生產葡聚糖的新方法、獲得的葡聚糖溶液及用途

生產葡聚糖的新方法、獲得的葡聚糖溶液及用途
【專利摘要】生產一種葡聚糖溶液的微生物學方法，根據該方法，用能夠生產葡聚糖的一種細菌菌株的預培養物對一種包含蔗糖的培養基進行接種，然后直接回收在發酵結束時獲得的葡聚糖溶液，且無需隨后的濃縮步驟，其特征在于：-在接種之前，該培養基包含至少10wt.%的蔗糖，-在接種之后，在使得該培養基中的包括在接種之前存在的蔗糖的蔗糖總量是至少16wt.%的條件下，再次添加蔗糖，-獲得的葡聚糖溶液包含至少10wt.%的葡聚糖。獲得的葡聚糖的原溶液以及這種溶液作為絮凝劑的用途。
【專利說明】生產葡聚糖的新方法、獲得的葡聚糖溶液及用途
[0001]本發明的【技術領域】
[0002]本發明涉及用微生物學方法獲得的多糖、更具體地為葡聚糖的領域。更精確地，它涉及后者的生產方式及其作為固體顆粒的水性懸浮液的絮凝劑以及作為水性介質的增稠劑的用途。
[0003]葡聚糖是將蔗糖通過稱為葡聚糖蔗糖酶的酶作用轉化而得到的長的復雜分子，該酶是由細菌(例如像腸膜明串珠菌，Leuconostoc mesenteroides)分泌的。因此,可以在一種特定的培養基中從上述類型的細菌培養物中生產葡聚糖。
現有技術
[0004]已知可以將某些微生物以使得它們產生能夠將糖轉化為微生物多糖的胞外酶的這樣一種方式進行培養。所述多糖包括例如，黃原膠、硬葡聚糖、裂褶菌素、迪特膠、果聚糖、膠凝糖、蘭膠、普魯蘭多糖以及葡聚糖。
[0005]葡聚糖尤其是從培養在補充蔗糖的培養基中的細菌(例如像腸膜明串珠菌)產生。在實踐中，葡聚糖是通過細菌的葡聚糖蔗糖酶將蔗糖的葡萄糖單體聚合為葡聚糖(多聚葡萄糖)來獲得的。除了蔗糖之外，培養液通常非窮盡性地還包含:營養元素，例如氮源，像銨鹽、尿素、乳和肉蛋白的水解產物(像酪蛋白)、酵母提取物；連同緩沖鹽，例如磷酸鉀或磷酸鈉；礦物質，例如鐵、鎂 、鈣、以及錳；維生素以及消泡劑。如已經指出的，這種液體培養基構成了發酵培養基，其中細菌將產生酶并且其中蔗糖將被轉化為葡聚糖。
[0006]例如，文獻Karthikeyan (卡菲基恩)等人(用于葡聚糖生產的分批發酵條件的優化)披露了一種用于從蔗糖的腸膜明串珠菌細菌培養物發酵中生產葡聚糖的工藝。最終溶液中的葡聚糖的濃度是約13.5wt%。
[0007]文獻SK 286 070披露了一種類似工藝，產生了一種包含約5.3wt%的葡聚糖的溶液。
[0008]文獻DD 226 015披露了一種類似工藝，其中葡聚糖的終濃度約為6.2wt%至
6.3wt%0
[0009]細菌培養物生產葡聚糖之后通常為將在發酵后獲得的葡聚糖進行純化的至少一個步驟。純化通常通過用醇(例如乙醇或異丙醇)沉淀來進行。在這種純化中，可以將細胞、可降解聚合物的水解酶、以及培養基從葡聚糖中去除。因此它使得獲得具有更好性能(特別是用作礦中的絮凝劑的應用)的葡聚糖成為可能。
[0010]因此，文章Production of Dextran by newly isolated strains of Leuconostocmesenteroides PCSIR-4 and PCSIR-9 (通過新分離的腸膜明串珠菌的菌株PCSIR-4和PCSIR-9生產葡聚糖)(Turkish Journal of Biochemistry (《生物化學的土耳其雜志》)-2005; 31(1) ; 21-26)描述了一種利用沉淀和純化的步驟來生產葡聚糖的方法。描述的純化步驟包括若干子步驟:沉淀、沉淀物的離心或過濾、洗滌、干燥以及溶解，這使得生產工藝復雜、漫長且昂貴。
