專利名稱：：化學發光組合物及其測定土壤有效鉬的方法
技術領域：
：本發明涉及化學發光
技術領域：
，尤其涉及一種化學發光組合物及利用該體系測定土壤中有效鉬的方法。(二)
背景技術：
化學發光(Chemiluminescence)是指某些化學反應中發光的現象。其發光機理是反應體系的某些物質分子吸收了反應釋放的能量而由基態躍遷到激發態，然后再從激發態返回基態，同時將能量以光輻射的形式釋放出來，產生化學發光。化學發光(Chemiluminescence,CL)分析法是近二十年迅速發展起來的一種新型分析技術，它具有靈敏度高、儀器結構簡單、線性范圍寬等優點。化學發光法的應用關鍵在于能夠研究開發出實用的高選擇性的化學發光體系來檢測待測樣品各種不同的成分。近年來，在改進和完善原有發光試劑和體系的同時，新發光試劑的合成、新體系的開發、與其它技術的聯用(尤其是流動注射技術、傳感器技術、HPLC技術及各種固定化試劑技術的聯用)，更顯示出化學發光分析快速，靈敏，簡便等優點，也進一步拓寬了化學發光的應用范圍，現在已廣泛應用于礦物巖石分析、材料分析、環境保護監測、藥物分析和臨床分析等方面。化學發光反應所以能夠用于分析測定，是因為化學發光強度與化學發光速率相關聯，因而一切影響反應速率的因素都可以作為建立測定方法的依據。化學發光分析測定的物質可以分為三類第一類物質是化學發光反應的反應物；第二類物質是化學發光反應中的催化劑、增敏劑或者抑制劑等；第三類物質是耦合反應中的反應物、催化劑、增敏劑或者抑制劑等。通過標記方式利用這三類物質還可以測定人們感興趣的其他物質，進一步擴大化學發光分析的應用范圍。目前，開發簡單、經濟、高發光率的新發光試劑仍是研究方向。為了解決化學發光分析技術選擇性差的問題，研究選擇性高的化學發光體系和高效的分離手段將是化學分析工作者的主要任務，也是化學發光分析技術能否廣泛應用的關鍵問題。鉬是作物必需的微量元素，而土壤中的鉬是植物獲得鉬的主要途徑。鉬通常以Mo0/—的形式存在于自然界中，其在土壤中的含量非常低，一般在1.0mg/kg以下，因此用常規方法測定土壤中的鉬是比較困難的。目前，比較常用的土壤有效鉬測定方法有分光光度法、極譜法等。分光光度法靈敏度較低，檢測限高，但其不適用于含鉬量很低的土壤樣品；極譜法要用到滴汞電極或懸汞電極，這種方法對操作者和環境有不良影響。當前，關于微量鉬的化學發光測定體系尚未見報道。
發明內容本發明要解決的技術問題是提供一種靈敏度高、檢測線低、對環境和操作人員無害的化學發光體系，并進一步給出了利用該體系快速準確的測定土壤中有效鉬的方法。為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是鉬酸根在酸性條件下被硼氫化鉀還原為低價態的鉬后，再與SCN"相結合生成絡合物，該絡合物與魯米諾相遇即發生化學發光反應，在一定的濃度條件下，其發光強度與參加反應的物質的濃度成正相關。檢測該反應的化學發光強度，便可計算出待測物質的濃度。例如，在硼氫化鉀、SCIf、魯米諾過量的條件下，可準確計算出鉬酸根的含量；在硼氫化鉀、鉬酸根、魯米諾過量的條件下，可準確計算出SCN"的含量。一種化學發光組合物，它是A、B兩種組合物以l:13的體積比混合后而呈現化學發光的體系，組合物A為溶解有SCN"402000mg/kg、硼氫化鉀30300mg/kg、MoOfO.0110mg/kgpH值為0.102.00的溶液，組合物B為溶解有魯米諾1.OX10—51.0X10—3mol/LpH值為9.0014.00的溶液。所述組合物A中溶解有SCN_8001800mg/kg、硼氫化鉀40200mg/kg、Mo0420.025mg/kg，其pH值為0.501.5。所述組合物B中溶解有魯米諾8.OX1(T58.OX10—4mol/L，其pH值為10.0013.00的溶液。所述組合物A為溶解有SCN"12001600mg/kg、硼氫化鉀40100mg/kg、MoOfO.022mg/kgpH值為0.601.00的溶液，組合物B為溶解有魯米諾1.0X10—45.0Xl(T4mol/LpH值為11.0013.00的溶液。所述組合物A為溶解有SCN—1520mg/kg、硼氫化鉀40mg/kg、MoO廣O.022mg/kgPH值為0.600.80的溶液，組合物B為溶解有魯米諾2.5X10—4mol/LpH值為12.00的溶液。