R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體及制備、富馬酸替諾福韋二吡呋酯制備

R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體及制備、富馬酸替諾福韋二吡呋酯制備
【專利摘要】本發明提供了一種R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體，本發明晶體純度高、質量好，能夠用于進一步制備高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯。同時，本發明還提供了一種所述R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體的制備方法，本發明方法所用原料易得，且操作簡便，晶體產率高、質量好；同時，本發明方法中通過分批加料等操作步驟，也進一步提高了所述晶體的產率。進一步的，本發明還提供了一種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法，本發明方法中，以本發明所制得的高純度R?9?(2?膦酰甲氧基丙基)?腺嘌呤一水合物晶體為原料，從而可以制得高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產物，并具有產物產量好，操作方法簡便等優點。
【專利說明】
R-9-(2-麟酰甲氧基丙基)-腺嘌昤一水合物晶體及制備、富馬 酸替諾福韋二吡呋酯制備
技術領域
[0001] 本發明涉及化合物晶體領域，具體的，本發明涉及R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌 呤一水合物晶體及制備、富馬酸替諾福韋二吡呋酯制備。
【背景技術】
[0002] 富馬酸替諾福韋二吡呋酯是一種核苷酸反轉錄酶抑制劑(NRTI)替諾福韋的酯類 前體藥物，并能夠用于治療艾滋病及HBV感染。富馬酸替諾福韋二吡呋酯最早是由美國吉利 德科學公司(Gilead Sciences)研制的，其制劑為300mg片劑，商品名Viread?。
[0003] 2001年10月26日由美國FDA首次批準富馬酸替諾福韋二吡呋酯上市的。隨后，在歐 盟、日本和澳大利亞等100多個國家和地區批準臨床使用。我國于2007年8月22日批準美國 吉利德公司進口替諾福韋二吡呋酯300mg片劑，商品名為韋瑞德。FDA于2008年8月11日將 Viread?擴大適應癥，并將其用于治療有肝代償功能的成人慢性乙肝病毒感染者。歐盟、澳 大利亞、新西蘭和土耳其等國也相繼批準臨床使用。
[0004] 富馬酸替諾福韋二吡呋酯片主藥成分為富馬酸替諾福韋二吡呋酯，為一種一磷酸 腺苷的開環核苷磷化二酯結構類似物，富馬酸替諾福韋二吡呋酯首先需要經二酯的水解轉 化為替諾福韋，然后發揮藥理作用。
[0005] R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物是合成富馬酸替諾福韋二吡呋酯最關 鍵的中間體，直接影響著終產物富馬酸替諾福韋二吡呋酯的質量。然而，在現有技術中，對 R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體并沒有進行過任何深入的研究或者報道。 同時，由于富馬酸替諾福韋二吡呋酯片是經美國FDA和歐盟EDMA批準即可用于HIV感染又可 用于HBV感染的少數藥物之一，而且富馬酸替諾福韋二吡呋酯也是一種非常好的抗乙肝病 毒藥。因此，開發一種高純度R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，并進一步將 其用于制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯，這無論是對于治療艾滋病還是乙肝而言，都是非常 有意義的。
[0006] 有鑒于此，特提出本發明。

【發明內容】

[0007] 本發明的第一目的在于提供一種R-9_(2-膦酰甲氧基丙基）_腺嘌呤一水合物晶 體，本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體純度高、質量好，能夠用于進一 步制備高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
[0008] 本發明的第二目的在于提供一種所述R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物 晶體的制備方法，本發明方法所用原料易得，且操作簡便，晶體產率高、質量好；同時，本發 明方法中通過分批加料等操作步驟，也進一步提高了所述晶體的產率。
[0009] 本發明的第三個目的在于提供一種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法，本發明 方法中，通過首先制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體再進一步制備目標 產物，從而可以制得高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產物，并具有產物產量好，操作方法 簡便等優點。
