一種雷公藤紅素衍生物、其制備方法及用圖

一種雷公藤紅素衍生物、其制備方法及用圖
【專利摘要】本發明公開了一種雷公藤紅素衍生物、其制備方法及用途，該雷公藤紅素衍生物具有如式Ⅰ所示的結構，其中，R1為H、烷基、鹵代的烷基、不飽和烷基、含雜原子的烷基或芳基，R2為烷基、鹵素、烷氧基、硝基，R3為H或烷基。本發明的雷公藤紅素衍生物的制備方法中，通過付克反應在雷公藤紅素的6位上引入吲哚或取代吲哚基團，反應條件溫和。本發明的雷公藤紅素衍生物用于癌癥的治療中，具有高抗癌活性、低毒性、副作用小、結構穩定的特點。
【專利說明】
一種雷公藤紅素衍生物、其制備方法及用途
技術領域
[0001] 本發明涉及一種雷公藤紅素衍生物、其制備方法及用途。
【背景技術】
[0002] 癌癥是世界嚴重的公共衛生問題，據國際癌癥研究機構公布的2008年的統計數 據顯示，每年全球約760萬人死于癌癥。目前臨床常用的腫瘤治療方法包括手術、化學治療 (化療）、放射治療（放療）和生物治療等。
[0003] 目前，利用外科手術徹底掃除癌灶仍是癌癥治療的首選方法。目前，腫瘤治療藥 物種類主要有7類：烷化劑、抗代謝藥物、抗生素類、植物類、小分子靶向治療藥物及其它類 等。在眾多抗癌藥中，植物來源的抗癌藥一直是國際抗癌藥物市場上一大類主導產品，喜樹 堿、紫杉醇等是均為著名的抗癌藥的先導化合物，其衍生物己經在臨床上作為治療癌癥的 化療的一線藥物使用。隨著腫瘤發病率的增加、變化，開發低毒高效的抗腫瘤藥物已經成為 癌癥治療的迫切需求。
[0004] 雷公藤紅素（Celastrol)是一種從中藥雷公藤、扁塑藤的根中提取并分離獲得的 五環三萜類化合物，具有多種生物活性，如：抗炎、抗腫瘤、抗真菌、抗氧化等作用，其作用靶 點有：NF-Kb、Notch、HSP90, (Mc37, ρ23, ΙΚΚβ，proteasome, Bcr-Abl, and p-Akt 等。由于 雷公藤紅素具有多種生物活性，因此也帶來了大量的副作用，以及其低溶解性而限制了其 在臨床上的應用。
[0005] 雷公藤紅素的副作用主要來源于其結構中的醌甲基結構，醌甲基結構可以與體內 分布廣泛的半胱氨酸殘基發生加成反應，從而產生不同的副作用，因此，如何有效的保持化 合物活性，且獲得安全的目標化合物成了該化合物的研究方向。
[0006] 針對雷公藤紅素的副作用及低溶解性，有文獻報道在雷公藤紅素的29位羧酸基 團引入不同的基團以改變其溶解性。中國專利CN102796254A引入聚乙二醇將其制成聚乙 二醇酯，雖然水溶性增加，但是其活性僅為雷公藤紅素的3~5% ;中國專利CN101311187A 引入長鏈烷烴以增加其脂溶性，在29位制成長鏈酯，但其抗癌活性略微弱于雷公藤紅素 (雷公藤紅素十六醇酯和雷公藤紅素同劑量下，對U-14宮頸癌的抑制率分別為63. 2%和 55. 3% )等；王家強等在29位進行酯化和酰胺化，發現其活性均弱于雷公藤紅素（中草藥， 2009(40)2 :201-204)。
[0007] 中國專利CN101805390A在雷公藤紅素的3位或者29位進行酯化，得到雷公藤紅 素衍生物，雖然其抗腫瘤活性基本與雷公藤紅素類似，或者其抗腫瘤活性弱于雷公藤紅素 (Cel-Ι~Cel-13對C6細胞的抑制作用均弱于雷公藤紅素）。
[0008] 但是，上述諸多研究中涉及的雷公藤紅素衍生物由于仍然保留雷公藤紅素的醌甲 基結構，因此仍存在許多毒性反應。
[0009] 孫紅莉在雷公藤紅素的2位與鹽酸羥胺制成肟（孫紅莉，雷公藤紅素衍生物的化 學合成及其活性研究[D]，暨南大學，2011)，雖然對醌甲基結構進行了改變，但其對PC12和 C6兩種細胞的IC50均大于50,已失去抗癌活性。
[0010] 世界專利W02009067891在雷公藤紅素的6位與亞硫酸鹽反應制成水溶性的雷公 藤紅素衍生物，在雷公藤紅素的6位引入亞硫酸鈉后，可能因為其溶解性增加，導致生物利 用度增加，其抗癌活性有不同程度的增加。由于雷公藤紅素的A/B環為麥克爾加成反應受 體，在6位引入亞硫酸鹽加成后，在體內通過逆麥克爾反應而釋放出雷公藤紅素，從而增加 了活性。但是，雷公藤紅素亞硫酸鹽中存在硫醚鍵，硫醚鍵不穩定，容易被氧化，其成藥性降 低。

【發明內容】