一種利用上述化學發光組合物測定土壤有效鉬的方法，包括以下步驟(1)待測樣品制備a浸提稱取一定量的待測土壤樣品置浸提容器中，按520:l的水土比加入Taram溶液，置于振蕩器上以100240次/分鐘的振蕩頻率振蕩1050分鐘后，再置超聲波下浸提210分鐘，提取浸提溶液；b分離用離心機以10005000轉/分鐘的轉速離心分離上步所得浸提溶液15分鐘；c加熱取分離后的上清液520mL置于耐熱容器中，先蒸干，再經加熱除酸后，加530mL水溶解殘渣，以定量濾紙過濾；d除干擾離子將上述濾液置入陽離子交換柱中或向濾液中加入陽離子交換樹脂，分離除去干擾離子；(2)測定a待測樣品測定調節步驟(p中所得待測液pH值至O.13.0，移取510mL，分別加入0.18%SCN—水溶液0.103.00mL，0.215wtX硼氫化鉀水溶液0.103.OOmL，以水定容至2050mL，調解其pH值至0.12.0，此即為化學發光組合物A，化學發光組合物B為含魯米諾1.0X10—51.0X10—3mol/L的水溶液，其pH值為9.014.0，將A與B以1:13的體辨比在化學發光儀的反應檢測容器中混合反應，檢測讀取該化學發光反應強度I,，反應溶液中Mo042—的濃度在0.021.0mg/kg范圍內與化學反應的發光強度呈正相關，根據已知濃度的Mo042—溶液與其發生化學反應時的發光強度作出Mo042—濃度一反應曲線，將待測樣品的發光強度扣除本底值后即可從該曲線推算或査找出該樣品中MoO-的含量。b空白及標準樣品制備、測定①空白制備同等待測液制備步驟相同；②標準制備分別取0.l5mg/L的鉬標準溶液OmL，0.50mL，1.OOmL，1.50mL，2.OOmL,2.50mL置于不同的定量容器中，再向各容器中分別加入0.18%NH4SCN水溶液0.103.OOmL,0.215wt0/^新配硼氫化鉀水溶液0.103.OOmL，以水定容至2050mL，調解溶液pH值至0.12.0，此即為含鉬不同的系列化學發光組合物A,以含魯米諾1.OX10—51.OX10—3mol/L、PH值為9.014.0的水溶液為化學發光組合物B，將A分別與B以1:13的體積比在化學發光儀的反應檢測容器中混合反應，檢測讀取各反應的發光強度。(3)結果計算根據空白及標準樣品的測定結果繪制工作曲線，在工作曲線上査找結果，或將待測樣品的發光強度結果代入以下公式計算，_7標準-7空白rP樣品—7-^~"xp標準x《xW7樣品_7空白上式中，p樣品為樣品中鉬的含量，p標準為標準溶液中鉬的含量，I標準為標準溶液反應時的發光強度，I,為樣品溶液反應時的發光強度，Iss為空白樣品反應時的發光強度；K為稀釋倍數，n為水土比；上述步驟(3)中所述化學發光儀的工作時的負高壓為-200-800V,增益倍數為18倍，測試響應時間為5100s。本發明具有積極有益的效果1.魯米諾-SCN"-Mo3+化學發光體系對鉬檢測限低、線性范圍較寬(鉬的檢測限為2.97X10—2mg/kg、線性范圍為0.021.0mg/kg)、靈敏度高。2.該體系既可以用于檢測樣品中的鉬，也可以用于檢測樣品中SCN—的含量；3.利用魯米諾-SCN—-Mo3+化學發光體系測定土壤中的有效鉬①測定準確，本發明方法測定標準土(中國科學院南京土壤研究所提供)的結果和標準結果經F檢驗無顯著性差異，見表l;②檢測限低、靈敏度高、線性范圍較寬，土壤中有效鉬的檢測限為2.97X10—2mg/kg;(D測試周期短，單人次測定一個樣品的時間約為3個小時，其中浸提、分離可以多個樣品同時進行，單人次測定6個樣品時間約為4個小時；④不使用有毒有害的化學試劑，是測定土壤中有效鉬的理想方法。4.測定成本低，所用的試劑均為廉價易得的通用試劑，但個樣品測試的藥劑成本僅為0.5元。具體實施方式實施例1:一種化學發光組合物，它是通過混合兩種組合物而呈現化學發光的體系，由含有SCN"1520mg/kg、硼氫化鉀40mg/kg、一定濃度的Mo042—的水溶液A和在溶液中溶解有魯米諾2.5X10—4mol/L水溶液B構成，A的pH值為0.72,B的pH值為12.00，組合物A與組合物B以1:1的體積比混合后呈現化學發光反應，光波長為420430nm。一種利用上述化學發光組合物測定土壤有效鉬的方法，包括以下步驟(1)待測樣品制備①浸提稱取標準土7417(中國科學院南京土壤研究所)2.0克，放入100mL的三角瓶中，加入Tamm(草酸-草酸銨溶液，pH3.3)溶液20.OOmL，在往復振蕩器上以200次/分鐘的頻率振蕩15分鐘；然后放入超聲波清洗器中超聲提取4分鐘；②分離將其上清液轉到離心管中，以3500轉/分鐘的轉速離心分離3分鐘；③加熱取上清液15.00mL于100mL的燒杯中，在電熱板上以40100'C的低溫蒸干，再經15040(TC的高溫將其中的殘酸除盡后，用10mL去離子水溶解殘渣，以定量濾紙過濾之；④除干擾離子用陽離子交換柱交換分離除去干擾離子，如F,等，棄去開始的20.0mL濾液，接取40.OOmL為待測液，以稀硫酸將待測液pH值調為1.0。