一種熒光增強型苯硫酚熒光探針的制備及應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及的是化學分析檢測技術領域，具體涉及一種新型的苯硫酚熒光探針的 制備方法以及該熒光探針在檢測苯硫酚方面的應用。
【背景技術】
[0002] 苯硫酚為無色液體，具有特殊臭味，主要作為醫藥、農藥等有機合成的中間體。人 體吸入后會引起支氣管痙攣、水腫及化學性肺炎，嚴重時會導致死亡。所以開發便捷快速檢 測苯硫酚的方法對環境及人類健康具有至關重要的意義。熒光探針檢測法具有操作簡便、 易于實現實時原位檢測、高靈敏度和高選擇性的優點，受到了研宄者的廣泛關注。目前開發 苯硫酚熒光探針的一大挑戰在于探針能否選擇性區分苯硫酚與脂肪硫醇，并且長波發射的 熒光探針用于細胞內熒光檢測時，不僅可以減少對生物樣品的破壞，還能夠減小背景熒光 干擾，所以，開發長波長、高選擇性的苯硫酚熒光探針對實現生物體內目標檢測具有重要價 值。
【發明內容】
[0003] 本發明目的之一是提供一種合成簡單、反應條件溫和、成本較低的熒光探針合成 方法；目的之二是提供一種靈敏度高、選擇性好，抗干擾能力強，能夠實現熒光法檢測苯硫 酚的熒光探針。
[0004] 本發明使用熒光法檢測苯硫酚，以喹喔啉衍生物為熒光團，以2,4_二硝基苯醚為 苯硫酚的識別基團。
[0005] 本發明解決問題采取的技術方案為，一種熒光檢測苯硫酚熒光探針，其分子結構
【主權項】
1. 一種苯硫酚熒光探針，其結構為：
2. 如權利要求1所述的苯硫酚熒光探針的制備方法，其特征在于按以下步驟進行制 備： (a) 將4-甲氧基-2硝基苯胺和10% Pd/C溶于甲醇中，用氬氣充分換氣三次后通入氫 氣，升溫至60°C反應12h，反應結束后，冷卻至室溫，抽濾，除去催化劑，用旋轉除去溶劑，得 到棕色液體為化合物6。 (b) 將上一步所得化合物6溶于乙腈中，加入乙二醛溶液，升溫至60°C反應6h。反應結 束后冷卻，旋轉除去溶劑得到棕色固體即為化合物5。 (c) 將上步所得化合物5溶于甲苯中，將反應液冷卻至0°C。向冷卻的溶液中緩慢加入 硼氫化鈉，得到的棕黃色溶液繼續攪拌l〇min。將醋酸緩慢滴加到體系中，并保持反應液溫 度在5-10°C之間，滴加完畢后繼續反應lh。升溫至回流，反應5h。反應結束后，冷卻至室 溫，向反應液中加入去離子水。有機層（甲苯）與水層分開，有機層用無水硫酸鈉干燥，水 層用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，旋轉除去溶劑，得到棕黃色油狀液體即為化合物4,無 需純化，直接用于下一步反應。 (d) 氬氣保護下，將DMF冷卻至5°C，在滴加三氯氧磷，繼續反應15min后，加入化合物 4。將反應液升溫至70-80°C，繼續反應4h。反應結束后，將反應液倒入冰水中，用冷的15% 的氫氧化鈉溶液進行中和，然后，反應液用乙酸乙酯萃取，有機層用無水硫酸鈉干燥。除去 溶劑，柱層析純化得到黃色液體即為化合物3。 (e) 氬氣保護下，將鋁粉加入乙腈中，室溫攪拌。向其中緩慢加入碘，加入完畢后，將化 合物3溶于乙腈中，滴加入體系，滴加完畢后，升溫至回流繼續反應12h。反應終止，降溫，將 反應液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，旋轉除去溶劑，柱層析純化得到黃色 液體即為化合物2。 &)將化合物2、2,4-二硝基氟苯溶于01^中，再加入一滴哌啶，然后加入1(2〇)3，加熱 至70°C反應3h，停止反應冷卻至室溫，將其倒入50mL水中，用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干 燥，旋干得粗產品，最終經柱層析分離得到化合物1。 (g)將化合物1、丙二腈溶于乙醇和二氯甲烷混合的溶劑中，加入少量哌啶，室溫攪拌 3h，停止反應，將反應液倒入水中，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除去溶劑，柱層析 分離得到探針分子。
3. 根據權利要求1所述的苯硫酚熒光探針的用途，其特征在于該苯硫酚熒光探針能夠 用于環境或生物樣品中苯硫酚的熒光檢測和分析。
【專利摘要】本發明公開了一種可以用于熒光檢測苯硫酚的新型化合物，具體涉及一種新型熒光探針的制備方法及其應用，屬于化學分析檢測技術領域。其分子結構式如下：該熒光探針選擇性好，抗干擾能力強，靈敏度高，可用于生物或環境樣品中的苯硫酚的熒光檢測，具有很好的應用前景。
【IPC分類】C07D241-42, C09K11-06, G01N21-64
【公開號】CN104804728
【申請號】CN201510202960
【發明人】宋相志
【申請人】蘇州羅蘭生物科技有限公司
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年4月27日