一種塞來昔布的藥物組合物及其新用圖
【專利摘要】本發明公開了一種塞來昔布的藥物組合物及其新用途，本發明提供的塞來昔布的藥物組合物中含有塞來昔布和一種新穎的天然產物化合物(Ⅰ)，塞來昔布、化合物(Ⅰ)單獨作用時，對痔瘡具有治療作用；塞來昔布和化合物(Ⅰ)聯合作用時，對痔瘡的治療效果顯著提高，可以開發成治療痔瘡的藥物，與現有技術相比具有突出的實質性特點和顯著的進步。
【專利說明】
一種塞來昔布的藥物組合物及其新用途
技術領域
[0001] 本發明屬于生物醫藥領域，涉及塞來昔布的新用途，具體涉及一種塞來昔布的藥 物組合物及其醫藥用途。
【背景技術】
[0002] 塞來昔布臨床用于緩解骨關節炎的癥狀和體征、緩解成人類風濕關節炎的癥狀和 體征、治療成人急性疼痛。
[0003] 塞來昔布是非留體類抗炎藥，動物模型中觀察到其有抗炎、鎮痛和退熱的作用。塞 來昔布的作用機理是通過抑制環氧化酶-2(C0X_2)來抑制前列腺素生成。且在人體治療濃 度下，本品對同工酶-環氧化酶-i(cox-i)沒有抑制作用。
[0004] 在動物結腸腫瘤模型中塞來昔布減緩了腫瘤的發生和進展。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供一種塞來昔布的藥物組合物，該藥物組合物中含有塞來昔 布和一種結構新穎的天然產物，塞來昔布和該天然產物可以協同治療痔瘡。
[0006] 本發明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現的：
[0007] 一種具有下述結構式的化合物（I)，
[0009] -種塞來昔布的藥物組合物，包括塞來昔布、如權利要求1所述的化合物（I)和藥 學上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0010] 進一步地，藥學上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、 崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑。
[0011] 進一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0012] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將半邊蓮粉碎，用70~90%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹脂除雜，先用20 %乙醇洗脫12個柱體積，再用80 %乙醇洗脫15個柱體積，收集80 %洗 脫液，減壓濃縮得80%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中80%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為80 :1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個組分；（(1)步 驟(c)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1、20:1和15:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為65%的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~17個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得 到化合物(I)。
[0013]進一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用80%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0014]進一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0015]進一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0016] 上述化合物(I)在制備治療痔瘡的藥物中的應用。
[0017] 上述塞來昔布的藥物組合物在制備治療痔瘡的藥物中的應用。
[0018] 本發明的優點：
[0019] 本發明提供的塞來昔布的藥物組合物中含有塞來昔布和一種結構新穎的天然產 物，塞來昔布、化合物（I)單獨作用時，對痔瘡具有治療作用；塞來昔布和化合物（I)聯合作 用時，對痔瘡的治療效果顯著提高，可以開發成治療痔瘡的藥物。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例進一步說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對 本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。
[0021 ]實施例1:化合物(I)分離制備及結構確證
[0022]分離方法：（a)將半邊蓮(2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取（15LX 3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用20 %乙醇洗脫12個柱體積，再用80 %乙醇洗 脫15個柱體積，收集80%洗脫液，減壓濃縮得80%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中80%乙醇 洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1 (10個柱體積）、40:1 (8個柱體積）、20:1 (8個柱體積)和10:1(9個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步驟(c)中組 分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1(7個柱體積）、20:1(8個柱體積)和15:1(7 個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵 合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為65 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~17個柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0023] 結構確證:冊431-]\^顯示[]\?1]+為111/2 419.1629，結合核磁特征可得分子式為 C22H26〇8，不飽和度為 10。核磁共振氫譜數據δΗ(ΡΡπι，CD30D，500MHz): Η-4α (2 · 59，d，J = 18.7Hz)，H-40(2.95，d，J=18.7Hz)，H-6a(1.32，t，J=13.2Hz)，H-60(1.66，dd，J=15.1， 5·2Ηζ)，H-7(1·16，m)，H-8(1.49，m)，H-9(4.46，s)，H-ll(6.28，s)，H-17(0.71，d，J= 6.8Hz)，H-18(1.21，d，J = 7.2Hz)，H-19a(5.91，d，J = 0.8Hz)，H-19b(5.87，d，J = 0.8Hz)，H-20a(3.78，d，J = 9.5Hz)，H-20K3.55，d，J = 9.5Hz)，2-0CH3(4.08，s)，3-0CH3(3.59，s);核磁 共振碳譜數據&(ppm，CD 30D，125MHz):195.9(C，l-C)，163.4(C，2-C)135.7(C，3-C)，41.8 (CH 2,4-C)，73.8(C，5-C)，36.9(CH2,6-C)，24.8(CH，7-C)，42.1(CH，8-C)，78·1(CH，9-C)， 126.4(C，10-C)，96.1(CH，11-C)，130.4(C，12-C)，150.1(C，13-C)，145.4(C，14-C)，123.6 (C，15-C)，56.1(C，16-C)，19.3(CH 3，17-C)，12.4(CH3，18-C)，103.1(CH2，19-C)，62.0(CH2， 20-〇,58.6(〇13,2-0〇13)，61.2(〇13,3-0〇13)。紫外波譜（218,271腦)和紅外吸收（1666， 1627CHT 1)表明該化合物含有芐基和羰基。該化合物的氫譜顯示該化合物中有兩個雙峰甲基 (δΗ〇. 71和1.21)，一個烯質子或者苯環質子信號（δΗ6.28)，一組亞甲二氧基質子信號（δ 巧.91和5.87)，一個連氧亞甲基質子信號（δΗ3.78和3.55)，一個連氧次甲基質子信號（δ η4.46)以及兩個甲氧基信號（δ Η4.08和3.59)。該化合物的碳譜結合HSQC譜，可以解析出22個 碳信號，包含一個羰基碳信號，四組雙鍵碳信號以及一個亞甲二氧基碳信號。通過查閱文 獻，以及4-? COSY譜中給出的C-6-C-7-C-8-C-9的自旋體系可以推論出該化合物可能為一 個二苯環辛烷木質素類化合物。對化合物的HMBC譜進行解析，H-20/C-16，H-20/C-15，H-20/ C-9以及H-9/C-20之間的相關性說明在C-20和C-9之間存在一個氧橋。進一步的解析發現， H-19/C-12以及H-19/C-13的相關性說明在C-12和C-13位之間存在一個亞甲二氧基結構。!1-4/〇2，!1-4/(：-3,2-0〇1 3/(：-2,3-0〇13/(：-3以及!1-20/(：-16的相關信號說明該化合物含有一個 環己酮結構單元。R0ESY譜中H-9/CH 3-18，CH3-17/CH3-18,以及CH3-17/H-4的相關性表明17/ 18-CH 3是位于a位的，而C-20位亞甲基是位于β位的。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和R0ESY譜，以 及文獻關于相關類型核磁數據，可基本確定該化合物如下所示，立體構型進一步通過ECD試 驗確定，理論值與實驗值基本一致。
[0024]該化合物化學式及碳原子編號如下：
[0026] 實施例2:藥理作用
[0027]本實例用鹽酸灼傷人工劃傷的大鼠肛門周圍皮膚及肛門內側的黏膜制備治療痔 瘡模型大鼠模型，觀察藥物使被鹽酸灼傷并發生病理性改變的皮膚得到有效地恢復等方面 抗痔瘡作用。
[0028] 1、材料與方法
[0029] 1.1動物
[0030] SD大鼠180~200g，雌雄各半。由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
[0031] 1.2試劑與樣品
[0032] 塞來昔布購自中國藥品生物制品檢定所。化合物（I)自制，制備方法見實施例1。龍 血竭膠囊用〇. 5 %羧甲基纖維素鈉溶液配制成濃度為0.63g/kg。
[0033] 1.3儀器
[0034] Nikon光學顯微鏡，日本Nikon生產。
[0035] 1.4大鼠分組及模型制備
[0036]健康SD品系大鼠，雌雄各半，肛門周圍毛發剪去并用刀劃傷，用10m〇l/L鹽酸lmL涂 抹于去毛皮膚表面，24h后出現紅腫、灼傷后按體重隨機分為5組，每組12只，分別為模型對 照組、陽性對照組(龍血竭膠囊〇.63g/kg)和塞來昔布組(80mg · kg<)、化合物（I)組(80mg · kg"1)、塞來昔布與化合物（I)組合物組【40mg · kg<塞來昔布+40mg · kg<化合物（I)】。各組 給藥體積為l.OmL/lOOg，模型對照組灌胃同體積去離子水。每日1次，連續10d。
