菌(A3"W^Z/c力e/^/b/y^s)U1-3CGMCCNo.2437作用后，油水相間的界面張力有所降低，界面張力由作用前樣的35.38mN/m下降至8.14mN/m，降低率76.99%，上述實驗結果說明地衣芽孢桿菌(勘ciW"s丌c力e/i/br肌^)U1-3CGMCCNo.2437發酵液的界面張力降低幅度較大。表2地衣芽孢桿菌("a"77wsh'c力e/2i'/anzu's)Ul-3CGMCCNo.2437發酵液的界面張力<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>3、菌種發酵液的有機酸含量分析采用美國HP公司生產的毛細管電泳儀檢測檢測地衣芽孢桿菌(Aaw7^Ash'c力ew'/bi7H^)U1-3CGMCCNo.2437發酵液的有機酸含量。結果經地衣芽孢桿菌(5scj77iAsh'c力e/^/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用后，有機酸含量從最低的300mg/L提升到1725mg/L，證明經地衣芽孢桿菌(^3ci77ash'c/朋j'/"or肌's)Ul-3CGMCCNo.2437氧化原油可以形成各種低分子有機酸。實施例3、地衣芽孢桿菌("aw77i/s7ic力ew'/b27W's)U1-3CGMCCNo.2437對原油烷烴組成的作用檢測地衣芽孢桿菌(5aci77"sh'c力e/n'/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437對原油烷烴組成的作用，方法為先取250mL三角瓶，加入油樣5-10g、地衣芽孢桿菌(5aw7^/sh'c力ew'/biTH^)U1-3CGMCCNo.2437菌液10mL(菌含量〉l()7cfu/mL)和富集培養液150mL后，在45-50。C、150rpm下搖培7-15天，培養結束后，收集發酵液，3500rpm離心15min脫水，用全烴色譜分析方法(中華人民共和國天然氣行業標準SY/T5779-1995原油全烴氣相色譜分析方法)對地衣芽孢桿菌(&cy""s7ic力朋f/bi7W's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后的原油進行全烴色譜分析(平行檢測3次)。結果如圖1B和表3所示，由表3的地衣芽孢桿菌("acj'L^s7ic力eW/b/7Z7^)m-3CGMCCNo.2437作用前、后原油的全烴色譜分析的各項參數中可以看出，姥鮫烷AiCn、植垸/nds是衡量生物降解原油的參數。從生油學角度常把Pr/nC17、ph/nCw兩個比值作為生物降解原油因子的重要指標，可判別原油降解的程度。這兩個比值增大，原油中正構烷烴轉變成異構垸烴的量越多，說明原油被中等幅度的降解增加了流動性。據梅博文教授報道"pr/ph比值也反映了原油在微生物作用下降解，發生了氧化還原反應。同時遵循著化學熱力學的規律。這是由于C,g、G。在熱作用下可以進一步降解形成U、C,6甚至C,5，這表示出高碳數異構垸烴下降的趨勢"(梅博文，油藏地球化學進展，1992)。i:c2yEC22增加了32.i%，(:21+(:22/(:28+(:29增加了17.6%。另夕卜，從地衣芽孢桿菌(萬aci"〃sh'c力e/n'fonzu's)Ul-3CGMCCNo.2437作用前、后的原油對照色譜1B中可以看出，主峰碳數均由于高分子量烴類的熱降解而向低碳數范圍轉移，色譜圖逐漸變為前高鋒型。檢測結果表明地衣芽孢桿菌(v9a"W^"c力e/n'/br歷is)U1-3CGMCCNo.2437對實驗油樣產生了明顯的氧化降解作用，使原油中的正構垸烴的含量降低，異構烷烴(特別是低碳數異構垸烴)含量增加，這對改善原油流動性，降低油水界面張力起到重要作用，具有良好的驅油作用。表3地衣芽孢桿菌(^aci〃M7ic力e/7i/arau's)Ul-3CGMCCNo.2437作用前、后原油的全烴色譜分析的各項參數<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>1、檢測經地衣芽孢桿菌(Sacj77iAs7ic力e/^'/anz7^s)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油中正垸烴碳數的變化情況檢測上述經地衣芽孢桿菌(fe"Wush'c力e7W'/oi7zis)Ul-3CGMCCNo.2437作用前、后原油中正垸烴碳數的變化，方法為正構垸烴參數"i:C2yEC22"和"C2,+C22/C28+C29"是描述油氣運移的參數，也是衡量微生物對原油作用的重要指標。一般從油氣運移參數i:C2yEC22和C2i+C22/C28+C29進行分析，在垸烴參數中確定Cu以前為輕組分，C22以后為重組分，那么1:(:21/1:(:22和(:21+(:22/(:28+(:29的比值增加，表示原油運移的方向，是高分子化合物含量相對減少，輕組分化合物含量相對增加。