一種蛹蟲草黃色素粉的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蛹蟲草黃色素粉的制備方法。本發(fā)明所述蛹蟲草黃色素粉是以蛹蟲草為原料，經(jīng)過特定復(fù)合酶酶解后，再經(jīng)提取、干燥而得。本發(fā)明通過復(fù)合酶將蛹蟲草進行酶解這一步驟，可以大大提高蛹蟲草黃色素的得率，所得的蛹蟲草黃色素的穩(wěn)定性好，具有較高的生理活性，總黃酮含量高。本發(fā)明方法步驟簡單易于操作，相對于現(xiàn)有的蛹蟲草黃色素的提取方法而言，本發(fā)明所述方法成本低，時間短，得率高，適合推廣應(yīng)用。
【專利說明】
一種蛹蟲草黃色素粉的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及黃色素粉的制備工藝領(lǐng)域，具體涉及一種從蛹蟲草中提取黃色素并將 其制成粉的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛹蟲草(Cordyceps militaris)又名北蟲草，屬于子囊菌亞門麥角菌科蟲草屬，具 有擴張氣管、鎮(zhèn)靜、抗炎癥、降血壓、抗病原微生物、抗惡性腫瘤等多種藥理活性。蛹蟲草能 呈現(xiàn)出橙黃色就是因為其自身所含的黃色素造成的，蛹蟲草黃色素是一種類胡蘿卜素。迄今 為止發(fā)現(xiàn)的類胡蘿卜素絕大部分是脂溶性的類胡蘿卜素，不易被人體吸收且有些遇光熱不穩(wěn) 定，蛹蟲草黃色素是迄今為止發(fā)現(xiàn)的一類罕見的水溶性類胡蘿卜素。
[0003] 類胡蘿卜素是全球生態(tài)系統(tǒng)中的一大類色素，在自然的分布非常廣泛，類胡蘿卜素 作為維生素 A的前體，有助于預(yù)防和根治維生素 A缺乏癥，同時，類胡蘿卜素還具有多種生物 活性，比如抗炎、抗癌、抗氧化的功效。類胡蘿卜素作為重要的營養(yǎng)素來源，不僅能增加機體 防病保健、免疫功能，而且在醫(yī)藥工業(yè)、食品、飼料等方面用途廣泛。蛹蟲草黃色素作為類胡 蘿卜素的一類，與傳統(tǒng)的類胡蘿卜素相比，其理論上具有更強的潛在生理活性。
[0004]目前蛹蟲草黃色素的提取方法中，主要有兩種:一種是先采用大孔吸附樹脂法對 粗提液進行粗分，再采用正相硅膠柱層析進行分離純化。另一種是經(jīng)初步純化后，采用制備 液相進行分離得到。前者步驟繁瑣，得率不高，且正相硅膠負(fù)載量小，回收利用難。后者成本 高，不能實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有的蛹蟲草黃色素的提取方法中存在的上述不足之處， 現(xiàn)提供一種新的蛹蟲草黃色素粉的制備方法，該方法成本低、耗時短，且得到的蛹蟲草黃色 素粉的得率高，穩(wěn)定性好，具有較高的生理活性。
[0006] 本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：
[0007] -種蛹蟲草黃色素粉的制備方法，具體包括如下步驟：
[0008] (1)蛹蟲草的前處理:將蛹蟲草子實體在50°C烘箱中烘干至恒重后，粉碎成粉末， 過50目篩；
[0009] (2)蛹蟲草的酶解:將步驟（1)所述粉末與復(fù)合酶解液按照1:1~1:6的質(zhì)量比充分 混合，在30~60°C下酶解10~30min;
[0010] (3)蛹蟲草黃色素的提取:將步驟(2)所得酶解產(chǎn)物按照料液質(zhì)量比1:10~1:20補 水后，25~60°C下恒溫水浴提取0.5~2h，然后過濾、取濾液，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60~80 %的乙 醇，靜置24h，取上層清液，50 °C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇；
[0011] (4)蛹蟲草黃色素的干燥:將步驟(3)所得產(chǎn)物進行噴霧干燥，得到蛹蟲草黃色素 粉；