[0011] 本發明的目的在于提供一種雷公藤紅素衍生物，其制備方法及用途，通過付克反 應在雷公藤紅素的6位上引入吲哚或取代吲哚基團，反應條件溫和，該雷公藤紅素衍生物 具有高抗癌活性、毒性降低，副作用小以及結構穩定的特點。
[0012] 為了達到上述目的，本發明的技術方案如下：
[0013] -種雷公藤紅素衍生物，具有如式I所示的結構：
[0014]
[0015] 其中，Ri、R2、R3為各自獨立的基團，三者相同或不同，R 2為吲哚環的第1位氮原子、 第2、4、5、6、7位碳原子上任意位點的一個或兩個取代基團；
[0016] 札為H、烷基、鹵代烷基、不飽和烷基、含雜原子的烷基或芳基；
[0017] 私為H、烷基、鹵素、烷氧基或硝基；
[0018] R3為Η或烷基。
[0019] 優選地，所述的烷基具有1~6個碳原子。
[0020] 優選地，所述的私為H、F、Cl、Br、甲氧基、甲基或乙基。
[0021 ] 優選地，所述的雷公藤紅素衍生物選自以下化合物：
[0022]
[0024] 本發明還提供一種雷公藤紅素衍生物的制備方法，包括如下步驟：
[0025] 1)將雷公藤紅素溶于有機溶劑中，加入路易斯酸催化劑及式A化合物，攪拌，進行 付克反應，得到式B化合物；其中式A化合物中的私為H、烷基、鹵素、烷氧基或硝基；雷公 藤紅素與式A化合物的摩爾比為1 :2~3 ;
[0026] 2)在無水條件下，將式B化合物溶于有機溶劑，加入無機堿和鹵代烴RJ，攪拌反 應，得到式I化合物，其中，&和R 3為各自獨立的基團，1^為Η或烷基，1?3和L相同；
[0027] 反應路線如下：
[0029] 本發明還提供另外一種雷公藤紅素衍生物的制備方法，其特征在于，包括如下步 驟：
[0030] 1)將雷公藤紅素溶于有機溶劑中，加入無機堿和鹵代烴RJ，進行親核取代獲得中 間體式C化合物；
[0031] 2)式C化合物溶于有機溶劑中，加入路易斯酸催化劑及式A化合物，攪拌反應，得 到式D化合物；其中，私為H、烷基、鹵素、烷氧基或硝基；其中，式C化合物與式A化合物的 摩爾比為1 :2~3 ;
[0032] 3)在無水條件下，將式D化合物溶于有機溶劑，再加入無機堿和鹵代烴R3X，攪拌 反應，得到化合物II ;其中，&和R 3為相互獨立的基團，R i為H、烷基、鹵代的烷基、不飽和烷 基、含雜原子的烷基或芳基；私為11或烷基，RJPR3相同或不同；
[0033] 反應路線如下：
[0035] 優選地，所述有機溶劑選自二甲亞砜、N' N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿或甲醇。
[0036] 又優選地，所述路易斯酸催化劑為Sc(0Tf)3、Ln(0Tf)3、Re(0Tf) 3、Sc(0Pf)3,路 易斯酸催化劑的用量為雷公藤紅素或式c化合物的0. lmol%~lOmol%，優選2mol%~ 6mol % 〇
[0037] 再，所述的無機堿選自碳酸鉀、碳酸鈉或碳酸銫。
[0038] 本發明的雷公藤紅素衍生物應用于癌癥的治療中。
[0039] 本發明的有益效果：
[0040] 1)本發明的雷公藤紅素衍生物對雷公藤紅素的A環和B環均發生了改變。在雷公 藤紅素的6位，即B環上，成功引入吲哚環，由于吲哚環本身具有信號通路抑制而具有一定 的抗癌作用，本發明在吲哚環上進行結構改造而獲得了良好的抗癌活性，部分化合物活性 明顯優于雷公藤紅素。
[0041] 2)雷公藤紅素的副作用主要來源于其結構中A/B環上的醌甲基結構，醌甲基結構 可以與體內分布廣泛的半胱氨酸殘基發生加成反應，從而產生不同的副作用。同時，本發明 的雷公藤紅素衍生物改變了雷公藤紅素的A/B環，使A環芳構化，且對A環的鄰二酚進行烷 基化，使該衍生物不含有易產生副作用的醌甲基結構，因此，本發明的雷公藤衍生物的毒性 降低。
[0042] 3)本發明通過付克反應，在雷公藤紅素的第6位碳原子上引入吲哚類衍生物，并 以C-C鍵形式將吲哚類衍生物連接至雷公藤紅素的6位，而碳-碳鍵的穩定性優于碳-硫 鍵，因此，化合物穩定好。
【具體實施方式】
[0043] 為了進一步了解本發明，下面結合實施例對本發明優選實施方案進行描述，但是 應當理解，這些描述只是為進一步說明本發明的特征和優點，而不是對本發明權利要求的 限制。
[0044] 路線一
[0045] 實施例1札=R 2 = R 3 = Η時，化合物1的制備
