α,β-不飽和化合物及其應用
【專利摘要】本發明公開了一種α,β?不飽和化合物及其應用。具體涉及一種α,β?不飽和羰基化合物、肟、肟醚及其衍生物對于BRAFV600E、表皮生長因子TK激酶以及微孔蛋白聚合酶的抑制活性。證明本發明合成的化合物適合用作預防、治療腫瘤疾病的藥物，同時也適合用作對具有多藥耐藥性的腫瘤細胞的預防、治療作用，具有較好的應用前景。
【專利說明】
α , β-不飽和化合物及其應用
技術領域
[0001] 本發明屬于制藥技術領域，具體涉及一種α，β-不飽和羰基化合物、肟、肟醚及其衍 生物的應用。
【背景技術】
[0002] 多細胞生物調控細胞行為并確保細胞作為一個整體在細胞修復或生長過程中的 正常的增值是一條復雜的信號傳導途徑。在這些信號的缺陷機制導致正常生長的故障，從 而導致癌癥。癌癥通過多種途徑和過程產生，由于正常的細胞和組織難以產生對所有受體、 途徑和信號機制有效應的抗癌藥物。此外，在周期性的抗癌化療試劑作用后，腫瘤細胞通過 激活抗凋亡通路適應自身，提高其對化療耐藥性，逃避程序性死亡。盡管通過化學治療劑的 組合使用，以防止耐藥，癌細胞適應并發展一種或多種耐藥途徑最終導致癌癥治療失敗。下 面介紹了一些抗癌和癌細胞中多藥耐藥抑制的主要目標。
[0003] 一種跨膜糖蛋白，表皮生長因子受體(EGFR)，屬于erbB家族的緊密聯系
[0004] 細胞膜受體，包括表皮生長因子受體（ERBB-1或HER1)，erbB2(HER2)，ERBB-(HER3)，和ErbB4(HER4)。許多人實體瘤，包括頭和頸，結腸直腸癌，非小細胞肺癌(NSCLC)， 卵巢癌和乳腺癌表現出的表達，過度表達，或表皮生長因子受體失調。表皮生長因子受體的 激活可能通過增加細胞能動性，增殖能力，侵襲能力，和粘合性，抑制凋亡的能力，支持腫瘤 生長。控制表皮生長因子受體信號的重要性作為癌癥治療策略最近通過廣泛收集分子抑制 劑已經證實，正在進行臨床試驗。
[0005] RAS-RAF-MEK-ERK是被酪氨酸激酶受體途徑迅速激活的下游途徑，它控制多個細 胞對細胞外信號的響應。該途徑在腫瘤細胞中激活(特別是黑色素瘤）引起細胞增殖，存活、 以及腫瘤細胞的生長。在人體中共發現3種 HRAS)基因，關鍵的是，BRAF，KRAS和NRAS分別在黑色素瘤的突變為45%、2%和20%。癌癥細 胞的增殖和生存由過信令刺激促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)途徑激活。該
[0006] 致癌性的BRAF抑制劑的發展，特別是I型BRAF抑制劑，與基本化療相比，阻斷BRAF 的活性構象激酶，導致了很大程度的實體腫瘤響應和提高了機體存活率。
[0007] 化療是最基本的治療癌癥的方法之一，但是成功的化療被癌細胞的多藥耐藥性阻 礙。抗癌藥物耐藥性的發展的機理是復雜的。到目前為止，最好的多藥耐藥性由癌細胞膜上 的三磷酸腺苷的過度表達。廣泛結構不同的抗癌藥物可通過P糖蛋白流出細胞，因此，降低 了細胞內的治療水平。通過抑制外排機制可以逆轉多藥耐藥性質。化療并發癥可以通過抑 制藥理調節的發展和多藥耐藥試劑外排栗逆轉多藥耐藥性。
[0008] 幾種天然的和合成的α，β不飽和羰基化合物，包括查耳酮，姜黃素，以及它們的合 成類似物被認為具有抗腫瘤活性。這些化合物的酮官能團被認為在癌癥化療的工作由硫醇 的烷基化發揮作用，不需要氨基和羥基的反應，因此，由于這一反應活性，烯酮可能具有比 傳統的烷化劑更優越的性質，因為它具有與其他抗癌試劑相比更小的遺傳毒性。此外，烯酮 的抗腫瘤活性含有的物質涉及很多效應，例如NF-kappaB和線粒體介導的途徑的抑制，觸發 死亡受體的腫瘤壞死因子，抑制細胞周期蛋白依賴性激酶或DNA拓撲異構酶Π 等等。因此， 合成特殊的α，β不飽和羰基化合物很有重要性。大多數對α，β不飽和羰基化合物（以查耳酮 和姜黃素類似物)為基礎的研究，集中在抗癌活性的評價，很少報道他們逆轉多藥耐藥的能 力。更多信息需要用來解釋缺乏β二羰基是否影響這些化合物抑制ABC轉運的能力，以及這 類化合物是否擁有更好的雙重抗癌效果并且可以作為有效的逆轉多藥耐藥的試劑。
【發明內容】
[0009] 本發明的目的在于提供一種α，β-不飽和化合物，用作預防、治療腫瘤疾病的藥物。
[0010] 為達到上述目的，采用技術方案如下：
[0011] α，β-不飽和化合物，具有以下結構式：
[0012]
[0013] 在上述結構式中，Rl·代表以下基團：
[0014] 亞甲基、仲氛基、氧原子、HC-CH3、N_CH3、CH-j
[0015] R2代表以下基團：
[0016] 氧原子、N-〇HgS
[0017] R ' 3是氫原子或甲氧基;R ' 4是氫原子或甲氧基;R ' 6代表氯原子或溴原子。
[0018] α，β-不飽和化合物，具有以下結構式：
[0019]
[0020] 在上述結構式中，Ri代表亞甲基或HC-CH3;
[0021] 1?2、1?4、1?5、1?' 3、1?'4分別是氫原子或甲氧基;1?3代表氫原子、氯原子、甲氧基、氟原子、 溴原子、硝基;R'6代表氯原子或溴原子；
[0022] R6代表以下基團：
[0023] 氧原子、Ν-0Η或
[0024] α，β-不飽和化合物，為
[0025] 2,6_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)環己酮(4a)、
[0026] 2，6-二（2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)環己酮(4b)、
[0027] 2,6_二（2-溴-3,4,5_三甲氧基亞芐基)環己酮(4c)、
[0028] 2,6_二（2-氯-3-甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮(4d)、
[0029] 2，6-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮(4e)、
[0030] 2,6_二（2-溴-3,4,5-三甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮(4f)、
[0031] 2,6_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)-4-異丙基環己酮(4g)、
[0032] 2，6-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)-4-異丙基環己酮(4h)、
[0033] 2,6_二（2-溴-3,4,5-三甲氧基亞芐基)-4-異丙基環己酮(4i)、
[0034] 3，5-二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮(4j)、
[0035] 3，5-二（2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基）哌啶-4-酮(4k)、
[0036] 3，5-二（2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基）哌啶-4-酮(41)、
[0037] 3,5_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮(4m)、
[0038] 3,5-二(2-氯-3,4-二甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮(4n)、
[0039] 3，5-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮(4〇)、
[0040] 1-芐基-3，5_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮(4p)、
[0041 ]丄-芐基-3，5-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮(4q)、
[0042] 1-芐基-3，5-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮(4r)、
[0043] 3,5_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基）四氫吡喃-4-酮(4s)、
[0044] 3，5-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基）四氫吡喃-4-酮(4t)、
[0045] 3，5-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基）四氫吡喃-4-酮(4u)、
[0046] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)_四氫萘酮(5a)、
[0047] 2-(2-氯-3,4_二甲氧基-亞芐基)_四氫萘酮(5b)、
[0048] 2-(2-溴-3,4-二甲氧基-亞芐基)_四氫萘酮(5c)、
[0049] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮(5d)、
[0050] 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮(5e)、
[0051 ] 2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮(5f)、
