用于治療或預防高尿酸血癥或痛風的化合物的制作方法
【專利摘要】本發明公開了用于治療或預防高尿酸血癥或痛風的化合物，其為式(I)或式(II)所述的化合物或其藥學上可接受的鹽。本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽可應用于促尿酸排泄以治療或預防高尿酸血癥或痛風。
【專利說明】
用于治療或預防高尿酸血癥或痛風的化合物
技術領域
[0001] 本發明屬于藥物化學領域，具體設及用于治療或預防高尿酸血癥或痛風的化合物 及其組合物和應用。
【背景技術】
[0002] 痛風是由于機體長期嚷嶺代謝素亂和(或)尿酸排泄減少，造成尿酸鹽結晶在機體 組織內沉積而引起的代謝性疾病，其最重要的生化基礎是高尿酸血癥。痛風患者易患急性 尿酸結晶關節炎、痛風石性慢性關節炎、尿酸鹽腎病和尿酸性尿路結石等高尿酸血癥相關 疾病。目前我國痛風發病率逐年增加，到2008年我國痛風患病率在一般人群中達1.1 % (Robert G,Beth Noe.Intra-Osseous Gout in a Diabetic Patient[J].The Journal of Foot and Ankle Surgery，2009,48(l):70-73)。發達國家發病率較高，其中美國大約有3-5 百萬人罹患痛風，且男性的發作率通常是女性的6-9倍。（Terkeltaub，R.A.Gout[J].The New England Journal of Medicine.2003,349:1647-1655)
[0003] 引發高尿酸血癥的一個十分重要的原因是尿酸排泄減少。尿酸的排泄過程較為復 雜，須經過腎小球濾過、腎近曲小管重吸收、分泌及分泌后再吸收四個過程。腎近曲小管重 吸收增加或分泌障礙將引起尿酸滯留，導致血尿酸升高。因此，腎近曲小管對機體內血尿酸 濃度的平衡調節起著非常重要的作用。腎近曲小管細胞的刷狀緣側膜和基底外側膜上存在 著多種尿酸轉運相關蛋白，人尿酸陰離子轉運蛋白Uhuman urate anion transporter 1， hURATl)在腎近曲小管細胞刷狀緣上表達，為有機陰離子轉運蛋白家族(OATS)成員。hURATl 負責尿酸的重吸收，通過有機陰離子交換，將尿酸鹽特異性的由腎管腔轉運入細胞，從而起 到了調控血尿酸濃度的作用。因此，WJRATl是痛風與高尿酸血癥藥物治療的重要祀點。
[0004] WJRATl基因首先是由化omoto從人腎臟克隆出來的，由化C22A12基因編碼，位于染 色體llql3,其CDNA全長2642bp，編碼區長1659bp，編碼含有555個氨基酸的蛋白質。 化C22A12基因存在多種突變，易引起尿酸代謝異常，一項Meta分析表明化C22A12基因對血 尿酸水平有0.13%的變量貢獻。（So A,Thorens B.Uric acid hansport and disease
[J] .J.Clin. Invest. ,2010,120(6): 1791-1799)另據研究表明，SLC22A12基因單核巧酸的 多態性rs893006位點GG、GT基因型與男性患者高血尿酸水平密切相關，提示該序列的多態 性可能是高尿酸血癥的基因風險因素。（王琪.男性高尿酸血癥與URATl基因多態性的關系 [J].檢驗醫學，2012,27(1) :30-33)
[0005] Makoto化soyamada等發現了hURATl的鼠源同系物小鼠腎臟特異性轉運蛋白 (Mouse Renal-specific transpo;rte;r，RST)，該蛋白固定在小鼠腎小管上皮細胞刷狀緣 偵U，其cDNA和氨基酸水平上均與WJRATl有較高的同源性化osoyamada MJchida K，Enomoto A，et al.Function and Localizationof Urate Transporter Iin Mouse Kidney[J] .Am. Soc.化P虹01.2004,15(2) :261-8. KRST的發現，為WURATl為祀點的高尿酸血癥治療 藥物的研究，提供了取材方便的體內外實驗模型來源。
[0006] 在痛風與高尿酸血癥的治療中，促尿酸排泄藥占有十分重要的地位。此類藥物作 用機理為抑制尿酸在近曲小管的重吸收，增加尿酸的排泄而降低血尿酸濃度，促進尿酸鹽 溶解。主要包括苯漠馬隆（Benzbromarone)、丙橫舒（Probenecid)、橫[I比酬 (Sulfinpyrazone)等。
[0007]苯漠馬隆為一種苯并巧喃衍生物，化學名稱為3,5-二漠-4-徑苯基-2-乙基-3-苯 并巧喃基-甲酬，可用于治療痛風。
[0008；
[0009] 舉俱與隆是t^UKATl刃視點治療高尿酸血癥的典型促尿酸排泄藥物，它不僅能抑 審IJURAT1對于尿酸鹽的轉運，還能夠降低URATl的基因表達。據國家藥品不良反應監測數據 庫分析顯示，苯漠馬隆的嚴重不良反應中肝損害問題比較突出，肝功能異常及谷草轉氨酶、 谷丙轉氨酶及堿性憐酸酶升高。研究發現，苯漠馬隆經肝臟CYP2C9氧化代謝成6-徑基苯漠 馬隆，再進一步被P450S酶系代謝成兩種鄰苯二釀類產物。此類物質化學性質活潑，可通過 與蛋白質的半脫氨酸殘基上的琉基共輛加成，使蛋白質變性失活，運是導致其肝毒性的直 接原因 （Matthew G.McDonald,Allan E.Rettie. Sequential Metabolism and Bioactivation of the Hepatotoxin Benzbromarone:Formation of Glutathione Adducts from a Catechol Intermediate[J].Chemical Research in Toxicology.2007, 20(12): 1833-1842)。苯漠馬隆目前已發現的多種不良反應還包括:腹瀉、胃部不適、惡屯、等 消化系統癥狀;斑疹、潮紅、痊癢等皮膚過敏癥。偶然會呈現腸胃不適感，極少呈現等麻疹 (風疹）。在個別環境下還會呈現眼結膜發炎(結膜炎），短時候的陽瘦，反常性的部分皮膚濕 疹(皮疹），頭疼和尿意頻增感。據報道，服用苯漠馬隆也有痊癢感，顏面發紅，紅斑，光過敏 癥，浮腫，屯、窩部不適感等不良反應的產生。苯漠馬隆因其毒副作用，尤其是肝臟毒性已被 歐洲一些國家限制使用，但國內由于其突出的療效，仍作為主要的促尿酸排泄藥物用于臨 床。
【發明內容】
[0010] 本發明的目的是提供新的能抑制URATl轉運尿酸的(4-徑基-3-臘基苯基)-3-苯并 巧喃基-甲酬或(4-徑基-3-S氣甲基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬類衍生物，它們是WURATl 為祀點的用于治療或預防高尿酸血癥或痛風的新型高效促尿酸排泄藥物。通過對(4-徑基- 3-臘基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬或(4-徑基-3-S氣甲基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬類化 合物進行合理的結構修飾，改變其理化性質，影響該類化合物在哺乳動物(包括人)體內的 代謝途徑，在保持或增強其促尿酸排泄活性的同時，降低它們的毒副作用，提高其在高尿酸 血癥或痛風等相關疾病的臨床治療或預防方面的應用安全性。
[0011] 本發明的目的可W通過W下措施達到：
[0012] 本發明提供了式(I)或式(II)所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，
[0013]
[0014] 其中，
[0015] Ri選自氨、気、面素、徑基、臘基、取代或非取代的Ci-4烷基、取代或非取代的Ci-4燒 氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種；