[0046] 反應式如下：
[0047]
[0048] 將雷公藤紅素（l.Oeq)溶于無水二氯甲烷中，加入吲哚（2. Oeq)及催化劑 Sc(0Tf)3(5mol% )，常溫反應24小時，TLC檢測反應，反應結束后，旋干溶劑，以柱層析 的方法（石油醚/丙酮=3/1)得到化合物1(收率78%，純度99.2% ) :mpll4-116°C ; [α ] 20 D-89. 78 。 （MeOH，c = 0· 2)，Α-Μ? (300MHz，CDC13) δ 7. 87 (s，1Η)，7. 78 (d，J = 7. 2Ηζ, 1Η), 7. 34 (d, J = 7. 5Hz, 1H), 7. 15-7. 20 (m, 2H), 6. 83 (s, 1H), 6. 32 (s, 1H), 6. 23 (d, J =6. 3Hz, 1H), 4. 94 (d, J = 5. 7Hz, 1H), 2. 41 (d, J = 15. 6Hz, 1H), 2. 03-2. 11 (m, 3H), L 95 (s, 3H), 1. 40-1. 68 (m, 8H), 1. 38 (s, 3H), 1. 31-1. 23 (m, 2H), 1. 16 (s, 3H), 1. 02 (s, 3H), 0. 94 -0· 89 (m, 1H)，0· 75 (s, 3H) · HRMS (ESI-) m/z calcd for C3SH46N06[M+C00H] 612. 3331，found 612. 3325〇
[0049] 實施例2 R1= R3= H，R2= -CH3，R2取代吲哚環的7位上的H時，化合物2的制備
[0050] 反應式如下：
[0051]
[0052] 除將實施例1中的吲哚替換為7-甲基吲哚外，其余反應條件均與實施例1相 同，得到化合物 2 (收率 65 %，純度 98. 5 % ) :mp92-94 °C ; [ α ] 20 D-78. 39 ° (MeOH，c =0.2),4-^1^(30010^,0)(:13)7.72(8,111),6.62((1,1 = 7·8Ηζ，1Η) ,6.99-7. 10 (m，2H)， 6. 84 (s, 1H), 6. 33 (d, J = 1. 8Hz, 1H), 6. 21 (d, J = 6. 3Hz, 1H), 4. 93 (d, J = 6. 3Hz, 1H), 2. 4 6 (s, 3H), 2. 39-2. 43 (dd, J = 15. 0Hz, 0. 6Hz, 1H), 2. 03-2. 06 (m, 3H), 1. 96 (s, 3H), 1. 46-1. 73 (m, 9H), 1. 38 (s, 3H), 1. 16 (s, 3H), 1. 02 (s, 3H) ,1.01 (s, 3H), 0. 88-0. 93 (m, 1H), 0. 73 (s, 3H).HRMS(ESI)m/z calcd for C3SH47N04Na[M+Na]+604. 3396, found 604.3397。
[0053] 實施例3平行反應
[0054] 參照實施例1中化合物1的制備方法，利用相應的取代吲哚作為反應底物，進行反 應，得到化合物3~11，結構式如下：
[0056] 部分化合物分析數據：
[0057] 化合物 4 :mp96-98°C ; [ a ]20 D-66. 31。（MeOH，c = 0· 2)，Α-ΜΚΟΟΟΜΗζ，CDC13) δ 7. 94 (s, 1Η), 7. 87 (s, 1H), 7. 22 (m, 3H), 6. 83 (s, 1H), 6. 32 (s, 1H), 6. 14 (d, J = 6. 2Hz, 1H), 4. 86 (d, J = 5. 8Hz, 1H), 2. 41 (m, 2H), 2. 15 - 1. 96 (m, 2H), 1. 93 (s, 3H), 1. 80 -1. 41 (m, 8H), 1. 37 (s, 3H), 1. 31-1. 22 (m, 2H), 1. 17 (s, 3H), 1. 04 (s, 3H), 1. 02 (s, 3H) ,0.98- 0. 87(m, 1H), 0. 73(s, 3H). HRMS(ESI)m/z calcd for C37H44FN04Na[M+Na]+608. 3147, found 608. 3141.