[0052] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮(5g)、
[0053] 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮(5h)、
[0054] 2-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮(5i)、
[0055] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-氯-四氫萘酮(5j)、
[0056] 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-8-氯-四氫萘酮(5k)、
[0057] 2_(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-氯-四氫萘酮(51)、
[0058] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮(5m)、
[0059] 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮(5η)、
[0060] 2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮(5〇)、
[0061 ] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-6-甲氧基-四氫萘酮(5p)、
[0062] 2-(2-氯-3,4_二甲氧基-亞芐基)-6-甲氧基-四氫萘酮(5q)、
[0063] 2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6-甲氧基-四氫萘酮(5r)、
[0064] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-7,8_二甲氧基-四氫萘酮(5s)、
[0065] 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-7,8_二甲氧基-四氫萘酮(5t)、
[0066] 2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-7，8-二甲氧基-四氫萘酮(5u)、
[0067] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮(5v)、
[0068] 2-( 2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-6，9-二甲氧基-四氫萘酮(5w)、
[0069] 2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-6,9-二甲氧基-四氫萘酮(5x)、
[0070] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-溴-四氫萘酮(5y)、
[0071] 2-(2-氯-3,4_二甲氧基-亞芐基)-8-溴-四氫萘酮(5z)、
[0072] 2_( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-溴-四氫萘酮(5aa)、
[0073] 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-氟-四氫萘酮(5ab)、
[0074] 2-(2-氯-3,4_二甲氧基-亞芐基)-8-氟-四氫萘酮(5ac)、
[0075] 2_( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-氟-四氫萘酮(5ad)、
[0076] 2_( 2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮(5ae)、
[0077] 2-(2-氯-3,4_二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮(5af)、
[0078] 2_( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮(5ag)、
[0079] 2,6_雙-(2-溴-3,4,5_三甲氧基-亞芐基)_環己酮-肟(7c)、
[0080] 2，6-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-環己酮-肟(7f)、
[0081 ] 3，5-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-哌啶-4-酮-肟(7〇)、
[0082] 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮-肟(8f)、
[0083] 2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮-肟(8i)、
[0084] 2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮-肟(8〇)、
[0085] 2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-7，8-二甲氧基-四氫萘酮-肟(8u)、
[0086] 2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-6,9-二甲氧基-四氫萘酮-肟(8x)、
[0087] 2_( 2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-肟(8af)、
[0088] 2-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-肟(8ag)、
[0089] 3,5_雙-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-環己酮-氧-(2-二乙基氨基-乙 基)-肟(l〇f)、
[0090] 3,5-雙-(2-溴_3,4,5-三甲氧基-亞芐基）-1-甲基-哌啶-4-酮-氧-(2-二乙基氨 基-乙基虧(10〇)、
[0091] 2-(2-溴_3,4，5_三甲氧基-亞芐基)-6,9-二甲氧基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨 基-乙基虧(llx)、
[0092] 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨基-乙基)-肟（llaf)或2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨基-乙 基)_肟(llag) 〇
[0093] 上述α，β-不飽和化合物作為預防、治療腫瘤疾病藥物的應用。
[0094] 上述α，β-不飽和化合物作為預防、治療耐藥性腫瘤疾病藥物的應用。
[0095] 上述α，β-不飽和化合物包括羰基化合物、肟、肟醚及其衍生物，通過評估其對七種 人類癌細胞的抗惡性細胞增殖的能力，以及對于BRAF V6_、表皮生長因子ΤΚ激酶以及微孔蛋 白聚合酶的抑制活性，發現這些化合物適合用作預防、治療腫瘤疾病的藥物。同時這些化合 物的多藥耐藥逆轉活性，表明這些化合物也適合用作對具有多藥耐藥性的腫瘤細胞的預 防、治療作用。
[0096]本發明的有益效果如下：
[0097] 本發明合成了一系列α，β-不飽和羰基化合物、肟、肟醚衍生物，通過測定其生物活 性，證明本發明合成的化合物適合用作預防、治療腫瘤疾病的藥物，同時也適合用作對具有 多藥耐藥性的腫瘤細胞的預防、治療作用，具有較好的應用前景。
【附圖說明】
[0098] 圖1:本發明微管蛋白聚合酶的作用效果測試。
【具體實施方式】
[0099] 以下實施例進一步闡釋本發明的技術方案，但不作為對本發明保護范圍的限制。
[0100] 實施例1
[0101] 化合物2，6-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基)環己酮(4c)的合成：
[0102] 在盛有151111^乙醇的圓底燒瓶中分別加入環己酮（1〇1111]1〇1，169)和2-溴-3,4,5-三甲 氧基苯甲醛(20mmo 1，2eq)，溫度保持在5 °C。之后，再加入40 %氫氧化鈉乙醇溶液。混合物在 27°C下攪拌反應l_24h。沉淀的外觀與顏色變化表明產物的生成。用TLC對該反應進行監控。 當反應完成時，加入酸化的冰淬滅反應。之后進行重結晶或柱層析過程得到純化的產物，產 率為74%。
[0103] 1^:102-1031^? NMR(500MHz，CDC13)S:7.82(s，2H)，6.89(s，2H)，3.75(s，18H)， 2.32(t，J = 8.0Hz，4H)，1.82(m，2H);13C NMR(500MHz，CDC13)S:185.4，151.2，146.5，144.2， 144.9,135.9,130.5,108.4,98.6,56.5,56.1，55.5,28.5,27.3;HRMS(ESI)m/z:613.32[M+ H]+,Microanalysis calculated for C26H2sBr2〇7(612.30),C: 51.00% ,H:4.61 % .Found C:51.22% ,H:4.59% .
