一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基以及肉紅膠韌革菌液體菌種制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基，包括以下重量份組分：麥冬藥渣78?80、玉米漿125?130、納米化魚骨粉34?35、麥芽粉89?90L?谷氨酰胺2.1?2.2、吲哚乙酸1.1?1.2、薄荷醇0.8?0.9、納米級電氣石粉5.8?6、細菌納米纖維素7.2?7.5等。本發明采用麥冬藥渣、玉米漿、納米化魚骨粉等作為培養基制備肉紅膠韌革菌液體菌種，原材料來源廣泛，價格成本低，同時，能夠通過麥冬藥渣的充分利用能夠增加肉紅膠韌革菌液體菌種的抗環境應激性；再者通過加入的納米化魚骨粉、納米細菌纖維素提高了培養基的穩定性和均勻性，為肉紅膠韌革菌液體菌種提供了良好的生長發育空間以及原料成分。
【專利說明】
一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基以及肉紅膠韌革菌液體菌種制備方法
技術領域
[0001]本發明涉及液體菌種技術領域，尤其涉及一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基以及肉紅膠韌革菌液體菌種制備的方法。
【背景技術】
[0002]肉紅膠韌革菌生產過程中，液體菌種具有固體菌種所不可比擬的優勢，液體菌種具有生產周期短，菌齡短而一致，純度高、活力強，接種簡便快捷，易實行工廠化、規模化、標準化生產等優點。現在，越來越多的人都在研究和使用液體菌種，而液體菌種的推廣和使用也是實現食用菌工廠化、規模化、標準化的必然趨勢。但是液體菌種也存在著自身的缺陷和不足:1、液體菌種萌發點多生長速度快，但是穿透力不強，培養料過粗菌絲不易吃透培養料，菌絲將沿著培養料表面快速生長，培養料內部菌絲量很少，嚴重影響了菌種產量和質量的問題;2、常規的液體菌種雖然解決了固體菌種存在的一些問題，能明顯縮短栽培周期、增強菌種活力和抗逆性、降低菌種污染率、使得菌種質量整齊度提高，但仍存在例如發酵得到的液體菌種中菌球的密度、大小、均勻度等物理特性不是很理想等不足，如果用攪拌剪切的方法將菌球打碎，得到的菌種均勻度會更理想，但是，高速攪拌粉碎和打漿的剪切力對菌種傷害極大，對菌種整體的質量影響較為嚴重。開發分布均勻且具有更小粒徑菌絲球的高質量的液體菌種具有重要意義。公開號CN105309194A《食用菌微粒液體菌種生產新技術》提供了一種菌絲球粒徑在0.5_的食用菌微粒液體菌種，采用的增加食用菌液體菌種培養液通氣量，使通氣量在I: 0.6—0.9V/V.min為適宜，同時在通氣發酵罐內裝置攪拌器使培養液渦流運動延長氣泡的運動路線的技術操作方法，該生產微粒液體菌種的方法是從生產工藝上進行改進，并沒有液體菌種培養基方面進行改進，實施起來技術難度要求高；公開號CN105130516A《分子級生物培養基制作方法》提到了分子級生物培養基營養成分可以快速全面的被吸收，促進液體菌種的生長，但是并沒有提到分子級生物培養基對液體菌種菌絲球直徑大小的影響。發展一種基于液體菌種培養基原材料成分改進液體菌種菌絲球直徑改善食用菌菌種產量和質量的技術，具有重要的意義。
[0003]細菌納米纖維素是自然界的豐富的可再生產物之一，細菌納米纖維素是纖維素的物理最小結構單元，是指直徑1-1OOnm之間的纖維，細菌納米纖維素質輕，生物相容性好，可降解、可再生，反應活性高，且具有楊氏模量高，聚合度高，潔凈度高，強度高，比表面積大等優勢。將細菌納米纖維素作作為食用菌液體菌種培養基原材料，對食用菌液體菌種的菌絲球分布以及直徑具有一定的影響，進而起到改善食用菌菌種質量的作用。
【發明內容】
[0004]本發明目的就是為了彌補已有技術的缺陷，提供一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基以及肉紅膠韌革菌液體菌種制備方法。
[0005]本發明是通過以下技術方案實現的: 一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基，包括以下重量份組分:麥冬藥渣78-80、玉米漿125-130、納米化魚骨粉34-35、麥芽粉89-90、乳糖7_8、葡萄糖4_5、L_天冬酰胺2.2-2.5、L-谷氛醜胺2.1-2.2、卩引噪乙酸1.1-1.2、薄荷醇0.8-0.9、石霄1-1.1、硫酸儀0.6-0.8、磷酸二氫鉀0.9-1、過磷酸鈣0.8-0.9、納米級電氣石粉5.8-6、細菌納米纖維素7.2-7.5、適量的水。