[0058] 化合物 6 :πιρ90-92Γ ; [ a ] 20 D-90. 36。（MeOH, c = 0· 2)，i-NMRGOOMHz，CDC13) δ 7. 85 (s, 1H) , 7. 62 (dd, J = 8. 6, 5. 3Hz, 1H) , 7. 06 - 6. 78 (m, 3H) , 6. 29 (d, J =1. 1Hz, 1H), 6. 17 (d, J = 6. 3Hz, 1H), 4. 89 (d, J = 6. 1Hz, 1H), 2. 40 (d, J = 15. 1Hz, 2H), 2. 10-2. 01 (m, 3H), 1. 95 (s, 3H), 1. 78 - 1. 39 (m, 9H), 1. 35 (s, 3H), 1. 32 - 1. 24(m, 1H), 1. 15(s, 3H), 1. 02 (s, 3H), 1. 01 (s, 3H), 0. 94 - 0. 85 (m, 1H), 0. 72 (s, 3H). HRMS (ESI)m/z calcd for C3SH47N05Na[M+Na]+620. 3344, found 620. 3346.
[0059] 化合物 10 :mp98-100 °C ; [ a ] 20 D-69. 7 1 ° (Me0H，c = 0· 2)，iH-NMR (300MHz，CDC13) δ 7. 82 (s，1H)，7. 62 (d，J = 8. 4Hz，1H)，7. 32 (s，1H)，7. 10 (d，J =8. 3Hz, 1H), 6. 83 (s, 1H), 6. 33 (s, 1H), 6. 16 (d, J = 6. 4Hz, 1H), 4. 89 (d, J = 6. 2Hz, 3H), 2. 40 (d, J = 15. 3Hz, 1H), 2. 10-2. 04 (m, 3H), 1. 95 (s, 3H), 1. 68-1. 43 (m, 9H), 1. 35 (s, 3H), 1. 26-1. 22 (m, 3H), L 16 (s, 3H), 1. 03 (s, 3H), 1. 00 (s, 3H), 0. 9〇-〇. 87 (m, 2H), 0. 7 2(s，3H).HRMS(ESI)m/z calcd for C37H44ClN04Na[M+Na]+624. 2861，found 624.2851。
[0060] 實施例4 R1= R 3= -CH 3, R2= -CH 3,且R2取代吲哚環2位上的H時，化合物12的 制備
[0061] 反應式如下：
[0062]
[0063] 將化合物3 (1. Oeq)溶于無水DMF中，加入K2C03 (4. Oeq)和Mel (3. 6eq)，氮氣保護 下室溫反應過夜，TLC檢測反應，反應結束后，加入水，析出固體，抽濾，固體用甲醇溶解后， 柱層析純化（石油醚/丙酮），得到化合物12。
[0064] 實施例5平行反應
[0065] 參照實施例4中化合物12的制備方法，利用相應的反應底物，進行烷基化反應，得 到化合物13~21，結構式如下：
[0067] 部分化合物分析數據：
[0068] 化合物 13 :mpl42_144 °C ; [ α ] 20 D-72. 37 。 （MeOH，c = 0. 2), ^-NMR (300MHz, CDC13) δ 7. 80 (s, 1H) , 7. 64-7. 60 (m, 1H) , 7. 00 (d, J = 9. 9Hz, 1H), 6. 96 - 6. 81 (m, 2H), 6. 28-6. 27 (m, 1H), 6. 18 (d, J = 5. 9Hz, 1H), 4. 88 (d, J =6. 0Hz, 1H), 3. 91 (s, 3H), 3. 75 (s, 3H), 3. 55 (s, 3H), 2. 42 (d, J = 16. 2Hz, 1H), 2. 16 -2. 01 (m, 3H), 1. 98 (s, 3H), L 81 - 1. 42 (m, 8H), 1. 41 (s, 3H), 1. 38-1. 25 (m, 1H), 1. 16 (s, 3H), 1. 04 (s, 3H), L 〇2 (s, 3H), 0. 98 - 0. 80 (m), 0. 63 (s, 3H). HRMS (ESI) m/z calcd for C40H50FNO 4Na[M+Na]+650. 8175, found 650. 8169〇
