集成固相微萃取的微流控芯片以及檢測方法

專利名稱：：集成固相微萃取的微流控芯片以及檢測方法
技術領域：
：本發明屬于樣品分析檢測領域，的設計及其在分析檢測領域的應用方法。更具體地涉及具有樣品濃縮功能的微流控芯片
背景技術：
：樣品預處理一直是樣品分析過程中最關鍵和最耗時的環節。傳統的溶劑萃取是樣品預處理常用手段之一，但它具有使用有毒的有機溶劑、操作繁瑣等缺點。為此，人們發展了無溶劑萃取技術，但其設備復雜，試驗條件苛刻，不適于廣泛應用。1989年，Pawlizyn等在固相萃取的基礎上開發了固相微萃取技術，該技術是在一個石英纖維中實現樣品的萃取和濃縮，濃縮后的樣品直接用于進樣，因此它集采集、萃取、濃縮和進樣于一體，簡單快速，可方便實現與氣相色譜或高效液相色譜的聯用。但固相微萃取技術也存在以下缺點石英纖維在使用過程中極易折斷；對復雜基體樣品萃取時易造成涂層污染；涂層種類不多，限制了其應用范圍；商品化纖維價格昂貴，不易實現大眾化和普及化。為了解決這些問題，研究者們在固相微萃取基礎上開發了固相微萃取膜技術和攪拌棒吸附萃取技術。這兩項技術與固相微萃取的基本原理相同，所使用的萃取相材料也一致，但攪拌棒上涂敷的萃取相的量通常為50-300ii1，是固相微萃取的100到1000倍，因此檢測靈敏度增加了100到1000倍。微流控芯片技術發展于20世紀90年代初，它依靠微機電加工技術在一張幾平方厘米大小的微芯片上加工各種微通道網絡，通過對微通道網絡中的流體(氣體和液體)的控制，將樣品分析中的采樣、純化、分離、進樣、檢測等操作在一個可多次使用的微芯片上完成，充分體現了分析儀器的微型化、集成化與便攜化的發展趨勢，已經成為當代分析化學領域研究的熱點與發展前沿。目前典型的微流控分析芯片常包括一個十字通道，如圖1所示，Rl為緩沖溶液池，R2為樣品池，R3為樣品廢液池，R4為廢液池，R0、R4為分離通道，R2、R0為進樣通道。目前將固相微萃取過程應用于微流控芯片的方法有兩種，一種是采用開口管形式在簡單玻璃片通道內涂漬一層吸附膜，該膜作為萃取的固定相。目前常用的一種固定相是C18;另一種是在芯片通道內通過原位聚合反應形成多孔的整體柱。但是這些方法皆有一定的缺陷，其一是在微尺寸的通道內形成吸附膜或者多孔整體柱的操作并不方便，無法控制和檢查固相吸附介質的形成質量；其二是該吸附膜或者聚合在通道的整體柱是固定在芯片的固相微萃取通道內，一旦吸附介質失效，則整個芯片不能再使用。
發明內容本發明提供一種集成固相微萃取的微流控芯片，用于克服現有技術中的上述缺陷。本發明的集成固相微萃取的微流控芯片，包括呈十字形排布的固相微萃取通道(以下稱萃取通道)和分離通道，在萃取通道的第一端與交叉點(萃取通道與分離通道的交匯處)之間設有萃取段，該萃取段填充有多孔微球作為固相微萃取的固定相。在一種具體實施方式中，該多孔微球為在無機顆粒表面包覆一層有機吸附膜。在一種更具體的實施方式中，該無機微珠為二氧化硅顆粒。在一種具體實施方式中，無機微珠表面包覆的有機吸附膜由羥基封端的聚二甲基硅氧烷(HO-PDMS)組成，也可以使用其他材質的吸附膜，如聚乙二醇、聚丙烯酸酯、聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯(PDMS/DVB)、聚乙二醇/聚二甲基硅氧烷、聚乙二醇/二乙烯基苯(CW/PVB)、聚乙二醇/模板樹脂(DB/TR)等。在本發明的優選實施方式中，鄰近萃取通道的第一端設有第一池、第二池和第三池，分別連通至該第一端并分別作為樣品池、清洗池和洗脫池。在萃取通道的第二端設第四池作為第一廢液池。在分離通道的第一端設第五池，作為分離緩沖液池。