[0010] -種R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，所述晶體的X-射線粉末圖 中2Θ為7.5768、15.0221、15.6349、16.0135;其中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤 一水合物結構如下：
[0011] 本發明中，R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物以特定的晶體形式存在，而 這也使得該化合物具有較高的純度以及較好的穩定性，這也進一步有利于制備高質量的富 馬酸替諾福韋二吡呋酯終產物。
[0012] 可選的，本發明中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一7K合物晶體的X-射線 粉末圖中 2Θ 為7·5768、15·0221、15·6349、16·0135、18·2180、22·5071、23·5315、24·8028。
[0013] 可選的，本發明中，所述R-9-(2_膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一7Κ合物晶體的X-射線 粉末圖基本如圖8所示。
[0014] 可選的，本發明中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體的X-射線 粉末數據基本如表1所示。
[0015] 同時，本發明還提供了一種所述的R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶 體的制備方法，所述方法包括如下步驟：
[0016] (1)向DMF中分別加入腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯以及氫氧化鈉，并加熱保溫反應， 然后降溫并加入甲醇和異丙醇的混合溶液，加入后，繼續降溫析晶，然后過濾，并將濾餅洗 滌、干燥，即得到R-9_(2-羥基丙基)腺嘌呤；（2)向NMP中分別加入步驟(1)所制得的R-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯、叔丁醇鎂并反應;然后，向反應體系內加入 冰醋酸、溴化鈉以及環己烷，回流分水后，將環己烷蒸出，降溫并再次加入溴化鈉，繼續反 應;在反應體系中分批次加入三甲基氯硅烷，并繼續反應，然后停止反應，并在冷卻后，向 反應體系中加入水，并攪拌溶解，然后靜置分液，在水相中加入三水合乙酸鈉，并在其溶解 后冷卻靜置，然后過濾，并將濾餅洗滌干燥，即得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水 合物晶體粗品；（3)將步驟(2)中所制得的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體 粗品溶于水中，并加熱溶解，然后降溫攪拌析晶并過濾，將濾餅洗滌干燥后，即得到產物R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體。
[0017] 本發明方法所用原料易得，且制備過程的操作簡便，所制得的晶體產率高、質量 好。同時，本發明方法中，通過分批加入溴化鈉、三甲基氯硅烷等原料，也避免了一次加入原 料而產生反應速率過快、副反應過多所導致的產率降低。
[0018] 本發明中的反應流程如下：
[0020] 可選的，本發明中，步驟(1)中所述加熱反應并保溫為加熱至135~145°C并保溫反 應。進一步的，所述保溫反應的時間為4_5h。
[0021] 可選的，本發明中，步驟(1)中所述降溫為降溫至100-120°c。
[0022] 可選的，本發明步驟(1)中所述甲醇的用量為腺嘌呤用量的2-4倍，所述異丙醇的 用量為腺嘌呤用量的2-4倍;優選的，本發明步驟（1)中所述甲醇的用量為腺嘌呤用量的3 倍，所述異丙醇的用量為腺嘌呤用量的3倍。進一步的所述甲醇和異丙醇混合溶液的加入時 間為15_60min。
[0023] 可選的，本發明中，步驟（1)中所述繼續降溫為繼續降溫至0-5°C;進一步的，所述 繼續降溫反應的時間為2_3h。
[0024] 可選的，本發明中，步驟（1)中所述濾餅洗滌為先將濾餅以異丙醇泡洗一次，然后 再以少量異丙醇淋洗2次。
[0025] 可選的，本發明中，步驟（1)中還進一步包括在濾餅洗滌后，將濾餅用離心機將濾 餅中產物與溶劑分離(即甩干)后，再進行干燥的步驟。
[0026] 可選的，本發明中，步驟(1)所述干燥的時間為4_6h，所述干燥的溫度為70-80°C。
[0027] 可選的，本發明中，步驟(2)中R-9_(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦酸二 乙酯以及叔丁醇鎂反應的溫度為70-80°C;進一步的，所述反應的時間為3_4h。
[0028] 可選的，本發明中，步驟(2)中所述回流反應的時間為1 _2h。