[0104] 實施例2
[0105] 化合物2，6-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮(4f)的合成：
[0106] 起始原料為4-甲基環己酮（lOmmol，leq)和2-溴-3,4,5-三甲氧基苯甲醛(20mmol， 2eq)，其它同實施例1，產率為69%。
[0107] ΜριΙΟδ-ΙΟθΓ;1!! NMR(500MHz，CDC13)S:7.84(s，2H)，6.87(s，2H)，3.79(s，18H)， 2.02(d，J = 8.5Hz，4H)，1.72(m，H) ;1.16(d，J = 8.5Hz，3H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 185.6,150.8,146.9,146.4,145.9,134.8,130.6,107·5,99·8,56·8,56·5,56.0,31.5， 29.3,22.5；HRMS(ESI)m/z:627.65[M+H] +,Microanalysis calculated for C27H3〇Br2〇7 (626.33),C:51.78% ,H:4.83% .Found C:51.92% ,H:4.99% .
[0108] 實施例3
[0109] 化合物3,5_二(2-溴-3,4,5-三甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮(4〇)的合成： [0110] 起始原料為1-甲基哌啶-4-酮（lOmmol，leq)和2-溴-3,4,5-三甲氧基苯甲醛 (20mmol，2eq)，其它同實施例1，產率為55%。
[0111] ΜριΗΟ-Η?Γ;1!! NMR(500MHz，CDC13)S:7.81 (s，2H)，6.84(s，2H)，3.81(s，18H)， 2.72(s，4H)，2·16(s，3H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S:184.9，150.6，147.5，145.2，144.9， 135.3,131.8,106.2,99.5,56.7,56.1,55.9,41.5,16.5；HRMS(ESI)m/z:628.32[M+H] +, Microanalysis calculated for C26H29Br2N〇7(627.32) ,C: 49.78% ,H:4.66% ,N: 2.23% .Found C:49.91% ,H:4.86% ,N:2.12% .
[0112] 實施例4
[0113] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮(5f)的合成：
[0114] 在盛有15mL乙醇的圓底燒瓶中分別加入4-甲基-四氫萘酮（lOmmol，leq)和2-溴-3，4，5-三甲氧基苯甲醛（lOmmo 1，1 eq)，溫度保持在5°C。之后，再加入40%氫氧化鈉乙醇溶 液。混合物在27°C下攪拌反應1 -24h。沉淀的外觀與顏色變化表明產物的生成。用TLC對該反 應進行監控。當反應完成時，加入酸化的冰淬滅反應。之后進行重結晶或柱層析過程得到純 化的產物，產率為69 %。
[0115] ΜρΑΟ-ΘΙΓ;1!! NMR(500MHz，CDC13)S: 7.69(s，H)，7.27(d，J = 7.5Hz，H)，7.19((1, J = 7.5Hz，H)，7.07(t，J = 7.5Hz，H)，6.91(t，J = 7.0Hz，H)，6.47(s，H)，3.56(s，9H)，2.19(d， J = 8.5Hz，2H)，1.79(m，H) ;1 · 19(d，J = 8.5Hz，3H); 13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 184.5， 150.7,149.1,147.1,146.8,145.2,137.3,134.5,134.0,130.2,127.3,125.5,124.8， 106.9,98.7,56.9,56.1,55.8,30.4,29.7,21.8；HRMS(ESI)m/z:418.32[M+H] +, Microanalysis calculated for C2iH2iBr〇4(417.29),C: 60.44% ,H: 5.07% .Found C: 60.52% ,H:5.15% .
[0116] 實施例5
[0117] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮(5i)的合成：
[0118] 起始原料為6-羥基-四氫萘酮（10mmol，leq)和2-溴-3,4,5-三甲氧基苯甲醛 (10mmol，leq)，其它同實施例4,產率為72%。
[0119] 1^:94-951^? NMR(500MHz，CDC13)S:7.68(s，H)，7.15((1,J = 7.5Hz，H)，7.02(t，J = 7.0Hz，H)，6.90(d，J = 7.5Hz，H)，6.42(s，H)，5.81(s，H)，3.52(s，9H)，2.52(t，J = 8.0Hz， 2H)，2.13(t，J = 8.0Hz，2H);13C NMR(500MHz，CDC13)S: 184.9,159.6,149.2,147.2,146.1， 140·2，137·8，134·4，134·0，130·5，126·2，122·4，120·2，105·5，96·1，56·8，56·0，55·8， 31.2,27.8；HRMS(ESI)m/z:420.46[M+H] +,Microanalysis calculated for C2〇HigBr〇5 (419.27),C:57.29% ,H:4.57% .Found C:57.52% ,H:4.65% .
[0120] 實施例6
[0121] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮(5o)的合成：
[0122] 起始原料為7-甲氧基-四氫萘酮（lOmmol，leq)和2-溴-3，4,5-三甲氧基苯甲醛 (10mmol，leq)，其它同實施例4,產率為76%。
[0123] 1^:92-931^? NMR(500MHz，CDCl3)S:7.80(s，H)，7.21(d，J = 8.0Hz，H)，7.02(s， H) ,6.85(d,J = 8.0Hz,H) ,6.55(s,H) ,3.59(s,3H) ,3.50(s,9H) ,2.50(t ,J = 8.0Hz,2H), 2.18(t，J = 8.0Hz，2H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 185.3,159.9,148.9,147.4,146.3, 141.0. 137.2.134.5.134.2.130.5.126.5.123.0.119.1.102.7.99.4.56.8.56.2.56.0, 55.8,30.6,25.9；HRMS(ESI)m/z:456.62[M+Na] + ,Microanalysis calculated for C2iH2iBr05(433.29),C:58.21% ,H:4.89% .Found C:58.51% ,H:4.91% .