[0011]這篇文章還傳授了最佳的總蔗糖濃度是10%，并且規定僅添加一次蔗糖。當蔗糖濃度較高時，觀察到葡聚糖合成受抑制。在這篇文章中，在利用的蔗糖的量為30%時獲得的葡聚糖濃度是至多約9%。通常，發酵之后，用微生物學方法獲得的葡聚糖濃度是大約Iwt.%至7wt.%，最經常是 2wt.% 與 5wt.% 之間[Behravan (比和拉文)等人 2003 Biotechnol ApplBiochem (《生物技術與應用生物化學》)38:267-269]。現在，采礦業(包括氧化鋁采礦業)通常利用15wt.%的葡聚糖溶液。因此，這需要對葡聚糖溶液進行濃縮的至少一個步驟。
[0012]產生的葡聚糖的分子量也是重要的。葡聚糖作為血液中的轉運介質被廣泛用于醫學領域。在這種情況下，它具有一個低分子量，在1000g/mol與70000g/mol之間。它還用于增強的油回收、化妝品以及食品領域，其中它充當增稠劑。它還用于造紙、鉆井和采礦中，例如應用于氧化鋁礦中，其中它充當絮凝劑(例如，參見文獻US 3，085，853)。為了達到作為絮凝劑的良好效率，通常需要高的分子量，通常高于100 OOOg/moL.[0013]有待解決的技術問題 [0014]因此，顯現出葡聚糖的微生物生產是受限的，這是因為在發酵之后，在沒有濃縮步驟的情況下，它不能生產出具有高于10%的葡聚糖濃度的溶液。而且，已經發現有必要對作為發酵結果而產生的葡聚糖進行純化，從而獲得在絮凝或稠化中的良好性能。當然，純化步驟趨向于增加成品的成本。
[0015]換言之，本發明要解決的問題是開發一種使得無需隨后的濃縮步驟來增加生產濃度成為可能的葡聚糖微生物生產方法。另一個目的是開發這樣一種生產葡聚糖的方法:該方法不需要隨后的純化步驟，獲得的葡聚糖剛好與純化的葡聚糖一樣有效，尤其是當它用作絮凝劑或增稠劑時。
[0016]本發明的說明
[0017]本發明目的在于克服前面提及的問題。
[0018]因此，本 申請人:已經開發了用微生物學方法獲得的高濃度的新的葡聚糖溶液，SP，在發酵之后無需濃縮步驟的情況下，該葡聚糖溶液的葡聚糖濃度高于IOwt.%，也就是說，通過優化發酵過程中的聚合參數實現。
[0019]具體地講，本 申請人:發現可以通過在細菌的接種之前，在培養基中摻入某個量的蔗糖，并且在接種之后添加蔗糖來實現這個目的。
[0020]更精確地講，本發明涉及生產葡聚糖溶液的微生物學方法，根據該方法，用能夠生產葡聚糖的細菌菌株的預培養物對一種包含蔗糖的培養基進行接種，然后直接回收在發酵結束時獲得的葡聚糖溶液，且無需隨后的濃縮步驟。
[0021]該方法的特征在于:
[0022]-接種之前，該培養基包含至少IOwt.%的蔗糖，
[0023]-接種之后，在使得向該培養基中添加的蔗糖(包括在接種之前存在的蔗糖)的總量是至少16wt.%的條件下,再次添加鹿糖，
[0024]-該葡聚糖溶液包含至少IOwt.%的葡聚糖。
[0025]因此，本 申請人:發現至少添加兩次蔗糖使得有可能避免細菌生長的抑制以及酶葡聚糖蔗糖酶的活性的抑制的現象。
[0026]而且，在接種之后，在使得蔗糖(包括在接種之前存在的蔗糖)的總量是至少16wt.%的條件下,再次添加鹿糖。
