核酸分子長期保存的方法和實施這種長期保存的包裝的制作方法

            文檔序號:4291133閱讀:1059來源:國知局

            專利名稱::核酸分子長期保存的方法和實施這種長期保存的包裝的制作方法
            技術領域
            :本發明屬于化工或生物領域,具體涉及一種適合于保存DNA的包裝以及DNA分子的長期保存方法。
            背景技術
            :核酸(nucleicacid)是生物特有的重要的大分子化合物,廣泛存在于各類生物細胞中。核酸及其組成單位在生物的個體發育、生長、繁殖、遺傳和變異等生命過程中起著重要的作用。核酸主要包括核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)。DNA通常是生命的物質基礎,由五種元素---碳、氫、氧、氮、磷構成的四種核苷酸序列。目前,核酸的研究越來越成為生物科學的核心,帶動了生物化學、分子生物學和分子遺傳學乃至整個生命科學研究的發展。核酸攜帶有生物遺傳信息,并且,不同的生物種類所攜帶的遺傳信息差別較大,而同種類個體之間所攜帶的遺傳信息相對而言差別較小,然而由于核酸的多樣性,即使同一種類的不同個體之間也均是有差異的。具有親緣關系的親本和子代之間遺傳信息較接近,核酸上所攜帶的遺傳信息的鑒別現在也成為鑒定親緣關系的標志,正在越來越廣泛地被應用。此外,核酸作為傳遞遺傳信息的載體,也是極其具有收藏價值的。例如可采集自身或他人的核酸,長期保存,作為紀念。然而,核酸是一種非常不穩定的大分子化合物,其在許多條件下均可能發生降解。造成核酸降解的外界物理因素如溫度、濕度、紫外線等;化學因素如pH值、水解反應、氧化反應等;生物因素如酶解及微生物侵染等。這些因素都直接與核酸的構型、分子組成有關。即使在核酸提取的時候,也極易于因操作不當而造成降解。特別是當將核酸作為紀念用途,保存于例如掛件等飾品中時,由于會被佩帶于人體或與人體接近,隨著人體的活動,易于接觸到高溫或強光線等不利環境因素,從而更易于造成降解。因此,需要一種可長期保存核酸的包裝器具,其具有良好的保護作用,可有效地阻止核酸的降解。
            發明內容本發明的目的在于提供一種復合材料組合物。本發明的目的還在于提供由所述復合材料組合物制成的容器。本發明的目的還在于提供含有核酸的飾品。在本發明的第一方面,提供一種復合材料組合物,所述的組合物含有以下組分:(a)雙酚A-環氧氯丙垸環氧樹脂63-69重量份;(b)聚苯乙烯31-35重量份;和(c)2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.15-0.4重量份,并且,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的40-100%。在另一優選例中,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的55-100%;較佳的,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的80-100%;更佳的,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的99-100%。較佳的,各組分的含量如下(a)雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂(b)聚苯乙烯(c)2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑更佳的,各組分的含量如下(a)雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂(b)聚苯乙烯(c)2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑在另一優選例中,所述的聚苯乙烯為65.5-67.5重量份;32-34重量份;和0.2-0.35重量份。66.75重量份;33重量份;和0.25重量份。其中,n是選自20-40(較佳的28-35;更佳的為29-31)的正整數'在另一優選例中,所述的雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂的為其中,m為選自30-50(較佳的35-45;更佳的為39-41)的正整數。在另一優選例中,所述的組合物通過以下方法制備以有機溶劑溶解所述的聚苯乙烯;之后加入雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂和2-(2'-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑;在5055。C的溫度下進行溶解和混合;其中,所述的組分(a)+(b)+(c)的總重量與有機溶劑體積的比例為1:(5-15)(g:ml)。在另一優選例中,在進行溶解和混合時,以N,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物作為相轉移催化劑。在另一優選例中,N,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物的用量按照體積比是0.1-0.5%(如0.2%)。最優選的,所述的有機溶劑是三氯甲垸。