表4地衣芽孢桿菌(5aci"ws乃'c力e/LZ'/bi7iW's)U1-3CGMCCNo.2437菌種作用前后原油正垸烴碳數分布數據<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由圖1和表4可以看出，與作用前相比，經地衣芽孢桿菌(73CW7ZASh-c力ew'/ora^)U1-3CGMCCNo.2437作用后，原油中正烷烴的碳數從C6-C17以前開始增加，IX,/EC22作用前該值為0.81，作用后增加到1.07，C2,+C22/C28+C29作用前該值為1.4S，作用后增加到1.74，表明原油中長鏈烴含量相對減少，短鏈烴或低鏈烴含量相對增加，這對改善原油流動性，降低油水界面張力起到重要作用，具有良好的驅油作用。2、檢測經地衣芽孢桿菌(5aw72wsh'c力e/2f/br/w's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油中的含蠟、含膠變化情況按中華人民共和國石油天然氣行業標準SY/T7550-2000原油中蠟、膠質、瀝青質含量測定法，檢測上述經地衣芽孢桿菌(5acj7^sA'c/e/2J'/oraj's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油中的含蠟、含膠變化情況。結果如表5所示，經地衣芽孢桿菌(^fe"W^h'c力朋i/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油的含蠟量降低6.94%。另外，經地衣芽孢桿菌(^3c/〃"h'c力e/2'/b」rffli's)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油的含膠量降低4.11%，表明地衣芽孢桿菌(fecj'l/"sh'ci/e"j'/b27W's)U1-3CGMCCNo.2437的降解作用不僅改變了原油的組分和結構，還具有稠油降粘的作用，而且其各種代謝產物產生的乳化降粘效果有助于石油的開采和輸送。表5經地衣芽孢桿菌(萬sci7仂s乃'c/e/^/or肌、)Ul-3<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>3、檢測經地衣芽孢桿菌(^agci^"sh'c/e/n'/br/iw、)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油凝固點的變化情況用凝固點測定法(中華人民共和國天然氣行業標準SY/T0541-1994原油凝點測定法)檢測經地衣芽孢桿菌(5aciW^h'c力朋i/bT7^'s)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油的流動能力，因為經該菌作用后原油的輕組份增加，相對應地經該菌種作用后的原油的流動性也將增加，為證明這個結果檢測了經地衣芽孢桿菌(5aciL^s"c力e/n'/or肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油的凝固點。結果如圖2所示，經地衣芽孢桿菌(Saci〃"sh'c力e/n'/arais)U1-3CGMCCNo.2437作用前原油的凝固點是4rC，經該菌種作用后的凝固點是27"C，凝固點降低了14'C，降低百分率是34.15%，表明經地衣芽孢桿菌(^3d7^/s〃c力e/w'/br邁is)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油的流動性增加。4、檢測經地衣芽孢桿菌(萬s""iASh'c力e"i/b"!W's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油各餾份油含量的變化情況用恩氏蒸餾法檢測(中華人民共和國國家標準GB6536-86)經地衣芽孢桿菌(Aaw77iAh'c力e/i/b77z")U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油各餾份油含量的變化情況。恩氏蒸餾實驗結果如表6和圖2A所示，當流程的溫度在100-16(TC時，菌種作用前的原油沒有餾份油蒸餾出來，當溫度升到18(TC時剛有0.4X體積的餾份油蒸餾出來；但經地衣芽孢桿菌(^ci"i/sh'c力朋i/orau's)U1-3CGMCCNo.2437作用后的原油從IO(TC開始就有0.6%體積的餾份油蒸餾出來，相比之下經該菌種作用后的餾份油的初始蒸餾溫度降低8(TC。根據石油煉制餾份油的規定，沸點在100-30(TC蒸出來的餾分是Cn以前成分，C2。-C3。是固體石蠟，上述恩氏蒸餾實驗結果表明經地衣芽孢桿菌(^feci77^h'c力e/^'/b2772;s)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油的輕組份增加了，該實驗結果與上述色譜分析結果相符，進一步證明經地衣芽孢桿菌(5sw77mh'c力e;i/br啦's)Ul-3CGMCCNo.2437作用后的原油中長鏈烴含量相對減少，短鏈烴或低鏈烴含量相對增加，這對改善原油流動性，降低油水界面張力起到重要作用，具有良好的驅油作用。