[0027]根據本發明，接種之后，蔗糖的添加可以是連續的或不連續的。[0028]當接種之后，進行若干次蔗糖的添加時，有利地為至少兩次。
[0029]至少兩次的添加有必要是分開的添加。然而，每次添加可以瞬時地或連續地進行，直到已經引入了所希望的量。將這兩種可能性結合也是可能的。
[0030]換言之，每次添加是瞬時地或連續地進行，或第一次添加是連續地進行而第二次添加是瞬時地進行，或反之亦然，直到已經引入了所希望的量。
[0031]為了進一步改進該葡聚糖溶液的終濃度，添加的蔗糖(包括存在于補加培養基中的鹿糖)的總量是至少20wt.%,優選25wt.%。
[0032]該葡聚糖溶液優選包含至少14wt.%的葡聚糖，并且更優選地至少18wt.%的葡聚糖。
[0033]根據本發明，能夠產生葡聚糖的菌株是明串珠菌屬(Leuconostoc)、鏈球菌屬(Streptococcus)、乳酸桿菌屬(Lactobacillus)或醋酸桿菌屬(Acetobacter)的菌株。在一個優選實施例中，它是腸膜明串珠菌的菌株，具體是菌株NRRL B 1299,NRRL B 742,NRRLB-512 F、NRRL B 523、V_2317 D、KCTC 3505、ZDRAVLJE SR.P0
[0034]因此，本發明的方法使得有可能在無需濃縮步驟的情況下，即，在發酵結束時直接地獲得具有高于IOwt.%、非常優選是高于14wt.%并且甚至更優選是高于18wt.%的濃度的葡聚糖溶液。
[0035]獲得的葡聚糖溶液基本上不需進行純化，包括直到使用的時候。換一種表達方式，在這種情況下，細胞材料和/或發酵培養基未與該葡聚糖溶液分離。換言之，它可以包含一些或所有的細胞材料和發酵培養基。具體地講，該溶液可以包含細菌、酶、連同培養液的鹽和元素。
[0036]為了促進微生物的生長，增加培養基的充氧量的水平。在實踐中，在發酵開始時的充氧量(oxygenation)大約為0.25vvm,發酵開始時是希望微生物在其期間進行增殖的一個步驟。其次，減少充氧量以促進酶的形成及其活性，并且因此促進蔗糖到葡聚糖的生物聚合反應。在實踐中，例如將充氧量降低至大約0.1vvm的值。
[0037]單位vvm對應于:相對于在其中進行葡聚糖生產的反應器的填充體積而言向培養基中引入的空氣的體積。
[0038]如稍后將看到的，生產的葡聚糖具有高的分子量。因此，發酵培養基是相當粘稠的。發酵培養基的攪拌必須是充分的，以確保酶葡聚糖蔗糖酶與蔗糖之間的質量傳遞，并且因此促進整個發酵罐的發酵的同質性。在實踐中，將發酵培養基在100rev/min與1000rev/min之間進行攪拌,優選在200rev/min與500rev/min之間。本領域的普通技術人員能夠結合微生物的生長、由攪拌產生的氧濃度以及蔗糖消耗來完美地調節這個參數。
[0039]從現有技術已知，發酵將一定比例的蔗糖轉化為酸，這導致pH的下降，通常從7.2下降至4.3。觀察到三個階段:
[0040]-第一階段，在此期間將pH調節至7.2，微生物生長的最佳條件；
[0041]-第二階段，在此期間將pH調節至6.6，酶形成的最佳條件；
[0042]-第三階段，在此期間將pH調節至5.2，葡聚糖形成的最佳條件。
[0043]為了優化這3個階段，常規地通過氫氧化鈉或氨的受控連續添加來調節pH，從而將PH控制至7.2、或6.6或5.2的恒定值。這個操作需要昂貴的專用設備。