[00W R2選自氨、気、面素、Cl-3烷基、面代Cl-3烷基、臘基中的一種；
[0017] R3 選自 Ci-4 烷基；
[001引 n或m分別獨立地為1或2;
[0019] R4選自氨、気、面素、徑基、臘基、取代或非取代的Ci-4烷基、取代或非取代的Ci-4燒 氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種；
[0020 ] R5選自氨、気、面素、Ci-3烷基、面代Ci-3烷基、臘基中的一種；
[002U 護選自Ci-4烷基；
[0022] X或y分別獨立地為1或2。
[0023] 在一種優選方案中，r1選自氨、気、面素、徑基、臘基、Ci-3烷基、取代的Ci-3烷基、Ci-3 烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-3烷氧基或氨基中的一種或幾 種。
[0024] 在另一種優選方案中，Ri選自氨、気、氣、氯、徑基、臘基、甲基、乙基、氣代甲基、氣 代乙基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、徑甲基、徑乙基、氨基甲基、氨 基乙基、甲氧基、乙氧基、氣代甲氧基、氣代乙氧基中的一種。
[0025] 在一種方案中，當Ri為一個或兩個基團時，Ri優選在苯并巧喃的5位或/和6位。
[0026] 在一種優選方案中，R2選自氨、気、氣、氯、漠、艦、甲基、乙基、氣代甲基、氣代乙基、 臘基中的一種。
[0027] 在一種優選方案中，R3選自Ci-3烷基，更優選為乙基。
[00%]在一種優選方案中，n或m分別獨立地為1或2,更優選的，n或m分別為1。
[0029] 在一種優選方案中，R4選自氨、気、面素、徑基、臘基、Ci-3烷基、取代的Ci-3烷基、Ci-3 烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-3烷氧基或氨基中的一種或幾 種。
[0030] 在另一種優選方案中，R4選自氨、気、氣、氯、徑基、臘基、甲基、乙基、氣代甲基、氣 代乙基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、徑甲基、徑乙基、氨基甲基、氨 基乙基、甲氧基、乙氧基、氣代甲氧基、氣代乙氧基中的一種。
[0031] 在一種優選方案中，R5選自氨、気、氣、氯、漠、艦、甲基、乙基、氣代甲基、氣代乙基 中的一種。
[0032] 在一種優選方案中，R6選自Ci-3烷基，更優選為乙基。
[0033] 在一種優選方案中，X或y分別獨立地為1或2,更優選的，X或y分別為1。
[0034] -些具體的式(I)或式(II)化合物，例如：
[00；
[0036]本發明的式(I)化合物可通過如下方法制得：
[0037]
[0038] 取代水楊醒跟氯丙酬在一定條件下反應生成取代的苯并巧喃，然后跟取代的苯甲 酷氯反應，所得化合物再依次脫去甲基，艦化和臘化反應得到目標化合物。
[0039] 苯并巧喃2位其它烷基取代基類似化合物可通過其它方法制備。具體的制備方法 參見實施例。
[0040] 本發明的式(II)化合物可通過如下方法制得：
[0041]
[0042] 通過化合物E的合成方法可制備化合物G，按上述方法得到目標化合物。
[0043] 除非另外說明，在說明書和權利要求中使用的W下術語具有下面討論的含義：
[0044] "烷基"用于表示飽和控基，Ci-4烷基是指含有1~4個碳原子的飽和控基，其包括甲 基、乙基、正丙基、異丙基、正下基、異下基和新下基。本發明中的烷基優選為Cl-4烷基，進一 步優選Ci-3烷基。取代烷基是指具有一個或大于一個取代基的烷基，當取代基的數目為2個 W上(包含2個)時，各取代基可W相同，也可W不同。取代的Ci-4烷基是指具有一個或多個(2 個或2個W上)取代基的含有1~4個碳原子的飽和控基;例如"氣代甲基"是指具有一個、兩 個或=個氣取代基的甲基，"氣代乙基"是指具有1~5個氣取代基的乙基。
[0045] "面代Ci-4烷基"是指具有一個或多個（即2個或2個W上）面素取代基的含有1~4個 碳原子的飽和控基，其中各面素取代基可W相同，也可W不同。"氣代Cl-3烷氧基"是指具有 一個或多個(即2個或2個W上)氣取代基的含有1~3個碳原子的飽和控基。本發明中的面代 Cl-4烷基包括但不限于面代甲基、面代乙基、面代正丙基、面代異丙基、面代正下基、面代異 下基、面代新下基等，更具體的基團包括但不限于=氣甲基、二氣甲基、一氣甲基、=氯甲 基、二氯甲基、一氯甲基、四氣乙基、=氣乙基、二氣乙基、一氣乙基、=氯乙基、=氯乙基、二 氯乙基、一氯乙基等。
[0046] "面素'包括氣(F)、氯(Cl)、漠他)和艦(I)。
[0047] "烷氧基"是指烷基"基團，其碳原子數一般為1~10個。Ci-4烷氧基是指該燒氧 基中含有1~4個碳原子。本發明中的烷氧基優選為Cl-4烷氧基，進一步優選Cl-3烷氧基。取代 烷氧基是指具有一個或大于一個取代基的烷氧基，當取代基的數目為2個W上（包含2個） 時，各取代基可W相同，也可W不同。取代的Cl-4烷氧基是指具有一個或多個（即2個或2個W 上）取代基的含有1~4個碳原子的烷氧基。本發明中的烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧 基、正丙氧基、異丙氧基、正下氧基、異下氧基和新下氧基等。
[004引"徑堂'是指"-OH"基團。
[0049]"臘基"是指"-CN"基團。
[0050]"氨堂'是指"-N出"基團。
[0051] 。気"尉旨。-護基團。
[0052] "藥學上可接受的鹽"表示保留母體化合物的生物有效性和性質的那些鹽。運類鹽 包括：
[0053] (1)與酸成鹽，通過母體化合物的游離堿與無機酸或有機酸的反應而得，無機酸例 如(但不限于)鹽酸、氨漠酸、硝酸、憐酸、偏憐酸、硫酸、亞硫酸和高氯酸等，有機酸例如(但 不限于）乙酸、丙酸、丙締酸、草酸、（D)或化)蘋果酸、富馬酸、馬來酸、徑基苯甲酸、丫-徑基 下酸、甲氧基苯甲酸、鄰苯二甲酸、甲橫酸、乙橫酸、糞-1-橫酸、糞-2-橫酸、對甲苯橫酸、水 楊酸、酒石酸、巧樣酸、乳酸、扁桃酸、班巧酸或丙二酸等，優選鹽酸或化)蘋果酸
[0054] (2)存在于母體化合物中的酸性質子被金屬離子代替或者與有機堿配位化合所生 成的鹽，金屬離子例如堿金屬離子、堿±金屬離子或侶離子，有機堿例如乙醇胺、二乙醇胺、 S乙醇胺、氨下S醇、N-甲基葡糖胺等。
[0055] 本發明的式(I)或式(II)化合物或其藥學上可接受的鹽可應用于制備促尿酸排泄 藥物方面，特別是應用于治療或預防高尿酸血癥或痛風藥物的制備。
[0056] 本發明還包括一種藥物組合物，其W本發明所指出的化合物為活性成分或主要活 性成分，輔W藥學上可接受的輔料。該藥物組合物中的其他活性成分可W為具有促尿酸排 泄的藥物化合物，也可W為具有其他治療效果的藥物化合物。本藥物組合物可W依據現有 方法制成多種制劑，例如口服制劑、液體制劑等，更具體的制劑包括但不限于散劑、顆粒劑、 片劑、膠囊劑、滴丸劑、膜劑等。
[0057] 本發明通過對(4-徑基-3-臘基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬或(4-徑基-3-=氣甲基 苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬類衍生物進行合理的結構修飾，改變其理化性質，影響該類化合 物在哺乳動物(包括人)體內的代謝途徑，在保持或增強其促尿酸排泄活性的同時，降低它 們的毒副作用，提高其在高尿酸血癥或痛風等相關疾病的臨床治療或預防方面的應用安全 性。
【具體實施方式】
[0058] 給出下列制備實施例和生物學實施例，使本領域技術人員能夠更清楚地理解和實 施本發明。它們不應被解釋為限制本發明的范圍，僅僅是其例證和代表。