表6經地衣芽孢桿菌(^3cj77mh'c力e/^/b/7w's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油各餾份油含量的變化情況的恩氏蒸餾實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>5、經地衣芽孢桿菌(Ssci"〃sh力6W'/br啦、)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油酸值的變化情況為觀察地衣芽孢桿菌(^3"'"ws7ic/e/n'/anzA)Ul-3CGMCCNo.2437氧化原油產生的酸性物質改變原油酸值的能力，釆用酸堿滴定法測定地衣芽孢桿菌(ife"W^h'c力e/^/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油酸值的變化情況。結果如表7所示，經地衣芽孢桿菌(^asc^"s"'c力ew'/bi7w's)Ul-3CGMCCNo.2437作用前原油的酸值是0.015mg(K0H)/g，經該菌種作用后酸值明顯提高，可達0.243rag(K0H)/g，表明經地衣芽孢桿菌(^aw77"s7i'c/e;n'/anw's)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油的酸值得到顯著提高。表7經地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油酸值的測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>6、經地衣芽孢桿菌(Aa"W〃sh'c力e/n'/anzw's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油的飽和烴、芳烴色質分析為定性了解地衣芽孢桿菌(萬aci"tAsh'c力e;^'/anHA)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油組成化學結構的變化，將經地衣芽孢桿菌(5aci7化sh'c/e/^/anzA)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油的飽和烴、芳烴進行色質分析。結果如圖2B所示，經地衣芽孢桿菌(&c277mh'c/ey^/biTW's)U1-3CGMCCNo.2437作用后原油結構發生了改變，由烷烴轉化了其它產物，經該菌種作用后的飽和烴發生了氧化反應，在保留時間438rain產生了丙酸CH3CH2C00H，在保留時間373min產生了十八碳二烯酸CnH^C00H，在保留時間328min產生了十六烷酸C15H31C00H，同時分析到了降解聚合物中的乙酰胺CH3C0NH3;經該菌種作用后的芳烴的色質分析結果表明，在保留時間868min產生了環己二烯l、4二酮<:14*1120.02，在保留時間898min產生了3a，7-產垸生物，在保留時間978min產生了碳酸CeH50H，另外，十六烷被細菌代謝的途徑如下H3C-(CH2)14—CH3-—H3C-(CH2)14—CH200H——H3C-(CH2)CH20H-—H3C_(CH2)14-CH0_—H3C-(CH2)14-C00HI十六烷酸上述實驗結果表明經經地衣芽孢桿菌(fec2'〃wsh'c力ew'/b」r肌's)Ul-3CGMCCNo.2437作用后原油結構發生了改變，由烷烴轉化了其它產物。7、經地衣芽孢桿菌(萬acil/iAsh'c/e/^'/ar肌's)Ul-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油族組成的變化情況為定量的了解地衣芽孢桿菌(5acW7〃sh'c/e/i/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437對原油中的飽和烴、芳烴、非烴和瀝青質組分的作用情況，檢測地衣芽孢桿菌("aci7^As"c力e/n'/bi777")Ul-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油族各組分的百分含量。結果如表8所示，結果原油在地衣芽孢桿菌(5aciL^Ash'c/ed'/b27w\s)Ul-3CGMCCNo.2437作用后族組成發生了很大的變化，飽和烴含量相對增加，芳烴的含量上下浮動，非烴和瀝青含量相對減少，說明該菌株可改變原油的各項組分，即產生了明顯的氧化降解作用，使原油中的重組分瀝青質的含量降低，非烴組分中的氧化物含量增加，而增加的這些氧化物多為分子量大小不同的有機酸、醇和酯等具有表面活性的物質，這對原油在多孔介質中的流動起到十分重要的作用。表8經地衣芽孢桿菌(^sci^"s2i'c力e/w'/oraw's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油族組成的變化情況<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>8、經地衣芽孢桿菌(&c^L^s〃c力朋i/b27zu's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油粘度、牛頓指數、粘度變化量、提高采收率指數的變化情況8.1地衣芽孢桿菌(5aci""sh'c力e"i/or肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后對原油粘度隨剪切速率的變化情況用德國HAAKE公司RS150型流變儀測定在剪切速率范圍0.01-1000s—'，轉子C35/2°，溫度為45。