一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒的制作方法
【技術領域】
[0001] 本實用新型涉及檢測試劑盒技術領域，尤其涉及一種用于制備多基因捕獲探針的 試劑盒。
【背景技術】
[0002] 現有技術中，檢測使用的一種Capture基因分型的基因捕獲檢測試劑盒，一般結 構包括盒體、盒體上部設有盒蓋，盒體的腔體內設有固定座和試劑瓶槽，在固定座上設有 I. 5ml EP管容器孔和0. 5ml EP管容器孔，所述I. 5ml EP管容器孔內設有I. 5ml EP管，所 述0.5ml EP管容器孔內設有0.5ml EP管，所述試劑瓶槽內設有裝洗液的試劑瓶。 【實用新型內容】
[0003] 本實用新型的目的：提供一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，設計更合理化， 克服了現有試劑盒底部易與容器孔的底部發生碰撞而破損，且盒蓋和盒體之間經常有密封 不嚴，在運輸和移動過程中無法保持穩定性的問題。
[0004] 為了實現上述目的，本實用新型的技術方案是：
[0005] 一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，包括試劑盒本體、盒蓋、固定架、旋轉軸 套、轉動軸、手持部、海綿墊、多支EP管、多個試劑瓶及密封條；所述的旋轉軸套水平設置在 所述的試劑盒本體的后端頂部，且所述的旋轉軸套的一側端開口，所述的轉動軸的一端通 過所述的旋轉軸套的開口端同軸插入在所述的旋轉軸套內，所述的轉動軸的另一端位于所 述的旋轉軸套的外側一端，并與所述的手持部同軸連接；所述的旋轉軸套上設有多個旋轉 通孔，所述的旋轉通孔為四分之一圓弧結構，所述的轉動軸上設有多個轉動齒，所述的多個 轉動齒與所述的多個旋轉通孔一一對應；所述的多個轉動齒分別與所述的盒蓋的一側端連 接，所述的盒蓋罩蓋在所述的試劑盒本體上，并繞所述的轉動軸轉動，所述的密封條設置在 所述的盒蓋內，所述的盒蓋通過所述的密封條與所述的試劑盒本體密封連接；所述的固定 架設置在所述的試劑盒本體內，所述的固定架與所述的試劑盒本體為一體結構，所述的海 綿墊設置在所述的固定架內，所述的海綿墊上設有多個EP管插孔及洗液瓶插孔，所述的多 支EP管及多個試劑瓶分別對應插入在所述的海綿墊上的多個EP管插孔及洗液瓶插孔內； 所述的多支EP管的容量為I. 5ml及0. 5ml，所述的多支EP管內灌裝有雜交液、探針及阻遏 劑等；所述的多個試劑瓶的容量為l〇〇ml。
[0006] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的盒蓋的上端面上設有標 記區，所述的標記區向下凹陷設置。
[0007] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的試劑盒本體的外側壁上 設有防滑紋，所述的防滑紋為網狀結構。
[0008] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的多支1.5ml的EP管內分 別裝有雜交液、阻遏劑I及阻遏劑II。
[0009] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的多支0. 5ml的EP管內分 別裝有帶生物素標記的捕獲探針以及分子級別的水。
[0010] 上述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其中，所述的試劑瓶內裝有洗液I及 洗液II。
[0011] 本實用新型結構簡單、設計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受污染，試劑 盒在多基因捕獲時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優點，插孔的設計使得容器底部磕碰 破損，保證試劑盒密封安全，方便運輸。