[0029]可選的，本發明中，步驟(2)中所述環己烷蒸出的溫度為110-120°C。
[0030] 可選的，本發明中，步驟(2)中所述降溫為降溫至90°C以內。
[0031]可選的，本發明中，步驟(2)中所述繼續反應為在80-90°C條件下繼續攪拌反應30-60min〇
[0032] 可選的，本發明中，步驟(2)中所述反應體系中分批次加入三甲基氯硅烷并繼續反 應的反應溫度為80_90°C ;進一步的，所述反應步驟的整體反應時間為5_8h。
[0033] 可選的，本發明中，步驟(2)中所述冷卻為冷卻至60_70°C。
[0034]可選的，本發明中，步驟(2)中所述攪拌溶解的溫度為60-70°C，攪拌溶解的時間為 1-2h〇
[0035]可選的，本發明中，步驟（2)中所加入三水合乙酸鈉的質量為腺嘌呤質量的1.1 -1.3倍。
[0036]可選的，本發明中，步驟(2)中所述冷卻靜置為冷卻至0_5°C，并靜置3_5h。
[0037] 可選的，本發明中，步驟(2)中所述濾餅洗滌干燥為將濾餅分別以冷純化水和丙酮 洗滌，然后將濾餅用離心機將濾餅中產物與溶劑分離（即甩干)后，再進行干燥;進一步的， 所述干燥溫度為65~75°C，干燥時間5~6小時。
[0038] 可選的，本發明中，所述水的質量為R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶 體粗品的8~13倍。
[0039] 可選的，本發明中，步驟(3)中所述加熱溶解為加熱到回流溫度進行溶解。進一步 的，在加熱溶解后，還進一步包括繼續攪拌lh，再進行降溫析晶的步驟。
[0040] 可選的，本發明中，步驟(3)中所述降溫攪拌為降溫至0_5°C，并攪拌lh。
[0041] 可選的，本發明中，步驟(3)中所述濾餅洗滌干燥為濾餅分別以冷純化水和丙酮洗 滌后，然后將濾餅用離心機將濾餅中產物與溶劑分離（即甩干)后，再進行干燥;進一步的， 所述干燥的溫度為65~75°C，干燥的時間7~8小時。
[0042] 可選的，本發明所述方法中，步驟(1)中腺嘌呤、R-( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉以及 DMF的質量比為(0.8-1.2) :(0.9-1.1):(0.2-0.3): (6-7)。
[0043] 本發明中，通過對原料加入比例的選擇和調整，從而可以提高原料的轉化率，并提 高反應收率。
[0044] 可選的，本發明所述方法中，步驟(2)中R-9_(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲 基膦酸二乙酯、叔丁醇鎂以及NMP的質量比為(0.9-1.1):(2-3) :(0.6-1.0): (3-5)。
[0045]可選的，本發明所述方法中，步驟(2)中R-9_(2-羥基丙基）腺嘌呤、冰醋酸、溴化 鈉、環己烷、再次加入溴化鈉以及三甲基氯硅烷的質量比為：（0.9-1.1):(0.3-0.6) :(0.2-0.5):(1.5-2.5):(1.4-2)：(3-4)〇
[0046]可選的，本發明所述方法中，步驟（2)中所述三甲基氯硅烷為分三次加入，每次加 入時間間隔為0.5-1.5h。
[0047]本發明中，通過對三甲基氯硅烷加入次數以及加入時間間隔的選擇和調整，從而 可以對反應速率進行調控，進而抑制副反應的發生，并提高產率。
[0048]可選的，本發明所述方法中，每次加入三甲基氯硅烷的比例為(5-7): (1-3): (0.5-2)〇
[0049] 本發明中，通過對三甲基氯硅烷每次加入量的調整和優化，從而進一步控制了反 應速率，提高了反應收率。
[0050] 可選的，本發明所述方法中，步驟(3)中，R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合 物晶體粗品與水的質量比為1: (8-13)。
[0051] 本發明中，通過對重結晶所用水量的調整和優化，可以使得晶體粗品能夠完全溶 解，同時也會由于用水量過多而導致的晶體過渡溶解無法析出，以及進一步所帶來的晶體 產率降低。
[0052]進一步的，本發明還提供了一種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法:首先按照 本發明所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，再由R-9-(2-膦酰甲 氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體經酯化成鹽制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
[0053]本發明中，通過使用本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體為原 料制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯，因而可以制得高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產物， 并具有產物產量好，操作方法簡便等優點。
