一種藍藻去除方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及了一種藍藻去除方法，屬于水環境保護領域。
【背景技術】
[0002]隨著經濟的飛速發展，人類對水資源的污染也日益嚴重。近年來由于一些內陸湖泊中水的營養化，每年夏季高溫天氣藍藻就會出現大爆發，也稱為水華；水華時，湖面上漂浮著一層綠色的、如油漆狀的藍藻，自水面向水體呈立方體分布。藍藻中的項圈藻可快速產生致死因子，破壞養殖對象的鰓組織，干擾其新陳代謝的正常進行，麻痹神經，使其死亡。藍藻中個別種不但活體帶毒，而且死亡個體分解會產生生物毒素一一藍藻毒素。藍藻毒素量多時可直接造成養殖對象中毒死亡，即使數量少，也可通過食物鏈積累效應危害養殖對象，直至危害人體。
[0003]目前，處理藍藻的主要方法分為外環境治理和內環境治理。內環境治理需要投入大量的人力物力進行引清沖污、搬迀污染企業等轉移污染方式，并沒有從根本上解決污染；內環境治理方面，如生物法、化學法各類治理藍藻的方法及處理劑，但至今難以得到廣泛、有效的應用，尤其化學方法中藥劑加入，會造成水生動植物的傷害，還會通過食物鏈進入人體，潛在二次污染。
【發明內容】
[0004]本發明所要解決的技術問題:針對于現有藍藻處理技術只能治標不能治本的弊端，提供了一種藍藻去除方法，通過從藍藻中提取藍藻毒素與食藻鳙魚內臟及組織的提取液混合物發霉，并將發霉后的混合溶液進行培養成具有溶藻性能的菌株，放入區域水體中，以在密閉箱中培育藍藻為載體，水為媒介，傳播到附近藍藻上，如此進行，波及整個區域水體，達到根除藍藻的目的。
[0005]為解決上述技術問題，本發明采用如下所述的技術方案:一種藍藻去除方法，其特征在于具體步驟為:
(1)取含有藍藻的水樣50?lOOmL，向其中加入乙醇，加入的乙醇與水樣體積比為3:5?4:5，在頻率為300?450赫茲的超聲波下震動15?25min ；
(2)將上述經超聲波處理過后的水樣調節pH為3.0?4.0，用無紡紗布過濾；
(3)將無紡紗布過濾后的濾液進行離心分離，取上清液；
(4)將上述上清液過碳酸鈣色譜柱，用體積含量為40%的甲醇水溶液淋洗，再用體積含量為95%的甲醇水溶液洗脫，得含有藍藻毒素的洗脫液；
(5)將上述的含有藍藻毒素的洗脫液濃縮、蒸餾，得藍藻毒素提取液；
(6)取鮮活3?5條鮮活鳙魚的內臟，清洗干凈后重復上述(I)?(5)步驟得鳙魚內臟及組織提取液；
(7)將藍藻毒素提取液與鳙魚內臟及組織提取液混合，在潮濕陰涼條件下使其發霉，待霉芽長到3?5cm為宜； (8)將發霉的混合液接種到固體培養基上，于25°C溫度下培養7?10天，得霉菌孢子培養物，所述固體培養基為瓊脂固體斜面；
(9)用無菌水將霉菌孢子培養物制成懸浮液接種到罐內已滅菌的培養基中，并通入無菌空氣、攪拌，于27°C溫度下培養20?28h，得種子培養液；
(10)然后將得到的種子培養液接種到含有苯乙酸前體的培養基中，通入無菌空氣，攪拌，并保持溫度培養5?8天，得霉素發酵液；
(11)將上述霉素發酵液冷卻，過濾，濾液在pH為2?2.5的條件下，用醋酸丁酯進行多級逆流萃取，再用PH7.0?7.2的緩沖液調節，活性炭脫色，經共沸蒸餾即可得霉菌提取液；
(12)把上述得到的霉菌提取液加熱煮沸，變為氣體通入充滿氮氣的密閉箱中，使其在氣相中濃度為50?80ppm，再把剛打撈上來的藍藻放入密閉箱中，自然吸收3?5天，待其顏色變淡發黑，從密閉箱中取出；
(13)以每30?50m2的區域面積投入30?50g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體。
[0006]本發明應用方法:以每30?50m2的區域面積投入30?50g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體，即可。
[0007]本發明的原理:通過從藍藻中提取藍藻毒素與鳙魚內臟及組織的提取液混合物并在一定的條件下發霉，篩選培養具有溶藻性能的菌株，放入區域水體中，以在密閉箱中培育藍藻為載體，水為媒介，傳播到附近藍藻上，如此進行，波及整個區域水體，達到根除藍藻的目的。
[0008]本發明與其他方法相比，有益技術效果是:
(1)無化學藥劑的使用，不會造成水生動植物的傷害，同時也不會通過食物鏈進入人體，潛在二次污染。
(2)與傳統方法相比，本發明所使用的方法處理藍藻具有效率高、能耗低的特性。
實施方式
[0009]—種藍藻去除方法，其特征在于具體步驟為:
(1)取含有藍藻的水樣50?lOOmL，向其中加入乙醇，加入的乙醇與水樣體積比為3:5?4:5，在頻率為300?450赫茲的超聲波下震動15?25min ；
(2)將上述經超聲波處理過后的水樣調節pH為3.0?4.0，用無紡紗布過濾；
(3)將無紡紗布過濾后的濾液進行離心分離，取上清液；
(4)將上述上清液過碳酸鈣色譜柱，用體積含量為40%的甲醇水溶液淋洗，再用體積含量為95%的甲醇水溶液洗脫，得含有藍藻毒素的洗脫液；