在分離通道的第二端設第六池，作為第二廢液池。本發明的第二方面提供一種微流控芯片，其包括呈十字形排布的萃取通道和分離通道，其中，在萃取通道的第一端與交叉點(萃取通道與分離通道的交匯處)之間的預定段設有萃取段。在萃取通道和分離通道的交匯處設有第一檢測點，用于對洗脫液中的目標分析物洗脫效果進行評價，在分離通道的末端設有第二檢測點，用于檢測在分離通道中被分離的目標分析物。在一種具體實施方式中，該萃取通道被涂漬C18固定相。可替代地，該萃取通道內可以通過原位聚合反應形成多孔聚合物整體柱。優選地，可以在該萃取通道內填入微球，作為吸附相。在本發明的優選實施方式中，鄰近萃取通道的第一端設有第一池、第二池和第三池，分別連通至該第一端并分別作為樣品池、清洗池和洗脫池。在萃取通道的第二端設第四池作為第一廢液池。在分離通道的第一端設第五池，作為分離緩沖液池。在分離通道的第二端設第六池，作為第二廢液池。在本發明的第三方面，提供一種集成固相微萃取的微流控芯片進行樣品濃縮與檢測的方法，其中，微流控芯片包括呈十字形排布的萃取通道和分離通道，在萃取通道的第一端與交叉點(萃取通道與分離通道的交匯處)之間的預定段設有萃取段。在萃取通道和分離通道的交匯處設有第一檢測點，在分離通道第二端設有第二檢測點。該方法包括以下步驟a)樣品池中的樣品流經萃取通道并被萃取通道中的固定相吸附濃縮；b)通過洗脫液洗脫吸附在固定相上的樣品，使其洗脫液到達第一檢測點；C)利用第一檢測設備檢測在第一檢測點D1處的樣品；d)當發現在第一檢測點處存在待檢測樣品時暫停洗脫，控制載帶介質從第一檢測點D1向分離通道第二端R6或其附近的第二檢測點D2移動，在移動過程中實現分離；e)通過第二檢測設備在第二檢測點D2處對分離的樣品進行檢測。在上述方法的一種具體實施方式中，包括以下步驟a)樣品池中的樣品通過電動方式從到萃取通道的第一端導入，樣品流經填充床(萃取段)后樣品中目標分析物被萃取相吸附萃取；b)填充床經過來自清洗池的清洗液清洗后，洗脫池中的洗脫液流經填充床，吸附的目標分析物被洗脫后到達所述第一檢測點D1;c)利用第一檢測設備檢測所述第一檢測點Dl處的樣品；d)當發現在所述第一檢測點Dl處出現目標分析物的總體檢測信號最大時，停止洗脫，通過電壓切換，控制萃取通道和分離通道的交匯處中的洗脫液介質沿分離通道流動，通過第二檢測點(D2)最終達到廢液池；e)洗脫液介質中的目標分析物在分離通道中分離并通過第二檢測設備在所述第二檢測點D2處進行檢測。作為優選，第一檢測設備為激光誘導熒光檢測器。通過電泳技術實現樣品在分離通道中的分離。在本發明的第四方面，提供一種用于微流控芯片的固相微萃取材料。其由多孔性二氧化硅顆粒包被一層聚二甲基硅氧烷(PDMS)涂層而形成。與現有技術相比，本發明的微流控芯片上集成了固相微萃取模式，采用涂覆有機吸附層的無機微珠填充床作為萃取固定相，免除在芯片通道內壁涂漬萃取層的繁瑣操作，而且方便萃取材料的更換，可以實現在一個微流控芯片上實現樣品濃縮、分離與檢測全過程分析。圖1是現有技術中的一種典型微流控芯片的示意圖；圖2是根據本發明的一種具體實施方式的微流控芯片的示意圖。具體實施例方式本發明的一個特點在于，將涂覆有有機高分子吸附層的多孔性微球引入到微流控芯片的萃取通道中，以作為固相微萃取的固定相。該方法的優勢在于，根據目標分析物的種類和性質，可以選擇能更好吸附目標分析物的吸附材料涂覆在無機微珠上，提高了芯片式固相微萃取的靈活性和選擇性。并且，當固定相萃取效率變劣時，可以方便更換固定相而不用丟棄整個芯片，增加了芯片的通用性。