[0124] 實施例7
[0125] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-7，8-二甲氧基-四氫萘酮(5u)的合成：
[0126] 起始原料為7,8_二甲氧基-四氫萘酮（10mm〇l，leq)和2-溴_3,4,5_三甲氧基苯甲 醛(10mmol，leq)，其它同實施例4,產率為72%。
[0127] 1^:98-991^? NMR(500MHz，CDC13)S:7.89(s，H)，7.12(s，H)，6.75(s，H)，6.25(s， H)，3.58(s，6H)，3.64(s，9H)，2.54(t，J = 8.0Hz，2H)，2· 18(t，J = 8.5Hz，2H) ;13C 匪R (500MHz，CDCl3)S:186.5,152.7,148.3,147.2,146.0,140.6,135.9,134.9,134.4,131.2， 125.2.122.6.119.6.102.2.93.2.56.1.55.9.55.5.55.3.55.0. 29.4.21.2；HRMS(ESI)m/z: 464.72[M+H] +,Microanalysis calculated for C22H23Br〇6(463.32),C:57.03% ,H: 5.00%.Found C: 57.25% ,H: 5.15% .
[0128] 實施例8
[0129] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6，9-二甲氧基-四氫萘酮(5x)的合成： [0130] 起始原料為6,9_二甲氧基-四氫萘酮（10mm〇l，leq)和2-溴_3,4,5_三甲氧基苯甲 醛(10mmol，leq)，其它同實施例4,產率為69%。
[0131] 1^:98-991^? NMR(500MHz，CDC13)S:7.85(s，H)，7.05((1, J = 7.5Hz，H)，6.82(d， J = 7.5Hz,H),6.24(s,H),3.72(s,15H),2.52(t ,J = 8.0Hz,2H),2.10(t ,J = 8.0Hz,2H)；13C 匪R(500MHz，CDC13)S:186.2,151.9,148.5,147.4,146.0,140.4,136.2,134.6,134.3, 131.0. 125.4.123.1.119.5.102.5.94.0.56.2.55.9.55.4.55.2.55.0.29.8.21.6；HRMS (ESI)m/z:464.36[M+H] +,Microanalysis calculated for C22H23Br〇6(463.32),C: 57.03% ,H:5.00% .Found C:57.24% ,H:5.12% .
[0132] 實施例9
[0133] 化合物2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)- 8-硝基-四氫萘酮(5af)的合成：
[0134] 起始原料為8-硝基-四氫萘酮（10mm〇l，leq)和2-氯-3,4_二甲氧基苯甲醛 (10mmol，leq)，其它同實施例4,產率為62%。
[0135] 1^:94-951^? NMR(500MHz，αχη3)δ:7.96(s，H)，7.64((1,J = 8Hz，H)，7.32(d，J = 8Hz，H)，7.12(d，J = 7.5Hz，H)，6.92(d，J = 7.5Hz，H)，6.52(s，H)，3.89(s，6H)，2.82(t，J = 8 · 0Hz，2H)，2 · 24(t，J = 8 · 0Hz，2H); 13C 匪R(500MHz，CDC13)δ: 190 · 2，154 · 5，149 · 5，147 · 1， 146.6,138.5,132.1,130.5,129.3,127.5,125.2,124.6,120.8,100.6，94·4,56·8,56·6， 27.3,19.4；HRMS(ESI)m/z:374.80[M+H] +,Microanalysis calculated for CigHieCINOs (373.79),C:61.05% ,H:4.31% ,N:3.75% .Found C:61.46% ,H:4.49% ,N:3.54% .
[0136] 實施例10
[0137] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮(5ag)的合成：
[0138] 起始原料為8-硝基-四氫萘酮（10mm〇l，leq)和2-溴_3,4,5_三甲氧基苯甲醛 (10mmol，leq)，其它同實施例4,產率為54%。
[0139] 1^:98-991^? NMR(500MHz，αχη3)δ:7.92(s，H)，7.66((1,J = 8Hz，H)，7.14(s，H)， 6.89(d,J = 7.5Hz,H),6.58(s,H),3.81(s,9H) ,2.88(t,J = 8.0Hz,2H) ,2.19(t,J = 8.0Hz, 2H);13C 匪R(500MHz，CDC13)S:191.0,154.2,148.6,147.4,146.2,137.2,132.6,130.1， 128.8,127.1,125.3,124.6,121.2,99.4,95.5,56.9,56.6,55.8,25.4,20.2；HRMS(ESI)m/ z:449.50[M+H] +,Microanalysis calculated for C2〇HisBrN〇6(448.26),C:53.59%,H: 4.05%，N:3.12% .Found C:53.64%，H:4.22%，N:3.06% ·
[0140] 實施例11
[0141] 化合物2，6-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-環己酮-肟(7c)的合成：
[0142] 起始原料為2,6_二（2-溴_3,4,5_三甲氧基亞芐基)環己酮(4c)(lmm〇l)和鹽酸羥 胺(2mmol)在10mL乙醇中反應6-8小時。TLC監測。反應結束后，混合物過濾，用二氯甲烷和水 萃取，無水硫酸鎂干燥有機層，過濾后減壓濃縮，用TLC檢測化合物純度，產物通過乙酸乙酯 重結晶得到固體粉末，柱色譜乙酸乙酯:正己烷=70:30純化產物，產率為54%。
[0143] 1^:105-1061^4^^(50010^,0)(:13)3:8.39(8,10,7.14(8,211),6.21(8,211), 3.75(s，18H)，2.10(d，J = 8.5Hz，4H)，1.81(m，2H);13C NMR(500MHz，CDC13)S:164.5，148.6， 146·5，145·4，142·2，134·5，130·1，105·2，98·8，56·9，56·5，56·0，29·2，28·1;HRMS(ESI)m/ z : 628.35[M+H] +,Microanalysis calculated for 〇26Η29ΒΓ2ΝΟγ(627.32) ,C:49.78% ,H: 4.66% ,N:2.23% .Found C:49.92% ,H:4.72% ,N:2.19% .
[0144] 實施例12
[0145] 化合物2，6-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-環己酮-肟(7f)的合成：
[0146] 起始原料為2，6_雙-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基）-4-甲基-環己酮（4f) (lmmol)和鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為49%。
[0147] 1^:108-1091^4^^(50010^,0)(:13)3:8.42(8,10,7.12(8,211),6.27(8,211), 3.72(s,18H),2.12(d,J = 8.5Hz,4H),1.75(m,H)；1.24(d,J = 8.5Hz,3H)；13C NMR(500MHz, αχη3)δ:162.2,148.8,146.4,145.4,141.6,134.6,130.7,107.4,98.2,56.4,56.2,56.0, 30.2,28.4,22.2；HRMS(ESI)m/z:642.37[M+H] +,Microanalysis calculated for C27H3iBr2N〇7(641.35) ,C: 50.56% ,H:4.87% ,N: 2.18% .Found C: 50.92% ,H:4.92% ,N: 2.10% .