(2)待測樣品測定將調好pH的樣品溶液轉入25.OmL的比色管中，加入1.00mL的5.0XNH4SCN，1.OOmL的0.1%硼氫化鉀，以水定容至25mL，搖動至不產生氣泡為止，即為A溶液，以含魯米諾2.5Xl(T4mol/L、pH值為12.0的水溶液為B液，分別取A溶液2.00ml、B溶液2.OOml在化學發光儀(儀器同上)的反應檢測容器中混合反應，.檢測讀取反應的發光強度。(3)空白及標準樣品制備、測定①空白液制備測定取浸提劑Tamm(草酸-草酸銨溶液，PH3.3)溶液20.00mL，不加土壤樣品，其它過程與上述待測樣品相同；②標準樣品制備分別移取1.0mg/L的鉬標準溶液OmL，0.50mL，1.OOmL，1.50mL，2.OOmL，2.50mL于25mL的比色管中，向各管中依次加入1.OOmL的1+9H2S04，1.OOmL的5%NH4SCN，1.OOmLO.1%新配的硼氫化鉀，定容至25mL，此即為含鉬不同的系列A溶液，以含魯米諾2.5X10—4mol/L、pH值為12.00的水溶液為B液，依次取各A溶液2.OOml放入化學發光儀(河南農大迅捷測試技術有限公司，YN-FGI瞬穩靜態注射化學發光分析儀，工作參數負高壓-525V，增益倍數l倍，測試時間10s)的反應檢測容器中，并分別加入B溶液2.00ml，檢測讀取各反應的發光強度；根據上面的測定結果繪制工作曲線，從該曲線上可得該土壤樣品中的有效鉬含量為0.16mg/kg。實施例2:—種化學發光組合物，它是通過混合兩種組合物而呈現化學發光的體系，由含有SCN"2000mg/kg、硼氫化鉀300mg/kg、一定濃度的MoOf的水溶液A和在溶液中溶解有魯米諾1.OX10-3mol/L水溶液B構成，A的PH值為2.0，B的pH值為14.0，組合物A與組合物B以1:3的體積比混合后呈現化學發光反應，光波長為420430nm。一種利用上述化學發光組合物測定土壤有效鉬的方法，包括以下步驟(l)待測樣品預處理①浸提稱混合均勻的土壤樣品5.0克，放入100mL的三角瓶中，加入Tanim溶液100.00mL，在往復振蕩器上以240次/分鐘的頻率振蕩10分鐘，然后放入超聲波清洗器中超聲提取10分鐘；②分離將其上清液轉到離心管中，以5Q00轉/分鐘的轉速離心分離1分鐘；③加熱取上清液20.00mL于100mL的燒杯中，在電熱板上以7010(TC的低溫蒸干，再以20040(TC的高溫將其蒸至白煙冒盡，用30mL去離子水溶解殘渣，以定量濾紙過濾之；④除干擾離子用陽離子交換柱交換分離，棄去開始的15.0mL濾液，接取35.OOmL為待測液，以稀硫酸將待測液pH值調為0.8。(2)待測樣品測定將調好PH的樣品溶液轉入25.0mL的比色管中，加入1.00mL的5.0XNH4SCN，1.00mL的O.1%硼氫化鉀，以水定容至25mL，搖動至不產生氣泡為止，即為A溶液，以含魯米諾2.5X10—4mol/L、pH值為12.0的水溶液為B液，分別取A溶液2.OOml、B溶液2.OOml在化學發光儀(所用儀器同上)的反應檢測容器中混合反應，檢測讀取反應的發光強度。(3)空白及標準樣品制備、測定①空白及標準樣品測定分別取2.0mg/L的鉬標準溶液OmL，2.00mL于容量瓶中，向各容量瓶中依次加入2.OOmL的1+9H2S04，3.00mL的4.4o掘4SCN，3.OOmL的0.5%硼氫化鉀堿性水溶液，以水定容至50mL，此即為含鉬不同的系列A溶液，以含魯米諾1.0X10—3mol/L、pH值為14.0的水溶液為B液，依次取各A溶液2.OOml放入化學發光儀(河南農大迅捷測試技術有限公司，YN—FGI瞬穩靜態注射化學發光分析儀，工作參數為負高壓-525V,增益倍數1倍，測試時間10s)的反應檢測容器中，并分別加入B溶液6.OOml，檢測讀取各反應的發光強度。將上面的測定結果代入前述計算公式，可得土壤樣品中的有效鉬含量。實施例3:—種化學發光組合物，它是通過混合兩種組合物而呈現化學發光的體系，由含有SCN"40mg/kg、硼氫化鉀30mg/kg、一定濃度的MoOf的水溶液A和在溶液中溶解有魯米諾1.OX10—5mol/L水溶液B構成，A的pH值為0.1，B的pH值為9.0，組合物A與組合物B以1:2的體積比混合后呈現化學發光反應，光波長為420430nm。