【附圖說明】
[0012] 圖1是本實用新型一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒的結構示意圖。
[0013] 圖2是本實用新型一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒的盒蓋的俯視圖。
【具體實施方式】
[0014] 以下結合附圖進一步說明本實用新型的實施例。
[0015] 請參見附圖1所示，一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，包括試劑盒本體1、 盒蓋2、固定架3、旋轉軸套4、轉動軸5、手持部6、海綿墊7、多支EP管8、多個試劑瓶9及密 封條10 ;所述的旋轉軸套4水平設置在所述的試劑盒本體1的后端頂部，且所述的旋轉軸 套4的一側端開口，所述的轉動軸5的一端通過所述的旋轉軸套4的開口端同軸插入在所 述的旋轉軸套4內，所述的轉動軸6的另一端位于所述的旋轉軸套4的外側一端，并與所述 的手持部6同軸連接；所述的旋轉軸套4上設有多個旋轉通孔11，所述的旋轉通孔11為四 分之一圓弧結構，所述的轉動軸5上設有多個轉動齒12,所述的多個轉動齒12與所述的多 個旋轉通孔11 一一對應；所述的多個轉動齒12分別與所述的盒蓋2的一側端連接，所述的 盒蓋2罩蓋在所述的試劑盒本體1上，并繞所述的轉動軸5轉動，所述的密封條10設置在 所述的盒蓋2內，所述的盒蓋2通過所述的密封條10與所述的試劑盒本體1密封連接；所 述的固定架3設置在所述的試劑盒本體1內，所述的固定架3與所述的試劑盒本體1為一 體結構，所述的海綿墊7設置在所述的固定架3內，所述的海綿墊7上設有多個EP管插孔 及洗液瓶插孔，所述的多支EP管8及多個試劑瓶9分別對應插入在所述的海綿墊7上的多 個EP管插孔及洗液瓶插孔內；所述的多支EP管8的容量為I. 5ml及0. 5ml，所述的多支EP 管8內灌裝有雜交液、探針及阻遏劑等；所述的多個試劑瓶9的容量為100ml。
[0016] 請參見附圖2所示，所述的盒蓋2的上端面上設有標記區13,所述的標記區13向 下凹陷設置，可將標簽貼在標記區13內，以便區分不同類型的試劑盒及不同病人使用的試 劑盒。
[0017] 所述的試劑盒本體1的外側壁上設有防滑紋14,所述的防滑紋14為網狀結構，便 于攜帶，避免打滑摔落。
[0018] 所述的多支I. 5ml的EP管8內分別裝有雜交液、阻遏劑I及阻遏劑II。
[0019] 所述的多支0. 5ml的EP管8內分別裝有帶生物素標記的捕獲探針以及稀釋用的 分子級別的水。
[0020] 所述的試劑瓶9內裝有洗液I及洗液II。
[0021] 盒蓋2可通過旋轉手持部6打開，盒蓋2通過密封條10與試劑盒本體1之間保持 密封連接；海綿墊7可對多支EP管8、多個試劑瓶9內的EP管和試劑瓶起到保護作用。
[0022] 本實用新型的操作方法：
[0023] 多基因 DNA捕獲：
[0024] I.制備如下混合液：
[0025] 3. 5ul 500ng DNA 庫（用 Illumina 方法制備好的庫）
[0026] I. 5ul 200uM 的 Adaptor Block
[0027] 5ul capture probe (200ng/ul)
[0028] 在 PCR 儀中，95。7min，65° 5min
[0029] 再加入IOul 65°預熱的2X雜交液(終濃度IX)
[0030] 在PCR儀上65度雜交24h (設定熱蓋105° )
[0031] II.洗脫程序：
[0032] L 用 IX binding buffer (IM NaCl, IOmM Tris-HCl, pH 7· 5，and EDTA)漂洗 IOOul Dynabeads? 3 次，最后懸浮于 200ul IX binding buffer 中.
