一株具有溶藻活性的芽孢桿菌及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一株具有溶藻活性的芽孢桿菌及其在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。從太湖水體中分離獲得了一株具有顯著溶藻活性的芽孢桿菌(Bacillus?sp.)Lzh-5，保藏號(hào)為CGMCC?No.8282，并且從其代謝產(chǎn)物中分離純化并鑒定出其有效溶藻成分六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮和3-異丙基-六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮，其中六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮和3-異丙基-六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮對(duì)銅綠微囊藻9110的半致死量LD50分別為5.7μg/mL和19.4μg/mL?？捎糜谛滦蜕餁⒃鍎┑难邪l(fā)和生產(chǎn)，最終應(yīng)用于湖泊藍(lán)藻水華的控制。
【專利說明】一株具有溶藻活性的芽孢桿菌及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及環(huán)境微生物領(lǐng)域，特別涉及一株分泌溶藻物質(zhì)的芽孢桿菌(Bacillussp.)Lzh-5及其在藍(lán)藻水華控制中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)前藍(lán)藻水華的控制技術(shù)可歸納為物理方法、化學(xué)方法和生物方法。物理方法如機(jī)械除藻、絮凝發(fā)除藻和電磁場(chǎng)除藻等可以作為水華爆發(fā)的輔助控制措施，但是缺點(diǎn)在于成本很高、設(shè)備復(fù)雜、治標(biāo)不治本，并且處理能力有限；化學(xué)方法如除草劑等化學(xué)殺藻劑可以直接殺死藻類，但這些化學(xué)物質(zhì)的專一性差，對(duì)水生生物毒性大，而且容易造成有害物質(zhì)殘留和二次污染。
[0003]基于物理方法和化學(xué)方法控制水華中存在的高成本、高難度、高污染等缺陷，生物方法因其環(huán)保、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)，受到越來越多的關(guān)注。針對(duì)藍(lán)藻的溶藻細(xì)菌(algae-lysingbacteria)是淡水生態(tài)環(huán)境系統(tǒng)的重要組成部分，對(duì)減少藍(lán)藻的生物量，維持生態(tài)平衡具有重要作用。
[0004]因此，本領(lǐng)域的技術(shù)人員致力于篩選高效溶藻細(xì)菌或分離富集溶藻細(xì)菌代謝產(chǎn)生的高效溶藻活性物質(zhì)，以開發(fā)微生物殺藻劑，用以安全和高效的控制藍(lán)藻水華問題。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]鑒于現(xiàn)有技術(shù)中物理方法和化學(xué)方法處理能力有限、容易造成二次污染的缺陷，本發(fā)所要解決的技術(shù)問題是尋找高效溶藻細(xì)菌及分離富集溶藻細(xì)菌代謝產(chǎn)生的高效溶藻活性物質(zhì)，用以安全和高效的控制藍(lán)藻水華問題。
`[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一株具有溶藻活性的芽孢桿菌及其代謝產(chǎn)物在藍(lán)藻水華控制中的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明公開了一株具有溶藻活性的芽孢桿菌(Bacillus sp.) Lzh_5，分類命名為芽孢桿菌Bacillus sp.,保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏單位名稱簡(jiǎn)寫為CGMCC，保藏號(hào)CGMCC N0.8282，保藏日期為2013年9月27日。保藏機(jī)構(gòu)地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編:100101，電話:86-10-64807355。
[0008]進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了上述芽孢桿菌Lzh-5在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。
[0009]進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了上述芽孢桿菌Lzh-5的發(fā)酵產(chǎn)物在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。
[0010]進(jìn)一步地，本發(fā)明公開了上述芽孢桿菌Lzh-5的發(fā)酵產(chǎn)物中兩種具有溶藻活性的有效成分，分別為具有結(jié)構(gòu)式(I)和(II)所示結(jié)構(gòu)的化合物，本發(fā)明提供了一種具有結(jié)構(gòu)式(I)和(II)所示結(jié)構(gòu)的化合物在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。
[0011]
【權(quán)利要求】
1.一株具有溶藻活性的芽孢桿菌(Bacillus sp.)Lzh_5,保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)CGMCC N0.8282，保藏日期為2013年9月27日。
2.如權(quán)利要求1所述的芽孢桿菌Lzh-5在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。
3.如權(quán)利要求1所述的芽孢桿菌Lzh-5的發(fā)酵產(chǎn)物在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。
4.一種具有結(jié)構(gòu)式(I)或(II)所示結(jié)構(gòu)的化合物在控制藍(lán)藻水華中的應(yīng)用。
5.一種溶藻菌劑，其特征在于，所述溶藻菌劑中包含權(quán)利要求1所述的芽孢桿菌(Bacillus sp.)Lzh_5。
6.一種溶藻藥劑，其特征在于，所述溶藻藥劑中包含權(quán)利要求1所述的芽孢桿菌(Bacillus sp.)Lzh-5的發(fā)酵產(chǎn)物，所述發(fā)酵產(chǎn)物為發(fā)酵液、發(fā)酵液濃縮物、發(fā)酵液粗提物或發(fā)酵液提取物。
7.一種控制藍(lán)藻水華的方法，包括如下步驟: 1)、發(fā)酵權(quán)利要求1所述的芽孢桿菌Lzh-5； 2)、萃取發(fā)酵液； 3)、萃取液蒸干得粗提物； 4 )、粗提物水溶后用于控制藍(lán)藻水華。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中步驟I)中，發(fā)酵條件為，芽孢桿菌Lzh-5接種于PH7.0的滅菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，28°C、200rpm環(huán)境條件下發(fā)酵48h，得到所述芽孢桿菌Lzh-5發(fā)酵液。
9.如權(quán)利要求7所述的方法，其中步驟2)中，萃取劑為乙酸乙酯。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中步驟2)中，乙酸乙酯與發(fā)酵液的體積比為1:1。
【文檔編號(hào)】C02F3/34GK103695342SQ201310683393
【公開日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月12日
【發(fā)明者】楊虹, 李正華, 譚晶, 柳向龍 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)