在另一優選例中,所述的組分(a)+(b)+(c)的總重量與有機溶劑體積比例為1:(8-12);最佳的是約l:10(g:ml)。在另一優選例中,所述方法還包括將充分混合后的復合材料組合物進行成形,從而獲得一種容器。在本發明的第二方面,提供一種用于保存核酸的容器,所述的容器是由所述的復合材料組合物制備而成。在另一優選例中,所述的容器長度為2-50rora(較佳的3-20鵬,更佳的5-10irnn),其橫截面積在4-2000mm2(較佳的9-300咖2;更佳的25-6Smm2)。在另一優選例中,所述的容器的形狀可以是圓柱形、圓球型、螺旋形、長方體形、圓錐形等,或者也可以是不規則的形狀。在另一優選例中,所述的容器包括外殼(11)和外殼蓋(12);且外殼(ll)與外殼蓋(12)可密合。在本發明的第三方面,提供所述的容器的用途,用于保存核酸。在另一優選例中,所述的核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。在本發明的第四方面,提供一種飾品,所述的飾品包括外飾(2),被外飾(2)包被或裝載的容器(1),和位于容器(1)內的核酸。在另一優選例中,所述的外飾(2)的材料選自(但不限于)水晶、玻璃、塑料、金屬、瑪瑙、玉、石材、陶瓷、木材。較佳的,所述的材料是透明的材料。本發明的其它方面由于本文的公開內容,對本領域的技術人員而言是顯而易見的。圖l顯示了核酸保存用的容器的示意圖。其中,ll為外殼,lll為核酸的裝入口,12為外殼蓋。圖2顯示了飾品的示意圖。其中,l為核酸保存用的容器,2為外飾。具體實施例方式本發明人針對目前核酸樣品易于降解,難以長期保存等特點,研制了一種可用于長期保存核酸的容器,所述的容器由含有以下組分的復合材料制備而成雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂、聚苯乙烯和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑。本發明人意外地發現,該容器可極好地保護核酸不被降解。如本文所用,術語"含有"或"包括"包括了"包含"、"主要由......構成(制成)"、"基本上由......構成"、和"由......構成"。組合物本發明提供一種復合材料組合物,所述的復合材料組合物含有如表1所述的組分表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>本發明人意外地發現,以雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂、聚苯乙烯和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑以適當的配比混合并制成容器后,該容器可極好地保護核酸不被降解。所述的雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂是一種本領域常用的環氧樹脂,可通過商購獲得,或可通過本領域常規的制備方法制備,例如將雙酚A與環氧氯丙烷在堿性催化劑作用下縮聚形成。作為本發明的優選方式,所述的雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂的結構式為其中,m為選自30-50(較佳的35-45)的正整數。所述的聚苯乙烯也是一種本領域常用的材料,其通常無色透明,可由苯乙烯單體經自由基縮聚反應形成。作為本發明的優選方式,所述的聚苯乙烯(人>)中,n為選自20-40(較佳的28-35)的正整數。當用于本發明時,與雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂和聚苯乙烯相配合,所述的2-(2'-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑可發揮優異的吸收紫外線的作用。作為一種優選方式,本發明的組合物可通過以下方式制備而成以三氯甲烷作為溶劑,以N,N,N-三丁基-1-丁銨溴化物作為相轉移催化劑,溶解所述的聚苯乙烯;之后加入雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑,充分混合;較佳地,在5055。C的溫度下進行溶解和混合。核酸保存用容器本發明還提供了一種用于保存核酸的容器,所述的容器是由本發明所述的復合材料制備而成。所述的容器可通過將上述制備的組合物置于模具中成形而獲得,成形的方法是本領域己知的。例如可將所述復合材料置于模具中,加溫到60-7(TC,然后降溫獲得。對所述的容器的形狀沒有特別的限制,可以是圓柱形、圓球型、螺旋形、長方體形、圓錐形等,或者也可以是不規則的形狀。對所述的容器的大小沒有特別的限制,主要取決于所需保存的核酸的量。作為本發明的優選方式,所述的容器包括外殼11和外殼蓋12,且外殼ll與外殼蓋12可密合。核酸可以由外殼11上的裝入口111加入到容器中。所述的容器具有結構穩定、抗擠壓、防紫外線等作用。對所述的外殼與外殼該之間密合的方式沒有特別的限制,可采用本領域常用的方式。例如,通過設置相配合的螺旋結構(旋蓋式封閉),或卡式結構;此外,也可采用一些黏合劑(如環氧樹脂黏合劑)進行黏合。作為本發明的優選方式,當用于制備飾品時,所述的容器長度為2-50mra,較佳的3-20ram,更佳的5-10mm;其橫截面積在4-2000mm2,較佳的9-300mm2,更佳的25-65mra2。作為本發明的優選方式,所述的外殼11或外殼蓋12是通過一次成型技術制成的,從而保證DNA分子受到外力擠壓和光照作用下保持穩定的化學結構和物理性質。