C條件下的經地衣芽孢桿菌(^3ciL"s乃'c力ed'/bi7zu's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后對原油表觀粘度隨剪切速率的變化情況，平行檢測三次。結果如圖3所示，經地衣芽孢桿菌(萬a^77iAS7/c/e/n'/an/s)U1-3CGMCCNo.2437作用前，原油的表觀粘度(u=KDn—0表現為假塑性流體的特性，經該菌處理后，原油的表觀粘度則趨于牛頓流體特性。8.2經地衣芽孢桿菌(^gci"i^h'c力ey^/or肌's)U1-3CGMCCNo.2437作用前、后原油前、后原油牛頓指數、粘度變化量、提高采收率指數的變化情況從步驟l中的剪切速率與粘度曲線可以看出，原油的流動性能和粘度是隨著剪切速率發生變化的，在相同的溫度下，經地衣芽孢桿菌(SaciW^^^e/nYonw's)U1-3CGMCCNo.2437處理過的原油粘度得到改善，原油粘度隨剪切速率的增大而降低，當剪切速率達到一定的數值時，經該菌種作用后的原油粘度趨于一直線，屬假性流體，不向水和煤油當剪切速率變化時粘度是常數。經地衣芽孢桿菌(&^7A/sh'c力e;n'/br/wi)U1-3CGMCCNo.2437作用后，降低了原油中長鏈分子的含量，使原油變稀，粘度下降，將原油移向了牛頓流體。同時，原油中長鏈分子降解時，原油的體積增大，形成了油包水或水包油的狀態，使原油的牛頓指數、粘度變化量、提高采收率指數發生了變化。根據AlejandroMaure等(AlejandroMaureetal:WaterfloodingOptimizationUsingBiotechnology:2-YearFieldTest,LaVentanaFieldArgentina,SPE69650，p34.)的方法評價地衣芽孢桿菌(^3C2'7Aa1z'c力ewYbr肌's)Ul-3CGMCCNo.2437對提高石油釆收率的貢獻指數(E0R)。該方法是以降粘效果作為實驗菌種性能評價的依據，通過測定在所給定的剪切速率區間內的最大和最小的表觀粘度值，并對所給定的剪切速率區間內測得的全部表觀粘度數據進行求和統計，應用牛頓指數、粘度變化量和提高采收率指數對該菌種進行綜合評價，三個參數表明了原油變化的特征，計算公式如下.-牛屯頁指數NewtonianIndex二fn{ViscosityoftheControl/ViscosityoftheInoculate}二(controlvis.shearrate-controlvis.@max,shearrate)/(inoculatevis.@min.shearrate-inoculatevis.@max.shearrate)注它標志著處理后原油的牛頓流體的好壞，一般該指數〉1.5為好。粘度變化量deltaViscosity-controlvis._2microbeinoculatedvis.)/2controlvis.注-.它標征著處理前后原油的粘度變化程度，一般以》0.01為好。提高采收率指數EORIndex=l/(1-deltaViscosity)注它表明潛在的增加采收率的大小，一般以》1.15為好。結果如表9所示，經地衣芽孢桿菌(5a"7J"sh'c力e/7i/bi7SJ^)U1-3CGMCCNo.2437作用后，原油的牛頓指數得到顯著提高，相對粘度變化量也得到提高，表明提高采收率指數也得到大幅提高，可以認為該菌種利用原油的性能較好，進一步說明經地衣芽孢桿菌(feci_/7ush'c/e/7J'/bryw's)Ul-3CGMCCNo.2437作用后有效地改變了原油的性質，增加了原油的流動能力。表9經地衣芽孢桿菌(萬aci""sh'c力e;3i/b力7w's)U1-3CGMCCNo.2437<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>9、地衣芽孢桿菌(^3cW7"s"c力e/w'/br/M's)U1-3CGMCCNo.2437與油藏本源菌的兼容性實驗為綜合評價地衣芽孢桿菌(^S3c^/7mUl-3CGMCCNo.2437適應油層的能力，進行了該菌與油層本源菌的兼容性實驗，方法為從油田注聚合物的各試驗區(一廠、二廠、三廠、四廠、六廠)分別取樣2000mL，與篩選的目的菌一地衣芽孢桿菌(&c^7^7ic/e/^/bi7zu\s)Ul-3CGMCCNo.2437菌液2mL(菌含量〉l()7c:fu/mL)進行配伍實驗，觀察目的菌的生長情況。結果如表10所示，共培養后經顯微鏡觀察，地衣芽孢桿菌(vfeci77^h'c力e/i/br啦'50U1-3CGMCCNo.2437為優勢菌種，生長良好，這是因為該菌種篩選自油層產出水，所以能與油層內的本源菌相兼容。此外，從實驗結果可以看出，在油藏環境中注入的外源菌形成了穩定的微生物體系，并在油水接觸的界面細菌氧化原油，這個氧化反應產生了低分子量的有機物，而厭氧菌可接著利用有機物生長、繁殖、代謝形成循環的生物鏈，所以地衣芽孢桿菌(5aw77^Wc力e/^/b」r肌's)U1-3CGMCCNo.2437的活菌數一般可達到108—9個/mL。