[0044]本 申請人:出人意料地發現，可以通過添加比通常所用量大得多的一定量的緩沖液來控制pH，不受限制并且無需額外的設備。
[0045]更精確地，將初始pH升高至高于7.5的值，優選高于8。然后，根據本發明，借助大量的一種或多種緩沖鹽來控制PH的下降。具體而言，在發酵過程中，通常利用0.1wt.%的量的緩沖鹽(例如磷酸氫二鈉或磷酸氫二鉀)，然而根據本發明，添加的至少一種緩沖鹽的量為至少0.5wt.%，有利地為至少Iwt.%，優選至少2wt.%。這使得有可能控制pH的下降并且優化微生物的生長(最佳pH為7.2)和酶的形成(最佳pH為6.6)、以及葡聚糖的形成(最佳pH為5.2)的階段的持續時間，同時不受通過添加氫氧化鈉或氨型的堿的溶液來對三種不同PH值進行設計并調節的限制。
[0046]也可以使用其他緩沖鹽，例如磷酸銨、硼酸鈉或檸檬酸鈉。
[0047]盡管最佳生長在pH7.2處，但是如已經提及的，發現以pH8.0的起始pH獲得了令人滿意的生長率。在這個優選實施例中，在PH8.0處開始發酵。它允許從發酵一開始就積累葡聚糖，因此獲得高于IOwt.%、優選高于14wt.%、并且更優選高于18wt.%的最終的葡聚糖濃度。
[0048]有利的是，在pH高于5、優選5.4、任選5.3處停止發酵，這高于常規的4.5-4.8的值。本 申請人:出人意料地發現，在pH5.4、任選5.3處停止發酵使得改進由此生產的葡聚糖溶液的絮凝和稠化性能成為可能。而且，以在PH5.4、任選5.3處停止發酵形成并獲得的葡聚糖對應于最大粘度的葡聚糖。
[0049]在實踐中，進行培養和生物轉化的溫度在15°C與35°C之間。在一個優選實施例中，初始溫度是在25°C 與35°C之間，持續4h與8h之間的時期，這使得優化微生物的生長成為可能。然后，降低溫度并且在18°C與24°C之間，持續發酵的剩余時間，即，持續10小時與30小時之間的時期，以用于優化酶和葡聚糖的形成。
[0050]在一個優選實施例中，并且與通常的技術相反，包括細菌菌株的生產、酶的生產以及葡聚糖的生產的步驟在內的發酵是在同一反應器中進行，這簡化了生產。
[0051]相當出人意料地，并且與常規實踐相反，該方法可以在基本上未滅菌的反應器中進行。
[0052]有利的是:
[0053]-在使用之前，用具有低于Iμ m、優選小于或等于0.3μπι的直徑的過濾器將水預過濾；
[0054]-在使用之前，用具有低于0.5 μ m、優選小于或等于0.3 μ m的直徑的過濾器將空氣預過濾；
[0055]-接種物比例是在0.5與30之間，優選在I與20之間，非常優選在5與10之間。接種物比例對應于向發酵罐中添加的預培養溶液占發酵罐中總體積的體積百分比。
[0056]根據本發明，本發明的葡聚糖的分子量在100 000g/mol與5億g/mol之間變化。優選地，它高于500 000g/mol并且非常優選在I百萬g/mol與5千萬g/mol之間。
[0057]因此，本發明還涉及可以通過以上所述的方法獲得的以下基本上未純化的葡聚糖原溶液，該原溶液包含至少IOwt.%、有利地為至少14wt.%、優選至少18wt.%的具有在100000g/mol與5億g/mol之間的分子量的葡聚糖。