此外，該固定相制備簡單，只需將涂覆有吸附層的微球填充入固相微萃取通道即可，無需進行復雜的通道內涂覆或原位聚合操作，且質量易控。多孔微球該多孔微球可以完全由有機吸附材料形成。也可以在無機微珠的表面通過化學健合包覆一層有機吸附材料。吸附材料可以是現有技術中適用于固相萃取的所有材料，其可以根據芯片的特定分析對象來選擇。這些吸附萃取材料包括但不限于聚二甲基硅氧烷(PDMS)、聚乙二醇(CW)、聚丙烯酸酯(PA)、聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯(PDMS/DVB)、聚乙二醇/聚二甲基硅氧烷(CW/PDMS)、聚乙二醇/二乙烯基苯(CW/PVB)、聚乙二醇/模板樹脂(DB/TR)等。目前常用的萃取材料是聚二甲基硅氧烷和聚乙二醇。可以用于本發明的無機微珠可以有多種，例如金屬單質、金屬氧化物或固態非金屬氧化物，可以利用的無機材料的例子包括但不限于金、銀、銅、鎳、鐵、氧化鋅、氧化鋁、氧化鋅、二氧化硅等，其中優選二氧化硅。本發明中提出一種優選的用于固相微萃取的微球，其由多孔性二氧化硅顆粒包被一層聚二甲基硅氧烷(PDMS)涂層而形成。二氧化硅顆粒的直徑適宜在在25iim之間，涂附的聚二甲基硅氧烷萃取層厚度在l2iim之間。這種多孔性二氧化硅顆粒容易從市場得到。上述二氧化硅顆粒可以為磁性顆粒(也稱為二氧化硅磁性微球)，很容易從市場上得到。在一種具體實施方式中，包被二氧化硅顆粒的過程主要有三步顆粒的預處理，溶膠凝膠的制備，包被以及老化過程。(1)二氧化硅微球的預處理將二氧化硅微球先用有機溶劑清洗，然后浸泡在堿性溶液中，使微球表面的硅羥基充分裸露，再用浸泡在酸性溶液中一定時間，最后用去離子水充分洗滌二氧化硅微球至中性，放入烘箱中烘干備用。(2)溶膠凝膠的制備將一定量的PDMS-OH溶于一定量二氯甲烷中，然后依次加入一定量的甲基三甲氧基硅烷，聚甲基含氫硅氧烷，和三氟乙酸，迅速將混合物振蕩混勻，直至形成澄清透明的溶膠溶液。(3)包被以及老化過程將一定量的二氧化硅微球浸泡在上述溶膠溶液中成膠，同時超聲一定時間，然后用去離子水洗滌，并置于烘箱中老化一定時間。下面以一個實例來例舉說明用于本發明的包被微球的制作過程。(1)二氧化硅磁性微球的預處理將二氧化硅微球(粒徑5iim)溶于二氯甲烷中，渦流振蕩(2min)，洗滌5min，然后用磁鐵將二氧化硅磁性微球吸附在試管底部，棄去二氯甲烷，再將磁性微球浸泡在lmol/LNaOH中，充分振蕩混勻，放置8h，使二氧化硅磁性微球表面的硅羥基充分裸露；再用磁鐵將磁性微球與NaOH溶液分離，并將其浸泡在0.1mol/LHC1中放置8h。最后用去離子水充分洗滌二氧化硅磁性微球，使其至中性，放入6(TC烘箱中烘干備用。(2)溶膠凝膠的制備表1列出了PDMS涂層的成分、作用和化學結構式。從表中可以看出，配置溶膠溶液需要溶膠前體MTMS、包被層、鈍化劑PMHS和催化劑TFA。將30iiLPDMS-OH溶于600iiL二氯甲烷中，然后依次加入50iiLMTMS，50iiLPMHS，和50iiLTFA。迅速將混合物振蕩混勻，直至形成澄清透明的溶膠溶液。表1PDMS涂層的成分、作用和化學結構式<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>(3)包被以及老化過禾:'王將lmg二氧化硅磁性微球浸泡在上述溶膠溶液中成膠，同時超聲30min，然后用去離子水洗滌兩次，并將包被好的磁性微球置于6(TC烘箱中老化10h。上述通過多孔性二氧化硅顆粒包被一層聚二甲基硅氧烷(PDMS)涂層的萃取材料相比于現有技術具有明顯改善的樣品萃取回收率。