表10地衣芽孢桿菌(Aacj7J〃5"力.c/e/n'/br肌'f)U1-3CGMCCNo.2437與地層水的配伍性實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>10、檢測地衣芽孢桿菌(萬a"'77ws"c力e;H'/b27ff^s)U1-3CGMCCNo.2437受pH值與毒性影響的化學實驗在影響微生物生長和代謝的一些生物化學參數中，pH值是影響最嚴重的，菌種生長和代謝的最佳pH值是4-9，其次是重金屬的濃度。pH值不但直接影響到菌種的生長和代謝，最重要的是還影響了重金屬的增溶性。假如重金屬砷、汞、鎳、硒的含量大大超過10-15rag/L營養所需量，則重金屬對微生物的毒性極大，不利于細菌的生長和代謝。任一種微生物提高原油采收率法都要求有可利用的大量的營養物，以供細菌正常地生長和進行代謝。大慶油田的水質分析結果如表ll所示，大慶油田油層水中的各種重金屬離子的濃度都在微生物生長條件的范疇內，因此本發明的地衣芽孢桿菌(&ci"ws1z力e/^/br歷is)U1-3CGMCCNo.2437能在油層水中生長繁殖。表ll聯合站水中金屬離子含量檢驗報告(mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>11、檢測聚合物的存在條件下對地衣芽孢桿菌(^3CjX"s7i'c力e/w'/b27Z7i's)U1-3CGMCCNo.2437生長速率的影響為比較地衣芽孢桿菌(^fe"L^s"c力e/w'/or肌's)U1-3CGMCCNo.2437在碳水、烴類、聚合物條件下的生長述率，進行了對比實驗。結果地衣芽孢桿菌(As"W^h'c力e/j'/b/7iw's)U1-3CGMCCNo.2437在碳水化合物(組成為肉湯40ml，K2HP040.1-0.5%，KH2P040.1-0.5%，NH4N030.1-0.2%，MgS047H200.01-0.1%，FeS040.001-0.01%，CaCl20.001-0.01%,ZnS040.01-0.02%,CuS04,0.0005-0.001%,尿素0.01-0.1%，水1000mL)中的繁殖速率很快，1天菌數密度就達10lfl—'2個/mL;地衣芽孢桿菌(5ad7hsh'c力e7^/or肌's)Ul-3CGMCCNo.2437在原油與無機鹽的培養基(組成為葡萄糖4%，K2HP040.l-O.5%，KH2P040.1-0.5%，,030.1-0.2%，MgS047H200.01-0,1%,FeS040.001-0.01%，CaCl20.001-0.01%,ZnS040.01-0.02%，CuS04.0.0005-0.001%,尿素0.01-0.1%，水lOOOmL)中生長繁殖3天后菌數密度達到109—12個/mL;地衣芽孢桿菌(萬3cj'"mh'c/e/^'/anM's)Ul-3CGMCCNo.2437在聚合物的培養基(組成為:K2HP040.l-O.5%,KH2P040.l-O.5%，,030.1-0.2%,MgS047H200.01-0.1%，FeS040.001-0.01%，CaCl20.001-0.01%,ZnS040.01-0.02%，CuS04,0.0005-0.001%，尿素0.01-0.1%，原油1-10%;聚合物(分子量1500萬)0.05-0.1%g，水1000mL)中生長速度較慢，3天后菌數密度為108—"個/mL。然后，將地衣芽孢桿菌(^aci'77ws7ic力e/^'/b/7zw's)Ul-3CGMCCNo.2437在聚合物的培養基中從第3天后放置3個月，檢測該菌種的生長速率，結果菌數密度達到106—7個/mL，說明該菌種在聚合物培養基中，即沒有營養的條件下還能存活；再將地衣芽孢桿菌(萬aci"Mh'c/ew'/bjmis)U卜3CGMCCNo.2437重新用原油激活菌數密度達到108—"個/mL。該實驗結果表明，在油藏中當地衣芽孢桿菌(Aacj77M"c力e/7i/br肌's)Ul-3CGMCCNo.2437以聚合物為碳源將聚合物利用完全后，直到不能在降解了，就是說當微生物營養不足時，它們移向新的食物源原油繼續繁殖生長。地衣芽孢桿菌(&cj77"sh'c力edYbr/w's)Ul-3CGMCCNo.2437在上述不同碳源條件下的菌濃度曲線如圖3A所示。另外，為考慮不同聚合物濃度對地衣芽孢桿菌(&w7J^7ic力朋i/br肌's)Ul-3CGMCCNo.2437生長述率的影響進行了該菌種與不同聚合物濃度的匹配實驗，其目的是觀察該菌種在不同聚合物濃度條件下的生長速率，方法為將菌種地衣芽孢桿菌(^feci7J"s2ic力e;j'/or肌's)U1-3CGMCCNo.2437分別加入原油、聚合物溶液(200—2000mg/L)之中，觀察其生長率的變化。結果如表12所示，聚合物濃度在200-600mg/L范圍內對該菌的生長沒影響，活菌數達W個/mL，當聚合物濃度達到1600-2000mg/L時，活菌數達108個/mL，表明由于聚合物濃度太高而產生了屏蔽效應，該菌在此條件下繁殖緩慢，但是都能分解聚合物，只是時間的問題。