[0148] 實施例13
[0149] 化合物3,5-雙-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-哌啶-4-酮-肟(7〇)的合 成：
[0150] 起始原料為3,5-雙-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基）-1-甲基-哌啶-4-酮（4〇) (lmmol)和鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為42%。
[0151] 1^:132-1331^4^^(50010^,0)(:13)3:8.38(8,10,7.14(8,211),6.29(8,211), 3.75(s，18H)，2.61(s，4H)，2·14(s，3H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S:164.1，150.2，147.3， 145.5,142.2,135.5,131.6,105.9,99.1,56.7,56.3,56.1,42.0,16.2；HRMS(ESI)m/z: 643.14[Μ+Η] +,Microanalysis calculated for C26H3〇Br2N2〇7(642.33),C: 48.62% ,Η: 4.71% ,Ν:4.36% .Found C:48.85% ,H:4.79% ,N:4.25% .
[0152] 實施例14
[0153] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮-肟(8f)的合成：
[0154] 起始原料為2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮(5〇(1111111〇1)和 鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為50%。
[0155] ΜρΗΗ-ΙΙδΓ;1!! NMR(500MHz，CDCl3)S:8.29(s，H)，7.42(s，H)，6.85(t，J = 7Hz， Η) ,6.79(t ,J = 7Hz,H) ,6.44(d ,J = 7.5Hz ,Η) ,6.35(d ,J = 7.5Hz ,H), 6.28(s ,H), 3.71 (s, 9H)，2.51(d，J = 7Hz，2H)，2.0(m，H) ;1.25(d，J = 8.5Hz，3H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 167.2,151.9,148.6,146.5,144.5,139.5,135.7,134.1,132.5,131.2,125.5,122.2， 118.5,99.8,92.5,56.8,56.2,55.5,29.6，24.5,22.5;HRMS(ESI)m/z:433.31[M+H]+， Microanalysis calculated for C2iH22BrN〇4(432.31),C: 58.34% ,H: 5.13% ,N: 3.24% .Found C:58.55% ,H:5.29% ,N:3.12% .
[0156] 實施例15
[0157] 化合物2-(2-溴-3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮-肟(8i)的合成：
[0158] 起始原料為2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮(5i) (lmmol)和 鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為57%。
[0159] NMR(500MHz，CDCl3)S:8.32(s，H)，7.46(s，H)，6.82(t，J = 7Hz， H),6.70(d ,J = 7.5Hz,H),6.38(d ,J = 7.5Hz,H),6.22(s,H) ,4.09(s,H) ,3.75(s,9H) ,2.57 (t，J = 7Hz，2H) ,1.98(t，J = 7.5Hz,2H);13C NMR(500MHz，CDC13)S: 167.5,152.2,148.4, 146.1,143.9,139.7,134.9,133.8,132.5,131.1,124.9,121.6,118.7,99.2,92.7,56.9， 56.1,55.8,29.2,24.1；HRMS(ESI)m/z:435.29[M+H]+,Microanalysis calculated for C2〇H2〇BrN05(434.28) ,C:55.31% ,H:4.64% ,N:3.23% .Found C: 55.52 % ,H: 4.68 % ,N: 3.20% .
[0160] 實施例16
[0161] 化合物2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮-肟(8〇)的合成：
[0162] 起始原料為2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮(5〇) (lmmol) 和鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為55%。
[0163] ΜριΙΠ-ΙΙβΓ;1!! NMR(500MHz，CDC13)S: 8.28(s，H)，7.42(s，H)，6.81((1, J = 7Hz， H)，6.76(d，J = 7.5Hz，H)，6.42(s，H)，6.25(s，H)，3.78(s，12H)，2.55(t，J = 7Hz，2H)，1.99 (t，J = 7.5Hz，2H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 168.2,152.8,148.1,146.5,142.1,139.6， 134.2,133.9,132.4,130.2,124.6,120.8,118.2,99.1,92.5,57.5,56.8,56.2,55.7,29.5， 25.1；HRMS(ESI)m/z:449.35[M+H]+,Microanalysis calculated for C2iH22BrN〇5 (448.31),C:56.26% ,H:4.95% ,N:3.12% .Found C:56.29% ,H:4.99% ,N:3.09% .
[0164] 實施例17
[0165] 化合物2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-7,8-二甲氧基-四氫萘酮-肟(8u)的合 成：
[0166] 起始原料為2-(2-溴-3，4,5-三甲氧基-亞芐基）-7,8-二甲氧基-四氫萘酮（5u) (lmmol)和鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為59%。
[0167] ΜρΗΙΙ-Ι^Γ;1!! NMR(500MHz，CDC13)S:8.29(s，H)，7.45(s，H)，6.75(s，H)，6.42 (s，H)，6.25(s，H)，3.78(s，15H)，2.52(t，J = 7Hz，2H)，1.97(t，J = 7.5Hz，2H) ;13C 匪R (500MHz，CDCl3)S :168.9,152.4,147.6,146.2,141.9,139.5,134.3,132.4,131.9,130.0， 124.2,120.9,118.7,98.8,92.4,57.5,56.9,56.2,55.7,55.2,29.4,25.8；HRMS(ESI)m/z: 479.35[M+H] + ,Microanalysis calculated for C22H24BrN06(478.33) ,C: 55.24% ,H: 5.06% ,N:2.93% .Found C:55.29% ,H:5.10% ,N:2.88% .
[0168] 實施例18
[0169] 化合物2-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮-肟(8x)的合 成：
[0170] 起始原料為2-(2-溴-3，4,5-三甲氧基-亞芐基）-6,9-二甲氧基-四氫萘酮（5x) (lmmol)和鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為52% 〇
[0171] = 7.2Hz,H) ,6.38(d,J = 7.4Hz,H),6.29(s,H),3.68(s,15H),2.51(t,J = 6.8Hz,2H),1.99(t, J = 7 · 5Hz，2H); 13C NMR(500MHz，αχη3)δ: 166 · 5，151 · 3，148 · 1，146 · 2，145 · 0，139 · 2，136 · 7， 134.2,133.9,131.5,124.8,123.5,117.2,100.1,94.6,56.7,56.4,56.2,55.9,55.5,29.6, 21.5；HRMS(ESI)m/z:479.45[M+H]+,Microanalysis calculated for C22H24BrN〇6 (478.33),C:55.24% ,H:5.06% ,N:2.93% .Found C:55.29% ,H:5.18% ,N:2.91% .