[0058]表述“葡聚糖原溶液”指代在補加有蔗糖的情況下對以上所說明的種類的細菌培養物進行發酵時在結束時獲得的葡聚糖溶液，該溶液在發酵結束時既沒有基本上被純化，也沒有被濃縮。所以，該葡聚糖溶液像現在這樣在該溶液中有雜質的存在下來使用。這些雜質具體是細菌細胞、溶解的細胞的組分(包括脂類、蛋白以及核酸)、酶、培養基的鹽、未轉化的蔗糖、其他糖(例如單糖，像果糖、二糖以及寡糖)、緩沖鹽、寡肽、有機酸(例如乳酸或氨基酸)、連同培養基的其他成分。
[0059]根據本發明，該葡聚糖原溶液包含至少2wt.%、優選至少5wt.%、有利地為至少8wt.%的雜質，尤其是以上說明的一些或全部的雜質。雜質的濃度通過從該原溶液的干物質的總濃度中減去葡聚糖濃度來測量。
[0060]在用3體積的甲醇對該原溶液進行沉淀并且將沉淀物在105°C下過夜干燥之后，通過重量分析法測量葡聚糖濃度。將葡聚糖原溶液在105 °C下過夜干燥之后，通過重量分析法測量總的干物質。
[0061]本發明還涉及以上所定義的葡聚糖原溶液作為固體顆粒的水性懸浮液的絮凝劑、凝結劑、沉淀劑、沉降劑或傾析劑，亦或作為水性介質的增稠劑的用途。
[0062]更精確地講，根據本發明的葡聚糖溶液可以在需要將水與固體顆粒分離的許多工藝中使用，這些固體顆粒可以是生物源、有機源或礦物源的。例如，我們可以提及，用于處理城市廢水和工業廢水的工藝，用于顆粒的絮凝、凝結和沉淀的工藝，以及用于礦業流出物的流變學修飾和抗塵操作的工藝。這里的例子尤其是用于從通過拜爾法(Bayer process)提取氧化鋁而得到的水合氧化鋁的絮凝，或用于從浙青砂的開采而得到的流出物的絮凝。該葡聚糖溶液還可以用作礦物晶體的生長修飾劑。
[0063]拜爾法用于通過將鋁礬土溶解于極端堿性的水性溶液中而從鋁礬土中提取氧化鋁。在溶解結束時，獲得由水和礦物顆粒(包括水合氧化鋁)組成的泥、或消解物。
[0064]如已經提及的，根據本發明的葡聚糖原溶液還可以用作水性介質的增稠劑并且尤其用于增強的油回收和化妝品領域中。
[0065]取決于懸浮液的性質和葡聚糖的分子量，用于這些應用的葡聚糖的濃度可以不同。通常，所述量在Ig/噸的總固體至1000g/噸之間變化。優選地，使用的量在5g/噸與500g/噸的總固體之間變化。
[0066]對于這些應用，葡聚糖的分子量是相對高的。根據本發明的具有高于100 OOOg/mol的分子量的葡聚糖給出了良好的結果。然而,具有至少500 000g/mol、優選I百萬g/mol與5千萬g/mol之間的分子量的那些是優選的。在實踐中，分子量將不超過5億g/mol。
[0067]還相當出人意料的是，用基本上未純化的葡聚糖在固體顆粒的水性懸浮液的絮凝中獲得了極好的結果。實際上，通常認為培養基的雜質和有機材料(例如細菌、酶、鹽以及發酵培養基的有機組分)對于此類型的應用是不希望的，因為它們降低絮凝性能。但是出人意料地，即使它基本上是未純化的，但是本發明的葡聚糖溶液是有效的。
[0068]在此類型的應用中，可以將葡聚糖溶液與任何其他常規使用的添加劑進行組合，這些添加劑例如水溶性聚合物，并且尤其是基于丙烯酰胺、丙烯酸酯、異羥肟酸、多胺、或二烯丙基二甲基氯化銨的那些。
[0069]本發明以及來源于它的優點將從以下實例中變得清楚。
[0070]在這些實例和在本說明書中，使用的術語具有以下定義。
[0071]術語接種意指將一定量的微生物水性懸浮液轉移至大量的水性介質中以允許這些微生物更大量地發育并且增殖。[0072]術語瓊脂指代通常用于皮氏培養皿(Petri dish)中的液體培養基的膠凝并且充當用于微生物發育的基質的化合物。
[0073]術語MRS培養基對應于一種常規使用的培養基，其構成如下(/升水性制品):