表12聚合物濃度對地衣芽孢桿菌(SacilZws72'c力e/^/b/wis)U1-3CGMCCNo.2437菌數的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>同時還檢測了地衣芽孢桿菌(^2cj77ws7/c力em'/"anzu^)U1-3CGMCCNo.2437對聚合物(濃度500mg/L)粘度的影響，結果如表13和圖3B所示，粘度由18.6mPas降解為1.10mPas。表13地衣芽孢桿菌(腸歷〃s7ic力e/^/br邁is)Ul-3CGMCCNo.2437對聚合物粘度的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實施例4、利用地衣芽孢桿菌(5aci"^hc力e^Tar/w's)U1-3CGMCCNo.2437的人造膠結巖心驅油實驗實驗一注聚合物后直接水驅+注微生物驅模型驅油實驗模型實驗用模型均為人造非均質膠結巖心，變異系數Vk=0.72，模型長cm=31.1-31.3，截面積cm2=12.38-12.46。實驗用水、油、菌液實驗用的飽和水是按大慶油田平均地層水人工配制的鹽水，礦化度為6778mg/L。實驗用油是取自三廠北2區-J5-P25井的原油，經脫水后原油的粘度是47.2mPas。注入水是三廠聚合物注入站的注入水。實驗用菌液是單一菌地衣芽孢桿菌(5aca7^s/2'c力e/w'/ar啦's)U1-3CGMCCNo.2437。實驗用聚合物聚丙烯酰胺，分子量1400萬，固含量0.88%，水解度23鵬1%，粘度是50.2mPas。實驗過程巖心抽空飽和地層水—飽和油一水驅含水達100%—注聚合物(1000mg/L)0.57PV—水驅含水達100%—將地衣芽孢桿菌(^fec277iAs力'c力朋i/b」rau's)Ul-3CGMCCNo.2437原菌液的菌濃109^個/1^稀釋至l(T個/mL，然后注菌液0.2PV—45"C恒溫培養7天一水驅含水達100%，結束實驗。驅油實驗在4塊巖心上進行，每兩塊為一組平行樣，共做了兩組模型驅油實驗，菌液使用了地衣芽孢桿菌(5aw'77"s7/c力e/n'/onzu'50U1-3CGMCCNo.2437單菌液兩種，其目的是為了觀察單一菌種的驅油效果。另外，將從微生物驅油模型中驅出來的原油離心脫水和注入模型之前的原油做了流變性分析，觀察注入模型之前的原油和模型中驅出來的原油間的粘度變化。聚合物驅后微生物驅油效果如圖4A所示，聚合物驅后微生物驅油模型數據如表14所示，聚合物后直接水驅模型數據如表15所示。表14聚合物驅后微生物驅油模型數據匯總表<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>由模型實驗數據可以看出，地衣芽孢桿菌(萬acj'"ush'c力em'/b—r加's)U1-3CGMCCNo.2437的兩只平行樣提高采收率的幅度是3.72-4.20%，從模型曲線圖中分析聚合物驅含水由100%下降至80%，微生物驅含水由100%下降至90%左右，表明經過菌種作用后含水下降，產量上升。對實驗結果進行分析，注入水的pH值是8，從模型中產出水的pH值是5-6;當模型后續水驅時，觀察了地衣芽孢桿菌(飽w7hsh'c力e/n'/onzu's)U1-3CGMCCNo.2437菌種在模型中的生長狀態當模型出口產出液lOmL時活菌數是1()8個/mL，產出液45mL(0.5PV)時活菌數是1(^個/mL，模型末端產出液90mL(1PV)時活菌數是1()S個/mL。從巖心產出液中的活菌數說明細菌遷移至整個巖心，因為模型注菌液0.2PV，實際上菌液僅進入模型入口的1/5處，當菌種消耗掉附近的營養物后移向新的食物聚合物碳源進行生長代謝。流變性分析結果如圖4和表16所示，經地衣芽孢桿菌(萬acj77^h'c力e/^'/br/z/is)Ul-3CGMCCNo.2437作用后的原油隨著剪切速率的增加而粘度下降，降粘率達50%以上，表明地衣芽孢桿菌("3ci77"s7yc》e/i/anzu\)U1-3CGMCCNo.2437具有較好的驅油效果。表16地衣芽孢桿菌(5aw7/〃sh'c力e/7i/oniu;s)U1-3CGMCCNo.2437注入模型前、后原油粘度與剪切速率的關系粘度單位mPas<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>實驗二注聚合物后直接水驅+注微生物驅模型驅油+聚合物保護段塞實驗模型與實驗一相同。實驗用水、油、菌液與實驗一相同。聚合物聚丙烯酰胺，聚合物的分子量1400萬，固含量0.88%，水解度23rao1%，粘度是50.2mPas或22.4mPas。實驗過程(1)巖心抽空飽和地層水一飽和油一水驅含水達100%—注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400萬，固含量0.88%,水解度23molM，粘度是50.2mPa*s)—水驅含水達100%—將地衣芽孢桿菌(Aa""i/s7ic力e/H'/or/w's)U1-3CGMCCNo.2437原菌液的菌濃1(f,個/mL稀釋至1(T個/mL，然后注菌液0.2PV—注0.2PV聚合物粘度(50.2mPas)保護段塞驅一45。C恒溫培養7天—水驅含水達100°/。，結束實驗。