直接pcr擴增試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種直接PCR擴增試劑盒，要解決的技術問題是便于攜帶、使用方便且能夠避免試劑污染。本實用新型試劑盒包括盒體，所述試劑盒還包括離心管、分別分裝有直接PCR擴增所需的若干個試劑的膠囊體以及研磨杵；所述離心管的蓋子的中心處設有用于刺破膠囊體上下兩端端面的刺針，膠囊體的橫截面為圓形，膠囊體的橫截面的直徑與離心管的內徑相等，在膠囊體的外周壁上端設有一周環形的凸邊。與現有技術相比，本實用新型直接PCR擴增試劑盒可以避免試劑被污染；而且能夠根據需要攜帶相應量的膠囊體，且在離心管上設置可刺破膠囊體的刺針，使用方便，而且成本低，能夠給免DNA提取PCR帶來巨大的改變，因此具有很好的市場應用前景。
【專利說明】
直接PCR擴増試劑盒
技術領域
[0001] 本實用新型涉及一種生物實驗技術領域，特別是一種直接PCR擴增試劑盒。
【背景技術】
[0002] 目前，傳統的直接PCR擴增試劑盒，通常包含有分別裝有溶液A、溶液B以及PCR MagicMix3.0的各種試劑管，而每種試劑管內一般裝有足夠檢測100次的試劑，而且其包含 的研磨杵以及實驗需要使用的離心管均是分散設置，在使用時，將試劑通過吸管從容器中 吸出放入離心管內混合，這種方式雖然簡單，但是多次使用或攜帶容易造成試劑污染而失 效的問題，而且各試劑和耗材均是分散設置，使用時還需要配合不同規格的移液槍和槍頭， 操作不太方便。
【發明內容】
[0003] 本實用新型的目的是提供一種直接PCR擴增試劑盒，要解決的技術問題是便于攜 帶、使用方便且能夠避免試劑污染。
[0004] 為解決上述問題，本實用新型采用以下技術方案實現:一種直接PCR擴增試劑盒， 所述試劑盒包括盒體，所述試劑盒還包括離心管、分別分裝有直接PCR擴增所需的若干個試 劑的膠囊體以及研磨杵;所述離心管的蓋子的中心處設有用于刺破膠囊體上下兩端端面的 刺針，膠囊體的橫截面為圓形，膠囊體的橫截面的直徑與離心管的內徑相等，在膠囊體的外 周壁上端設有一周環形的凸邊。
[0005] 本實用新型所述的直接PCR擴增試劑盒所需的若干個試劑包括溶液A、溶液B以及 PCRMagicMix3.0試劑。
[0006] 本實用新型的每個膠囊體放置在與其形狀適配且容易被擠出至離心管的小盒管 中。
[0007] 本實用新型所述的膠囊體的下端為弧面。
[0008] 本實用新型所述的膠囊體的上端設有薄膜面。
[0009] 本實用新型所述的盒體內設有將盒體的內腔劃分為至少五個分隔腔的隔板，所述 離心管、膠囊體以及研磨杵分別放置在分隔腔內。
[0010] 本實用新型的放置研磨杵的分隔腔內設有研磨杵盒，研磨杵放置在研磨杵盒內， 研磨杵盒上設有蓋子。
[0011] 本實用新型的放置裝有PCRMagicMix3.0試劑的膠囊體的分隔腔的腔體內設有 保溫隔熱板。
[0012] 本實用新型所述的放置離心管的分隔腔內設有離心管支架，所述離心管支架上設 有至少一個用于將離心管插入后豎立放置的放置孔。
[0013] 本實用新型直接PCR擴增試劑盒與現有技術相比，采用各個分區將免DNA提取PCR 所需的耗材和試劑統一集中隔置，再用一個盒體將各個分區容納進來，便于攜帶;采用將一 定量的免DNA提取PCR所需的若干個試劑分別封裝在膠囊體中，可以避免試劑被污染;而且 能夠根據需要攜帶相應量的膠囊體，且在離心管上設置可刺破膠囊體的刺針，使用方便，而 且成本低，能夠給免DNA提取PCR帶來巨大的改變，因此有很好的市場應用前景。
【附圖說明】
[0014] 圖1是本實用新型試劑盒的結構示意圖。
[0015] 圖2是本實用新型離心管的剖視圖。
[0016] 圖3是本實用新型膠囊體的剖視圖。
[0017] 圖4是本實用新型使用時的離心管與膠囊體的結構示意圖。
【具體實施方式】
[0018] 下面結合附圖和實施例對本實用新型作進一步詳細說明。
[0019] 如圖1所示，本實用新型的試劑盒包括盒體1，在盒體1上設有能夠將盒體1的敞口 封閉的盒蓋12,盒蓋12與盒體1通過現有技術的卡扣結構實現相互扣合。
[0020] 該試劑盒還包括離心管2、分別裝有直接PCR擴增所需要的溶液A、溶液B和PCR MagicMix3.0的膠囊體3以及研磨杵4;其中的裝有溶液A、溶液B以及PCRMagicMix3.0的 膠囊體3的容量可根據實際測試所使用的劑量進行灌裝;本實用新型的免DNA提取PCR試劑 盒中的溶液A、溶液B以及PCRMagicMix3.0試劑來源于寶曼公司生產的型號為130985-100 型免DNA提取PCR試劑盒中的試劑。