[0033] 2.把 20ul 雜交產物加入到 200ul Dynabeads? IX binding buffer 中。禍旋震蕩 混勻，使用移液器輕輕吹打10次充分混勻。室溫搖動孵育30分鐘。
[0034] 3.將反應管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清（約5分鐘） 小心移除上清。
[0035] 4.保持I. 5ml管始終處于磁力架中，用洗液I清洗15 min。
[0036] 5.再用65° C溫浴的洗液II洗3次。
[0037] 6.將反應管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清（約5分鐘） 小心移除上清。
[0038] 7.加入50 μ 1滅菌超純水，渦旋震蕩混勻，使用移液器輕輕吹打10次充分混勻。 室溫孵育5分鐘。（捕獲的DNA還在生物素結合的磁珠上)。
[0039] III.捕獲后的擴增：（用高保真酶的反應擴增體系）
[0040] 5Χ phusionPCR Buffer 稀釋為 IX
[0041] 模板 20 ul (磁珠震蕩混勻）
[0042] 各引物 IuM
[0043] Hotstar phusion 酶 5 U
[0044] DMSO 2 ul
[0045] dNTP I mM
[0046] 總體積 50uL
[0047] PCR反應條件如下：
[0048]
[0049] IV :擴增產物用磁珠純化后，用Nanodrop定量至20ng/ul，分裝保存。
[0050] 綜上所述，本實用新型結構簡單、設計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受 污染，試劑盒在多基因捕獲時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優點，插孔的設計使得容 器底部磕碰破損，保證試劑盒密封安全，方便運輸。
[0051] 以上所述僅為本實用新型的優選實施例，并非因此限制本實用新型的專利范圍， 凡是利用本實用新型說明書內容所作的等效結構變換，或直接或間接運用附屬在其他相關 產品的技術領域，均同理包括在本實用新型的專利保護范圍內。
【主權項】
1. 一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其特征在于：包括試劑盒本體、盒蓋、固定 架、旋轉軸套、轉動軸、手持部、海綿墊、多支EP管、多個試劑瓶及密封條；所述的旋轉軸套 水平設置在所述的試劑盒本體的后端頂部，且所述的旋轉軸套的一側端開口，所述的轉動 軸的一端通過所述的旋轉軸套的開口端同軸插入在所述的旋轉軸套內，所述的轉動軸的另 一端位于所述的旋轉軸套的外側一端，并與所述的手持部同軸連接；所述的旋轉軸套上設 有多個旋轉通孔，所述的旋轉通孔為四分之一圓弧結構，所述的轉動軸上設有多個轉動齒， 所述的多個轉動齒與所述的多個旋轉通孔一一對應；所述的多個轉動齒分別與所述的盒蓋 的一側端連接，所述的盒蓋罩蓋在所述的試劑盒本體上，并繞所述的轉動軸轉動，所述的密 封條設置在所述的盒蓋內，所述的盒蓋通過所述的密封條與所述的試劑盒本體密封連接； 所述的固定架設置在所述的試劑盒本體內，所述的固定架與所述的試劑盒本體為一體結 構，所述的海綿墊設置在所述的固定架內，所述的海綿墊上設有多個EP管插孔及洗液瓶插 孔，所述的多支EP管及多個試劑瓶分別對應插入在所述的海綿墊上的多個EP管插孔及洗 液瓶插孔內；所述的多支EP管的容量為I. 5ml及0. 5ml，所述的多支EP管內灌裝有雜交液、 探針及阻遏劑；所述的多個試劑瓶的容量為l〇〇ml。2. 根據權利要求1所述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其特征在于：所述的盒 蓋的上端面上設有標記區，所述的標記區向下凹陷設置。3. 根據權利要求1所述的用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，其特征在于：所述的試 劑盒本體的外側壁上設有防滑紋，所述的防滑紋為網狀結構。
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于制備多基因捕獲探針的試劑盒，包括試劑盒本體、盒蓋、固定架、旋轉軸套、轉動軸、手持部、海綿墊、多支EP管、多個試劑瓶及密封條；旋轉軸套設在試劑盒本體頂部，轉動軸插在旋轉軸套內并與手持部連接；旋轉軸套上設有旋轉通孔，轉動軸上設有轉動齒，轉動齒與盒蓋連接，盒蓋通過密封條與試劑盒本體密封連接；固定架設在試劑盒本體內，海綿墊設在固定架內，EP管及試劑瓶插在海綿墊內。本實用新型結構簡單、設計合理、使用方便、制造容易、檢測過程不易受污染，試劑盒在多基因捕獲時具有敏感性高、特異性強、耗時短等優點，插孔的設計使得容器底部磕碰破損，保證試劑盒密封安全，方便運輸。
【IPC分類】C12M1/34
【公開號】CN204644365
【申請號】CN201520300883
【發明人】張道允, 鞏子英
【申請人】上海允英醫療科技有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年5月12日