樣品萃取回收率即萃取層吸附的溶質的量(mPDMS)和水溶液中原來的溶質的量(m。)的比值，其由下式表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>由下式可知，萃取回收率取決于分配系數KPDMS/W和相比13。對于分配系數相同的組分，相比P越小，萃取回收率越大，通過減小相比，可以使分配系數較小的組分得到較大甚至100%的萃取回收率。目前采用的固相微萃取膜技術和攪拌吸附萃取技術與傳統的纖維狀固相微萃取技術相比，都是通過大幅度增大萃取層聚甲基硅氧烷(PDMS)的體積，使相比大幅度減少，從而提高萃取回收率，提高檢測靈敏度。然而針對通常的攪拌吸附萃取技術而言，PDMS的體積通常為1001，樣品基體體積通常在10ml左右，其相比13=100。在微流控芯片中，如果雙圍堰式填充床深度為20iim，寬度為60iim，長度為5mm，微珠直徑為2um，PDMS涂附層厚度為1um，當微珠數量占用該填充床體積約50%的情況下，經計算，其相比e=1.14，即填充床中微珠表面的PDMS體積之和幾乎與填充床中的樣品基體體積相等，可見與攪拌吸附萃取相比，相比降低了約100倍，由此可知，對于那些由于分配系數較小無法在傳統纖維型固相微萃取模式和攪拌吸附萃取模式下獲得滿意萃取回收率的組分可以在芯片式固相微萃取模式中實現100%萃取回收率。因此，采用芯片式固相微萃取一方面可以大大擴展目標分析物的種類，另一方面可以大幅度提高萃取效率。芯片的結構和構建在本發明的一種優選方式中，其采用的芯片結構如圖2所示。l為洗脫通道，洗脫通道1的一部分AB是包含有微萃取固定相的填充床；2為分離通道；R^為樣品池，用于放待分析樣品；112為清洗池，用于放清洗試劑；&為洗脫池，用于放洗脫液；R4為廢液池，用于收集流經洗脫通道l的洗脫液、清洗液和分析后的樣品；&為分離緩沖液池，用于放置分離用緩沖溶液；Re為分離廢液池。02為檢測點，用于檢測樣品的分離峰。在本發明中，可以不對該交叉處的尺寸做擴大處理，或者其尺寸略大于分離通道的寬度，而且該交叉處作為第一檢測點D1，用于實時檢測洗脫到交叉處的樣品。為了形成具有預定微米級溝槽設計(例如圖2所示的結構)的芯片，可以先設計具有相應微圖案的膠片狀掩膜，通過曝光將掩膜上的微圖案轉移到涂覆一層光刻膠的玻璃基片上，然后用氫氟酸刻蝕液在玻璃基片的曝光部分刻蝕，形成大約5ym深的溝槽結構，再將萃取通道1的下游部分和整個分離通道用透明膠帶掩蓋，繼續刻蝕萃取通道的填充床部分，使其具有適于填充固定相的尺寸，例如形成深度為30ym的單圍堰填充床結構。將聚二甲基硅氧烷(PDMS)聚合物制得的蓋片經等離子化清洗器處理后，鍵合到玻璃基片上，并在蓋片上粘上多個儲液槽I^至Re，完成芯片的制備。PDMS蓋片的制備和芯片的鍵合該片的制備和芯片的鍵合已經是先有技術中已知的技術。下面以一個實例來例舉說明。(l)硅片基片的處理將硅片置于H2S04:H202(體積比3:1)的混合液中，加熱至微沸lh，待冷卻后，將硅片至于丙酮中超聲5min。(2)去離子水清洗硅片，并超聲5min，超凈臺上晾干。然后置于加熱板上，IO(TC加熱30min。(3)將硅片放入真空干燥器中，硅烷化lh。(4)將PDMS預聚物和固化劑按照10:1的比例混合攪拌均勻，澆鑄到硅片上。(5)真空脫氣30min以上，直至預聚物中看不到任何氣泡為止。(6)將預聚物放到6(TC左右的烘箱中烘烤約2h，預聚物即可完全固化。玻璃基片和PDMS蓋片分別制備完畢后，即可進行兩者的鍵合，過程如下首先用去污粉徹底清洗玻璃表面的污漬，然后在乙醇中、水中依次超聲15min，再置于H2S04:H202(體積比3:1)的混合液中加熱煮沸30min，待冷卻后，用鑷子將玻片取出，去離子水清洗干凈，置于超凈臺里晾干。