[0021] 如圖2所示，在離心管2的蓋子的中心處設有用于刺破膠囊體3上下兩端端面的刺 針5;在離心管2的蓋子上與離心管2的管腔開口相對的一側端面上還設有與離心管2的管腔 開口相適配連接的凸臺13。
[0022] 如圖3所示，膠囊體3的橫截面為圓形，其橫截面的直徑與離心管2的內徑相等，膠 囊體3的下端為弧面，弧面可以引導膠囊體3中的液體從膠囊體3的刺破孔中流入離心管2的 管腔內；而膠囊體3的上端設有厚度小于膠囊體3其余部分厚度的薄膜面15。在膠囊體3的外 周壁上端設有一周環形的凸邊6,當膠囊體3放入離心管2內時，凸邊6的下端邊緣與離心管2 的管體上端邊緣相互抵靠，從而使膠囊體3不會掉入離心管2的管腔內。每個膠囊體3可以放 置在與其形狀適配且可容易擠出至離心管的小盒管中，以避免在存放或時間時受到污染， 使用時只需通過擠壓小盒管的底部將膠囊體3的一頭擠入離心管，利用小盒管將膠囊體3壓 入離心管中即可。
[0023] 如圖1所示，盒體1內設有將盒體1的內腔劃分為至少五個分隔腔的隔板7,優選為5 個，分別為設于盒體1左邊上側的離心管分隔腔16、設于盒體1左邊下側的研磨杵分隔腔17、 設于盒體1右邊上側的用于放置裝有溶液A的膠囊體的第一膠囊體分隔腔18、設于盒體1右 邊中部的用于放置裝有溶液B的膠囊體的第二膠囊體分隔腔19以及設于盒體1的右邊下側 的用于放置裝有PCRMagicMix3.0的膠囊體的第三膠囊體分隔腔20,離心管2放置在離心 管分隔腔16,膠囊體3根據裝在的不同試劑分別放置在三個膠囊體分隔腔18、19、20中，研磨 杵4放置在研磨杵分隔腔17內。
[0024] 因PCRMagicMix3.0需要低溫保藏，在放置裝有PCRMagicMix3.0的膠囊體3的分 隔腔（即第三膠囊體分隔腔20)的腔體內設有保溫隔熱板9,該保溫隔熱板9由PE棉外包塑料 材料制成，在第三膠囊體分隔腔20上還可以設有由保溫隔熱板制作而成的蓋板14,使第三 膠囊體分隔腔20形成一個可用于低溫保藏的腔體。當需要外出攜帶時，將放置于-20°C的包 含有膠囊體3的小盒管取出放入本實用新型免DNA提取PCR試劑盒中，或者將提前放置于-20 °(：保存的已保存有膠囊體3的本實用新型直接PCR擴增試劑盒中直接取出，因在裝有PCR MagicMix3.0的膠囊體3的分隔腔的腔體內設有保溫隔熱板9,即便外出，還能夠使其維持 在低溫環境，避免失效。
[0025]在放置離心管2的分隔腔（即離心管分隔腔16)內設有離心管支架10,離心管支架 10的兩端固定在離心管分隔腔相對兩側的腔壁上，在離心管支架10上設有至少一個用于將 離心管2插入后豎立放置的放置孔11。
[0026]在研磨杵分隔腔17內還可以設有可取出的研磨杵盒8,研磨杵盒8上設有蓋子，可 以使得研磨杵3更干凈，免受污染。
[0027] 如圖4所示，根據試劑的添加順序，將膠囊體3放入離心管2內，當蓋合離心管2的蓋 子時，刺針5依次刺破膠囊體3的上端面以及下端面，使得膠囊體3內的試劑從下端面上的刺 破孔流入離心管2內，進一步將離心管2的蓋子緊壓在離心管2的管體上時，由于凸臺13的表 面對膠囊體3的上端面的擠壓，使膠囊體3中的試劑被完全推送至離心管2的管腔內，然后取 出膠囊體3，重復上述步驟，使三種試劑均被擠入離心管2的管腔內。
[0028]具體使用方法如下：
[0029] 1.首次使用本產品時需要詳細檢查溶液A和溶液B的膠囊體3是否有結晶析出。如 果有需要37°C溶解后搖晃均勻待用。未開封的裝有溶液A和溶液B膠囊體3可以放常溫保存。
[0030] 2.根據材料不同參考下表取少量樣品到1.5mL塑料的離心管2中。
[0031] L〇〇32」注意：未列出樣品，用尸需要自己摸
索最佳用量。對冨含多醌多酚的植物材料（如 棉花），組織使用量最好不要超過0.5mg。
[0033] 3.加入100uL溶液A，將裝有溶液A的膠囊體3放在離心管2上，蓋上蓋子，使刺針5刺 破薄膜面15以及膠囊體3的下端面，讓溶液A流入離心管2中，按壓離心管2蓋子，確保膠囊體 3中的溶液A完全被擠出并確保溶液A完全將樣品淹埋，并取出用過的膠囊體3。