(2)巖心抽空飽和地層水一飽和油一水驅含水達100%—注聚合物(1000mg/L)0.57PV(聚合物的分子量1400萬，固含量0.88%，水解度23mol%，粘度是22.4mPa*s)—水驅含水達100%—將地衣芽孢桿菌(^ggcj7Jws"c力e;wTar肌's)U1-3CGMCCNo.2437原菌液的菌濃109—w個/mL稀釋至106—7個/mL，然后注菌液0.2PV—注0.2PV聚合物粘度(22.4mPa's)保護段塞驅一45'C恒溫培養7天一水驅含水達100%，結束實驗。應用(1)和(2)各進行了兩塊人造巖心平行驅油實驗，實驗方法與實驗一相同。實驗結果如表17所示。通過與實驗一表14數據比較可以看出實驗二的驅油效果大于實驗一，主要原因是在注微生物(地衣芽孢桿菌(Jfe"'""sh'c力e;7i/br肌's)U1-3CGMCCNo.2437)后加了聚合物保護段塞，經微生物作用后的原油都能被聚合物均勻推進，使微生物作用后的原油被富積集中驅出，提高了波及體積，從而增加了驅油幅度。在實驗的過程中還檢測了注入模型前、后聚合物溶液的粘度。結果實驗二(1)模型注入前的聚合物溶液的原始粘度是50.2mPas，段塞是0.57PV在注入模型的過程中用50mL量筒接從模型中產出液0.5PV檢測聚合物的粘度是16.5raPas，聚合物溶液通過多孔介質過濾后粘度下降了3倍多，當驅出1PV時的粘度是2.0mPa，s，繼續驅出1.5-2PV時的粘度是0.OmPas，表明聚合物在油層中已被巖石和孔喉產生了吸附和滯留。將實驗二(1)禾P(2)的實驗數據進行比較，(1)的EORX和MEORX的采油幅度均高于(2)，是因(1)聚合物溶液的注入粘度50.6mPas高于(2)的聚合物溶液的注入粘度22.6mPa's所致，(2)的驅油實驗結果扣除空白驅油實驗的0.68%，(2)提高的驅油幅度為8.90-6.27%。表17實驗二聚合物驅后微生物一聚合物保護段塞模型實驗數據<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>實驗三注聚合物后直接水驅+注微生物驅模型驅油+化學驅+聚合物保護段塞實驗模型、實驗用水、油、菌液與實驗一相同。聚合物聚丙烯酰胺，分子量1400萬，固含量0.88%，水解度23molX，粘度是50.2mPas。三元體系的配方表活劑垸基苯磺酸鈉O.1%，NaOH1.0%，聚合物聚丙烯酰胺0.25%。實驗過程巖心抽空飽和地層水一飽和油一水驅含水達100%—注聚合物(1000mg/L)0.57PV—水驅含水達100%—將梭形芽孢桿菌(Lysinnibacillusfusiformis)6#CGMCCNo.2439原菌液的菌濃10^個/raL稀釋至106—'個/mL，然后注菌液0.2PV—注三元體系0.3PV—注0.2PV聚合物粘度(50.2mPas)保護段塞驅—45。C恒溫培養7天一水驅含水達100%，結束實驗。為了比較微生物模型驅油實驗的幅度，用人造非均質巖心做了聚驅后直接注0.3PV三元進行驅油，后再注0.2PV聚合物保護段塞的驅油對照試驗，實驗結果如表18所示。表18聚合物驅后+微生物+化學驅+聚合物保護段塞模型實驗數據表<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>從上述的實驗數據看到聚驅后注完微生物后繼續注化學驅扣除對照試驗的3.66%，提高采收率幅度是11.53%。序列表<160>1〈210〉1<211〉1459<212〉DNA<213〉地衣芽孢桿菌(Ssd'7乃5h'c力e;7i/bi777A)Ul-3CGMCCNo.2437<400〉1cccttttgactgcggcgtgctatacatgcaagtcgagcggaccgacgggagcttgctccc60ttaggtcagcggcggacgggtgagtaacacgtgggtaacctgcctgtaagactgggataa120ctccgggaaaccggggctaataccggatgcttgattgaaccgcagggggcaatcata肌a180ggtggcttttagctaccacttgcagtaggacccgcggcgcattagctagttggtg3ggtaacggctcaccaaggcgacgatgcgatgccgaccggagagggtgatcggccacactgggac300ggagacacggcccagcaccctacgggaggcagcagtagggaatcttccgcaatgga^gaa360agtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaaactctgttgt420tagggaagaacaagtaccgttcgaataggssgscaccttgacggtacctaaccagaaagc480cacggccct3actacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccgga540attattgggcgtaaagcccgcgcaggcggtttcttaagtctgatgtgaaagcccccggct600caaccggggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaagaggagagtggaMtc660cacