專利名稱:一種分離純化制備神經節苷脂工藝的制作方法
本發明屬于制備具有生物活性物質的工藝。
神經節苷脂有重要生物功能和活性,它主要存在于動物腦細胞膜,現有一般制備方法〔1-3〕,是將腦組織勻漿后的提取液濃縮、透析再經過無機吸附柱或離子交換樹脂柱分離純化,用有機溶劑洗脫,再濃縮、冷凍干燥而得。該工藝周期長,有機溶劑耗量大,神經節苷脂部分有效組分損失,產品實收率較低。
本發明的特點主要是利用中等極性的大孔徑吸附樹脂層析柱,當含有機溶劑(氯仿和甲醇)的腦組織勻漿清液(有機溶劑與水之比為3∶2~4∶3,PH為2-6)通過層析柱時,神經節苷脂的有效組分全部吸附于柱上,雜質(有機的和無機的)可洗去,再改變有機溶劑與水的配比即8∶1-9∶1,進行洗脫,可將神經節苷脂洗脫下來。從而省去了提取濃縮及透析等過程。將洗脫液濃縮、冷凍干燥即可得純品。這大大簡化了現有生產工藝過程。同時可避免有效組分在透析和離子交換柱中的丟失和破壞。本工藝處理過程周期短,條件溫和,可保持有效組分的生物活性,全過程所需時間只相當現有生產工藝的五分之一,產品純度高,組分全。
實例將鮮腦組織5Kg勻漿,同時加入有機溶劑和水(3∶2)。棄渣,得提取清液約40立升。將清液通過大孔樹脂柱,流出液可回收有機溶劑,再用有機溶劑(與水之比8∶1)洗脫。
a.收集全部洗脫液,經濃縮、干燥,得粗制品15g。粗制品中唾液酸含量20%,粗制品實收率為~3g/Kg鮮組織。
b.如將收集的洗脫液,再上一次樹脂柱,經洗脫、干燥,得精制品8g,實收率為~1.6g/Kg鮮組織。精制品含唾液酸為30%。
參考文獻1.Biochem.Biophys.Acta.61797-109 (1980)2.Biochem.Biophys.Acta.60350 (1962)
3.Biochem.J. 88373(1963)
權利要求
1.一種分離純化制備神經節苷脂工藝,其特征在于將細胞勻漿提取清液直接通過大孔吸附樹脂層析柱,再用有機溶劑(氯仿和甲醇)與水的混合液洗脫,得純神經節苷脂。
2.按照權利要求
1所說的分離純化制備神經節苷脂工藝,其特征在于細胞勻漿提取清液中含有機溶劑(氯仿和甲醇)和水,其有機溶劑與水之比為3∶2~4∶3,PH為2-6。
3.按照權利要求
1所說的分離純化制備神經節苷脂工藝,其特征在于所用大孔吸附樹脂為中等極性的吸附樹脂。
4.按照權利要求
1所說的分離純化制備神經節苷脂工藝,其特征在于洗脫用的有機溶劑與水之比為8∶1~9∶1。
專利摘要
一般分離純化制備神經節苷脂工藝是將細胞勻漿清液濃縮后透析,再用無機吸附或離子交換樹脂柱分離純化。本工藝使用新型大孔吸附樹脂直接及附勻漿清液中的全部神經節苷脂成分,可在層析柱上完成濃縮、脫鹽、純化全部過程。大大節省時間和有機溶劑用量,并簡化中間處理程序。產品純度高。實收率高。
文檔編號B01D15/08GK85102590SQ85102590
公開日1985年11月10日 申請日期1985年4月1日
發明者商宗一, 張金紅 申請人:南開大學導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan