一種高純度烏苯美司的制備方法
【專利摘要】本發明屬于藥物化學制備領域，具體涉及到一種高純度的烏苯美司制備方法，包括以下步驟：將烏苯美司粗品加入到水和其他有機溶劑的混合溶液中，加熱攪拌溶解；溶解后，降溫析晶，抽濾，將所得的濾餅真空烘干，即得烏苯美司終產品，通過本申請制備方法的參數控制，可以顯著提高烏苯美司的收率和純度，產品純度高，更好地確保產品質量。
【專利說明】
一種高純度烏苯美司的制備方法
技術領域
[0001] 本發明屬于藥物化學制備領域，具體涉及到一種高純度的烏苯美司制備方法。
【背景技術】
[0002] 烏苯美司(Ubenimex)，其化學名稱為:N-[(2S，3R)-3-氨基-2-羥基-4-苯基丁酰]_ L-亮氨酸;分子式:Ci6H24N2〇4;分子量:308.37;其結構式如下：
[0004] 專利US4281180公開了烏苯美司的制備方法，其中，烏苯美司中間體在還原羰基和 脫保護的兩個步驟中都用到鈀炭氫化反應，而兩次的氫化反應容易產生過度氫化雜質：
在后續加鹽酸溶解，然后滴加氨水調pH值析晶的過程中，該雜質無 法被有效的除掉。因此，如果氫化反應失控，造成過度氫化雜質偏大，則無法得到質量合格 的烏苯美司。此外，US4281180公開了采用酸堿調pH值析晶的方式得到烏苯美司a、0晶型。
[0005] US4786754進一步指出0晶型具有吸濕性，會在空氣中吸收水分變成二水合物a晶 型。而晶型不穩定，會轉變成穩定的Y晶型。雖然該專利闡述了直接加熱或在溶劑中加 熱轉晶型的工藝，但該工藝中未公開將烏苯美司溶解，再重新析出T晶型的詳細過程，因此 產品可能出現混晶，即產品均一性和最終產品的質量無法得到保證。
[0006] 中國專利201410784653.3也公開了一種新的烏苯美司合成工藝，為了解決上述問 題，該專利避開了氫化反應步驟，采用二碳酸二叔丁酯反應來保護氨基和羧基，然后用酸堿 體系脫保護，最后再調pH值析晶，得到烏苯美司。該工藝雖然避開了氫化反應，但是需要先 用酸脫氨基上的保護，再用堿脫羧基上的保護，最后再調pH值析晶。整個操作工藝比較復 雜，同時在用堿脫羧基上的保護時可能會有酰胺鍵斷裂的副反應，從而影響產品質量。
[0007] 中國專利201010124132.7公開了一種烏苯美司的制備方法，包括以苯乙酮為原 料，依次經溴化、氨基化、乙酰化、羥醛縮合、氫化還原、拆分、去乙酰化、氨基保護、酰胺縮合 和脫保護反應制得烏苯美司。該專利講述了采用L-賴氨酸做拆分劑的優點，但拆分步驟的 結晶時間就需要耗時24小時以上，且拆分后的粗品還需要至少兩次重結晶才能達到目標純 度。并且該專利在酰胺縮合步驟時用EDCI作為縮合劑，該縮合劑價格較貴，不利于工業化生 產。
[0008] 因此，本領域仍然需要一種操作簡單，成本更低，保護環境，又能夠有效地除去工 藝過程中可能產生的雜質，確保產品質量的制備方法，本發明符合這種需求。
【發明內容】
[0009] 本申請通過對烏苯美司工藝進行了深入研究和分析，提供了一種烏苯美司的精制 方法，能夠獲得高純度的烏苯美司。
[0010] 本申請提供了一種高純度烏苯美司的制備方法，該制備方法包括以下步驟：
[0011] (1)將烏苯美司粗品加入到水和其他有機溶劑的混合溶液中，加熱攪拌溶解；
[0012] (2)溶解后，降溫析晶；
[0013] (3)將步驟(2)所得溶液抽濾；
[0014] (4)將步驟(3)所得的濾餅在真空烘干，即得烏苯美司終產品。
[0015] 其中，步驟⑴中的有機溶劑優選甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫呋喃或乙腈;特別 優選乙醇或異丙醇。
[0016] 其中，步驟(1)中的水與有機溶劑的體積比為1: (0.33~9);優選1:(1~9)。
[0017] 其中，步驟（1)中的烏苯美司粗品與混合溶液的質量體積比為1: (30~120);優選 1:(40~100)。
[0018] 與現有技術相比，采用本申請方法制備的烏苯美司具有如下優點：
[0019] 1、通過本申請制備方法的參數控制，可以顯著提高烏苯美司的收率和純度，產品 純度高（純度彡99.80%，最大單雜<0.15 %，最優條件下可達到最大單雜僅為0.07 % )，而 對比例1制備的產品純度99.10%，最大單雜0.45% ;因此，采用本申請的制備方法能夠解決 現有技術中過度氫化后雜質難以去除的問題，實現對工藝過程中過度氫化雜質進行有效控 制，更好地確保產品質量。
[0020] 2、本申請的制備方法操作簡單，所用溶劑均為常規溶劑，使用單一重結晶方法，重 現性好，所用溶劑可回收利用，能夠有效降低試劑成本，無需使用昂貴試劑，節約能源，有利 于保護環境，便于生產操作，且能夠一次性達到質量要求，更適合工業化大規模生產高純度 的烏苯美司。而對比例2的工藝雖然避開了氫化反應，但是需要先用酸脫氨基上的保護，再 用堿脫羧基上的保護，最后再調pH值析晶。整個操作工藝比較復雜，同時在用堿脫羧基上的 保護時可能會有酰胺鍵斷裂的副反應，產品純度略高于對比文件1，但仍然低于本申請產品 質量。
【具體實施方式】
[0021] 以下結合實施例對本發明作進一步的詳細描述，但并非對本發明的限制，凡依照 本發明公開內容所作的任何本領域的等同替換，均屬于本發明的保護范圍。
[0022] 本申請產品純度的測定采用以下方法(烏苯美司日本藥典JP16版）：
[0023] 取烏苯美司30mg加流動相A溶解稀釋至10mL，作為供試品溶液;移取供試品溶液 2mL，用流動相稀釋至200mL，作為對照溶液。分別吸取上述溶液按照液相色譜法進樣20此， 通過自動積分確定樣品溶液中各色譜峰面積:樣品溶液中所顯雜質峰面積不得大于對照溶 液主峰面積的0.5倍(0.5%);樣品溶液中所有雜質峰面積的總和不得大于對照溶液主峰面 積(1.0%) 〇
[0024] 色譜條件如下：
[0025] UV 波長：220nm
[0026] 色譜柱：C18,4.6mm X 25cm X5wn [0027]柱溫：25°C
[0028] 流動相A:磷酸鹽緩沖液(取0.1M磷酸二氫鉀TS13ml，加水稀釋至20ml):乙腈= 17: 3
[0029] 流動相B:磷酸鹽緩沖液(取0.1M磷酸二氫鉀TS13ml，加水稀釋至20ml):乙腈=1:2 [0030]梯度洗脫條件：
[0032] 流速:調整流速使烏苯美司出峰時間約為14min;
[0033]洗脫時間：約為烏苯美司保留時間的5倍。
[0034]實施例1:烏苯美司的制備方法
[0035] 將40.0g烏苯美司粗品投入到1600mL乙醇和水的混合溶液中（水：乙醇體積比=1: 1)，攪拌均勻。然后加熱到內溫80 °C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勾速降溫至6°C，保溫 攪拌30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重33.0g，收率為82.5%，純度為99.82%，最 大單雜:0.12%。
[0036]實施例2:烏苯美司的制備方法
[0037] 將lO.Og烏苯美司粗品投入至lj600mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1:1)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫78°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至8°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重7.75g，收率為77.5 %，純度為99.82%，最大單雜： 0.11%〇
[0038]實施例3:烏苯美司的制備方法
[0039] 將10.0g烏苯美司粗品投入到1000mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1:1)中，攪拌 均勻。然后加熱到內溫75°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勾速降溫至8°C，保溫攪拌 30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重5.42g，收率為54.2%，純度為99.83%，最大單 雜:0?〇
[0040]實施例4:烏苯美司的制備方法
[00411 將5.0g烏苯美司粗品投入到200mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1: 3)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫77°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至5°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.97g，收率為79.4%，純度為99.87%，最大單雜： 0.08%0
[0042]實施例5:烏苯美司的制備方法
[0043] 將5.0g烏苯美司粗品投入到300mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1: 3)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫78°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至9°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.40g，收率為68.0 %，純度為99.89%，最大單雜： 0.07%〇
[0044]實施例6:烏苯美司的制備方法
[0045] 將5.0g烏苯美司粗品投入到300mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1:6)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫79°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至7°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.59g，收率為71.8%，純度為99.81 %，最大單雜： 0.10%〇
[0046]實施例7:烏苯美司的制備方法
[0047]將5.0g烏苯美司粗品投入到500mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1:6)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫76°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至7°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重2.79g，收率為55.8%，純度為99.84%，最大單雜： 0.08%〇
[0048]實施例8:烏苯美司的制備方法
[0049] 將5.0g烏苯美司粗品投入到600mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1:9)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫79°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至5°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重2.67g，收率為53.4%，純度為99.86%，最大單雜： 0.11%〇
[0050]實施例9:烏苯美司的制備方法
[00511 將5.0g烏苯美司粗品投入到250mL乙醇水溶液(水：乙醇體積比=1:0.33)中，攪拌 均勻。然后加熱到內溫79°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勾速降溫至8°C，保溫攪拌 30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.38g，收率為67.6%，純度為99.81 %，最大單 雜:0.14%0
[0052]實施例10:烏苯美司的制備方法
[0053] 將lO.Og烏苯美司粗品投入至_0mL甲醇水溶液(水：甲醇體積比= 1:1)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫63°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至9°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重6.35g，收率為63.5 %，純度為99.84%，最大單雜： 0.11%〇
[0054]實施例11:烏苯美司的制備方法
[0055] 將10.0g烏苯美司粗品投入到400mL異丙醇水溶液(水:異丙醇體積比=1:1)中，攪 拌均勻。然后加熱到內溫83°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至6°C，保溫攪拌 30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重8.51g，收率為85.1 %，純度為99.81 %，最大單 雜:0.14%〇
[0056]實施例12:烏苯美司的制備方法
[0057] 將10.0g烏苯美司粗品投入至lj600mL異丙醇水溶液(水:異丙醇體積比=1:1)中，攪 拌均勻。然后加熱到內溫src，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至s°c，保溫攪拌 30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重7.83g，收率為78.3%，純度為99.80%，最大單 雜:0.13%〇
[0058]實施例13:烏苯美司的制備方法
[0059] 將5.0g烏苯美司粗品投入到350mL異丙醇水溶液(水:異丙醇體積比= 1:3)中，攪 拌均勻。然后加熱到內溫82°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至6°C，保溫攪拌 30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.88g，收率為77.6%，純度為99.82%，最大單 雜:0?〇
[0060]實施例14:烏苯美司的制備方法
[0061 ] 將10.0g烏苯美司粗品投入到750mL丙酮水溶液(水:丙酮體積比=1:1)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫58°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至9°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重5.19g，收率為51.9%，純度為99.81 %，最大單雜： 0.15%〇
[0062]實施例15:烏苯美司的制備方法
[0063]將5.0g烏苯美司粗品投入到150mL四氫呋喃水溶液（水：四氫呋喃體積比=1:1) 中，攪拌均勻。然后加熱到內溫65°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至6°C，保溫 攪拌30min后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.09g，收率為61.8%，純度為99.83%，最 大單雜:0.11%。
[0064]實施例16:烏苯美司的制備方法
[0065]將5.0g烏苯美司粗品投入到300mL乙腈水溶液(水：乙腈體積比=1:1)中，攪拌均 勻。然后加熱到內溫82°C，保溫攪拌至固體全溶。停止加熱，勻速降溫至8°C，保溫攪拌30min 后抽濾，濾餅于60°C真空烘干，得干重3.26g，收率為65.2%，純度為99.81 %，最大單雜： 0.13%〇