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggagactctc720tggtctgtaactgacgctgaggcgcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctg780gtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttagagggtttccgccctttagtgctg840cagcaaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtggcaagactgaaactcaaagget900attgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaa%0ccttaccaggtcttgacatcctctgacaaccctagagatagggccttccycttcgggggc1020agaggtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtc1080ccgcaacgagcgcaacccttgatcttagt"tgccagcattcagttgggcactctaaggtga1140ctgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgac1200ctgggctacacsLcgtgctacaatgggcageiacaaagggcagcgaagccgcgaggctaagccaatcccacaaatctgttctcagttcggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagctg1320gaatcgctagtaatagctgcgggatcagcatgccgcggtgaatacgttcccgggccttgt1380acacacccgcccgtcacaccacgagagtttgtaacacccgaaagtcggtgaggtaacctt1440ttggagccagccgccgaag1459權利要求1、地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)U1-3CGMCCNo.2437。2、含有地衣芽孢桿菌(《a"77"si/c力e/n'/b」rau's)U1-3CGMCCNo.2437的菌劑。3、根據權利要求2所述的菌劑，其特征在于，含有地衣芽孢桿菌(^3Ci'W^7/c力e/i/brazys)lU-3CGMCCNo.2437和營養基，所述營養基由液體石蠟0.5%_2%,NaCl0.3%-7%，NH4C10.3%-1%，MgS040.02%，KH2P040.2%-0.8%,Na2HP040.4-1.4%，Na2EDTA0.002%-0.0063%,酵母粉0.01%_0.08%，CaCl20.001%-0.007%。4、根據權利要求3所述的菌劑，其特征在于，所述地衣芽孢桿菌(&"7&sJ/c力e/nYbi7w's)U1-3CGMCCNo.2437和營養基重量份數比為1-10:100。5、根據權利要求2或3或4所述的菌劑，其特征在于，所述營養基為水溶液，其pH值為5.0-9.0。6、地衣芽孢桿菌(Aaci""sh'c力e"y/b」rais)U1-3CGMCCNo.2437在采油工程領域中的應用。7、根據權利要求6所述的應用，其特征在于所述地衣芽孢桿菌(&w77mh'c力e/7i/b」raw's)U1-3CGMCCNo.2437添加于聚合物直接水驅后進行生物驅油。8、根據權利要求7所述的應用，其特征在于所述地衣芽孢桿菌(^3W'W^h'c力e/^/b/7/i^)U1-3CGMCCNo.2437添加于聚合物直接水驅后，并用聚合物保護段塞進行生物驅油。9、根據權利要求6所述的應用，其特征在于所述地衣芽孢桿菌(^few7/whc力ew'/bi7W's)Ul-3CGMCCNo.2437添加于聚合物直接水驅后，并與化學驅相結合，再用聚合物保護段塞進行生物驅油。10、地衣芽孢桿菌(ifecj7hs力'c力朋j'/orau'力Ul-3CGMCCNo.2437在采油工程領域中稠油降粘的應用。全文摘要本發明公開了地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)U1-3CGMCCNo.2437及其應用。含有地衣芽孢桿菌(Bacilluslicbeniformis)U1-3CGMCCNo.2437的菌劑也屬于本發明的保護范圍。模型驅油實驗結果表明，在聚合物驅后用該菌驅油提高采收率幅度達3-5％(OOIP)，在聚合物驅后用該菌驅加聚合物保護段塞驅油提高采收率幅度約達7％(OOIP)，在聚合物驅后利用該菌與化學驅相結合的方法驅油提高采收率幅度可達6-13％(OOIP)。實驗結果表明該菌株可廣泛應用于采油工程領域特別是微生物強化采油領域，適合大面積推廣和應用。文檔編號E21B43/16GK101412979SQ200810227858公開日2009年4月22日申請日期2008年12月1日優先權日2008年12月1日發明者樂建君,侯兆偉,蔚李,梅石,陳星宏申請人:大慶油田有限責任公司