一種利用上述化學發光組合物測定土壤有效鉬的方法，包括以下步驟(1)待測樣品預處理①浸提稱混合均勻的土壤樣品2.0克，放入lOOmL的三角瓶中，加入Tamm溶液10.OmL，在往復振蕩器上以100次/分鐘的頻率振蕩50分鐘，然后放入超聲波清洗器中超聲提取2分鐘；②分離將其上清液轉到離心管中，以1000轉/分鐘的轉速離心分離5分鐘；③加熱取上清液5.OmL于100mL的燒杯中，先低溫蒸干，再加熱去除殘酸后，用5mL去離子水溶解殘渣，以定量濾紙過濾之；④除干擾離子用陽離子交換柱交換分離，棄去開始的濾液，接取20mL為待測液，以稀硫酸將待測液pH值調為0.20。(2)待測樣品測定將調好酸度的樣品溶液轉入25.0mL的比色管中，加入1.OOmL的5.0%NH4SCN，1.OOmL的0.1%硼氫化鉀，以水定容至20mL，搖動至不產生氣泡為止，即為A溶液，以含魯米諾2.5X1(Tmol/L、pH值為12.0的水溶液為B液，分別取A溶液2.00ml、B溶液6.OOml在化學發光儀(同上)的反應檢測容器中混合反應，檢測讀取反應的發光強度。(3)空白及標準樣品制備、測定分別取3.Omg/L的鉬標準溶液OmL，1.OOmL于比色管中，向各管中依次加入0.5mL的1+9H2S04，0.10mL的1.05%NH4SCN，0.10mL的0.6Q/a朋氫化鉀堿性水溶液，以水定容至20mL，此即為含鉬不同的系列A溶液，以含魯米諾1.0X10—5mol/L、pH值為9.0的水溶液為B液，依次取各A溶液2.OOml放入化學發光儀(河南農大迅捷測試技術有限公司，YN—FGI瞬穩靜態注射化學發光分析儀，工作參數負高壓-500V，增益倍數1倍，測試時間20s)的反應檢測容器中，并分別加入B溶液3.00ml，檢測讀取各反應的發光強度。將上面的測定結果代入前述計算公式，可得該土壤樣品中的有效鉬含量。實施例4:與實施例1基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN—80mg/kg、硼氫化鉀60mg/kg、Mo042—，pH值為0.40;②組合物B為溶解有魯米諾8.0X10—5mol/LpH值為ll.OO的溶液；③以15:1的水土比浸提土壤；空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入2.OOmL的1.3%NH4SCN，2.OOraL的0.075%硼氫化鉀，以水定容至25mL。實施例5:與實施例2基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN"100mg/kg、硼氫化鉀100mg/kg、MoO廣，pH值為0.60;②組合物B為溶解有魯米諾1.0X10—4mol/LpH值為12.00的溶液；③以8:1的水土比浸提土壤；④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入1.OOmL的0.66%NH4SCN,1.OOmL的0.5%硼氫化鉀，以水定容至50mL。實施例6:與實施例3基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN-200mg/kg、硼氫化鉀150mg/kg、Mo042-，pH值為0.70;②組合物B為溶解有魯米諾3.0X10—4mol/LpH值為13.00的溶液；③空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入2.00mL的1.3%NH4SCN，2.OOmL的0.75%硼氫化鉀，以水定容至50mL。實施例7:與實施例2基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN—500mg/kg、硼氫化鉀200mg/kg、Mo0,，pH值為0.80;②組合物B為溶解有魯米諾5.OXl(T4mol/LpH值為14.00的溶液；③空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入3.00mL的1.6XNH4SCN，3.OOmL的0.5%硼氫化鉀，以水定容至25mL。