本發明的容器可以是透明的,也可以通過在復合材料中加入一些本領域常用的著色劑(如二氧化鈦),使容器具有所需的顏色。本發明還提供了一種飾品,所述的飾品包括外飾2,被外飾2包被或裝載的容器l,和位于容器1內的核酸。可通過在外飾上預留放入口,將容器1置于外飾2內部。也可通過黏合材料(如環氧樹脂黏合劑)將容器1粘合到外飾2的內部。對于外飾2的材料沒有特別的限制,可以是本領域常規用于制備飾品的材料;其形狀和大小也可可參照本領域常規的飾品。例如所述的外飾2的材料選自(但不限于)水晶、玻璃、琉璃、塑料、金屬、瑪瑙、玉、石材、陶瓷、木材。此外,兩個或多個包含相同種或不同種核酸的容器可被置于同一外飾中。核酸本發明所述的核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。核酸通常存在于溶液(如緩沖液)中,或被制成凍干粉的形式。由于DNA溶解在液體溶液中,一般常溫下只能保存最多一周就會降解,保存在4t大概12個月(冰箱冷藏室),保存在-2(TC度會久一點(冰箱冷凍室)。反復凍融也是造成DNA降解的一種因素。干燥狀態的DNA更有利于保存。因此,作為本發明的優選方式,所述的核酸是凍干處理的。核酸的提取是分子生物學研究的基礎技術,提取的核酸的純度及結構完整性是進行基因工程(分子生物學)各項研究所必需的條件。酚抽提法、異丙醇沉淀法和甲酰胺裂解法是提取DNA最為經典的方法,目前很多新方法都是在它們的基礎上經過改進而得來的。這三種方法均要利用蛋白酶K和十二烷基硫酸鈉(SDS)來消化破碎細胞。在酚抽提法、異丙醇沉淀法中,裂解液先用酚/氯仿(體積比為25:24)去除蛋白質,再分別用乙醇或異丙醇沉淀DNA。甲酰胺法是利用高濃度的甲酰胺解聚蛋白質(各種核蛋白)與DNA的結合,然后利用透析來處理DNA樣品。目前也可運用一些全自動核酸提取工作站(如Kurabo公司生產的核酸提取工作站),對樣品中的核酸進行全自動的制備。提高核酸的純度,最大程度減少被降解的風險。在這種工作站中,離心機和機械加樣系統整合其中,可實現全自動的制備,完全避免了傳統抽提方法的弊端(操作過程繁瑣,用時長,且所用試劑有毒性)。利用全自動的核酸制備方法具有以下特點操作簡單、自動處理,降低了在核酸制備過程中被污染的風險。本發明的主要優點在于選用合適的材料制備成對于核酸具有良好的保護作用的容器,從而使得核酸可被長期保存(保存時間可超過500年)。將含有核酸的容器置于飾品中,從而使其更有紀念價值。下面結合具體實施例,進一步闡述本發明。應理解,這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。實施例1DNA保護容器1的制作采用的組分配方如下表1。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>將聚苯乙烯按照上述配方分別稱取后置于容器中,然后加入1000ml三氯甲烷,以1.5mlN,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物為相轉移催化劑使之溶解,然后加入雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑,在53"C下充分混合后,用于制備成形的DNA外殼。根據所需的DNA外殼的形狀,制備用于一次成型的模具,所述的模具包括核酸外殼的模具的以及外殼蓋的模具。將上述混合的材料加料到模具中,加熱至65'C,進行一次定型,從而獲得合適的DNA外殼,該外殼的尺寸是長度為10ram,其橫截面積在65mm2,外殼蓋與外殼可通過螺旋結構密合。按照前述方法,分別獲得容器l(配方l,獲得5個成品),容器2(配方2,獲得5個成品),容器3(配方3,獲得5個成品),容器4(配方4,獲得5個成品)。所述的容器的示意圖如圖l所示,其中,ll為外殼,lll為核酸的裝入口,12為外殼蓋。實施例2全自動的核酸制備法提取DNA運用Kurabo公司的全自動核酸提取工作站,對樣品中的DNA進行全自動的制備。提高DNA的純度,同時最大程度減少被降解的風險。抽取2ml人體靜脈血作為樣本,置于離心管中離心棄上清,獲取下層血細胞,取下層溶液溶解于2ml氯仿/異戊醇(l:l)溶液中,置于全自動核酸提取工作站(Kurabo公司)進行全自動DNA提取。獲得溶解于TRIS-EDTA緩沖液中的DNA,將該DNA進行凍干處理,最終獲得以干粉狀態存在的DNA。實施例3包含DNA的水晶飾品的制備用移液器將上述制備的DNA轉移入上述制備的容器中,密封,從而獲得內里裝有DNA的容器。在水晶飾品的里面預留一個與容器的外形相匹配的空間,在容器的外表面上涂敷一層環氧樹脂黏合劑,然后黏合于水晶飾品的內部,從而獲得攜帶DNA的水晶飾品。所述的水晶飾品的示意圖如圖2。其中,l為核酸保存用的容器,2為外飾。實施例4不同環境下水晶飾品內DNA的穩定性測試為了證明本發明的容器對于核酸樣品具有防止降解的作用,本發明人進行了試驗。擴大樣品量的基礎上,按照前述相同的方法提取DNA,制成凍干粉狀樣品,將各凍干樣品分成等量的35份。取20份等量的DNA樣品,分別置于本發明人前述制備的容器1(5個),容器2(5個),容器3(5個),容器4(5個)中,每一容器1份。取5份等量的DNA樣品,分別置于由褐色玻璃制成的5個形狀大小與容器l相同的容器a中。