[0066]對比例1:按照專利US4281180實施例19公開的方法制備
[0067] 將（2S，3R)-3-芐氧羰基氨基-2-羥基-4-苯基丁酸_(S)_亮氨酸芐酯（lO.Og， 18.8mmol)溶解在167mL，95 %的醋酸中，用鈀碳氫化，2~3小時催化氫化還原反應完全。過 濾鈀碳，濾液減壓濃縮干。濃縮物中加入100mL丙酮打漿析晶，然后過濾。濾餅用1N鹽酸溶 解，然后加入l.〇g活性炭，攪拌，再將不溶物過濾。濾液用稀氨水調pH至5-6,將析出晶體過 濾，并用丙酮淋洗。濾餅真空干燥，得到烏苯美司4.66g，收率為80.5%，純度為99.10 %，最 大單雜:0.45%。
[0068] 對比例2:按照中國專利201410784653.3實施例3公開的制備 [0069] 在500mL三口瓶中加入32.5g中間體（S-2-[(2S，3R)-3-叔丁氧羰氨基-2-羥基-4-苯基-丁酰基氨基]-4-甲基-戊酸叔丁酯），200mL水和100mL乙醇，加入7mL濃鹽酸調節后加 熱至40°C攪拌3小時，體系冰浴下降溫至4°C，緩慢滴加lmol/L的氫氧化鈉水溶液15mL，室溫 下攪拌2小時，TLC檢測反應完全，調pH至6,60°C下減壓濃縮除去大部分乙醇，用lmol/L的稀 鹽酸調pH至1，加入少量活性炭攪拌1小時后過濾，濾液冰浴下用稀氨水調pH至7,濾出結晶， 丙酮洗滌后干燥得到烏苯美司成品。外觀：白色結晶粉末，純度99.5%。
[0070]質量對比實驗：
[0071 ]將本申請實施例中結果較好的1、2、4、5、6、11、12和13制得的烏苯美司與對比例1、 2公開的制備方法制得的產品通過HPLC面積歸一法測定純度、最大單雜，對比結果如下：
[0072]
[0073] 通過上述對比試驗可以看出，采用本申請技術方案，較現有技術相比能獲得更高 純度的產品，制備方法簡單，便于生產操作，便于質量控制，較現有技術具有明顯進步。
[0074] 對于本領域的普通技術人員而言明顯的是，在不偏離本發明精神或者范圍的情況 下，可對本申請的精制方法進行的多種修飾和變化，因此，本發明的保護范圍涵蓋了對本發 明進行的各種修飾和變化，只要所述修飾或變化處于權利要求和其等同實施方式所涵蓋的 范圍內。
【主權項】
1. 一種高純度烏苯美司的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 將烏苯美司粗品加入到水和其他有機溶劑的混合溶液中，加熱攪拌溶解； (2) 溶解后，降溫析晶； (3) 將步驟(2)所得溶液抽濾； (4) 將步驟(3)所得的濾餅真空烘干，即得烏苯美司終產品。2. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，其中，步驟1所用的有機溶劑選自甲 醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫咲喃或乙臆。3. 根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，其中，步驟1所用的有機溶劑選自乙醇 或異丙醇。4. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，其中，步驟1中水與有機溶劑的體積比 為 1:(0.33 ~9)。5. 根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，其中，步驟1中水與有機溶劑的體積比 為 1:(1 ~9)。6. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1中烏苯美司粗品與水和有機溶 劑的混合溶液的質量體積比為1: (30~120)。7. 根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟1中烏苯美司粗品與水和有機溶 劑的混合溶液的質量體積比為1: (40~100)。8. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 將40.0g烏苯美司粗品投入到800mL乙醇和800mL水的混合溶液中，攪拌均勻，然后 加熱到內溫80°C，保溫攪拌至固體全溶； (2) 停止加熱，勻速降溫至6 °C，保溫攪拌30min; (3) 將步驟(2)所得溶液抽濾； (4) 將步驟（3)所得的濾餅于60°C真空烘干，得干重33.0g，收率為82.5%，純度為 99.82%，最大單雜:0.12%。9. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 將5.0g烏苯美司粗品投入到225mL乙醇和75mL水的混合溶液中，攪拌均勻，然后加 熱到內溫78°C，保溫攪拌至固體全溶； (2) 停止加熱，勻速降溫至9 °C，保溫攪拌30min; (3) 將步驟(2)所得溶液抽濾； (4) 將步驟（3)所得的濾餅于60°C真空烘干，得干重3.40g，收率為68.0%，純度為 99.89%，最大單雜：0.07%。
【文檔編號】C07C231/24GK105968026SQ201610621722
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年8月1日
【發明人】王穎, 李曉迅, 盧鐵剛, 劉時奎
【申請人】四川青木制藥有限公司