[0172] 實施例19
[0173] 化合物2-(2-氯-3,4_二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-肟(8af)的合成：
[0174] 起始原料為2-(2-氯-3，4_二甲氧基-亞芐基)-8_硝基-四氫萘酮(5af)(lmmol)和 鹽酸羥胺(2_〇1)，其它同實施例11，產率為57 %。
[0175] = 8.4Hz,H),7.04(d ,J = 7.4Hz,H) ,6.87(d ,J = 7.2Hz ,Η) ,6.65(d ,J = 7.5Hz ,Η) ,6.50(s ,Η), 3.74(s，6H)，2.75(t，J = 8.2Hz，2H) ,2.14(t，J = 8.2Hz，2H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 164.5,152.3,149.2,147.8,145.2,138.6,132.9,130.1,128.7,127.1,125.2,124.1， 121.3,99.9,93.7,57.1,56.8,28.8,19.l；HRMS(ESI)m/z:389.80[M+H]+,Microanalysis calculated for C19H17CIN2O5(388.80), C: 58.69% ,H: 4.41 % ,N: 7.21 % .Found C: 58.72% ,H:4.49% ,N:7.25% .
[0176] 實施例20
[0177] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-肟(Sag)的合成：
[0178] 起始原料為2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮(5ag)(lmmol) 和鹽酸羥胺(2mmol)，其它同實施例11，產率為54%。
[0179] 1^:98-991^? NMR(500MHz，CDC13)S:8.45(s，H)，7.32(s，H)，7.22((1,J = 8.2Hz， H)，7.10(s，H)，6.75(d，J = 8.2Hz，H)，6.48(s，H)，3.72(s，9H)，2.81(t，J = 8.0Hz，2H) ,2.09 (t，J = 8.0Hz，2H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 167.9,154.6,148.4,146.5,145.1,137.6， 131.9,130.0,128.5,126.9,125.1,124.7,120.8,98.8,95.2,56.8,56.5,56.0,25.2,19.7; HRMS(ESI)m/z :449.50[M+H] +,Microanalysis calculated for C2〇HigBrN2〇6(463.28) ,C: 51.85% ,H:4.13% ,N:6.05% .Found C:51.59% ,H:4.29% ,N:6.14% .
[0180] 實施例21
[0181] 化合物3，5-雙-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-環己酮-氧-(2-二乙基 氨基-乙基)-肟（l〇f)的合成：
[0182] 在干燥的圓底燒瓶中加干燥的丙酮10mL，烘干的碳酸鉀5_〇1，環狀烷基胺的鹽酸 鹽（1.2mmol)，2,6_雙-(2-溴-3,4,5-三甲氧基-亞芐基）-4-甲基-環己酮-肟（7f) (1. Ommol)，在無水條件下回流8小時。TLC監測反應，試驗結束后，丙酮洗滌，過濾，用堿性氧 化鋁柱純化產物，產率62 %。
[0183] 1^:106-1071^? NMR(500MHz，CDC13)S:7.12(s，2H)，6.87(s，2H)，4.51(m，2H)， 3.81(s，18H)，2.60(m，4H)，2.51(m，2H)，2.14(d，J = 8.5Hz，4H)，1.76(m，H) ;1.70(t，J = 7 · OHz，6H); 1 · 25(d，J = 8 · 5Hz，3H); 13C 匪R(500MHz，CDCI3)δ: 164 · 5，152 · 5，147 · 5，145 · 1， 140.8,135.9,132.4,104.1,98.9,72.1,56.9,56.2,55.8,52.1,48.2,42.5,30.9,17.5， 14.9;HRMS(ESI)m/z:741.52[M+H]+，Microanalysis calculated for C32H44Br2N2〇7 (740.52),C:53.52% ,H:5.99% ,N:3.78% .Found C:53.54% ,H:6.12% ,N:3.62% .
[0184] 實施例22
[0185] 化合物3，5-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-哌啶-4-酮-氧-(2-二乙 基氨基-乙基)-肟(10〇)的合成：
[0186] 起始原料為3，5_雙-(2-溴_3,4，5_三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-哌啶-4-酮-肟(7〇) (lmmol)和環狀烷基胺的鹽酸鹽（1.2mmol)，其它同實施例21，產率為50%。
[0187] 3.78(s，18H)，2.62(s，4H)，2.55(m，2H)，2.42(m，4H)，2.19(s，3H)，1.75(t，J=7.0Hz，6H); 13C 匪R(500MHz，CDC13)S:164.7，151.3，147.8，145.5，141.4，135.9，132.0，104.7,99.6， 72.2.56.8.56.6.56.2.52.0. 48.4.42.1.17.7.14.4；HRMS(ESI)m/z:742.55[M+H]+, Microanalysis calculated for C32H43Br2N3〇7(741.51) ,C:51.83% ,H:5.85% ,N:5.67% .Found C:51.89% ,H:5.92% ,N:5.52% .
[0188] 實施例23
[0189] 化合物2-( 2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6， 9-二甲氧基-四氫萘酮-氧-(2-二乙 基氨基-乙基)-肟(llx)的合成：
[0190] 起始原料為2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮-肟(8x) (lmmol)和環狀烷基胺的鹽酸鹽（1.2mmol)，其它同實施例21，產率為49%。
[0191] Mp: 12卜 匪R(500MHz，αχη3)δ:7· 25(s，H)，7.02((1, J = 8.0Hz，H)，6.91 (s,H) ,6.65(d ,J = 8.0Hz,H) ,4.50(m, 2H), 3.68(s , 15H), 2.87( t ,J = 8.0Hz , 2H), 2.55(m, 2H)，2.40(m，4H)，2.08(t，J = 8.0Hz，2H);1.70(t，J = 7.0Hz，6H);13C NMR(500MHz，CDC13)S: 170.2.153.5.148.7.146.1.145.2.135.6.131.0. 129.5.127.2.126.2.125.0.124.1， 118.4.98.2.95.1.72.5.56.8.56.2.56.0. 55.5.55.2.52.4.48.8.25.1.19.9.14.2；HRMS (ESI )m/z : 578.55[M+H]+,Microanalysis calculated for C2sH37BrN2〇6(577.51), C: 58.23% ,H:6.46% ,N:4.85% .Found C:58.25% ,H:6.72% ,N:4.75% .