取5份等量的DNA樣品,分別置于5個形狀大小與容器1相同的容器b中,其中,容器b的材料的配方為雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂(m二40)58重量份、聚苯乙烯(『30)41重量份、2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑l重量份;制備方法同實施例1。取5份等量的DNA樣品,分別置于5個形狀大小與容器1相同的容器c中,其中,容器c的材料的配方為雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂(n^40)72重量份、聚苯乙烯(『30)27.9重量份、2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.l重量份;制備方法同實施例l。在密封裝樣后,將上述35個容器分別置于35個相同的水晶飾品的內部,制成35個水晶飾品。將上述35個水晶飾品在波長為260nm的紫外光下照射30分鐘,然后將各水晶飾品拆開,并從各容器中移取出DNA,采用熒光光度法(g卩PicoGreen熒光試劑與DNA結合能產生可激發熒光的復合物、再用熒光分光光度計對復合物進行定量檢測)鑒定DNA的降解情況。結果發現,在較長時間的紫外光照射后,5個以容器1制備的水晶飾品中DNA的降解率為0。/。;5個以容器2制備的水晶飾品中DNA的降解率為0。/。;5個以容器3制備的水晶飾品中DNA的降解率為20%;5個以容器4制備的水晶飾品中DNA的降解率為20%。在較長時間的紫外光照射后,5個以容器a制備的水晶飾品中DNA的降解率為100%;5個以容器b制備的水晶飾品中DNA的降解率為60。/。;5個以容器c制備的水晶飾品中DNA的降解率為80%。在本發明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考,就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解,在閱讀了本發明的上述講授內容之后,本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改,這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。權利要求1.一種復合材料組合物,其特征在于,所述的組合物含有以下組分(a)雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂63-69重量份;(b)聚苯乙烯31-35重量份;和(c)2-(2’-羥基-3’,5’-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.15-0.4重量份,并且,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的40-100%。2.如權利要求l所述的復合材料組合物,其特征在于,各組分的含量如下:(a)雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂65.5-67.5重量份;(b)聚苯乙烯32-34重量份;和(c)2-(2,-羥基-3,,5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.2-0.35重量份。3.如權利要求l所述的復合材料組合物,其特征在于,所述的聚苯乙烯為:其中,n是選自20-40的正整數。4.如權利要求1所述的復合材料組合物,其特征在于,所述的雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂的為其中,m為選自30-50的正整數。5.如權利要求1所述的復合材料組合物,其特征在于,所述的組合物通過以下方法制備以有機溶劑溶解所述的聚苯乙烯;之后加入雙酚A-環氧氯丙垸型環氧樹脂和2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑;在5055。C的溫度下進行溶解和混合;其中,所述的組分(a)+(b)+(c)的總重量與有機溶劑體積的比例為1:(5-15)。6.如權利要求5所述的復合材料組合物,其特征在于,在進行溶解和混合時,以N,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物作為相轉移催化劑。7.—種用于保存核酸的容器,其特征在于,所述的容器是由權利要求l-6任一所述的復合材料組合物制備而成。8.如權利要求7所述的容器,其特征在于,所述的容器包括外殼(ll)和外殼蓋(12);且外殼(11)與外殼蓋(12)可密合。9.權利要求7-8任一所述的容器的用途,其特征在于,所述的容器用于保存核酸。10.—種飾品,其特征在于,所述的飾品包括外飾(2),被外飾(2)包被或裝載的容器(1),和位于容器(1)內的核酸。全文摘要本發明公開了一種可用于制備核酸保存用容器的復合材料組合物,其包括雙酚A-環氧氯丙烷型環氧樹脂、聚苯乙烯和2-(2’-羥基-3’,5’-二叔-甲基苯基)苯并三唑。本發明還公開了以該組合物制成的核酸保存用容器,以及含有核酸的飾品。文檔編號B65D85/00GK101575441SQ20081003704公開日2009年11月11日申請日期2008年5月7日優先權日2008年5月7日發明者盧莉瓊申請人:上海優你生物科技有限公司
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