[0074]-蛋白胨10.0g
[0075]-肉膏8.0g
[0076]-酵母提取物4.0g
[0077]-葡萄糖20.0g
[0078]-三水合乙酸鈉5.0g
[0079]-檸檬酸銨2.0g
[0080]-吐溫80 lml
[0081]-磷酸氫鉀2.0g
[0082]-七水合硫酸鎂0.2g
[0083]-四水合硫酸錳0.05g
[0084]實例1:無需濃縮步驟并且無需純化的高濃度的葡聚糖溶液的生產
[0085]將短于一周的腸膜明串珠菌B512的新鮮培養物接種于MRS培養基中，其中20g的葡萄糖已經被20g的蔗糖替換，補加有20g/L的瓊脂、100ml的沒有瓊脂的相同的培養基，預先在121°C下滅菌20min。在伴隨150rpm的攪拌下，將此培養物在30°C下培育24h。然后，將此預培養物轉移至5L的沒有瓊脂的相同的已滅菌培養基中。將它以同樣的方式進行培育，并且然后將其轉移至100L的沒有瓊脂的相同的已滅菌培養基中。在2000L的已滅菌培養基中進行同樣的操作。將這個最后的預培養物接種于14000L的水中，該水包含沒有瓊脂、補加有16wt.%蔗糖、2.25%磷酸氫二鉀以及0.05%Rhodorsil481消泡劑的相同的培養基。培養基未滅菌但是將水事先在0.22 μ m下進行過濾。在30°C下發酵5h并且連續添加0.25vvm的在0.22 μ m下進行過濾的空氣之后，將溫度降至22°C。發酵1Oh之后，將它降至
0.1vvm的空氣并且添加6%的蔗糖，并且在14h之后，再次添加6%的蔗糖。發酵15h之后，停止通氣。18h之后，在發酵液中獲得18.6%的葡聚糖干物質，該發酵液包含生物質以及其他雜質。
[0086]實例2:葡聚糖的純化
[0087]將50kg的從根據實例1的發酵獲得的葡聚糖原溶液進行稀釋，并且與200kg的去離子水混合。將此混合物在具有500kD的截止值的中空聚砜纖維類型的超濾膜上通過透析進行切線過濾，從而去除來自該培養基的所有鹽類以及其他雜質。穿過膜的發酵培養基的鹽被包含在濾液(穿過過濾器的那些)中。經由滲余物(沒有穿過過濾器的那些)的再循環將葡聚糖濃縮直至葡聚糖的初始體積。
[0088]再次將50kg的滲余物用200kg的去離子水進行稀釋，并且再次通過透析過濾和再循環進行濃縮，直到以69.2%的產率獲得44kg的被純化至14.7%濃度的葡聚糖。
[0089]實例3:未純化的葡聚糖相對于純化的葡聚糖的效力
[0090]將參照品純化的葡聚糖以及來自實例1和2的那些在500ml的去離子水中稀釋至
0.1%的活性物質的濃度。使用磁棒將它們在攪拌板上劇烈攪拌30min。
[0091]平行地，為了去除由拜爾法獲得的消解物中的水合氧化鋁的濃縮物中的變化，進行以下操作。將80g的從氧化鋁礦或消解物(直接取自氧化鋁采礦工廠)中獲得的干燥的水合氧化鋁混合于I升的拜爾液(Bayer liquor)中，然后過濾以去除水合氧化鋁。
[0092]使用放置于加熱至65°C的浴中的1000-ml刻度量筒進行測試。相對于水合氧化鋁的量，以從2g/t至20g/t活性物質的比率添加葡聚糖。因為一個礦井與另一個礦井、并且在同一個礦井中某天與第二天的水合氧化鋁的濃度會變化，因此這個裝置被廣泛地用于工業中。所以，相對于水合氧化鋁的量來調節葡聚糖的量是必要的。