[0006]—種上述的培養基制備肉紅膠韌革菌液體菌種的方法，包括以下步驟:
(1)、將一半納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發制備無菌水備用;將石膏、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、過磷酸鈣的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將乳糖、葡萄糖、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、吲哚乙酸、薄荷醇的總量和無菌水按6g/L混合攪拌溶解得溶液二;將麥冬藥渣放入超微粉碎機中粉碎處理30min，和玉米漿一起放入鍋中小火文煮lh，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液中加入麥芽粉混合攪拌均勻，并在進行98°C進行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三，將濾渣、納米化骨粉混合均勻小火翻炒焙烘，在采用膨化機處理，得改性麥冬藥渣膨化粉備用;將另一半納米電氣石粉和細菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復合液，在將該復合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養液，并調整pH，此后對該營養液進行通電激發處理30min得液體培養基備用；
(3)、將肉紅膠韌革菌母種在無菌環境中先接種到一半的液體培養基上進行液體發酵，發酵條件為PH4.3-4.5、接種量13%、溫度28-29°C、搖床轉速100r/min、培養ll-12h，得肉紅膠韌革菌液體菌種一；
(4)、將剩余一半的液體培養基、溶液四無菌混合均勻，之后加入改性麥冬藥渣膨化粉以及總重量2倍的無菌水，高壓均質之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養瓶中，得復合培養基，將步驟(3)得到的肉紅膠韌革菌液體菌種一按58%的接種量在無菌環境中接種到該培養瓶中，溫度24-25°C，搖床轉速120r/min、并鼓入無菌氧氣，培養39-40h即得。
[0007]本發明的優點是:
本發明采用麥冬藥渣、玉米漿、納米化魚骨粉、麥芽粉、乳糖、葡萄糖培養營養物質作為培養基制備肉紅膠韌革菌液體菌種，原材料來源廣泛，價格成本低，同時，能夠通過麥冬藥渣的充分利用能夠增加肉紅膠韌革菌液體菌種的抗環境應激性;再者通過加入的納米化魚骨粉、納米細菌纖維素提高了培養基的穩定性和均勻性，為肉紅膠韌革菌液體菌種提供了良好的生長發育空間以及原料成分，本發明制備的液體菌種菌絲球大小合適，分布均勻，移栽后抗逆性好，成活率好。
【具體實施方式】
[0008]一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基，包括以下重量份組分:麥冬藥渣78、玉米漿125、納米化魚骨粉34、麥芽粉89、乳糖7、葡萄糖4、L天冬酰胺2、L谷氨酰胺2.1、吲哚乙酸1.1、薄荷醇0.8、石膏1、硫酸鎂0.6、磷酸二氫鉀0.9、過磷酸鈣0.8、納米級電氣石粉5.8、細菌納米纖維素7.2、適量的水。
[0009 ] 一種上述的培養基制備肉紅膠韌革菌液體菌種的方法，包括以下步驟: (1)、將一半納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發制備無菌水備用;將石膏、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、過磷酸鈣的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將乳糖、葡萄糖、L天冬酰胺、L谷氨酰胺、吲哚乙酸、薄荷醇的總量和無菌水按6g/L混合攪拌溶解得溶液二;將麥冬藥渣放入超微粉碎機中粉碎處理30min，和玉米漿一起放入鍋中小火文煮lh，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液中加入麥芽粉混合攪拌均勻，并在進行98°C進行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三，將濾渣、納米化骨粉混合均勻小火翻炒焙烘，在采用膨化機處理，得改性麥冬藥渣膨化粉備用;將另一半納米電氣石粉和細菌納米纖維素以及總重量3倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復合液，在將該復合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養液，并調整pH，此后對該營養液進行通電激發處理30min得液體培養基備用；