(5)將上述的含有藍藻毒素的洗脫液濃縮、蒸餾，得藍藻毒素提取液；
(6)取鮮活3?5條鮮活鳙魚的內臟，清洗干凈后重復上述(I)?(5)步驟得鳙魚內臟及組織提取液；
(7)將藍藻毒素提取液與鳙魚內臟及組織提取液混合，在潮濕陰涼條件下使其發霉，待霉芽長到3?5cm為宜；
(8)將發霉的混合液接種到固體培養基上，于25°C溫度下培養7?10天，得霉菌孢子培養物，所述固體培養基為瓊脂固體斜面； (9)用無菌水將霉菌孢子培養物制成懸浮液接種到罐內已滅菌的培養基中，并通入無菌空氣、攪拌，于27°C溫度下培養20?28h，得種子培養液；
(10)然后將得到的種子培養液接種到含有苯乙酸前體的培養基中，通入無菌空氣，攪拌，并保持溫度培養5?8天，得霉素發酵液；
(11)將上述霉素發酵液冷卻，過濾，濾液在pH為2?2.5的條件下，用醋酸丁酯進行多級逆流萃取，再用PH7.0?7.2的緩沖液調節，活性炭脫色，經共沸蒸餾即可得霉菌提取液；
(12)把上述得到的霉菌提取液加熱煮沸，變為氣體通入充滿氮氣的密閉箱中，使其在氣相中濃度為50?80ppm，再把剛打撈上來的藍藻放入密閉箱中，自然吸收3?5天，待其顏色變淡發黑，從密閉箱中取出；
(13)以每30?50m2的區域面積投入30?50g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體。
實例I
[0010]以每30m2的區域面積投入30g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體；在投放3天后，河道中藍藻出現大片的死亡，其死亡率達到了80%以上。
實例2
[0011]以每40m2的區域面積投入40g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體；在投放4天后，河道中藍藻出現大片的死亡，其死亡率達到了82%以上。
實例3
[0012]以每50m2的區域面積投入50g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體；在投放5天后，河道中藍藻出現大片的死亡，其死亡率達到了85%以上。
【主權項】
1.一種藍藻去除方法，其特征在于具體步驟為: (1)取含有藍藻的水樣50?lOOmL，向其中加入乙醇，加入的乙醇與水樣體積比為3:5?4:5，在頻率為300?450赫茲的超聲波下震動15?25min ； (2)將上述經超聲波處理過后的水樣調節pH為3.0?4.0，用無紡紗布過濾； (3)將無紡紗布過濾后的濾液進行離心分離，取上清液； (4)將上述上清液過碳酸鈣色譜柱，用體積含量為40%的甲醇水溶液淋洗，再用體積含量為95%的甲醇水溶液洗脫，得含有藍藻毒素的洗脫液； (5)將上述的含有藍藻毒素的洗脫液濃縮、蒸餾，得藍藻毒素提取液； (6 )取鮮活3?5條鮮活鳙魚的內臟，清洗干凈后重復上述(I)?(5 )步驟得鳙魚內臟及組織提取液； (7)將藍藻毒素提取液與鳙魚內臟及組織提取液混合，在潮濕陰涼條件下使其發霉，待霉芽長到3?5cm為宜； (8)將發霉的混合液接種到固體培養基上，于25°C溫度下培養7?10天，得霉菌孢子培養物，所述固體培養基為瓊脂固體斜面； (9)用無菌水將霉菌孢子培養物制成懸浮液接種到罐內已滅菌的培養基中，并通入無菌空氣、攪拌，于27°C溫度下培養20?28h，得種子培養液； (10)然后將得到的種子培養液接種到含有苯乙酸前體的培養基中，通入無菌空氣，攪拌，并保持溫度培養5?8天，得霉素發酵液； (11)將上述霉素發酵液冷卻，過濾，濾液在pH為2?2.5的條件下，用醋酸丁酯進行多級逆流萃取，再用PH7.0?7.2的緩沖液調節，活性炭脫色，經共沸蒸餾即可得霉菌提取液； (12)把上述得到的霉菌提取液加熱煮沸，變為氣體通入充滿氮氣的密閉箱中，使其在氣相中濃度為50?80ppm，再把剛打撈上來的藍藻放入密閉箱中，自然吸收3?5天，待其顏色變淡發黑，從密閉箱中取出； (13)以每30?50m2的區域面積投入30?50g上述從密閉箱中經霉菌處理后變淡發黑的藍藻計算，分區覆蓋整個區域水體。
【專利摘要】本發明涉及了一種藍藻去除方法，屬于水環境保護領域。本發明針對于現有藍藻處理的方法只能治標不能治本的弊端，提供了一種藍藻去除方法，通過從藍藻中提取藍藻毒素與食藻鳙魚內臟及組織提取液的混合溶液發霉，并將發霉后的混合溶液進行培養，提取霉菌溶液的方法對河道中藍藻治理，達到去除藍藻的目的。與傳統方法相比，本發明所使用的方法處理藍藻具有效率高、能耗低的特性；無化學藥劑的使用，不會造成水生動植物的傷害，同時也不會通過食物鏈進入人體。
【IPC分類】C02F3/34
【公開號】CN105130006
【申請號】CN201510400443
【發明人】黃勇, 余靜
【申請人】常州大學
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年7月9日