[0069] 化合物 15 :mpl 1 1-1 13 °C ; [ a ] 20 D-85. 77 。 （Me0H，c = 0. 2), ^-NMRCSOOMHz, CDC13) δ 7. 64(d, J = 8. 1Hz, 2H), 7. 14 (s, 1H), 7. 00 (d, J = 7. 8Hz, 1H), 6. 85 (s, 1H), 6. 22 (d, J = 6. 0Hz, 2H), 4. 90 (d, J = 6. 1Hz, 1H), 3. 91 (s ,3H), 3. 75 (s, 3H), 3. 56 (s, 3H), 2. 47 (s, 3H), 2. 45 - 2. 40 (m, 1H), 2. 19 - 2. 02 (m, 4H) , 1. 99 (s, 3H) , 1. 77-1. 49 (m, 8H) , 1. 42 (s, 3H) , 1. 38 - 1. 26 (m, 2H) , 1. 17(- s, 3H), L 〇4 (s, 3H), L 〇2 (s, 3H), 0. 98 - 0. 92 (m, 1H), 0. 64 (s, 3H). HRMS (ESI) m/z calcd for C41H53N04Na[M+Na]+646. 3865, found 646. 3867 〇
[0070] 化合物 18 :mpl08_l 10 °C ; [ a ] 20 D-93. 86 。 （MeOH,c = = 8. 9Hz，lH), 7.14 (d，J = 1.9Hz ,1H), 6. 87-6. 84(m, 2H), 6. 32(d, J = 2. 2Hz, 1H), 6. 20 (d, J = 6. 2Hz, 1H), 4. 88 (d, J = 5. 9Hz, 1H), 3. 91 (s, 3H), 3. 89 (s, 3H), 3. 75 (s, 3H), 3. 56 (s, 3H), 2. 45-2. 41 (m, 1H), 2. 14 - 2. 10 (m, 3H), 1. 99 (s, 3H), L 83 - 1. 50 (m, 8H), 1. 43 (s, 3H), 1. 39-1. 26 (m, 2H), 1. 17 (s, 3H), 1. 05 (s, 3H), L 〇4 (s, 3H), 0. 97-0. 92 (m, 1H), 0. 65 (s, 3H). HRMS (ESI) m/z calcd for C41H53N 05Na[M+Na]+662. 3836, found 662. 3816〇
[0071] 化合物 2 1 : · mp84_86 °C ; [ a ] 20 D-76. 73 ° (MeOH，c = 0.2), ^-NMR (300MHz, CDC13) δ 7. 81 (s, 1H) , 7. 6 5-7. 60 (m, 1H) , 7. 01 (d, J = 9. 5Hz, 1H), 6. 90 (dd, J = 19. 1, 7. 8Hz, 2H), 6. 28 (d, J = 1. 1Hz, 1H), 6. 19 (d, J = 6. 1Hz, 1H), 4. 89 (d, J = 5. 9Hz, 1H), 3. 91 (s, 3H), 3. 76 (s, 3H), 3. 56 (s, 3H), 2. 43 (d, J = 15. 5Hz, 1H), 2. 14-2. 04 (m, 3H), 1. 99 (s, 3H) 1. 69 - 1. 49 (m, 8H), 1. 41 (s, 3H), 1. 37-1. 26 (m, 1H), 1. 17 (s, 3H), L 〇5 (s, 3H), 1. 03 (s, 3H), 0. 97-0. 93 (m, 1H), 0. 64 (s, 3H). HRMS (ESI) m/z calcd for C40H51FN04[M+H] 628. 3797, found 628. 3786〇