[0054] 與現有技術相比，本發明的有益效果為：
[0055] (1)本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體純度高、穩定性好，能 夠用于進一步制備高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
[0056] (2)本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體的制備方法所用原料 易得，且操作簡便，晶體產率高、質量好；同時，本發明方法中通過分批加料等操作步驟，也 進一步提尚了所述晶體的廣率。
[0057] (3)本發明富馬酸替諾福韋二吡呋酯以本發明高純度R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_ 腺嘌呤一水合物晶體為原料，從而可以制得高質量的富馬酸替諾福韋二吡呋酯產物，并具 有產物產量好，操作方法簡便等優點。
【附圖說明】
[0058]圖1為本發明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體的HPLC圖譜；
[0059] 圖2為本發明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體晶體差示掃描量熱 測定圖（DSC圖）；
[0060] 圖3為本發明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體晶體熱重測定圖 (TGA圖）；
[0061] 圖4為本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體紅外吸收光譜 圖；
[0062] 圖5為本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體質譜圖；
[0063] 圖6為本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體H-NMR圖；
[0064] 圖7為本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體C-NMR圖；
[0065] 圖8為本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體晶體X-射線衍射圖。
【具體實施方式】
[0066] 下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會 理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限制本發明的范圍。實施例中未注明具體 條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為 可以通過市售購買獲得的常規產品。
[0067] 實施例1
[0068] 1)按重量份數比，稱取1份腺嘌呤、0.983份R-( + )_碳酸丙烯酯、0.025份氫氧化鈉、 7份的N，N-二甲基甲酰胺，備用；
[0069] 將N，N_二甲基甲酰胺、腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉依次加入到反應容器 中，加熱至135~145°C，保溫反應4~5h，降溫，冷卻到約100~120°C時，向反應溶液中加入3 倍甲醇和3倍異丙醇的混合溶液，15~60min加完，冷卻到0~5°C，攪拌2~3小時后離心過 濾，濾餅以冷異丙醇泡洗一次，再以少量冷異丙醇淋洗2次，甩干，并在70~80°C條件下干燥 4~6h，得(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(HPA)，備用。
[0070] 2)按重量份數比計稱取1份ΗΡΑ、2.5份對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯（DESMP)、 〇. 88份叔丁醇鎂(ΜΤΒ)和4份Ν-甲基吡咯烷酮(ΝΜΡ)，備用；
[0071] 向ΝΜΡ(Ν-甲基吡咯烷酮)溶液中加入HPA、DESMP和叔丁醇，并在70~80°C條件下反 應3~4h;反應完成后，向反應體系內加入0.5份冰醋酸，15分鐘后加入0.36份溴化鈉、2份環 己烷，并在升溫回流分水條件下1~2小時，并在110~120°C條件下蒸出環己烷;然后對反應 體系進行降溫，并在降溫至90 °C內后，再在反應體系內加入1.77份溴化鈉，并在80~90 °C攪 拌30~60分鐘；
[0072] 然后，在80~90°C溫度條件下，向反應液內分三次加入3.28份三甲基氯硅烷 (TMSC1)，其中第一次加入TMSC1總量的6/9，第二次加入TMSC1總量的2/9，第三次加入TMSC1 總量的1/9，每次加入的間隔時間為lh，并在加入后繼續反應4h，停止反應。