實施例8:與實施例1基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN—800mg/kg、硼氫化鉀250mg/kg、MoO產，pH值為0.90;②組合物B為溶解有魯米諾8.0X10"mol/LpH值為IO.O的溶液；③以15:1的水土比浸提土壤；④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入1.OOmL的5.3%NH4SCN，1.OOmL的1.25%硼氫化鉀，以水定容至50mL。實施例9:與實施例3基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN1200mg/kg、硼氫化鉀260mg/kg、MoOf，pH值為1.00;②組合物B為溶解有魯米諾9.0X1(Tmol/LpH值為11.0的溶液；③以18:1的水土比浸提土壤；④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入0.50mL的6.3%NH4SCN，0.50mL的1.04%硼氫化鉀，以水定容至20mL。實施例10:與實施例2基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN-1500mg/kg、硼氫化鉀280mg/kg、Mo042—，pH值為1.20;②組合物B為溶解有魯米諾7.0X10—4mol/LpH值為14.0的溶液；③空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入2.50mL的2.37%NH4SCN，2.50mL的0.21%硼氫化鉀，以水定容至30mL。實施例11:與實施例1基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN"1800mg/kg、硼氫化鉀290mg/kg、Mo042—，pH值為1.50;②組合物B為溶解有魯米諾5.0X1(TW)1/LpH值為13.0的溶液；③以20:1的水土比浸提土壤浸提土壤；④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入1.50mL的6.3XNH4SCN，1.50mL的0.78%硼氫化鉀，以水定容至40mL。實施例12:與實施例3基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN—1900mg/kg、硼氫化鉀300mg/kg、MoO產，pH值為1.90;②組合物B為溶解有魯米諾2.0X10—4mol/LpH值為12.0的溶液；③空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入2.00mL的6.25%NH4SCN，1.OOmL的1.5%硼氫化鉀，以水定容至50mL。實施例13:與實施例1基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN"1950mg/kg、硼氫化鉀295mg/kg、Mo042—，pH值為1.80;②組合物B為溶解有魯米諾3.0X10-4mol/LpH值為13.5的溶液；③以6:1的水土比浸提土壤浸提土壤；④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入1.00mL的6.4%NH4SCN，3.OOmL的O.25%硼氫化鉀，以水定容至25mL。實施例15:與實施例2基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN—1600mg/kg、硼氫化鉀95mg/kg、Mo042—,pH值為0.60;②組合物B為溶解有魯米諾2.0X10—4mol/LpH值為12.00的溶液；③以10:1的水土比浸提土壤浸提土壤；④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入3.00mL的1.75%NH4SCN，1.00mL的0.24%硼氫化鉀，以水定容至25mL。實施例16:與實施例3基本相同，不同之處在于①組合物A中含有SCN—45mg/kg、硼氫化鉀35mg/kg、MoO廣，pH值為0.75;②組合物B為溶解有魯米諾4.0X10—4mol/LpH值為11.50的溶液；③加入陽離子交換樹脂，去除干擾離子;④空白溶液、標準溶液及待測溶液分別依次加入1.OOmL的0.3Q%NH4SCN，1.00mL的O.175%硼氫化鉀，以水定容至50mL。