[0093]在從1000ml至700ml的范圍內，以m/s來測量沉降速率。這是澄清的上清液與濃縮的懸浮液之間的分離的水平面從1000ml刻度到700ml所用的時間。
[0094]在沉降15min之后，通過確定獲得的上清液的干物質的量來評估上清液的澄清度:從刻度量筒中取出100ml的上清液，然后過濾、干燥(在105°C下2小時)，并且對上清液稱重。
[0095]通過觀察量筒底部的沉積物對壓實度進行評估，并且10分鐘之后借助刻度量筒進行測量。所有的測試進行三次并且得到平均值。
[0096]結果:
[0097]A.中國廬山的氧化鋁礦
【權利要求】
1.生產一種葡聚糖溶液的微生物學方法，根據該方法，用能夠生產葡聚糖的一種細菌菌株的預培養物對一種包含蔗糖的培養基進行接種，然后直接回收在發酵結束時獲得的葡聚糖溶液，無需隨后的濃縮步驟，其特征在于: -在接種之前，該培養基包含至少IOwt.%的鹿糖， -在接種之后，在使得該培養基中的包括在接種之前存在的蔗糖的蔗糖總量是至少16wt.%的條件下,再次添加鹿糖。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于接種之后，向該培養基中連續地或不連續地添加蔗糖。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于接種之后，至少添加兩次蔗糖。
4.根據以上權利要求之一所述的方法，其特征在于添加的包括存在于補加培養基中的鹿糖的鹿糖總量是至少20wt.%,優選至少25wt.%。
5.根據以上權利要求之一所述的方法，其特征在于在發酵開始時將pH固定在值8處，然后在高于5的值處停止反應。
6.根據以上權利要求之一所述的方法，其特征在于在發酵過程中，添加至少0.5wt.%的至少一種緩沖鹽，有利地為至少Iwt.%、優選至少2wt.%的鹽。
7.根據以上權利要求之一所述的方法，其特征在于該細菌菌株是腸膜明串珠菌B512的菌株。
8.根據以上權利要求之一所述的方法，其特征在于在同一個反應器中進行包括該細菌菌株的生產、酶的生產以及葡聚糖的生產的步驟在內的發酵。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于該反應器基本上是未滅菌的。
10.通過根據權利要求1至9之一所述的過程可獲得的包含至少14wt.%、有利地為至少18wt.%的葡聚糖的基本上未純化的葡聚糖原溶液。
11.根據權利要求10所述的葡聚糖原溶液，其特征在于它包含至少2wt.%、優選至少5wt.%、有利地為至少8wt.%的雜質。
12.根據權利要求10或11之一所述的葡聚糖原溶液，其特征在于，該葡聚糖的分子量在100000g/mol與5億g/mol之間，有利地為500000g/mol并且優選是在I百萬g/mol與5千萬g/mol之間。
13.根據權利要求11至12之一所述的葡聚糖原溶液作為固體顆粒的水性懸浮液的絮凝劑、凝結劑、沉淀劑、沉降劑或傾析劑，亦或作為水性介質的增稠劑的用途。
14.根據權利要求11至12之一所述的葡聚糖原溶液作為從氧化鋁提取得到的水合氧化鋁的一種絮凝劑的用途。
【文檔編號】B01D21/01GK103620048SQ201280031033
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2012年6月18日 優先權日:2011年8月1日
【發明者】馬爾科·威澤 申請人:S.P.C.M.股份公司