[0059] 制備實施例
[0060] 實施例1:5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(5)和5-(2-乙基苯并 巧喃-3-幾基)-2-徑基間苯二甲臘(6)的合成
[00
[0062] 步驟A:在室溫下向氨氧化鐘（6.13g，109mmo 1)的乙醇（SOmL)溶液中加入水楊醒 (12.2g，IOOmmol )，升溫到回流并繼續攬拌2小時。然后在該溫度下滴加氯丙酬（10 . Og， IOSmmol)，滴加完畢，保溫繼續攬拌2小時。冷卻到室溫，過濾除去不溶物，收集濾液。減壓蒸 除溶劑，然后向剩余物中加入乙二醇(40mL)和85%水合阱(6.7g，178mmo 1)，回流攬拌10分 鐘。冷卻到80~100°C，分批加入氨氧化鐘（13.Og，232mmol)，有大量氣體產生，然后緩慢升 溫到回流，直到沒有氣體放出為止。冷卻到室溫，加入水(400mL)，用甲基叔下基酸（120血X 3)萃取，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，石油酸洗 脫），得2-乙基苯并巧喃（1) (13. Og)。收率為78.7 %。
[0063] 步驟B:在冰水浴下將4-甲氧基苯甲酯氯(2.3g，13.5mmol)加入到化合物1 (2. Og， 13.6mmo 1)的氯仿(50血)溶液中，然后向該混合物中滴加四氯化錫(3.56g，13.6mmo 1)，滴加 完畢，自然升溫到室溫攬拌過夜。將反應物倒入適量冰水中，用二氯甲燒(40mLX2)萃取，無 水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1: 30~1:15洗脫），得（2-乙基苯并巧喃-3-基）（4-甲氧基苯基）甲酬（2)(3. Og)。收率為 78.7%。
[0064] 步驟C:在冰水浴下將乙硫醇（SmL)滴加到氨化鋼（640mg，16 . Ommol)的無水THF (15mL)懸濁液中，攬拌5分鐘，有大量固體析出。減壓蒸除溶劑，然后向剩余物中加入DMF (20mL)，得反應液A。再將化合物2(3.Og, 10.7mmol)的DMF(20mL)溶液滴加到反應液A中，然 后在110°C攬拌3小時。冷卻到室溫，加入水（120mL)，用乙酸乙醋(60mLX3)萃取，合并的有 機相用飽和食鹽水（30mL X 2)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化 (200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1:50~1:6洗脫），得(2-乙基苯并巧喃-3-基）（4-? 基苯基）甲酬(3)(2.2g)。收率為77.2%。
[0065] 步驟D :將化合物3 (1. Og，3.76mmol)溶解于甲醇（30mL)，加入硝酸銀（1.4g， 8.28mmol)和艦(2. Ig，8.27mmol)，所得混合物在室溫下攬拌3小時。減壓蒸除溶劑，向產物 中加入乙酸乙醋(60mL )，過濾除去不溶物，用水（1 OmL X 2)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除 溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1:20~1:10洗脫），得(2-乙 基苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3，5-二艦苯基）甲酬(4) (900mg)。收率為46.2 %。
[0066] Ih NMR(DMS0-d6,400MHz)S8.12(s，2H)，7.66(d，J = 8.4Hz，lH)，7.45-7.43(m，lH)， 7.38-7.：M(m，lH)，7.31-7.27(m，lH)，2.79(q，J = 7.Wz，2H)，1.26(t，J = 7.6Hz，3H)〇MS 化I，m/z):517.0[M-扣-。
[0067] 步驟E:將含有化合物4(700mg，1.35mmol)、氯化亞銅（360mg，4.02mmol)和DMF (5mL)的混合物在100°C攬拌5小時。冷卻到室溫，加入水（30mL)，用乙酸乙醋（20mLX 3)萃 取，合并的有機相用飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層 析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸= 1:1~30:1洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3- 幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(5)和5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基間苯二甲臘(6)。
[006引 化合物5:4 NMR(DMS0-d6,400MHz)S8.21(s，lH)，7.74(d，J = 2.4Hz，lH)，7.62(d，J =8. OHz，1H) ,7.43-7.41 (m，lH) ,7.35-7.25(m，2H)，2.81 (q，J = 7.細Z，2H) ,1.25( t，J = 7.細z，3H)eMS化I，m/z):416.1[M-H]-。
[0069] 化合物6:1h Mffi(DMS0-d6,400MHz)S7.86(s，2H)，7.62(d，J = 8.0Hz，lH)，7.42- 7.39(m，lH)，7.35-7.25(m，2H)，2.83(q，J = 7.細z，2H)，1.25(t，J = 7.6Hz，3H)。MS(EI，m/ z):315.2[M-H]-。
[0070] 實施例2:5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘(7)
[0071：
[0072] 將化合物5 (SOmg，0.192mmo 1)溶解在乙酸乙醋（15mL)中，加入5 %鈕碳（20mg)，所 得混合物在常溫常壓下氨化攬拌反應過夜。過濾除去鈕碳，減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純 化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:10~1: 5洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾 基)-2-徑基苯甲臘(7)。
[007；3] Ih NMR(DMS0-d6,400MHz)Sl2.16(s，lH)，8.06(d，J = 2.0Hz，lH)，7.94(dd，J = 2.0， 8.4Hz，lH)，7.66(d，J = 8.0Hz，1H) ,7.40-7. ：34(m，2H) ,7.30-7.26 (m，lH)，7.15(d，J = 8.4Hz，lH)，2.81(q，J = 7.細z，2H)，1.26(t，J = 7.6Hz，3H)。MS(EI，m/z):290.2[M-H]-。
[0074] 實施例3:3-漠-5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘(8)的合成
[0075：