[0072] 路線二
[0073] 實施例6 R1= -CH 2CH3, R2= H，R 3= H時，化合物22的制備
[0074] 反應式如下：
[0076] 雷公藤紅素（leq)溶于DMF中，加入碳酸鈉（5eq)，加入1-碘代乙燒（5eq)后，室 溫反應過夜，加入水和乙酸乙酯，分出有機層，有機層用飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉干燥， 旋干，柱層析純化（乙酸乙酯/正己烷），得到中間體化合物22-1。
[0077] 將中間體化合物22-1 (1. Oeq)溶于無水二氯甲烷中，加入吲哚（2. Oeq)及催化劑 Sc (OTf) 3 (5mol % )，常溫反應24小時，TLC檢測反應，反應結束后，旋干溶劑，以柱層析的方 法（石油醚/丙酮）得到化合物22。
[0078] 實施例7平行反應
[0079] 參照實施例6中間體化合物22-1的制備方法，利用相應的反應底物，進行親核取 代反應，得到中間體化合物23-1~27-1，結構式如下：
[0080]
[0081] 參照實施例6中化合物22的制備方法，利用相應的反應底物進行付克反應，獲得 化合物28~36。
[0082]
[0083] 部分化合物分析數據：
[0084] 化合物 23-1 :MS (El) [M+H] +m/z 493. 6, iH-NMR (CDC13, 400MHz) δ 7. 03 (1H, dd)，6. 6 0 (IH, d), 6. 36 (IH, d), 3. 95 (2H, m), 1. 85 (1H, m), 1. 73 (1H, m), 2. 23 (3H, s), 1. 48 (3H, s), 1. 2 5(3H, s), 1. 20 (3H, s), 1. 10 (3H, s), 0. 95 (3H, s), 0. 91 (3H, s). HRMS(m/z) : [M+H]+calcd for C32H4504, 493. 3240, found493. 3235。
[0085] 化合物 25-1 :MS (El) [M+H] +m/z 542. 0· ^-NMR (CDC13, 400MHz) δ 7. 62 (2H，m)，7. 25 (3H, m), 6. 96 (IH, d), 6. 29 (IH, d), 5. 43 (IH, m), 4. 97 (IH, d), 4. 85 (IH, d), 2. 10 (3H, s), L 53 (3H，s)，1· 36 (3H，s)，1· 14 (3H，s)，1· 04 (3H，s)，0· 45 (3H，s) · HRMS (m/z) : [M+H] +calcd for C 36H4404, 540. 5350, found，540. 5351。
[0086] 化合物 28 :MS(EI) [M+H]+m/z 624. 9. ^-NMRGOOMHz，CDC13)7. 71 (s，1H)，6. 63( d，J = 7.8Hz，lH)，6.89-7.11(m，2H)，6.85(s，lH)，6.34(d，J = 1.8Hz，lH)，6.21(d，J = 6. 3Hz, 1H), 4. 93 (d, J = 6. 3Hz, 1H), 3. 91 (2H, m), 2. 46 (s, 3H), 2. 39-2. 43 (dd, J = 15. 0Hz, 0 .6Hz, 1H), 2. 03-2. 05 (m, 3H), L 95 (s, 3H), 1. 46-1. 71 (m, 9H), L 34 (s, 3H), 1. 15 (s, 3H), 1. 0 5 (s, 3H), L 〇l (s, 3H), 0. 88-0. 93 (m, 1H), 0. 63 (s, 3H). HRMS (m/z) : [M+H]+calcd forC36H4404, 624. 3975, found, 624. 3974。