[0073]將反應液冷卻到60~70 °C，加入水溶解固體，60~70 °C攪拌1小時，靜置，分液。水 層加入1.13份三水合乙酸鈉，溶解后，冷卻靜置12~48小時，析出固體產物，降溫到0~5°C， 靜置4小時，離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65~75 °C條件下干燥5 ~6小時，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品。
[0074] 3)將步驟2)所得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品溶于 10倍的純化水中；然后，將體系升溫到回流溫度，待固體完全溶解后，繼續攪拌1小時;接著， 將體系降溫到〇-5°C，并在攪拌1小時后離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干， 并在65~75°C條件下干燥5~6小時，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經計算晶體的收率為52%。
[0075] 然后，對實施例1所制得的晶體進行產物表征，其結果如下：
[0076] 首先，對晶體進行HPLC檢測，由圖1所示本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤 一水合物晶體的HPLC圖譜可知，實施例1所制得晶體的純度為99.6。
[0077] 然后，對晶體進行DSC檢測，由圖2所示本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一 水合物晶體晶體差示掃描量熱測定圖（DSC圖）可知，實施例1中所制得的R-9-(2-膦酰甲氧 基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體熔點為275°C。
[0078] 接著，對晶體進行TGA檢測，由圖3所示本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一 水合物晶體晶體熱重測定圖（TGA圖）可知，實施例1中晶體在99.03 °C附近有一個吸熱峰為 初熔，在272.25°C附近有一個吸熱峰為分解點。進一步對TGA分析可知，實施例1中產物晶體 在95-101.9°C重量減少約5.0%，與其1個結晶水的含量相近，在270°C后其慢慢分解，至492 °(：重量減少40%以上。以上說明實施例1中產物晶體含1個結晶水，其熔點（分解點）約為 272 Γ。
[0079] 接下來，對晶體進行使用紅外圖譜檢測，由圖4所示本發明R-9_(2-膦酰甲氧基丙 基)-腺嘌呤一水合物晶體晶體紅外吸收光譜圖可知，實施例1中晶體用KBr壓片測得的圖譜 在 3392cm-1，3218cm-1，3107cm-1，3066cm- 1，2969cm-1，2931cm-1，2293cm-1，1698cm- 1，1614cm-1， 1558cm-1，1514cm-1，1483cm- 1，1410cm-1，1359cm-1，1237cm-1，1105cm- 1，1077cm-1，1005cm-1， 937cm-1，879cm- 1，834cm-1，787cm-1，751cm-1，716cm- 1，652cm-1，606cm-1，527cm-1，477cm- 1 有較 強吸收峰。
[0080] 然后，對晶體進行質譜檢測，由圖5所示本發明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤 一水合物晶體晶體質譜圖可知，本發明晶體的分子離子峰為286，與其分子量M-1 -致。
[0081 ] 接下來，對實施例1的晶體進行H-NMR(DMSO，400MHZ)檢測，由圖6所示本發明R-9-(2 -膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體晶體H-匪R圖可知，實施例1中晶體的δ Η為： 8.132(s，lH，2-H)，8·138(s，lH，8-H)，7.246(dd，2H，-NH2)，，4·182-4.288(dd，2H，- NCH2CH)，3·896-3·904(m，1H，-CH2-CH-0)，3·551-3·624(dd，2H，-0CH2P)，3·346(dd，2H，2 個-OH),1.018-1.028(d，3H，-CH3)。
[0082] 然后，對實施例1的晶體進行晶體C-NMR(DMSO，400MHZ)檢測，由圖7為本發明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體晶體C-匪R圖可知，實施例1種晶體的δ(：為： 118.700-156.322(腺嘌呤環上5個〇,75.721(-〇12-〇1(〇13)-0-上的(：），64.267(-(：!12?0上的 C)，39.571-40.405(與腺嘌呤環上N相連的亞甲基上的C)，17.467(甲基C)
[0083]最后，對實施例1的晶體進行粉末X射線衍射(XRD)分析，由圖8所示本發明R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體晶體X-射線衍射圖，實施例1晶體的在2Θ值為 7·5768、15·0221、15·6349、16·0135、18·2180、22·5071、23·5315、24·8028 等處有明顯的特 征峰;進一步的，實施例1晶體粉末衍射峰數據具體如下表1所示：