表1方差分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>權利要求1.一種化學發光組合物，它是A、B兩種組合物以1∶1～3的體積比混合后而呈現化學發光的體系，組合物A為溶解有SCN-40～2000mg/kg、硼氫化鉀30～300mg/kg、MoO42-0.01～10mg/kgpH值為0.10～2.00的溶液，組合物B為溶解有魯米諾1.0×10-5～1.0×10-3mol/LpH值為9.00～14.00的溶液。2.根據權利要求1所述的化學發光組合物，其特征在于，所述組合物A中溶解有SCN—8001800mg/kg、硼氫化鉀40200mg/kg、MoO廣O.025mg/kg，其pH值為0.501.5。3.根據權利要求1所述的化學發光組合物，其特征在于，所述組合物B中溶解有魯米諾8.0X10—58.0X10—W/L，其pH值為10.0013.00的溶液。4.根據權利要求1所述的化學發光組合物，其特征在于，組合物A為溶解有SCN—12001600mg/kg、硼氫化鉀40100mg/kg、Mo0/—0.022mg/kgpH值為0.601.00的溶液，組合物B為溶解有魯米諾1.0X10—45.0X10—4mol/LpH值為11.0013.00的溶液。5.根據權利要求1所述的化學發光組合物，其特征在于，組合物A為溶解有SCN"1520mg/kg、硼氫化鉀40mg/kg、Mo042—0.022mg/kgpH值為0.600.80的溶液，組合物B為溶解有魯米諾2.5X10—4mol/LpH值為12.00的溶液。6.—種利用權利要求1所述的化學發光組合物測定土壤有效鉬的方法，包括以下步驟(1)待測樣品制備a浸提稱取一定量的待測土壤樣品置浸提容器中，按520:l的水土比加入Tamm溶液，置于振蕩器上以100240次/分鐘的振蕩頻率振蕩1050分鐘后，再置超聲波下浸提210分鐘，提取浸提溶液；b分離用離心機以10005000轉/分鐘的轉速離心分離上步所得浸提溶液15分鐘；c加熱取分離后的上清液520mL置于耐熱容器中，先蒸干，再經加熱除酸后，加530mL水溶解殘渣，以定量濾紙過濾；d除千擾離子將上述濾液置入陽離子交換柱中或向濾液中加入陽離子交換樹脂，分離除去干擾離子；(2)測定調節步驟(l)中所得待測液pH值至O.13.0，移取510mL，分別加入0.18%SCN—水溶液0.103.00mL，0.215wt%硼氫化鉀水溶液0.103.00mL，以水定容至2050mL，調解其pH值至0.12.0，此即為化學發光組合物A，化學發光組合物B為含魯米諾1.OX10—51.0X10—3mol/L的水溶液，其pH值為9.014.0，將A與B以1:13的體積比在化學發光儀的反應檢測容器中混合反應，檢測讀取該化學發光反應的發光強度，反應溶液中MoO廣的濃度在0.021.0mg/kg范圍內與化學反應的發光強度呈正相關，根據己知濃度的Mo042—溶液與其發生化學反應時的發光強度作出Mo0/—濃度一反應曲線，將待測樣品的發光強度扣除本底值后即可從該曲線查找或推算出該樣品中MoOf的含量。7.根據權利要求6所述的化學發光組合物測定土壤中有效鉬的方法，其特征是步驟(3)中所述化學發光儀的工作時的負高壓為-200-800V，增益倍數為18倍，測試響應時間為5100s。全文摘要本發明涉及一種化學發光組合物及利用該組合物測定土壤有效鉬的方法。它是A、B兩種組合物混合后而呈現化學發光的體系，組合物A為溶解有SCN<sup>-</sup>40～2000mg/kg、硼氫化鉀30～300mg/kg、MoO<sub>4</sub><sup>2-</sup>0.02～10mg/kgpH值為0.10～2.00的溶液，組合物B為溶解有魯米諾1.0×10<sup>-5</sup>～1.0×10<sup>-3</sup>mol/LpH值為9.00～14.00的溶液；以Tamm溶液提取土壤中的有效鉬，再經過分離除雜后，利用前述化學發光體系即可準確測出鉬的含量。該發光體系對鉬的檢測限低、靈敏度高、線性范圍寬，本發明方法測鉬周期短、測定成本低，不涉及有毒有害的化學試劑，是測定土壤中有效鉬的理想方法。文檔編號C09K11/63GK101328403SQ200710054649公開日2008年12月24日申請日期2007年6月22日優先權日2007年6月22日發明者劉炎超,孫偉濤,磊孟,李偉華,段鐵城,王志榮,王海娟申請人:河南農大迅捷測試技術有限公司