[0012] 其中，步驟(2)中所述復(fù)合酶解液的制備方法是:將幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和半纖維 素酶按照2:1:1~5:1:1的質(zhì)量比混合，用水配制為質(zhì)量百分比為0.2~0.6%的復(fù)合酶解 液，并將其pH調(diào)節(jié)為4.0~6.0。
[0013] 作為進一步的優(yōu)選技術(shù)方案，所述復(fù)合酶解液的pH的調(diào)節(jié)是通過檸檬酸-磷酸氫 二鈉緩沖液進行調(diào)節(jié);檸檬酸溶液的濃度為〇. lmol/L，磷酸氫二鈉溶液的濃度為0.2mol/L。
[0014] 作為更進一步的優(yōu)選技術(shù)方案，步驟(4)中，所述噴霧干燥是在除去乙醇的蛹蟲草 黃色素提取液中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5~15%的麥芽糊精后進行噴霧干燥，噴霧干燥的條件為： 進口溫度100~120 °C，熱風(fēng)量為0 · 80~1 · 30m3/min，進料流量為0 · 03~0 · 06cm3/min，噴頭轉(zhuǎn) 速為 15000 ~20000r/min。
[0015] 本發(fā)明方法制備得到的蛹蟲草黃色素粉可以作為類胡蘿卜素應(yīng)用于任何需要類胡 蘿卜素的產(chǎn)品中。
[0016] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
[0017] (1)本發(fā)明采用生物-物理法制備蛹蟲草黃色素粉，其中，通過選用幾丁質(zhì)酶、纖維 素酶和半纖維素，將其按照特定比例配制得到的復(fù)合酶解液，對蛹蟲草的細(xì)胞壁進行酶解 后提取蛹蟲草中的黃色素，可以大大提高蛹蟲草黃色素的得率，同時，制備得到的蛹蟲草黃 色素粉具有較高的生理活性，總黃酮含量高；
[0018] (2)本發(fā)明所使用的幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和半纖維素，將其按照特定比例配制得到 的復(fù)合酶解液，是特別適用于蛹蟲草黃色素提取的酶解液，具有酶解時間短且酶解充分的 優(yōu)點；
[0019] (3)本發(fā)明所述制備方法與現(xiàn)有的蛹蟲草黃色素的提取方法相比，成本大大降低， 且具有耗時短的優(yōu)點；
[0020] (4)本發(fā)明采用噴霧干燥對蛹蟲草黃色素提取液進行干燥，制得的黃色素粉色澤 鮮艷，純度高。
【具體實施方式】
[0021] 以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的描述，但實施例并不對本發(fā)明做任何形式的 限定。
[0022] 以下實施例中，如無特別說明，所使用的原料均為市面上在售的原料，所使用的方 法均為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法。
[0023] 實施例1
[0024]將蛹蟲草子實體在50 °C烘箱中烘干至恒重，用高速粉碎機粉碎成粉末；
[0025]選用幾丁質(zhì)酶、纖維素酶與半纖維素酶，按照幾丁質(zhì)酶、纖維素酶與半纖維素酶質(zhì) 量比2:1:1配制復(fù)合酶，再用水配制質(zhì)量百分比為0.2%的復(fù)合酶液，并用O.lmol/L檸檬酸 溶液、0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液緩沖溶液調(diào)節(jié)復(fù)合酶液的pH至4.0;
[0026]將預(yù)處理后的蛹蟲草粉末與復(fù)合酶解液按照1:1的質(zhì)量比混合，在30°C下酶解 30min;酶解完后的蛹蟲草-復(fù)合酶混合液按照料液質(zhì)量比1:10補水，在40°C下提取lh，過 濾，取濾液，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇，靜置24h，取上層清液，50°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇； [0027]除去乙醇的蛹蟲草黃色素提取液添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%麥芽糊精后進行噴霧干燥， 噴霧干燥的條件為:進口溫度為1〇〇°C，熱風(fēng)量為0.8m 3/min，進料流量為0.03cm3/min，噴頭 轉(zhuǎn)速為15000r/min。經(jīng)噴霧干燥制得的即為蛹蟲草黃色素粉末。