[0084]表1實施例1 R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體X-射線衍射峰數據：
[0086]
[0087] 實施例2
[0088] 1)按重量份數比，稱取0.8份腺嘌呤、1.1份R_( + )_碳酸丙烯酯、0.02份氫氧化鈉、6 份的N，N-二甲基甲酰胺，備用；
[0089] 將N，N_二甲基甲酰胺、腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉依次加入到反應容器 中，加熱至135~145°C，保溫反應4~5h，降溫，冷卻到約100~120°C時，向反應溶液中加入3 倍甲醇和3倍異丙醇的混合溶液，15~60min加完，冷卻到0~5°C，攪拌2~3小時后離心過 濾，濾餅以冷異丙醇泡洗一次，再以少量冷異丙醇淋洗2次，甩干，并在70~80°C條件下干燥 4~6h，得(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，備用。
[0090] 2)按重量份數比計稱取0.9份ΗΡΑ、3份對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯(DESMP)、1份 叔丁醇鎂(ΜΤΒ)和3份Ν-甲基吡咯烷酮(ΝΜΡ)，備用；
[0091] 向ΝΜΡ(Ν-甲基吡咯烷酮)溶液中加入HPA、DESMP和叔丁醇，并在70~80°C條件下反 應3~4h;反應完成后，向反應體系內加入0.3份冰醋酸，15分鐘后加入0.2份溴化鈉、1.5份 環己烷，并在升溫回流分水條件下1~2小時，并在110~120°C條件下蒸出環己烷;然后對反 應體系進行降溫，并在降溫至90°C內后，再在反應體系內加入1.4份溴化鈉，并在80~90°C 攪拌30~60分鐘；
[0092] 然后，在80~90°C溫度條件下，向反應液內分三次加入3份三甲基氯硅烷(TMSC1)， 其中第一次加入TMSC1總量的5/7,第二次加入TMSC1總量的1/7,第三次加入TMSC1總量的1/ 7,每次加入的間隔時間為lh，并在加入后繼續反應4h，停止反應。
[0093]將反應液冷卻到60~70 °C，加入水溶解固體，60~70 °C攪拌1小時，靜置，分液。水 層加入1.1份三水合乙酸鈉，溶解后，冷卻靜置12~48小時，析出固體產物，降溫到0~5 °C， 靜置4小時，離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65~75°C條件下干燥5 ~6小時，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品。
[0094] 3)將步驟2)所得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品溶于 8倍的純化水中；然后，將體系升溫到回流溫度，待固體完全溶解后，繼續攪拌1小時;接著， 將體系降溫到〇-5°C，并在攪拌1小時后離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干， 并在65~75°C條件下干燥5~6小時，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經計算實施例2晶體的收率為42%，經過HPLC測試，實施例2晶體的純度為99.1%， 最大單雜<0.8%。實施例2晶體的其他晶體表征結果與實施例1中檢測結果相同。
[0095] 實施例3
[0096] 1)按重量份數比，稱取1.2份腺嘌呤、0.9份R_( + )_碳酸丙烯酯、0.03份氫氧化鈉、7 份的N，N_二甲基甲酰胺，備用；
[0097]將N，N_二甲基甲酰胺、腺嘌呤、R_( + )_碳酸丙烯酯、氫氧化鈉依次加入到反應容器 中，加熱至135~145°C，保溫反應4~5h，降溫，冷卻到約100~120°C時，向反應溶液中加入3 倍甲醇和3倍異丙醇的混合溶液，15~60min加完，冷卻到0~5°C，攪拌2~3小時后離心過 濾，濾餅以冷異丙醇泡洗一次，再以少量冷異丙醇淋洗2次，甩干，并在70~80°C條件下干燥 4~6h，得(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(HPA)，備用。
[0098] 2)按重量份數比計稱取1.1份HPA、2份對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯(DESMP)、1份 叔丁醇鎂(MTB)和5份N-甲基吡咯烷酮(NMP)，備用；
[0099] 向NMP(N-甲基吡咯烷酮)溶液中加入HPA、DESMP和叔丁醇，并在70~80°C條件下反 應3~4h;反應完成后，向反應體系內加入0.6份冰醋酸，15分鐘后加入0.5份溴化鈉、2.5份 環己烷，并在升溫回流分水條件下1~2小時，并在110~120°C條件下蒸出環己烷;然后對反 應體系進行降溫，并在降溫至90°C內后，再在反應體系內加入2份溴化鈉，并在80~90°C攪 拌30~60分鐘；