接下來對PDMS蓋片和已經清洗干凈的玻璃基片進行等離子體處理2min，迅速將PDMS蓋在玻璃基片上，壓緊，即完成了玻璃-PDMS芯片的制作。最后在R1，R2，R3，R4，R5，R6的位置用環氧乙烷膠粘上儲液槽。微球的填裝可以采用壓力或抽氣的方式將前述微球裝入萃取通道，將包被好有機吸附層的微球溶于乙腈中配成勻漿液，用注射器吸入此勻漿液，在壓力泵的驅動下，將微球壓入到固相微萃取填充床中。樣品的檢測在進行樣品分析時，在例如圖2所示的樣品池中放入分析樣品，在清洗池R2中放入清洗試劑；在洗脫池113中放入洗脫液，在分離緩沖液池115中放入分離緩沖液。樣品池中的樣品通過電動方式導入到萃取通道中，樣品流經填充床后樣品中目標分析物被萃取相吸附萃取；填充床經過來自清洗池的清洗液清洗后，洗脫池中的洗脫液流經填充床，吸附的目標分析物被洗脫濃縮到達富集池，此時停止洗脫，通過電壓切換，控制萃取通道和分離通道的交匯處中的洗脫液介質沿分離通道流動，通過第二檢測點最終達到廢液池(R6);目標分析物在分離通道中分離并通過第二檢測點處進行檢測。在本發明的一種具體實施方式中，通過在相應端施加電壓來控制流體在通道中的流動。例如，在Ri施加高壓、114接地，樣品池中的樣品流向填充床，在&施加高壓、&接地，清洗池中的清洗液以清洗填充床，去除填充床上吸附的檢測干擾物；在&施加高壓，114接地，洗脫池中的洗脫液洗脫填充床，將被吸附的目標分析物洗脫下來。當需要將洗脫樣品進行分離以便在02點逐個檢測樣品成分時，可以將&、114兩端的電壓懸浮，將電壓切換到Rs高壓、Re接地，開始電泳分離過程。在本發明中，通常通過電泳技術實現樣品在分離通道的分離，這是現有技術所熟知的。通過電泳使樣品中的不同成分在不同的時間到達檢測點D2，被檢測器檢測。在交叉處作為第一檢測點D工的情況下，可以通過激光誘導熒光法跟蹤經過第一檢測點D工處的樣品，當發現較大的洗脫峰時，立即中止在Rp114兩端施加電壓，而將電壓切換到R5和Re兩端，通過電泳使樣品中的不同成分在不同的時間到達檢測點D2，進而被檢測器檢測。這種方法可以很方便地判斷洗脫出的樣品何時到達交叉處，以便在恰當的時候進行分離。這種方法的另一益處在于，洗脫過程和分離過程可以完全分開，在確定最優化條件時互不干擾，并且可以對同一批樣品中的多個不同類別目標分析物按照被洗脫出的先后順序選擇性進行分離檢測。與傳統方法相比，用于本發明的這種方式可以提高分離效率，使在傳統芯片電泳中不能很好分離的目標物質在本發明芯片結構中得以完全分離。尤其對于多組分的復雜樣品，可以通過編制電壓程序來完全控制各組分的洗脫順序和分離順序，使得洗脫效果和分離效果都達到最優。在本發明的一個操作例中，以熒光素異硫氰酸脂標記的苯丙氨酸(FITC-Phe)為樣品，其初始濃度為0.1iimol/L。經一段時間以后，FITC-Phe被富集到填充床上，清洗填充床后，用9mmol/L的乙酸鈉溶液(含10^乙腈)洗脫，經40s后在第一檢測點Dl檢測到洗脫峰。通過計算富集因子，富集400s以后濃縮倍數可達到87。混合樣品FITC-Phe和熒光素異硫氰酸脂標記的甘氨酸(FITC-Gly)經過50S富集以后，用9mmol/L的乙酸鈉溶液(含10%乙腈)可將其同時洗脫下來，以1Ommol/L硼砂緩沖液(pH9.1)為分離緩沖液，分離電壓1.2kV，可實現FITC-Phe和FITC-Gly兩種組分在分離通道的基線分離，其濃縮倍率分別為12.2倍和16.6倍。