[0034] 4.研磨杵4小心將樣品在離心管內搗碎。血液一般搗碎30秒即可;實體組織需要搗 碎到溶液的顏色變渾濁(植物葉片的話，溶液的顏色將變成綠色）。如需更多研磨杵4,可另 購。對棘手的樣品，還可以增加95°C保溫10 - 60分鐘一步，待溫度冷卻到室溫后再進入下一 步。殘留的實體組織碎片不會影響后續試驗。
[0035] 5.加入100uL溶液B，將裝有溶液B的膠囊體3放在離心管2上，蓋上蓋子，使刺針5刺 破薄膜面15以及膠囊體3的下端面，讓溶液B流入離心管2中，按壓離心管2蓋子，確保膠囊體 3中的溶液B完全被擠出，取出用過的膠囊體3，離心管2震蕩10秒混勻。
[0036] 6 ?常溫12000rpm離心2分鐘。
[0037] 7.將上清液轉移到一個干凈的1.5mL離心管中。如果不用，可以放一 80°C長期保 存。如果用于后續PCR，請直接進入下步。
[0038] 8.直接用裂解液作為模板設置30uL體系的PCR反應體系如下：
[0039]
[0040] 注意：裝有PCRMagicMix3.0的膠囊體3需要放入離心管2中，刺破，使試劑流入離 心管內，裂解液體積最好不要超過PCR體積的1/10。如果需要增加模板的加入量，則PCR體系 應該相應的增加。如果加入5uL裂解液，則可以使用50uL的PCR體系。
【主權項】
1. 一種直接PCR擴增試劑盒，所述試劑盒包括盒體（1)，其特征在于:所述試劑盒還包括 離心管(2)、分別分裝有直接PCR擴增所需的若干個試劑的膠囊體(3)以及研磨杵(4);所述 離心管(2)的蓋子的中心處設有用于刺破膠囊體(3)上下兩端端面的刺針(5)，膠囊體(3)的 橫截面為圓形，膠囊體(3)的橫截面的直徑與離心管(2)的內徑相等，在膠囊體(3)的外周壁 上端設有一周環形的凸邊(6)。2. 根據權利要求1所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:所述直接PCR擴增試劑盒所 需的若干個試劑包括溶液A、溶液B以及PCR MagicMix 3.0試劑。3. 根據權利要求1所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:每個膠囊體(3)放置在與其 形狀適配且容易被擠出至離心管(2)的小盒管中。4. 根據權利要求2所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:所述膠囊體(3)的下端為弧 面。5. 根據權利要求4所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:所述膠囊體(3)的上端設有 薄膜面(15)。6. 根據權利要求5所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:所述盒體（1)內設有將盒體 (1)的內腔劃分為至少五個分隔腔的隔板(7)，所述離心管(2)、膠囊體(3)以及研磨杵(4)分 別放置在分隔腔內。7. 根據權利要求6所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:放置研磨杵(4)的分隔腔內 設有研磨件盒(8 )，研磨件(4)放置在研磨件盒(8)內，研磨件盒(8)上設有蓋子。8. 根據權利要求7所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于：放置裝有PCR MagicMix 3.0試劑的膠囊體(3)的分隔腔的腔體內設有保溫隔熱板(9)。9. 根據權利要求8所述的直接PCR擴增試劑盒，其特征在于:所述放置離心管(2)的分隔 腔內設有離心管支架（10)，所述離心管支架（10)上設有至少一個用于將離心管（2)插入后 豎立放置的放置孔(11)。
【文檔編號】C12M1/00GK205687905SQ201620605914
【公開日】2016年11月16日
【申請日】2016年6月20日 公開號201620605914.5, CN 201620605914, CN 205687905 U, CN 205687905U, CN-U-205687905, CN201620605914, CN201620605914.5, CN205687905 U, CN205687905U
【發明人】付偉, 魏霜, 汪天杰, 王晨光, 朱鵬宇, 林春貴, 蔡雪妍, 朱水芳
【申請人】中國檢驗檢疫科學研究院