[0087] 化合物 33 JH-匪R(300MHz，CDC13) δ 7. 87 ~7. 38(m，4H)，7. 64(dd，J = 8. 6, 5. 3Hz, 1H), 7. 04 - 6. 85 (m, 3H), 6. 33 (s, 1H), 6. 21 (d, J = 6. 2Hz, 1H), 4. 92 (d, J = 6. 1Hz, 1H), 2. 45 - 2. 41 (m, 2H), 2. 15 - 2. 02 (m, 2H), 1. 93 (s, 3H), 1. 37 (s, 3H), 1. 28 - 1. 25 (m, 1H), 1. 16 (s, 3H), 1. 07 (s, 3H) ,1.01 (s, 3H), 0. 95 - 0. 90 (m, 1H), 0. 75 (s, 3H). HRMS(ESI-)m/z calcd for C44H49FN04[M-H] 674. 3722, found674. 3734〇
[0088] 實施例8 R1= -CH 2CH3, R2= -CH 3,且R2取代吲哚環上2位的H，R 3= -CH 3時，化 合物37的制備
[0089] 反應式如下：
[0090]
[0091] 參照實施例6中22-1進行反應，合成中間體36-1，再參照實施例6中的化合物22 的制備進行反應，合成化合物36。再參照實施例4中化合物12的反應條件，進行烷基化反 應，獲得化合物37。
[0092] 實施例9平行反應
[0093] 參照實施例8中化合物37的合成，先進行相應的中間體化合物的制備，再進行烷 基化反應，獲得化合物38~44。
[0094]
[0095] 部分化合物結構數據
[0096] 化合物 38 ^H-NMR (300MHz, CDC13)1H-NMR(300MHz, CDC13) δ 7. 71 (s, 1H), 7. 21 (m, 1H), 7. 14 (d, J = 1. 9Hz, 1H), 6. 87-6. 83 (m, 2H), 6. 35 (d, J = 2. 2Hz, 1H), 6. 20 (d, J = 6. 2Hz, 1H), 4. 88 (d, J = 5. 9Hz, 1H), 3. 91 (s, 3H), 3. 89 (s, 3H), 2. 4 5-2. 41 (m, 1H), 2. 14 - 2. 10 (m, 3H), 1. 99 (s, 3H), 1. 83 - 1. 50 (m, 10H), 1. 43 (s, 3H), 1. 39-1. 26 (m, 2H), 1. 17 (s, 3H), 1.05(s, 3H), 1.04(s, 3H), 0.97-0. 92 (m, 1H),0. 71(s, 3H), 0. 65 (s, 3H). HRMS(ESI)m/z calcd for C42H55FN04[M+H]+656. 4035, found 656. 4033〇
[0097] 化合物 42 "H-NMR (300MHz, CDC13) δ 7. 73 (s, 1H)，7. 22 (d, J = 8. 9Hz, 1H), 7. 11 (d, J = 1. 9Hz, 1H), 6. 87-6. 83 (m, 2H), 6. 32 (d, J = 2. 2Hz, 1H), 6. 21 (d, J =6. 2Hz, 1H), 4. 89 (d, J = 5. 9Hz, 1H), 3. 91 (s, 3H), 3. 84 (s, 3H), 3. 77 (s, 3H), 2. 45-2. 48 ( m, 1H), 2. 14 - 2. 120 (m, 3H), 2. 01 (s, 3H), 1. 83 - 1. 54 (m, 10H), 1. 41 (s, 3H), 1. 39-1. 26 (m, 2 H), 1. 17 (s, 3H), 1. 05 (s, 3H), 1. 04 (s, 3H), 0. 97-0. 92 (m, 1H), 0. 75 (s, 3H), 0. 65 (s, 3H). 13. HRMS(ESI-)m/z calcd for C42H56N05[M+H]+653. 9087, found 653. 9085〇
[0098] 實施例10本發明的雷公藤紅素衍生物對腫瘤細胞的抑制作用驗證