9權利要求一種集成固相微萃取的微流控芯片，包括呈十字形排布的萃取通道(1)和分離通道(2)，其特征在于，在所述萃取通道的第一端與交叉點之間設有萃取段，其深度大于所述萃取通道的其余部分，寬度大于或等于其余部分，并且填充有多孔微球作為固相微萃取的固定相。2.根據權利要求1所述的微流控芯片，其中，所述微球由無機顆粒和涂覆在其表面的吸附膜構成。3.根據權利要求2所述的微流控芯片，其中，鄰近萃取通道的第一端設有第一池、第二池和第三池，分別連通至該第一端并分別作為樣品池、清洗池和洗脫池，在所述萃取通道的第二端設第四池作為第一廢液池，在所述分離通道的第一端設第五池，作為分離緩沖液池，在所述分離通道的第二端設第六池，作為第二廢液池。4.根據權利要求1所述的微流控芯片，其中的吸附膜由羥基封端的聚二甲基硅氧烷形成。5.根據權利要求1所述的微流控芯片，其中，在所述萃取通道(1)和分離通道(2)的交匯處設有第一檢測點(Dl)，用于對固相微萃取洗脫液中目標分析物的檢測。6.—種集成固相微萃取的微流控芯片進行樣品濃縮與檢測的方法，其中，所述微流控芯片包括呈十字形排布的固相微萃取通道(1)和分離通道(2)，在所述萃取通道(1)中距離交叉處(D1)的預定段設有填充床，其中填充有微球作為固相微萃取的萃取相，并且，在所述萃取通道(1)和分離通道(2)的交匯處設有第一檢測點(Dl)，在分離通道(2)的末端設有第二檢測點(D2)，所述方法包括以下步驟a)樣品池(Rl)中的樣品通過電動方式導入到固相微萃取通道(l)中，樣品流經填充床后樣品中目標分析物被萃取相吸附萃取；b)填充床經過來自清洗池(R2)的清洗液清洗后，洗脫池(R3)中的洗脫液流經填充床，吸附的目標分析物被洗脫后到達所述第一檢測點(Dl);c)利用第一檢測設備檢測所述第一檢測點(Dl)處的樣品；d)當發現在所述第一檢測點(Dl)處出現目標分析物的總體檢測信號最大時，停止洗脫，通過電壓切換，控制萃取通道(1)和分離通道(2)的交匯處中的洗脫液介質沿分離通道(2)流動，通過第二檢測點(D2)最終達到廢液池(R6);e)洗脫液介質中的目標分析物在分離通道(2)中分離并通過第二檢測設備在所述第二檢測點(D2)處進行檢測。7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述第一檢測設備和第二檢測設備為激光誘導熒光檢測器或電化學檢測器。8.根據權利要求6所述的方法，其中，在步驟e)中，通過電泳實現樣品在所述分離通道中的分離。9.一種微流控芯片，其包括呈十字形排布的萃取通道和分離通道，其中，在萃取通道的第一端與交叉點之間的預定段設有萃取段，在萃取通道和分離通道的交匯處設有第一檢測點，在分離通道的末端設有第二檢測點。10.—種用于集成了固相微萃取的微流控芯片的萃取材料，其由多孔性二氧化硅微球包被一層聚二甲基硅氧烷(PDMS)涂層而形成。全文摘要本發明涉及一種集成固相微萃取的微流控芯片，包括呈十字形排布的固相微萃取通道和分離通道，在萃取通道的第一端與交叉點(萃取通道與分離通道的交匯處)之間設有萃取段，該萃取段填充有多孔微球作為固相微萃取的固定相。在一種具體實施方式中，該多孔微球為在無機顆粒表面包覆一層有機吸附膜。在一種更具體的實施方式中，該無機微珠為二氧化硅顆粒。本發明的微流控芯片不僅方便萃取材料的更換，而且可以在一個微流控芯片上進行樣品濃縮、分離與檢測的全過程分析。文檔編號B01D15/08GK101690855SQ200910235700公開日2010年4月7日申請日期2009年10月12日優先權日2009年10月12日發明者厲紅,李海芳,林金明,陳志鋒申請人:中國檢驗檢疫科學研究院