(3)、將肉紅膠韌革菌母種在無菌環境中先接種到一半的液體培養基上進行液體發酵，發酵條件為PH4.3、接種量13%、溫度28 °C、搖床轉速100r/min、培養I Ih，得肉紅膠韌革菌液體菌種一；
(4)、將剩余一半的液體培養基、溶液四無菌混合均勻，之后加入改性麥冬藥渣膨化粉以及總重量2倍的無菌水，高壓均質之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養瓶中，得復合培養基，將步驟(3)得到的肉紅膠韌革菌液體菌種一按58%的接種量在無菌環境中接種到該培養瓶中，溫度24°C，搖床轉速120r/min、并鼓入無菌氧氣，培養39h即得。
【主權項】
1.一種基于麥冬藥渣的肉紅膠韌革菌培養基，其特征在于，包括以下重量份組分:麥冬藥渣78-80、玉米漿125-130、納米化魚骨粉34-35、麥芽粉89-90、乳糖7_8、葡萄糖4_5、L-天冬酰胺2.2-2.5、L-谷氨酰胺2.1-2.2、卩引噪乙酸1.1_1.2、薄荷醇0.8-0.9、石霄1_1.1、硫酸鎂0.6-0.8、磷酸二氫鉀0.9-1、過磷酸鈣0.8-0.9、納米級電氣石粉5.8_6、細菌納米纖維素7.2-7.5、適量的水。2.—種采用權利要求1所述的培養基制備肉紅膠韌革菌液體菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)、將一半納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發制備無菌水備用;將石膏、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、過磷酸鈣的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將乳糖、葡萄糖、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、吲哚乙酸、薄荷醇的總量和無菌水按6g/L混合攪拌溶解得溶液二;將麥冬藥渣放入超微粉碎機中粉碎處理30min，和玉米漿一起放入鍋中小火文煮lh，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液中加入麥芽粉混合攪拌均勻，并在進行98°C進行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三，將濾渣、納米化骨粉混合均勻小火翻炒焙烘，在采用膨化機處理，得改性麥冬藥渣膨化粉備用;將另一半納米電氣石粉和細菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用； (2)、將溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復合液，在將該復合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養液，并調整pH，此后對該營養液進行通電激發處理30min得液體培養基備用； (3)、將肉紅膠韌革菌母種在無菌環境中先接種到一半的液體培養基上進行液體發酵，發酵條件為PH4.3-4.5、接種量13%、溫度28-29°C、搖床轉速100r/min、培養ll-12h，得肉紅膠韌革菌液體菌種一； (4)、將剩余一半的液體培養基、溶液四無菌混合均勻，之后加入改性麥冬藥渣膨化粉以及總重量2倍的無菌水，高壓均質之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養瓶中，得復合培養基，將步驟(3)得到的肉紅膠韌革菌液體菌種一按58%的接種量在無菌環境中接種到該培養瓶中，溫度24-25°C，搖床轉速120r/min、并鼓入無菌氧氣，培養39-40h即得。
【文檔編號】C12R1/645GK106047726SQ201610552379
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年7月14日
【發明人】儲榮生
【申請人】安徽天明生態林農科技開發有限公司