[0192] 實施例24
[0193] 化合物2-(2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-氧-( 2-二乙基氨基_ 乙基)_肟(llaf)的合成：
[0194] 起始原料為2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮_肟(8&〇(1111111 〇1) 和環狀烷基胺的鹽酸鹽(1.2_〇1)，其它同實施例21，產率為47%。
[0195] 1^:117-1181^4^^(50010^,0)(:13)3:7.29(8,10,6.99((1,1 = 8.01^,10,6.89 (d,J = 8.0Hz,H) ,6.72(d,J = 8.0Hz,H) ,6.58(d,J = 8.0Hz,H) ,6.40(s,H) ,4.55(m,2H), 3.68(s,6H) ,3.10(t,J = 8.4Hz,2H) ,2.52(m,2H) ,2.43(m,4H) ,2.12(t,J = 8.2,2H) ,1.75 (t，J = 7.0Hz，6H) ;13C 匪R(500MHz，CDC13)S: 169.5,154.5,148.0,146.9,145.1,136.8, 132.0. 129.2.128.5.125.5.124.9.124.1.118.9.98.9.95.2.72.5.56.9.56.1.52.0.48.2， 25.5,20.6,15.1；HRMS(ESI)m/z:488.98[M+H]+,Microanalysis calculated for C25H3〇C1N3〇5(487.98),C:61.53% ,H:6.20% ,N:8.61% .Found C: 61.55% ,H: 6.25% ,N: 8.55% .
[0196] 實施例25
[0197] 化合物2-(2-溴-3，4, 5-三甲氧基-亞芐基）-8-硝基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨 基-乙基)-肟(llag)的合成：
[0198] 起始原料為2-(2-溴-3，4,5-三甲氧基-亞芐基）-8_硝基-四氫萘酮-肟（8ag) (lmmol)和環狀烷基胺的鹽酸鹽（1.2mmol)，其它同實施例21，產率為42%。
[0199] Mp: 119-1201^? 匪R(500MHz，αχη3)δ:7· 24(s，H)，7.05((1, J = 8.0Hz，H)，6.90 (s，H)，6.68(d，J = 8.0Hz，H)，6.42(s，H)，4.59(m，2H)，3.64(s，9H)，3.12(t，J = 8.4Hz，2H)， 2.58(m，2H)，2.41(m，4H)，2· 10(t，J = 8.2,2H) ,1.72(t，J = 7.0Hz，6H) ;13C 匪R(500MHz， CDC13)δ :169.9,153.5,148.2,146.8,145.9,136.2,131.3,129.9,128.4,126.5,125.2, 124.0,119.1,98.5,94.0,72.4,56.9,56.4,56.0,52.1,48.1,25.7,20.2,14.9；HRMS(ESI) m/z :563.44[M+H] + ,Microanalysis calculated for C26H32BrN3〇6(562.45) ,0:55.52% ,H: 5.73% ,N:7.47% .Found C:55.59% ,H:5.92% ,N:7.62% .
[0200] 對如下人體癌細胞的抗惡性細胞增生的活性:前列腺癌細胞(PC-3)、結腸癌細胞 (HT-29)、乳腺癌細胞(MCF-7)、肺癌細胞(H-460)、上皮癌細胞(A-549)、胰腺癌細胞(PaCa-2)和胰腺癌細胞株(Panc-1)進行了碘化物(PI)的熒光測定。所得數據見表1所示。
[0201] 表1
[0202]
[0203]
[0204]
[0205] 普遍地，測試的化合物對不同癌細胞表現出相似的抗惡性細胞增殖活性，它們對 各種癌細胞抑制活性平均方差小于8%。環己酮衍生物中三個最活躍的化合物(4c，4f，4o) 顯示出潛在的抑制癌細胞生長的能力。化合物4f、4o顯示出對所用癌細胞系最大的抗癌活 性，IC 5Q在1.1±0.2和1.9±0.8μΜ之間。另外，化合物4c也顯示出對結腸癌細胞系的強的抑 制活性，IC 5〇達2.0 ± 1.5μΜ。這些化合物對七種癌細胞系有相似的抑制效果。
[0206] 5f、5i、5o、5u、5x、5af、5ag這7種四氫萘酮的衍生物也顯示出潛在的抑制癌細胞系 生長的作用。5ag顯示出對胰腺癌細胞株最佳的抗癌潛能，IC5Q為1.2 ±0.9μΜ。僅次于5ag，5〇 的抗癌活性IC5〇為1.4±0.5μΜ。衍生物5丨、5&廠5匕511、51也顯示出引人注目的抗癌效果。之 后，我們通過3個4(c，f，〇)最具活性的環己酮的衍生物與7個5(f，i，o，u，x，af，ag)最具活性 的四氫萘酮的衍生物合成了 10個新的肟類似物。新合成的10個肟類似物通過7種癌細胞株 進行抗惡性細胞增生的測試，所有的化合物顯示出對7種癌細胞系的抗癌活性的IC5Q為0.02 ±0.08以]?與2.9±0.24]\1之間。
[0207]最具活性的肟類似物被選作合成肟醚的類似物，并且合成的類似物也進行了抗癌 活性的測試。然而，得到的肟醚類似物抗癌活性較差。
[0208]選擇其中抗癌潛能最佳的10個化合物進行對微管蛋白聚合酶的作用效果測試，實 驗結果如圖1所示。大多數化合物表現出對微管蛋白聚合酶的作用效果，化合物7f，8f顯示 出很強的抑制微管蛋白聚合酶組裝的性能，根據碘化物熒光分析結果，僅有兩個化合物 (7〇，10〇)沒有顯示出抑制微管蛋白聚合酶組裝的性能，說明細胞毒性和抑制微管蛋白聚合 酶是不同的過程。與化療藥物多烯紫杉醇相比，我們合成的化合物沒有顯示出穩定微管蛋 白聚合酶的行為。
[0209] 對這十種化合物進行表皮生長因子受體抑制活性、BRAFV6(X^m制活性、多藥耐藥逆 轉活性的相關測試。所得數據見表2所示。
[0210] 表2
[0211]
[0212] 從表2可知，這十種化合物具有很強的表皮生長因子受體的抑制活性，半數抑制濃 度在0.07 ±0.03與8.4±0.2μΜ之間。根據測試結果，我們發現化合物7〇和10〇是最有效的， 表皮生長因子受體的IC5Q在0.07±0.03μΜ與0.1±0.05μΜ之間，它們的表皮生長因子受體抑 制活性均類似于陽性對照厄洛替尼（Ι(^ = 0.05±0.02μΜ)。該實驗表明α，β不飽和羰基化合 物、肟類似物和肟醚類似物是強效表皮生長因子受體抑制劑，并有可能被用作抗腫瘤藥物。
[0213] 體外分析測定了這1〇種最具抗癌活性的合成化合物對BRAF_%抑制活性。根據 測試結果，所用測試的化合物顯示出半數抑制濃度在0.9±0.4與6.3±0.4μΜ之間。基于α，β 不飽和羰基化合物合成的肟類似物顯示出很強的BRAFV6_的抑制活性。有趣的是，8af，8ag 顯示出幾乎相同的BRAFV_的抑制活性，同時發現具有抑制癌細胞增值的潛能。這些發現表 明，這類化合物是潛在的抗癌試劑且能有效地抑制BRAF酶。
[0214] 通過羅丹明積累測試，研究合成的化合物(在非毒性濃度)對癌細胞多藥耐藥蓄積 的影響。通過臺盼藍實驗研究這些化合物的毒性作用。四氫萘酮結構的8(f，i，o，u，x，af， ag)的肟類似物活性最佳，7f，7o，10o幾乎是無效的。沒有化合物對人mdrl基因轉染的小鼠 淋巴瘤細胞無效。傳統化療劑與反轉修飾的組合可用于治療多藥耐藥癌細胞。因此，具有既 可作為強效抗癌藥物，又可作為多藥耐藥逆轉試劑的雙重特性的化合物在未來的癌癥治療 中應用前景廣闊。
[0215] 本發明合成的一系列α，β_不飽和羰基化合物、肟、肟醚及其衍生物用人癌細胞系 體外評估其抗增殖活性，并確定這些化合物可以作為BRAF V6_、表皮生長因子受體以及微孔 蛋白聚合酶的抑制劑。這些化合物中大部分也表現出逆轉多藥耐藥的活性。在所有實驗中 化合物8af和Sag被發現是非常有活性的。因此，本發明所提出的α，β_不飽和羰基化合物、 肟、肟醚及其衍生物具有抗癌和逆轉多藥耐藥的雙重作用效果，具有廣闊的應用前景。
【主權項】