[0100] 然后，在80~90°C溫度條件下，向反應液內分三次加入4份三甲基氯硅烷(TMSC1)， 其中第一次加入TMSC1總量的5/12,第二次加入TMSC1總量的2/12,第三次加入TMSC1總量的 5/12,每次加入的間隔時間為lh，并在加入后繼續反應4h，停止反應。
[0101] 將反應液冷卻到60~70 °C，加入水溶解固體，60~70 °C攪拌1小時，靜置，分液。水 層加入1.2份三水合乙酸鈉，溶解后，冷卻靜置12~48小時，析出固體產物，降溫到0~5°C， 靜置4小時，離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65~75°C條件下干燥5 ~6小時，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品。
[0102] 3)將步驟2)所得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(PMPA)-水合物晶體粗品溶于 13倍的純化水中；然后，將體系升溫到回流溫度，待固體完全溶解后，繼續攪拌1小時;接著， 將體系降溫到〇-5°C，并在攪拌1小時后離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干， 并在65~75°C條件下干燥5~6小時，得到R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經計算實施例3晶體的收率為48 %，經過HPLC測試，實施例3晶體的純度為99.3 %， 最大單雜<0.5%。實施例3晶體的其他晶體表征結果與實施例1中檢測結果相同。
[0103] 實施例4
[0104] 在DMF溶液中，分別加入適量實施例1所制得R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一 水合物晶體晶體以及氯甲基碳酸異丙酯，60°C條件下反應4h后，加入富馬酸，繼續反應5h， 然后，將反應體系冷卻至0 °C后，離心過濾，濾餅分別以冷純化水和丙酮洗滌，甩干，并在65 ~75°C條件下干燥5~6小時，得到富馬酸替諾福韋二吡呋酯，并稱量，經計算，富馬酸替諾 福韋二吡呋酯產物收率為90%。經過HPLC測試，富馬酸替諾福韋二吡呋酯的純度為99%，最 大單雜<0.5%。
[0105] 對比例1
[0106] 首先，按照實施例1步驟(1)中所述方法制備(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，并 備用。然后，按照實施例1步驟⑵中所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(ΡΜΡΑ) 一水合物晶體粗品，其中溴化鈉為一次加料。最后，按照實施例1步驟(3)所述方法制備R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體，并稱重，經計算對比例1晶體的收率為30%，經 過HPLC測試，對比例1晶體的純度為98.1 %，最大單雜彡0.9%。對比例1晶體的其他晶體表 征結果與實施例1中檢測結果相同。
[0107] 對比例2
[0108] 首先，按照實施例1步驟(1)中所述方法制備(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，并 備用。然后，按照實施例1步驟⑵中所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(ΡΜΡΑ) 一水合物晶體粗品，其中三甲基氯硅烷(TMSC1)為一次加料，并在加料反應6h后，停止反應。 最后，按照實施例1步驟(3)所述方法制備R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體， 并稱重，經計算，對比例2晶體的收率為30%，經過HPLC測試，對比例，2晶體的純度為 98.3%，最大單雜<0.7%。對比例2晶體的其他晶體表征結果與實施例1中檢測結果相同。
[0109] 對比例3
[0110] 首先，按照實施例1步驟(1)中所述方法制備(R)-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤(ΗΡΑ)，并 備用。然后，按照實施例1步驟⑵中所述方法制備R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤(ΡΜΡΑ) 一水合物晶體粗品。其中，溴化鈉為一次加料；同時，三甲基氯硅烷(TMSC1)也為一次加料， 并在TMSC1加料反應6h后，停止反應。最后，按照實施例1步驟(3)所述方法制備R-9-(2-膦酰 甲氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體，并稱重，經計算對比例3晶體的收率為25%，經過HPLC 測試，對比例3晶體的純度為97.3%，最大單雜<1.1%。對比例3晶體的其他晶體表征結果 與實施例1中檢測結果相同。