[0037] 1.5肛門組織病理(潰瘍、壞死)積分情況測定實驗
[0038] 末次給藥后lh，將大鼠麻醉處死，肉眼觀察評分后，取肛門組織進行病理組織學檢 查。與模型對照組比較，進行統計學計算。潰瘍、壞死評分標準："一"計為10分；"+"計為8分； "++"計為6分；"+++"計為4分；"++++"計為2分。
[0039] 1.6肛門組織肉芽組織增生積分情況測定實驗
[0040] 肉芽組織增生評分標準："一"計為10分；"+"計為8分；"++"計為6分；"+++"計為4 分；"++++"計為 2分。
[00411 1.7統計學方法
[0042]實驗數據用均數土標準差(X土s)表示，應用SPSS18.0版統計軟件進行單因素方差 分析和t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。
[0043] 2、實驗結果
[0044] 2.1對痔瘡模型大鼠肛門組織病理(潰瘍、壞死)的影響
[0045] 與模型對照組比較，塞來昔布與化合物（I)組合物組和陽性對照組肛門組織病理 (潰瘍、壞死)總積分明顯減小(P<〇.01);與模型對照組比較，塞來昔布組、化合物（I)組肛 門組織病理(潰瘍、壞死)總積分減小(P<〇.05)。結果見表1。
[0046] 2.2對痔瘡模型大鼠肛門組織肉芽組織增生的影響
[0047] 與模型對照組比較，塞來昔布與化合物（I)組合物組和陽性對照組肛門組織肉芽 組織增生總積分明顯增加(P<〇.01);與模型對照組比較，塞來昔布組、化合物（I)組肛門組 織肉芽組織增生總積分增加 (P < 0.05)。結果見表1。
[0048] 表1對痔瘡模型大鼠肛門組織病理(潰瘍、壞死)和肛門組織肉芽組織增生的影響
[0050] 上述結果表明，塞來昔布、化合物（I)單獨作用時，對痔瘡具有治療作用;塞來昔布 和化合物(I)聯合作用時，對痔瘡的治療效果顯著提高，可以開發成治療痔瘡的藥物。
[0051] 上述實施例的作用在于說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明的保護 范圍。本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發明技術方案的實質和保護范圍。
【主權項】
1. 一種具有下述結構式的化合物α)， ▼.〇2. -種塞來昔布的藥物組合物，其特征在于:包括塞來昔布、如權利要求1所述的化合 物(I)和藥學上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據權利要求2所述的塞來昔布的藥物組合物，其特征在于:藥學上可以接受的載體 包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體 或潤滑劑。4. 根據權利要求2所述的塞來昔布的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、膠 囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、 栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將半 邊蓮粉碎，用70~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用20%乙醇洗脫12個柱體積，再用80%乙醇洗脫 15個柱體積，收集80%洗脫液，減壓濃縮得80%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中80%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到4個組分；（d)步驟(c)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1、20:1 和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為65%的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~17個柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據權利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用80%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據權利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。8. 根據權利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯進行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 權利要求1所述的化合物（I)在制備治療痔瘡的藥物中的應用。10. 權利要求2~4任一所述的塞來昔布的藥物組合物在制備治療痔瘡的藥物中的應 用。
【文檔編號】C07D493/10GK105949216SQ201610340391
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年5月20日
【發明人】秦勇, 徐成, 朱亞芳, 張慶鈺, 馬甜甜, 周自桂, 王 琦, 陳建芳
【申請人】江蘇神龍藥業有限公司