[0076] 將化合物7 (170mg，0.584mmoI)溶解于DMF(5mL)，加入NBS(135mg，0.758mmoI)，所 得混合物在室溫下攬拌過夜。加入水(25mL)，用乙酸乙醋（20mLX3)萃取，合并的有機相用 飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目 硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1:1洗脫），得3-漠-5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘 (8)。
[0077] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.13(d，J=l.細z，lH)，7.86(d，J=l.細z，lH)，7.52(d， J = 7.細z，lH)，7.41(dJ = 7.細z，lH)，7.：M-7.22(m，2H)，2.88(qJ = 7.5Hz，2H)，1.33(t，J =7.甜Z，3H) eMS化I，m/z): 368.0[M-H]-。
[007引實施例4: (2-乙基苯并巧喃-3-基）[4-徑基-3-艦-5-(S氣甲基)苯基]甲酬（11)和 5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-(=氣甲基)苯甲臘(12)的合成
[0079
[0080]步驟A:將化合物4(848111旨，1.64111111〇1)溶解于醋酸酢（31111^)，加入014?(2〇111邑， 0.164mmol)和化晚(3mL)，所得混合物在室溫下攬拌2小時。向反應液中加入水(50mL)，用二 氯甲燒(25血X 3)萃取，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目娃 膠，乙酸乙醋：石油酸= 1:5洗脫），得乙酸[4-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2,6-二艦]苯醋 (9)(930mg)。收率為 100%。
[0081 ] 步驟B:將化合物9(780mg，1.39mmol)溶解于DMF( 15mL)，加入氣橫酷基二氣乙酸甲 醋（1.95血)和艦化亞銅(663mg，3.48mmol)，所得混合物在90°C及氮氣下攬拌1小時。冷卻到 室溫，加入水(60mL)，用乙酸乙醋(30mLX3)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水(20mL)洗涂， 無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，石油酸洗脫），得乙 酸[4-( 2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-艦-6-( S氣甲基）]苯醋（10) (150mg)。收率為23.5 %。
[0082] 步驟C:將化合物10 (140mg，0.279mmo 1)溶解于甲醇（5mL)，加入碳酸鐘（115mg， 0.833mmo 1)，所得混合物在室溫下攬拌2小時。加入水(25血），用石油酸（10血)洗涂，收集水 相。水相用稀鹽酸調節pH值至5~6，用乙酸乙醋（15mL X 3)萃取，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除 溶劑，產物用石油酸重結晶，得(2-乙基苯并巧喃-3-基）[4-?基-3-艦-5-(S氣甲基)苯基] 甲酬（11)(12〇111邑）。收率為93.5%。
[0083] Ih NMR(DMS0-d6，300MHz)S8.36(S，1H)，7.93(S，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.44-7.42 (m，lH)，7.38-7.33(m，lH)，7.31-7.26(m，lH)，2.80(q，J = 7.5Hz，2H)，1.27(t，J = 7.5Hz， 3H)dMS化I，m/z):459.0[M-H]-。
[0084] 步驟D:將含有化合物11 (I IOmg，0.239mmoI)、氯化亞銅（32mg，0.357mmoI)和DMF (5血)的混合物在100°C攬拌過夜。冷卻到室溫，加入水(25血），用乙酸乙醋（20血X 3)萃取， 合并的有機相用飽和食鹽水(IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純 化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸= 1:5~1:1洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)- 2- 徑基-3-(=氣甲基)苯甲臘（12)。
[0085] Ih 匪R(DMS0-d6,500MHz)S7.95(s，lH)，7.82-7.81(m，lH)，7.62-7.61(m，lH)， 7.42-7.40(m，lH)，7.33-7.30(m，lH)，7.27-7.24(m，lH)，2.81(q，J=7.5Hz，2H)，1.26(t，J =7.甜z，3H)dMS 化I，m/z):360.2[M+扣+。
[0086] 實施例5:5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(16)的合成 [0087；
[0088] 步驟A和B的實驗操作分別參見實施例1步驟B和C，其中實施例1步驟B中的氯仿用 二氯甲燒替代。
[0089] 化合物 13 Ih NMR(DMS0-d6，，300MHz)S7.68-7.62(m，3H)，7.41(d，J = 7.5Hz，lH)， 7.36-7.31(m，lH)，7.28-7.23(m，lH)，7.08(d，J = 9.0Hz，lH)，3.91(s，3H)，2.81(q，J = 7.5Hz，2H)，2.21(s，3H)，1.25(t J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):317.1[M+Na] +。
[0090] 步驟C:將化合物14(650mg，2.44mmol)溶解于DMF(15mL)，加入NIS(678mg， 3.0ImmoI)，所得混合物在室溫下攬拌30分鐘。加入水(75mL)，用乙酸乙醋（30mL X 3)萃取， 合并的有機相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純 化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1: 30洗脫），得(2-乙基苯并巧喃-3-基）（4-徑基- 3- 艦-5-甲基苯基）甲酬（15) (420mg)。收率為42.4%。
[0091] Ih 醒R(DMS0-d6,，500MHz)Sl0.03(s，lH)，7.96(s，lH)，7.63(d，J = 8.0Hz，lH)， 7.59(s，lH)，7.42(d，J = 8.0Hz，lH)，7.36-7.33(m，lH)，7.28-7.25(m，lH)，2.78(q，J = 7.5Hz，2H)，2.28(s，3H)，1.25(t，J = 7.甜z，3H)。MS化I，m/z):405.0[M-H]-。
[0092] 步驟D:將含有化合物15 (360mg，0.886mmoI)、氯化亞銅（119mg，1.329mmoI)和DMF (1 OmL)的混合物在11 (TC攬拌3小時。冷卻到室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙醋（20mL X 3)萃 取，合并的有機相用飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層 析純化(200~300目硅膠，二氯甲燒:石油酸= 1:1洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)- 2-徑基-3-甲基苯甲臘(16)。