[0111] 盡管已用具體實施例來說明和描述了本發明，然而應意識到，在不背離本發明的 精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權利要求中 包括屬于本發明范圍內的所有這些變化和修改。
【主權項】
1. 一種R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，所述晶體的X-射線粉末圖中2 0為7.5768、15.0221、15.6349、16.0135;其中，所述R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水 合物結構如下：2. 根據權利要求1所述的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基）-腺嘌呤一水合物晶體，其特征在 于，所述晶體的 X-射線粉末圖中 29為7.5768、15.0221、15.6349、16.0135、18.2180、 22.5071、23.5315、24.8028。3. 根據權利要求1或2所述的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體的制備方 法，其特征在于，所述方法包括如下步驟： (1) 向DMF中分別加入腺嘌呤、R-( + )_碳酸丙烯酯以及氫氧化鈉，并加熱保溫反應，然后 降溫并加入甲醇和異丙醇的混合溶液，加入后，繼續降溫析晶，然后過濾，并將濾餅洗滌、干 燥，即得到R-9_( 2-羥基丙基)腺嘌呤； (2) 向NMP中分別加入步驟（1)所制得的R-9-(2-羥基丙基)腺嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦 酸二乙酯、叔丁醇鎂并反應;然后，向反應體系內加入冰醋酸、溴化鈉以及環己烷，回流分水 后，將環己烷蒸出，降溫并再次加入溴化鈉，繼續反應;在反應體系中分批次加入三甲基氯 硅烷，并繼續反應，然后停止反應，并在冷卻后，向反應體系中加入水，并攪拌溶解，然后靜 置分液，在水相中加入三水合乙酸鈉，并在其溶解后冷卻靜置，然后過濾，并將濾餅洗滌干 燥，即得到R-9_(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體粗品； (3) 將步驟(2)中所制得的R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體粗品溶于水 中，并加熱溶解，然后降溫攪拌析晶并過濾，將濾餅洗滌干燥后，即得到產物R-9_(2-膦酰甲 氧基丙基)_腺嘌呤一水合物晶體。4. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(1)中腺嘌呤、R-( + )_碳酸丙 烯酯、氫氧化鈉以及DMF的質量比為(0.8-1.2): (0.9-1.1): (0.2-0.3): (6-7)。5. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(2)中R-9-(2-羥基丙基)腺 嘌呤、甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯、叔丁醇鎂以及NMP的質量比為(0.9-1.1): (2-3): (0.6-1.0)：(3-5)〇6. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(2)中R-9-(2-羥基丙基)腺 嘌呤、冰醋酸、溴化鈉、環己烷、再次加入溴化鈉以及三甲基氯硅烷的質量比為：（〇.9-1.1): (0.3-0.6)：(0.2-0.5)：(1.5-2.5)：(1.4-2)：(3-4)〇7. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法步驟(2)中，所述三甲基氯硅烷為 分三次加入，每次加入時間間隔為0.5-1.5h。8. 根據權利要求7所述的方法，其特征在于，每次加入三甲基氯硅烷的比例為（5-7): (1-3):(0.5-2)。9. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟（3)中，R-9-(2-膦酰甲氧基丙 基)_腺嘌呤一水合物晶體粗品與水的質量比為1: (8-13)。10. -種富馬酸替諾福韋二吡呋酯的制備方法，其特征在于，首先按照權利要求3-9中 任一項所述方法制備R-9-(2-膦酰甲氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體，再由R-9-(2-膦酰甲 氧基丙基)-腺嘌呤一水合物晶體經酯化成鹽制備富馬酸替諾福韋二吡呋酯。
【文檔編號】C07F9/6561GK106046055SQ201610364010
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月27日
【發明人】劉勝文, 余丹, 余玉靜, 洪華云, 周震, 汪旭東, 羅松, 陳龍, 邵振, 徐朕
【申請人】湖北麗益醫藥科技有限公司