專利名稱：用蜂蜜殘渣促進宿輪蟲生長的方法
技術領域：
本發明屬于水污染控制技術領域，具體涉及一種用生物活性物質促進宿輪蟲 (ifo6rafrac^sp.)生長的方法。通過投加富含活性物質的蜂蜜殘渣而達到有效促進 宿輪蟲的生長的目的。
背景技術：
宿輪蟲是一種在基質(活性污泥、生物膜)上周叢生活、以懸浮顆粒為食物的小 型后生動物，它對減少污水處理系統中的懸浮固體并提高透視度有很大貢獻，但其在 污水處理裝置中的密度卻不高，因此，設法促進宿輪蟲的生長從而提高其密度對污水 處理具有非常重要的意義。
生物活性物質是一類植物或動物內源性物質，對生物機體有特定的活性功能。目 前生物活性物質主要用于醫療衛生、健康保健等方面，而用于如輪蟲這樣的小型后生 動物的研究還很少。當前的研究僅發現幾種生育酚化合物可增加宿輪蟲的壽命和生育 力，但對污水處理經濟成本過高。因此尋找一種經濟有效的生物活性物質成為解決宿 輪蟲在污水處理裝置中的密度的關鍵性問題。
蜂蜜殘渣是提取蜂蜜后剩余的廢渣，內含很多蜂膠和花粉，它們中含有黃酮類、 萜烯類、維生素和其它生物活性物質。目前利用蜂蜜殘渣來促進宿輪蟲的生長尚屬首 例，其對資源的循環利用也有重要的意義。
發明內容
本發明的目的是提供一種有效促進宿輪蟲生長的方法。
本發明是通過投加富含活性物質的蜂蜜殘渣，使宿輪蟲的生長得到顯著促進；同 時可使蜂蜜殘渣變廢為用，實現資源的循環利用。
一種用蜂蜜殘渣促進宿輪蟲生長的方法，其特征在于具體步驟如下
a. 配制輪蟲的培養液，其配比為0.06 1.00gCaCO3， 6 8mL 1M的磷酸鹽緩沖液
(pH=6.5)，加入蒸餾水配至lOOOmL，煮沸并滅菌；
b. 用肉湯培養基大量培養葡萄球菌(5top/^/ococa^)，經離心后作為輪蟲食物；
c. 預培養從污水中采集宿輪蟲，分離后置入口徑為60mm的培養皿中，加入8mL步驟a的培養液、步驟b的葡萄球菌10S 10Scells'mL—1、蜂蜜殘渣5昭，實驗室 內在25'C光照培養箱中進行培養，預培養時間持續7天；
d. 在培養皿中放入6個從預培養的培養皿中隨機挑取的輪蟲幼體(不帶卵輪蟲)，加 入8mL的輪蟲培養液，葡萄球菌10S 10Scells'mL'1，再加入3 15昭的蜂蜜殘渣， 每天向培養皿中補充與初始日培養皿中含同等濃度的蜂蜜殘渣及葡萄球菌的輪蟲 培養液；
e. 每隔24小時計數培養容器中成活宿輪蟲的數量，培養實驗ll天后結束。
本發明的主要內容為在口徑為60mm的培養皿中，內含8mL用CaC03、磷酸 鹽緩沖液和蒸餾水配制而成的輪蟲培養液，投加不同量的蜂蜜殘渣，以葡萄球菌為輪 蟲食物，葡萄球菌的投加量為10S l()8celkmL—、在25卩光照培養箱中進行輪蟲的 培養。培養時間為11天，這時大多數輪蟲的增長速率開始下降。每隔24小時計數培 養容器中成活宿輪蟲的數量。試驗周期內每天向培養皿中補充的輪蟲培養液為與初 始日每個培養皿中含同等濃度的蜂蜜殘渣及葡萄球菌。
本發明的特點是選用蜂蜜殘渣這種食品生產廢料作為添加劑用于促進宿輪蟲的 生長， 一方面其對宿輪蟲的促生長作用非常顯著，可使宿輪蟲對數增長期內的種群增 長率達0.87d—、遠高于不投加蜂蜜殘渣時的0.55d";另一方面可使蜂蜜殘渣變廢為 用，實現資源的循環利用，也使未來實際運用到污水處理中時更經濟。
本發明制備的宿輪蟲可用于減少污水處理系統中的懸浮固體并提高污水透視度。