[0093] Ih 醒R(DMS0-d6,，300MHz)Sll.24(s，lH)，7.88-7.86(m，2H)，7.65(d，J = 7.8Hz， lH)，7.42-7.25(m，3H)，2.80(q，J = 7.5Hz，2H)，2.29(s，3H)，1.25(t，J = 7.甜z，3H)。MS巧I， m/z):304.1[M-扣-。
[0094] 實施例6:5-(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(21)的合成
[0095]
[0096] 步驟A :在室溫下將氨氧化鐘（1 . 22g，21 . 74mmol)加入5-氣水楊醒（2.5g， 17.84mmo 1)的乙醇（50mL)溶液，然后升溫到回流，再在回流下滴加氯丙酬（1 . 82g， 19.67mmol)，所得混合物在回流下攬拌過夜。冷卻到室溫，過濾除去不溶物，收集濾液。減壓 蒸除溶劑，然后向剩余物中加入乙二醇(20mL)和85%水合阱（1.22g，32.36mmol)，回流攬拌 20分鐘。冷卻到室溫，加入氨氧化鐘(2.23肖，39.74皿〇1)，有大量氣體產生，然后緩慢升溫到 回流，直到沒有氣體放出為止。冷卻到室溫，加入水(200mL)，用二氯甲燒（1 OOmL X 3)萃取， 無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，二氯甲燒:石油酸= 1:5洗脫），得2-乙基-5-氣苯并巧喃（17) (1.84g)。收率為62.8 %。
[0097] 步驟B:將3-甲基-4-甲氧基-苯甲酸（500mg，3 . Ommo 1)懸浮在氯化亞諷（1 OmL)中， 加入DMF(2滴），所得混合物在回流下攬拌2小時。減壓蒸除溶劑，加入化合物17(500mg， 3.OSmmol)和無水二氯甲燒（15mL)，再在水浴下滴加四氯化錫（1.59g，6. IOmmol)，加完后， 室溫下攬拌過夜。將反應物倒入適量冰水中，用乙酸乙醋(25mLX3)萃取，無水硫酸鋼干燥。 減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:40~1: 20洗 脫），得（2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-甲氧基-3-甲基苯基）甲酬（18)(909mg)。收率為 97.0%。
[009引步驟C:在水浴下將4MS漠化棚(0.83mL)滴加到化合物18(690mg，2.21mmol)的無 水二氯甲燒（15mL)溶液中，所得混合物在室溫下攬拌2小時。將反應物倒入適量冰水中，用 乙酸乙醋(40mL X 2)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓 蒸除溶劑，得(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3-甲基苯基）甲酬（19)(730mg)粗品。 該化合物不經純化直接用于下一步反應。
[0099] 步驟D:將化合物19粗品（730mg)溶解于DMF(IOmL)，然后分批加入NIS(645mg， 2.87mmoI)，加完后，所得混合物在室溫下攬拌30分鐘。加入水(50mL)，用乙酸乙醋（25mL X 3)萃取，合并的有機相依次用硫代硫酸鋼水溶液（IOmL)和飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無水硫 酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1:20洗 脫），得(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3-艦-5-甲基苯基）甲酬(20)(640mg)。步驟C 和D兩步反應總收率為68.3%。
[0100] Ih NMR(DMS0-d6，，500MHz)Sl0.06(s，lH)，7.96(s，lH)，7.70-7.67(m，lH)，7.59(s， lH)，7.22-7.16(m，2H)，2.76(q，J = 7.5Hz，2H)，2.29(s，3H)，1.24(t，J = 7.甜z，3H)。MS巧I， m/z):423.0[M-扣-。
[OW]步驟 E:將含有化合物 20 (590mg，1.39mmol)、氯化亞銅（187mg，2.09mmol)和 DMF (1 OmL)的混合物在115 °C攬拌2.5小時。冷卻到室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙醋（20mL X 3) 萃取，合并的有機相用飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱 層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1:10~3:5洗脫），得5-(2-乙基-5-氣苯并 巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(21)。
[0102] Ih NMR(DMS0-d6，，500MHz)Sll.l9(s，lH)，7.89(s，lH)，7.85(s，lH)，7.71-7.68(s， lH)，7.22-7.16(m，2H)，2.76(q，J = 7.5Hz，2H)，2.29(s，3H)，1.23(t，J = 7.甜z，3H)。MS巧I， m/z):322.1[M-扣-。
[0103] 實施例7:5-(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(25)的合成
[0105] 步驟A:在室溫下將4-甲氧基苯甲酯氯(680mg，3.99mmol)加入到化合物17(600mg， 3.65mmo 1)的二氯甲燒（15mL)溶液中，然后加入四氯化錫（1.90g，7.29mmo 1)，所得混合物在 室溫下攬拌過夜。將反應物倒入適量冰水中，用二氯甲燒(30mLX2)萃取，無水硫酸鋼干燥。 減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1: 30~1: 20洗 脫），得(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基K4-甲氧基苯基）甲酬(22)(1.05g)。收率為96.4%。
[0106] 步驟B:在水浴下將IMS漠化棚(6.7mL)滴加到化合物22( 1.0g，3.35mmol)的無水 二氯甲燒（15mL)溶液中，所得混合物在室溫下攬拌2小時。將反應物倒入適量冰水中，用乙 酸乙醋（30mLX3)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸 除溶劑，得灰白色固體(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）(4-徑基苯基）甲酬(23)粗品（1.03g)。 該化合物不經純化直接用于下一步反應
[0107] 步驟C:將化合物23粗品（1.03g)溶解于甲醇（30mL)，加入無水乙酸鋼（660mg， 8. OSmmol)和艦(2.04g，8.20mmol)，所得混合物在回流下攬拌1.5小時。然后加入含有氨氧 化鋼（28Omg，7mmo 1)的水（40mL)溶液，繼續回流0.5小時。冷卻到室溫，加入飽和食鹽水 (40mL)，用乙酸乙醋(30mLX3)萃取，合并的有機相依次用稀硫代硫酸鋼溶液（15mL)和飽和 食鹽水（IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經石油酸/乙酸乙醋重結晶，得 (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3，5-二艦苯基）甲酬(24) (1.30g)。步驟B和C兩步反 應總收率為72.4%。