[0099] 體外培養人肝癌細胞株Bel7402和人腦神經膠質瘤細胞株H4,細胞生長至對 數生長期后，收集細胞，lOOOrpm離心5分鐘，棄上清，適量培養基懸浮，調整細胞濃度至 3. 5 X 104/ml。將細胞懸液接種到96孔細胞培養板中，每孔100 μ 1，放置細胞培養箱（37°C， 5% C02)中培養24小時后，加入待測藥物，陰性對照組加入終濃度為0. 5 % DMS0,各組均 設3個復孔。培養箱中培養72小時后，每孔加入5mg/ml的ΜΤΤ 20μ1，于培養箱（37°C， 5% C02)放置4h。每孔加入150 μ 1 DMS0,于37°C搖床振蕩5分鐘，492nm/620nm測吸光度 (0D)。運用Prism Graphpad統計軟件計算IC50值，結果見表1。
[0100] 表 1
[0101]
[0102] 由表1數據可知，本發明部分化合物活性強于雷公藤紅素（化合物17、40)，或者活 性與雷公藤紅素相當（8、11、15、37、42)。本發明的雷公藤紅素衍生物對雷公藤紅素的A環 和B環進行了改變，去除了醌甲基結構與體內分布廣泛的半胱氨酸殘基發生作用而產生的 副作用，毒性降低；且引入吲哚環，利用吲哚環本身具有的信號通路抑制作用增加或保持了 雷公藤紅素的抗癌活性。
【主權項】
1. 一種雷公藤紅素衍生物，其特征在于：具有如式I所示的結構：其中，Rn R2、Rs為各自獨立的基團，S者相同或不同，Rz為嗎I噪環的第1位氮原子、第 2、4、5、6、7位碳原子上任意位點的一個或兩個取代基團； Ri為H、烷基、面代烷基、不飽和烷基、含雜原子的烷基或芳基； Rz為H、烷基、面素、烷氧基或硝基； Rs為H或烷基。2. 根據權利要求1所述的雷公藤紅素衍生物，其特征在于，所述的烷基具有1~6個碳 原子。3. 根據權利要求1所述的雷公藤紅素衍生物，其特征在于，所述的Rz為H、F、Cl、Br、甲 氧基、甲基或乙基。4. 根據權利要求1所述的雷公藤紅素衍生物，其特征在于，所述的雷公藤紅素衍生物 選自W下化合物：…口5. -種雷公藤紅素衍生物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： 1) 將雷公藤紅素溶于有機溶劑中，加入路易斯酸催化劑及式A化合物，攬拌，進行反 應，得到式B化合物；其中式A化合物中的Rz為H、烷基、面素、烷氧基或硝基；雷公藤紅素 與式A化合物的摩爾比為1:2~3 ; 2) 在無水條件下，將式B化合物溶于有機溶劑，加入無機堿和面代控RiX,攬拌反應，得 到式I化合物，其中，Ri和R 3為各自獨立的基團，R 1為H或烷基，Rs和R 1相同； 反應路線如下：6. -種雷公藤紅素衍生物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： 1) 將雷公藤紅素溶于有機溶劑中，加入無機堿和面代控RiX,進行親核取代獲得式C化 合物； 2) 式C化合物溶于有機溶劑中，加入路易斯酸催化劑及式A化合物，攬拌反應，得到式 D化合物；其中，Rz為H、烷基、面素、烷氧基或硝基；其中，式C化合物與式A化合物的摩爾 比為1:2~3 ; 3) 在無水條件下，將式D化合物溶于有機溶劑，再加入無機堿和面代控RsX,攬拌反應， 得到式II化合物；其中，R郝R3為相互獨立的基團，R1為H、烷基、面代的烷基、不飽和烷基、 含雜原子的烷基或芳基化為H或烷基，R 1和R 3相同或不同； 反應路線如下：7. 根據權利要求5或6所述的制備方法，其特征在于，所述有機溶劑選自二甲亞諷、 N' N-二甲基甲酯胺、二氯甲燒、氯仿或甲醇。8. 根據權利要求5或6所述的制備方法，其特征在于，所述路易斯酸催化劑選自 Sc (OTf) 3、Ln (OTf) 3、Re (OTf) 3或 Sc (OPf) 3。9. 根據權利要求5或6所述的制備方法，其特征在于，所述路易斯酸催化劑的用量為雷 公藤紅素或式0化合物的0.1111〇1%~10111〇1%，優選2111〇1%~6111〇1%。10. 根據權利要求5或6所述的制備方法，其特征在于，所述無機堿選自碳酸鐘、碳酸鋼 或碳酸飽。11. 根據權利要求1至4任一項所述的雷公藤紅素衍生物在治療癌癥中的應用。
【文檔編號】A61P35/00GK105985401SQ201510083099
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月16日
【發明人】唐開勇, 曾佳烽, 陳慶花, 方通, 潘俊芳
【申請人】上海華拓醫藥科技發展有限公司