一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型屬于分析檢測技術領域，涉及一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒。其包含試劑盒蓋、試劑盒以及置于試劑盒內的四個試劑瓶；所述的四個試劑瓶分別盛裝檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品；所述檢測緩沖液為NADPH和磷酸鉀緩沖液；所述標準品為5μg/mL的人硫氧還蛋白和0.1％wt血清白蛋白混合液。與現有技術相比，本實用新型樣本需求量少，特別適合血清、血漿檢測，能非常專一地檢測人血清或血漿硫氧還蛋白活性，線性范圍寬；簡化了檢測操作步驟，更好地滿足自動檢測設備基本流程配置的需要，降低了因檢測程序復雜引入的檢測結果的離散性、提高檢測結果的準確性。
【專利說明】
一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒
技術領域
[0001]本實用新型屬于分析檢測技術領域，具體來說，涉及到一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒。
【背景技術】
[0002]硫氧還蛋白存在于所有活細胞中，與細胞生長與存活密切相關。硫氧還蛋白也會分泌到細胞外，存在于血液及細胞外液中。該蛋白活性變化與許多疾病的發生發展有關。目前，硫氧還蛋白ELISA試劑盒，是以免疫學反應為基礎，依靠抗原、抗體的特異性反應，檢測硫氧還蛋白的蛋白水平。然而，硫氧還蛋白極易被體內的代謝物、中間產物修飾改變活性，組織和細胞中硫氧還蛋白的蛋白水平，不能確切地反映硫氧還蛋白的功能狀態。此外，ELISA試劑盒有獨特的組織特異性，實驗中可能用到不同來源的樣本，需要辨別哪種ELISA試劑盒能測手中的樣本。至今，實驗室研究中，硫氧還蛋白的測活方法主要有兩種:胰島素測活法(Luthman,B1chemistry 21:6628-6633 ； 1982.)、終點法(Arner ,Methods Enzymol300:226-239.； 1999.)及改良后的終點法(Wu，Y.Atherosclerosis 212:351-355;2010.)。胰島素測活法，適合酶動力學研究，不適合大批量樣本的測定。終點法及改良后的終點法，各實驗室所用的條件及標準不盡相同，步驟較復雜，所測得的結果難以比較。
【發明內容】
[0003]為解決上述技術問題，本實用新型提供了一種高靈敏度、高效且使用簡便的高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒。
[0004]本實用新型所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，所述檢測試劑盒包含試劑盒蓋1、試劑盒3以及置于試劑盒內的四個試劑瓶2;所述的四個試劑瓶2分別盛裝檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品;所述檢測緩沖液為NADPH緩沖液;所述標準品為5yg/mL的人硫氧還蛋白和0.1 % wt血清白蛋白混合液。
[0005]所述的NADPH緩沖液為NADPH和磷酸鉀緩沖液。
[0006]本實用新型所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，所述試劑瓶2為塑料瓶或EP管。
[0007]本實用新型所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，所述血清白蛋白為人血清白蛋白或牛血清白蛋白。
[0008]本實用新型所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，所述試劑盒蓋I扣蓋在試劑盒3上構成外部大小為1cmX 1cmX 3cm的立方體。
[0009]本實用新型所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，盛裝檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品的試劑瓶(2)的容量依次為2mL、100yL、1.7mL及200yL。
[0010]與現有技術相比，本實用新型所述的高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒的樣本需求量少，僅需20yL血清、血漿，特別適合血清、血漿檢測，能非常專一地檢測人血清或血漿硫氧還蛋白活性，標準曲線的線性范圍在O-SOng;而且進一步簡化了檢測操作步驟，更好地滿足自動檢測設備基本流程配置的需要，進一步降低了因檢測程序復雜引入的檢測結果的離散性、提高檢測結果的準確性。其解決了硫氧還蛋白活性檢測試劑盒不適用于現行常用自動檢測設備基本流程配置需要的問題，而且顯著提高了檢測靈敏度。
【附圖說明】
[0011 ]圖1:高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒組件示意圖；試劑盒蓋-1、試劑瓶-2、試劑盒-3。
【具體實施方式】
[0012]下面結合具體的實施例對本實用新型所述的高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒做進一步說明，但是本實用新型的保護范圍并不限于此。
[0013]實施例1
[0014]—種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，包含試劑盒蓋1、試劑盒3以及置于試劑盒內的四個試劑瓶2;所述的四個試劑瓶2分別盛裝檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品；所述檢測緩沖液為NADPH緩沖液，所述的NADPH緩沖液為2mM NADPH和250mM磷酸鉀緩沖液(PH= 7.5)；所述酶溶液為5μΜ牛硫氧還蛋白還原酶溶液;所述底物液為10mg/mL牛胰島素溶液;所述標準品為5yg/mL的人硫氧還蛋白(hTrxl)和0.1 % wt人血清白蛋白混合液。所述試劑瓶2為塑料瓶。所述試劑盒蓋I扣蓋在試劑盒3上構成外部大小為1cmX 1cmX3cm的立方體。所述的檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品對應的試劑瓶2的容量以及盛裝容量依次為2mL、lOOyL、1.7mL及200yL。
[0015]與現有技術相比，本實用新型所述的高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒的樣本需求量少，僅需20μ1血清、血漿，特別適合血清、血漿檢測，能非常專一地檢測人血清或血漿硫氧還蛋白活性，標準曲線的線性范圍在O-SOng;而且進一步簡化了檢測操作步驟，更好地滿足自動檢測設備基本流程配置的需要，進一步降低了因檢測程序復雜引入的檢測結果的離散性、提高檢測結果的準確性。其解決了硫氧還蛋白活性檢測試劑盒不適用于現行常用自動檢測設備基本流程配置需要的問題，而且顯著提高了檢測靈敏度。
【主權項】
1.一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑盒包含試劑盒蓋(I)、試劑盒(3)以及置于試劑盒內的四個試劑瓶(2);所述的四個試劑瓶(2)分別盛裝檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品;所述檢測緩沖液為NADPH緩沖液;所述標準品為5yg/mL的人硫氧還蛋白和0.1 % wt血清白蛋白混合液。2.根據權利要求1所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑瓶(2)為塑料瓶或EP管。3.根據權利要求1所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，其特征在于，所述血清白蛋白為人血清白蛋白或牛血清白蛋白。4.根據權利要求1所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒蓋(I)扣蓋在試劑盒(3)上構成外部大小為1cmX 1cmX 3cm的立方體。5.根據權利要求1所述的一種高靈敏度的高通量硫氧還蛋白活性檢測試劑盒，其特征在于，盛裝檢測緩沖液、酶溶液、底物液和標準品的試劑瓶(2)的容量依次為2mL、10yL、.1.7mL及200yL。
【文檔編號】C12Q1/26GK205590718SQ201620151522
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年2月29日
【發明人】梁巍, 劉軍, 杜澄
【申請人】北京中科研源科技發展有限公司