[010 引步驟 D:將含有化合物 24(1.26g，2.35mmol)、氯化亞銅（115mg，2.34mmol)和DMF (20mL)的混合物在100°C攬拌4小時。冷卻到室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙醋（30mLX 3)萃 取，合并的有機相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層 析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=2 : 5~3 :1洗脫），得5-(2-乙基-5-氣苯并巧 喃-3-幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(25)。
[0109] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.15(s，lH)，7.95(s，lH)，7.64(s，lH)，7.16-7.13(m， 2H)，2.79(q，J = 7.細z，2H)，1.25(t，J = 7.細z，3H)。MS化I，m/z):434.0[M-H]-。
[0110] 實施例8:5-(5-氯2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(26)的合成
[0111
[0112」化合物26的制備方法參見實施例6。
[0113] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S7.89-7.85(m，2H)，7.71(d，J = 8.7Hz，lH)，7.45(d，J = 2.1Hz，lH)，7.39(dd，J = 2.1，8.7Hz，lH)，2.75(q J = 7.5Hz，2H)，2.28(s，3H)，1.23(t J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):338.1[M-H]-。
[0114] 實施例9:5-( 5-氯-2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-哲基-3-艦苯甲臘(27)的合成
[0115
[0116] 化合物27的制備方法參見實施例7。
[0117] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.15(d，J = 2.4Hz，lH)，7.67-7.64(m，2H)，7.41(d，J = 2.1Hz，lH)，7.34(dd J = 2.1，8.7Hz，lH)，2.78(q J = 7.甜z，2H)，1.25(tJ = 7.甜z，3H)。MS (El，m/z):450.0[M-H]-。
[011引實施例10:(2-乙基-苯并巧喃-3-基）-[4-徑基-3,5-二（^氣甲基）-苯基]-甲酬 (29)的合成
[0119]
[0120]化合物29的制備方法參見實施例4中的步驟B和C。
[01 別]Ih 匪R(DMS0-d6,300MHz)S8.15(s，2H)，7.68-7.65(m，lH)，7.44-7.42(m，lH)， 7.38-7.33(m，lH)，7.31-7.26(m，lH)，2.81(q，J = 7.5Hz，2H)，1.26(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS 化I，m/z):401.1[M-扣-。
[0122] 實施例11:5-( 2-乙基-5-氣-苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-S氣甲基-苯甲臘(30) 的合成
[0123]
[0124] I 實施例4〇MS(EI，m/z): 376.0[M-H]-。
[0125] 基-5-氣-苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-苯甲臘(31)的合成
[0126]
[0127] 化合物31的制備方法參見實施例巧日實施例3eMS化I，m/z):386.1[M-W-。
[012引實施例13: (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）[4-徑基-3,5-二(S氣甲基）苯基]甲酬 (35)和(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）[4-徑基-3-艦-5-(S氣甲基)苯基]甲酬(36)的合成
[0
[0130] 化合物35和36的制備方法參見實施例4中的步驟A、B和C。
[0131] 化合物35:1h NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.12(s，2H)，7.73-7.68(m，lH) ,7.23-7.18 (m，2H)，2.77(q，J = 7.甜z，2H)，1.25(t，J = 7.甜z，3H)。MS化I，m/z):419.1[M-H]-。
[0132] 化合物 36: Ih 醒 R(DMS0-d6,300MHz )58.37( S，1H)，7.93(s，lH) ,7.73-7.69(m， lH)，7.24-7.19(m，2H)，2.77(q J = 7.5Hz，2H)，I. 25(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z) :477.0 [M-扣 _。
[0133] 實施例14:5-(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘(41)的合成 LOUS」步驟A:將3-鵬-4-輝基苯甲酸甲鵬（4
. Ig，14.75mmol)溶解于DMF(25mL)，加入碳酸 鐘(2.65g，19.20mmo 1)和艦甲燒(3.14g，22.12mmo 1)，所得混合物在60°C攬拌2小時。冷卻到 室溫，加入水(SOmL)，用乙酸乙醋(40mL X 3)萃取，合并的有機相依次用水(30mL X 2)和飽和 食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物用石油酸重結晶，得3-艦-4-甲氧 基苯甲酸甲醋(37)(3.81g)。收率為88.4%。
[0136] 步驟B:將化合物37(3.Og, 10.27mmol)溶解在THF(IOmL)和乙醇（IOmL)中，加入2M 氨氧化鋼溶液(20mL)，所得混合物在55°C攬拌1小時。減壓蒸除約一半溶劑，加入水(60mL)， 用稀鹽酸調pH值至1~2，乙酸乙醋（40mL X 3)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水（20mL)洗 涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，得3-艦-4-甲氧基苯甲酸(38)(2.76g)。收率為96.7%。