具體實施例方式
本發明的實施例是
(1) 配制輪蟲的培養液，其配比為0.06 1.00gCaCO3， 6 8mLlM的磷酸鹽 緩沖液(pH=6.5)，加入約1000mL的蒸餾水，煮沸并滅菌；
(2) 用肉湯培養基大量培養葡萄球菌，經離心后作為輪蟲食物；
(3) 預培養從上海市曲陽污水處理廠好氧工藝段污水中采集宿輪蟲，分離后 置入口徑為60mm的培養皿中，加入8mL步驟(1)的培養液、步驟(2)的葡萄球 菌10S 10ScellsTnU1、蜂蜜殘渣5嗎，實驗室內在25'C光照培養箱中進行培養，預培 養時間持續7天；
(4) 在每個培養皿中放入6個從預培養的培養皿中隨機挑取的輪蟲幼體(不帶卵輪蟲)，加入8mL的輪蟲培養液，葡萄球菌10S 108cells'mL'1，再分別加入0.0、 4.5 5.0、 7.0 7.5、 9.5 10.0、 12.0 12.5、 14.0 14.5|ag的蜂蜜殘渣，每個實驗做 三個重復，其中投加蜂蜜殘渣量O.(Hig的設為控制組，每天向培養皿中補充與初始日 每個培養皿中含同等濃度的蜂蜜殘渣及葡萄球菌的輪蟲培養液；
(5)每隔24小時計數培養容器中成活宿輪蟲的數量，培養實驗ll天后結束， 這時大多數輪蟲的增長速率開始下降。
本實施例中宿輪蟲的促生長作用非常顯著，可使宿輪蟲對數增長期內的種群增長 率達0.87d"，遠高于對比例中不投加蜂蜜殘渣時的0.55cT1。
權利要求
1. 一種用蜂蜜殘渣促進宿輪蟲生長的方法，其特征在于該方法具體步驟如下a. 配制輪蟲的培養液，將0.06～1.00g CaCO3，6～8mL1M的磷酸鹽緩沖液(pH＝6.5)，加入蒸餾水配至1000mL，煮沸并滅菌；b. 用肉湯培養基大量培養葡萄球菌，經離心后作為輪蟲食物；c. 預培養從污水中采集宿輪蟲，分離后置入口徑為60mm的培養皿中，加入8mL步驟a的培養液、步驟b的葡萄球菌106～108cells·mL-1、蜂蜜殘渣5μg，實驗室內在25℃光照培養箱中進行培養，培養時間持續7天；d. 在培養皿中放入6個從預培養的培養皿中隨機挑取的輪蟲幼體(不帶卵輪蟲)，加入8mL的輪蟲培養液，葡萄球菌106～108cells·mL-1，再加入3～15μg的蜂蜜殘渣，每天向培養皿中補充與初始日培養皿中含同等濃度的蜂蜜殘渣及葡萄球菌的輪蟲培養液；e. 每隔24小時計數培養容器中成活宿輪蟲的數量，培養實驗11天后結束。
全文摘要
本發明為一種用蜂蜜殘渣促進宿輪蟲生長的方法，屬水污染控制技術領域。通過投加富含活性物質黃酮類和萜烯類等的蜂蜜殘渣而達到有效促進宿輪蟲的生長的目的。本發明是在用CaCO<sub>3</sub>、磷酸鹽緩沖液和蒸餾水配制而成的輪蟲培養液中，投加蜂蜜殘渣，以葡萄球菌為輪蟲食物，在25℃光照培養箱中進行輪蟲的培養。本發明的選用蜂蜜殘渣這種食品生產廢料作為添加劑用于促進宿輪蟲的生長，一方面其對宿輪蟲的促生長作用非常顯著，可使宿輪蟲對數增長期內的種群增長率達0.87d<sup>-1</sup>，遠高于不投加蜂蜜殘渣時的0.55d<sup>-1</sup>；另一方面可使蜂蜜殘渣變廢為用，實現資源的循環利用，也使未來實際運用到污水處理中時更經濟。
文檔編號C02F3/32GK101433190SQ20081020397
公開日2009年5月20日 申請日期2008年12月4日 優先權日2008年12月4日
發明者丁國際, 楊芳芳, 沈成媛 申請人:上海大學