[0028]用紫外分光光度法測定，蛹蟲草黃色素含量為92.68%，總黃酮含量為90.70%。穩(wěn) 定性研究結(jié)果表明，制備的蛹蟲草黃色素低溫下熱穩(wěn)定性好，酸性條件下穩(wěn)定性好，且具有 較好的金屬穩(wěn)定性和耐氧性。
[0029] 實施例2
[0030]將蛹蟲草子實體在50 °C烘箱中烘干至恒重，用高速粉碎機粉碎成粉末；
[0031]選用幾丁質(zhì)酶、纖維素酶與半纖維素酶，按照幾丁質(zhì)酶、纖維素酶與半纖維素酶質(zhì) 量比3.5:1:1配制復(fù)合酶，再用水配制質(zhì)量百分比為0.4%的復(fù)合酶液，并用O.lmol/L檸檬 酸溶液、〇. 2mol/L磷酸氫二鈉溶液緩沖溶液調(diào)節(jié)復(fù)合酶液的pH至5.0;
[0032]將預(yù)處理后的蛹蟲草粉末與復(fù)合酶解液按照1:3的質(zhì)量比混合，在50°C下酶解 20min;酶解完后的蛹蟲草-復(fù)合酶混合液按照料液質(zhì)量比1:15補水，在50°C下提取2h，過 濾，取濾液，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 %的乙醇，靜置24h，取上層清液，50°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇； [0033]除去乙醇的蛹蟲草黃色素提取液添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%麥芽糊精后進行噴霧干燥， 噴霧干燥的條件為:進口溫度為110°C，熱風(fēng)量為1.10m 3/min，進料流量為0.04cm3/min，噴頭 轉(zhuǎn)速為18000r/min。經(jīng)噴霧干燥制得的即為蛹蟲草黃色素粉末。
[0034]用紫外分光光度法測定，蛹蟲草黃色素含量為95.6 %，總黃酮含量為93.85 %。穩(wěn) 定性研究結(jié)果表明，制備的蛹蟲草黃色素低溫下熱穩(wěn)定性好，酸性條件下穩(wěn)定性好，具有較 好的金屬穩(wěn)定性和耐氧性。
[0035] 實施例3
[0036]將蛹蟲草子實體在50 °C烘箱中烘干至恒重，用高速粉碎機粉碎成粉末；
[0037]選用幾丁質(zhì)酶、纖維素酶與半纖維素酶，按照幾丁質(zhì)酶、纖維素酶與半纖維素酶質(zhì) 量比5:1:1配制復(fù)合酶，再用水配制質(zhì)量百分比為0.6%的復(fù)合酶液，并用O.lmol/L檸檬酸 溶液、0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液緩沖溶液調(diào)節(jié)復(fù)合酶液的pH至6.0;
[0038]將預(yù)處理后的蛹蟲草粉末與復(fù)合酶解液按照1:6的質(zhì)量比混合，在60°C下酶解 30min;酶解完后的蛹蟲草-復(fù)合酶混合液按照料液質(zhì)量比1:20補水，在60°C下提取lh，過 濾，取濾液，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇，靜置24h，取上層清液，50°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇；
[0039] 除去乙醇的蛹蟲草黃色素提取液添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%麥芽糊精后進行噴霧干燥， 噴霧干燥的條件為:進口溫度為120°C，熱風(fēng)量為1.30m 3/min，進料流量為0.06cm3/min，噴頭 轉(zhuǎn)速為20000r/min。經(jīng)噴霧干燥制得的即為蛹蟲草黃色素粉末。