[0137] 步驟C:將化合物38(2.74g，9.85mmol)懸浮在氯化亞諷（IOmL)中，加入DMF(3滴）， 所得混合物在65 °C攬拌5小時。減壓蒸除溶劑，加入化合物17 (1.62g，9.86mmol)和無水二氯 甲燒(54mL)，再在水浴下加入四氯化錫(5.14g，19.73mmo 1)。加完后，所得混合物在室溫下 攬拌過夜。將反應物倒入適量冰水中，用乙酸乙醋(50mLX3)萃取，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸 除溶劑，產物經柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:100~1:20洗脫），得 (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（3-艦-4-甲氧基苯基）甲酬(39) (2.96g)。收率為70.8 %。
[0138] 步驟D:將含有化合物39 (2.48g，5.85mmo 1)、氯化亞銅（785mg，8.77mmo 1)和DMF (30mL)的混合物在130°C攬拌過夜。冷卻到室溫，加入乙酸乙醋(40mL)，經過娃藻±過濾除 去不溶物。加入水(90mL)，分層，收集有機層。水層用乙酸乙醋(40mLX2)萃取，合并的有機 相依次用水(30mLX2)和飽和食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經 柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1: 20~1:10洗脫），得5-(2-乙基-5-氣苯 并巧喃-3-幾基）-2-甲氧基苯甲臘(40)(1.62g)。收率為85.6% c/H NMR(CDCl3,300MHz)S 8.06-8.03(m，2H)，7.45-7.41(m，lH)，7.09-7.05(m，lH)，7.02-6.98(m，2H)，4.05(s，3H)， 2.90(q J = 7.甜z，2H)，l.：M(tJ = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):322.1[M-H] -。
[0139] 步驟E:在水浴下將IMS漠化棚(7.5mL)加入到化合物40(830mg，2.57mmol)的無水 二氯甲燒（15mL)溶液中，所得混合物在室溫下攬拌72小時。將反應物倒入適量冰水中，用乙 酸乙醋(40mLX2)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸 除溶劑，產物經柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:10~1:5洗脫），得5- (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-?基苯甲臘(41)。Ih NMR(DMS0-d6，500MHz) S12.17 (S， lH)，8.08(s，lH)，7.93(d，J = 8.甜z，lH)，7.72-7.70(m，lH)，7.23-7.15(m，3H)，2.77(q，J = 7.5Hz，2H)，1.24( t，J = 7.5Hz，3H) 〇MS(EI，m/z): 308.1 [M-H]-。
[0140] 實施例15: [3-気-4-?基-5-(S氣甲基)苯基](2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）甲酬 (43) 的合成
L0142J 步徽A:將化合物％(340mg，0.654mmo 1)浴解在乙酸乙鵬（20血）中，加入童水（1血） 和5%鈕碳(20mg)，所得混合物在気氣下攬拌過夜。過濾除去鈕碳，減壓蒸除溶劑，產物經柱 層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1:30洗脫），得[2-気-4-(2-乙基-5-氣苯并 巧喃-3-幾基)-6-( S氣甲基）]乙酸苯醋(42) (90mg)。收率為34.8 %。
[0143] 步驟B:將化合物42(90111旨，0.228111111〇1)溶解于甲醇（51111^)，加入碳酸鐘（95111邑， 0.688mmol)，所得混合物在室溫下攬拌0.5小時。加入水(25mL)，用稀鹽酸調節pH值至3~4， 乙酸乙醋（25mL X 2)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水（15mL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓 蒸除溶劑，產物用石油酸重結晶，得[3-気-4-徑基-5-(=氣甲基)苯基](2-乙基-5-氣苯并 巧喃-3-基）甲酬（43)。lHNMR(DMS0-d6,500MHz)Sll.68(s，lH)，7.95-7.93(m，2H)，7.71- 7.69(m，lH)，7.22-7.15(m，2H)，2.78(q，J = 7.5Hz，2H)，1.24(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/ z):352.0[M-扣-。
[0144] 實施例16: [3-漠-4-徑基-5-(S氣甲基)苯基](2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）甲酬 (44) 的合成
[0145
[0146] 將漠(41mg，0.257mmol)的醋酸（1血)溶液滴加到化合物43(60mg，0.170mmol)的醋 酸巧mU溶液中，所得混和物在室溫下攬拌2小時。向混和物中滴加稀亞硫酸氨鋼水溶液，直 到顏色稱去。然后加入適量水，用乙酸乙醋（20mLX 2)萃取，合并的有機相用飽和食鹽水 (IOmL)洗涂，無水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產物經柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙 醋：石油酸=1:5~3:5洗脫），得[3-漠-4-?基-5-(S氣甲基）苯基](2-乙基-5-氣苯并巧 喃-3-基）甲酬（44)。lH匪R(DMS0-d6,300MHz)S8.10(s，lH)，7.84(s，lH)，7.71-7.66(m， lH)，7.20-7.17(m，2H)，2.76(q J = 7.5Hz，2H)，1.25(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):429.0 [M-扣-。
[0147]實施例17:3-氯-5-(2-乙基-5-氣-苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-苯甲臘(45)的合成 [014 引
[0149] 化合物45的制備方法參見實施例6中的步驟B、C、D和E。其中實施例6步驟B中的3- 甲基-4-甲氧基苯甲酸用3-氯-4-甲氧基苯甲酸替代。Ih NMR化MS0-d6，500MHz)S8.04-8.02 (m，2H)，7.71-7.68(m，lH)，7.20-7.19(m，2H)，2.80(q，J = 7.5Hz，2H)，1.24(t，J = 7.5Hz， 3H)〇MS(EI，m/z):342.0[M-H]-。
[0150] 生物學實施例
[0151] 實施例17:實施例化合物對HEK293轉染細胞株中hURATl轉運尿酸的抑制試驗：
[0152] 1.包被24孔板:按20化L/孔加入0.1 mg/mL多聚賴氨酸(poly-D-Lysin),放置過夜。 移去多聚賴氨酸，用無菌水清洗并徹底驚干，待用。
[0153] 2.將肥K293-WJRAT1穩轉細胞按2X 1〇5個/孔接入包被過的24孔板中，37°C，5%C02 解箱培養3天。