1. α，β-不飽和化合物，其特征在于具有以下結構式：在上述結構式中，Ri代表以下基團： 亞甲基、仲氨基、R2代表以下基團： 氧原子、N-OHiR ' 3是氫原子或甲氧基;R ' 4是氫原子或甲氧基;R ' 6代表氯原子或溴原子。2. α，β-不飽和化合物，其特征在于具有以下結構式：在上述結構式中，Ri代表亞甲基或HC-CH3; 尺2、1?4、1?5、1?'3、1?'4分別是氫原子或甲氧基;1?3代表氫原子、氯原子、甲氧基、氟原子、溴原 子、硝基;R ' 6代表氯原子或溴原子； R6代表以下基閉： 氧原子、N-OHi3. α，β-不飽和化合物，其特征在于為 2,6_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)環己酮、 2，6-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)環己酮、 2,6_二(2-溴_3,4,5_三甲氧基亞芐基)環己酮、 2,6_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮、 2，6-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮、 2,6_二(2-溴_3,4,5_三甲氧基亞芐基)-4-甲基環己酮、 2，6_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)-4-異丙基環己酮、 2，6-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)-4-異丙基環己酮、 2,6_二(2-溴_3,4,5_三甲氧基亞芐基)-4-異丙基環己酮、 3，5_二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮、 3，5-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮、 3，5-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮、 3，5-二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮、 3，5_二(2-氯-3，4_二甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮、 3，5_二(2-溴-3，4,5_三甲氧基亞芐基)-1-甲基哌啶-4-酮、 1-芐基-3,5-二(2-氯-3-甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮、 1-芐基-3，5-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮、 1- 芐基-3，5-二(2-溴-3，4，5-三甲氧基亞芐基)哌啶-4-酮、 3，5-二(2-氯-3-甲氧基亞芐基）四氫吡喃-4-酮、 3，5-二(2-氯-3，4-二甲氧基亞芐基）四氫吡喃-4-酮、 3，5_二(2-溴-3，4,5_三甲氧基亞芐基）四氫吡喃-4-酮、 2- (2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-四氫萘酮、 2-(2-氯-3，4_二甲氧基-亞芐基)-四氫萘酮、 2-(2-溴-3，4_二甲氧基-亞芐基)-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3，4_二甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮、 2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-氯-四氫萘酮、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-氯-四氫萘酮、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-氯-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-6-甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-6-甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-6-甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-7,8_二甲氧基-四氫萘酮、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-7，8-二甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-7,8_二甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3，4_二甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-溴-四氫萘酮、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-溴-四氫萘酮、 2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-溴-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-氟-四氫萘酮、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-氟-四氫萘酮、 2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-氟-四氫萘酮、 2-(2-氯-3-甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮、 2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮、 2，6-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-環己酮-肟、 2，6-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-環己酮-肟、 3，5-雙-(2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-哌啶-4-酮-肟、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-4-甲基-四氫萘酮-肟、 2- (2-溴-3，4，5-三甲氧基-亞芐基)-6-羥基-四氫萘酮-肟、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-7-甲氧基-四氫萘酮-肟、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-7,8_二甲氧基-四氫萘酮-肟、 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮-肟、 2- (2-氯-3，4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-肟、 2-(2-溴-3，4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-肟、 3,5_雙-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-環己酮-氧-(2-二乙基氨基-乙基)-肟、 3，5_雙-(2-溴_3,4，5_三甲氧基-亞芐基)-1-甲基-哌啶-4-酮-氧-(2-二乙基氨基-乙 基)_月虧、 2-(2-溴-3，4,5-三甲氧基-亞芐基)-6,9_二甲氧基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨基-乙 基)_月虧、 2-(2-氯-3,4-二甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨基-乙基)-肟或 2-(2-溴_3,4,5_三甲氧基-亞芐基)-8-硝基-四氫萘酮-氧-(2-二乙基氨基-乙基)-肟。4. 權利要求1或2或3所述α，β-不飽和化合物作為預防、治療腫瘤疾病藥物的應用。5. 權利要求1或2或3所述α，β_不飽和化合物作為預防、治療耐藥性腫瘤疾病藥物的應 用。
【文檔編號】A61P35/00GK106008324SQ201610390429
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月3日
【發明人】秦華利, 冷靜, 王曉燕, 郝建宏
【申請人】武漢理工大學