[0040] 用紫外分光光度法測定，蛹蟲草黃色素含量為96.84%，總黃酮含量為93.12%。穩(wěn) 定性研究結(jié)果表明，制備的蛹蟲草黃色素低溫下熱穩(wěn)定性好，酸性條件下穩(wěn)定性好，較好的 金屬穩(wěn)定性和耐氧性。
[0041 ] 實驗例
[0042] A組：申請?zhí)枮?01110280492.0的發(fā)明專利申請公開的蛹蟲草酶解營養(yǎng)液的制備 方法中所用的酶，將該酶及相應(yīng)的酶解條件和酶解時間等替換本申請的復(fù)合酶解液，本申 請的其余步驟不變。
[0043] B組：申請?zhí)枮?01410002259. X的發(fā)明專利申請中所用到的酶及相應(yīng)的酶解條件 和酶解時間等替換本申請的復(fù)合酶解液，本申請的其余步驟不變。
[0044] C組:按照實施例1的步驟。
[0045] 結(jié)果如表1所示。
[0046]表 1
[0048]由表1可知，本發(fā)明所使用的特定的復(fù)合酶解液對蛹蟲草進行酶解，酶解的時間大 大縮短，且酶解所需溫度也比A組和B組都低，得率和總黃酮均遠(yuǎn)高于A、B兩組。
【主權(quán)項】
1. 一種蛹蟲草黃色素粉的制備方法，其特征在于所述制備方法包括如下步驟： (1) 蛹蟲草的前處理:將蛹蟲草子實體在50°C烘箱中烘干至恒重后，粉碎成粉末，過50 目篩； (2) 蛹蟲草的酶解:將步驟（1)所述粉末與復(fù)合酶解液按照1:1~1:6的質(zhì)量比充分混 合，在30~60°C下酶解10~30min; (3) 蛹蟲草黃色素的提取:將步驟（2)所得酶解產(chǎn)物按照料液質(zhì)量比1:10~1:20補水 后，25~60 °C下恒溫水浴提取0.5~2h，然后過濾、取濾液，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60~80 %的乙 醇，靜置24h，取上層清液，50 °C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇； (4) 蛹蟲草黃色素的干燥:將步驟(3)所得產(chǎn)物進行噴霧干燥，得到蛹蟲草黃色素粉； 其中，步驟(2)中所述復(fù)合酶解液的制備方法是：將幾丁質(zhì)酶、纖維素酶和半纖維素酶 按照2:1:1~5:1:1的質(zhì)量比混合，用水配制為質(zhì)量百分比為0.2~0.6%的復(fù)合酶解液，并 將其pH調(diào)節(jié)為4.0~6.0。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草黃色素粉的制備方法，其特征在于所述復(fù)合酶解液的 pH的調(diào)節(jié)是通過檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液進行調(diào)節(jié);檸檬酸溶液的濃度為0.1mol/L，磷酸 氫二鈉溶液的濃度為〇. 2mol/L。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草黃色素粉的制備方法，其特征在于步驟(4)中，所述噴 霧干燥是在除去乙醇的蛹蟲草黃色素提取液中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5~15%的麥芽糊精后進行 噴霧干燥，噴霧干燥的條件為:進口溫度1〇〇~120°C，熱風(fēng)量為0.80~1.30m 3/min，進料流 量為 0 · 03 ~0 · 06cm3/min，噴頭轉(zhuǎn)速為 15000 ~20000r/min。
【文檔編號】C09B61/00GK106046845SQ201610352128
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月24日
【發(fā)明人】秦艷, 康林芝, 云帆, 王娜, 唐惠奇
【申請人】廣州市澳鍵豐澤生物科技股份有限公司