[0154] 3.實驗當天，用溫浴過的皿SS( 125mM葡萄糖酸鋼、4. SmM葡萄糖酸鐘、1.3mM葡萄糖 酸巧、1.2mMK出P04、1.2mMMgS04、5.6mM葡萄糖、25mM肥陽S，pH7.4)清洗2遍細胞并吸凈， 再按16化L/孔加入皿SS，并按20化/孔加入終濃度為SOOnM待測化合物，做為試驗化合物孔 (CPM(試驗化合物））；按18化L/孔加入皿SS但不加試驗化合物，做為空白對照孔(CPM(空白 對照））。放置室溫下1 Omin。
[01對 4.按20化/孔加入終濃度為SOiiM的I4C尿酸，放置室溫下20min。
[0156] 5.吸凈每孔溶液，用預冷的皿SS清洗細胞并吸凈。最后加入0.2M化OH溶解細胞， 收集細胞碎片并加入適量閃爍液，在化rkin Elmer MicroBe化Trilux 1450型液體閃爍分 析儀上檢測同位素1化的放射強度(CPM值）。
[0157] 6.通過對1化標記尿酸的測定，按W下公式可計算出試驗化合物對WJRATl轉運尿酸 的抑制效果。試驗化合物均設=次重復，試驗結果取平均值，并計算標準偏差sd。
[015 引
[0159] 7.實施例化合物對皿K293轉染細胞株中WJRATl轉運巧酸抑制率的試驗結果見表 Io
[0160] 表1.試驗化合物對HEK293轉染細胞株中WJRATl轉運尿酸的抑制率
[0161]
[0162] 試驗結果顯示，在5(K)nM濃度下，運些化合物對肥K293轉染細胞中hURATl轉運尿酸 均有較好的抑制效果，其中，化合物5，11，25,29,44和45的抑制效果優于苯漠馬隆。
[0163] 實施例18:化合物25對人正常肝細胞心02和WRk68生長的抑制作用
[0164] 1.人正常肝細胞k02(購自武漢普諾賽生物科技有限公司）和WRL-68(由南京大學 生命科學研究院惠贈），均用DMEM培養液(含10%胎牛血清，lOOU/mL青霉素，0.1 mg/mL鏈霉 素)在37°C、5 %C〇2解箱培養至細胞匯合度達90 %左右。按1 X IO^孔的細胞數接種于96孔板 中，置37 °C、5 % C〇2解箱培養2地。
[0165] 2.用DMEM培養液配制不同濃度梯度的試驗化合物25和對照藥物苯漠馬隆，并按 10化L/孔加入，作為試驗化合物孔和對照藥物孔;按10化L/孔加入DMEM培養液，做為陰性對 照孔。置37°C、5%C02解箱中，L-02細胞和WRL-68細胞各培養96h。
[0166] 3.將 Resazu;rin(15mg/50mL) 'Methylene Blue(25mg/10mL) 'Potassium fGiricyanide(C). 329g/1OOmL) 'Potassium fGirocyanide(C). 422g/1OOmL)溶于PBS(0.1 M、 抑=7.4)中，配制成Alamar Blue溶液，待用。
[0167] 4.細胞用PBS(0.1M、抑=7.4)清洗2次，按100化/孔加入Alamar Blue溶液;在無細 胞的孔中加入100化/孔Alamar Blue溶液，做為空白對照孔。將96孔板置37 °C、5 % C〇2解箱 中培養化。
[0168] 5.用酶標儀Victor X4(I^rkin Elmer)在530/590nm處檢測細胞巧光值。每個濃度 重復測定3次，得出平均值和標準偏差。按W下公式計算細胞存活率：
[0169]
[0170] 6.根據細胞存活率，利用Prism Graph軟件計算得出藥物對細胞的半數抑制濃度 (ICsq)。結果顯示，化合物25對正常肝細胞k02和WRk68的ICsq值分別為153.20測和145.82 yM，苯漠馬隆對應肝細胞的ICso值為70.95iiM和56.03測。
[0171] 上述實驗數據表明化合物25對正常肝細胞的毒性顯著低于苯漠馬隆。部分實施例 化合物也具有類似效果。
【主權項】
1. 式(I)或式(II)所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中， R1選自氫、氖、鹵素、羥基、腈基、取代或非取代的Cl-4烷基、取代或非取代的Cl-4烷氧基中 的一種，其取代基選自氟、羥基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種； R2選自氛、気、?'素、Cl-3烷基、?'代Cl-3烷基、臆基中的一種； R3選自烷基； η或m分別獨立地為1或2; R4選自氫、氖、鹵素、羥基、腈基、取代或非取代的Cl-4烷基、取代或非取代的Cl-4烷氧基中 的一種，其取代基選自氟、羥基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種； R5選自氛、気、?'素、Cl-3烷基、?'代Cl-3烷基、臆基中的一種； R6選自烷基； X或y分別獨立地為1或2。2. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R1選自氫、氘、鹵素、羥基、 臆基、Cl-3烷基、取代的Cl-3烷基、Cl-3烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、輕 基、&-3烷氧基或氨基中的一種或幾種。3. 根據權利要求2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R1選自氫、氘、氟、氯、羥 基、腈基、甲基、乙基、氟代甲基、氟代乙基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙 基、羥甲基、羥乙基、氨基甲基、氨基乙基、甲氧基、乙氧基、氟代甲氧基、氟代乙氧基中的一 種。4. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R2選自氫、氘、氟、氯、溴、 碘、甲基、乙基、正丙基、異丙基、氟代甲基、氟代乙基、腈基中的一種;R 3選自Cn烷基;η或m 分別獨立地為1。5. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R4選自氫、氘、鹵素、羥基、 臆基、Cl-3烷基、取代的Cl-3烷基、Cl-3烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、輕 基、&-3烷氧基或氨基中的一種或幾種。6. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R5選自氫、氘、氟、氯、溴、 碘、甲基、乙基、正丙基、異丙基、氟代甲基、氟代乙基中的一種;R 6選自Cn烷基;X或y分別獨 立地為1。7. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中化合物選自：8. 權利要求1~7中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備促尿酸排泄藥 物方面的應用。9. 權利要求1~7中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備治療或預防高 尿酸血癥或痛風藥物方面的應用。10. -種藥物組合物，其以權利要求1~8中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的 鹽為活性成分或主要活性成分，輔以藥學上可接受的輔料。
【文檔編號】C07D307/80GK106065010SQ201610258184
【公開日】2016年11月2日
【申請日】2016年4月22日 公開號201610258184.0, CN 106065010 A, CN 106065010A, CN 201610258184, CN-A-106065010, CN106065010 A, CN106065010A, CN201610258184, CN201610258184.0
【發明人】史東方, 傅長金, 承曦
【申請人】鎮江新元素醫藥科技有限公司