一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法及其應用
【專利摘要】本發明公開一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法及其應用。該方法包括如下步驟：蓮子心藥材浸泡于甲醇和/或乙醇的水溶液中進行超聲或閃式提取，得提取物；提取液濃縮，酸提堿沉，離心，通過大孔吸附樹脂柱吸附、醇的水溶液洗脫等方法，得到一種甲基蓮心堿粗品，純度70％以上。本發明生產成本低，操作簡單易行，設備投入小，綠色環保，適合工業化生產應用。
【專利說明】
一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法及其應用
技術領域
[0001] 本發明屬于天然藥材提取物的深加工技術領域，具體涉及一種從蓮子心中提取甲 基蓮心堿的方法。
【背景技術】
[0002] 隨著社會人口的老齡化，老年癡呆癥與腦血管疾病、惡性腫瘤已被列為三大老年 人疾病。老年癡呆(Alzheimer Disease，簡稱AD)是一種病因不明的原發性腦部退行性疾 病，是老年人的多發病和常見病。1907年Alois Alzheimer首先描述此病，目前病因尚不明 確，臨床以進行性記憶和后天獲得的知識喪失和生活能力最終喪失為特征。AD發病率約占 癡呆病人的40%-60%，病理特征主要為皮質神經元纖維纏結(Neurof ibri 1 lary tangles， NFTs)和神經炎性斑（Senile plaques，SP)的出現及大量神經元的死亡。據統計，當今世界 約有5000多萬老年人患有不同程度的癡呆。AD在確診后平均生存期為7-8年。西方國家這類 病人每年需花費約1.5萬美元，我國雖沒有這方面的統計，估計每年總花費約200億人民幣。 由此可見，AD已是家庭和社會的沉重負擔，不僅是一個重大的醫學問題，而且是一個嚴重的 社會問題。近十年AD的研究取得了很大進展，國外分析家預測在未來十年內AD患者將會增 加到20%左右，AD藥品市場的增長速度將有較大幅度的上升。
[0003] 因此，研究開發治療或預防老年癡呆等神經退化性疾病和高血壓等心腦血管疾病 的藥物具有巨大的市場前景。
[0004] 蓮子心（lotus plumula)為睡蓮科植物蓮NelumbonuciferaGaertn.成熟種子中間 的綠色胚根，主要分布于中國江西廣昌、南豐白舍鎮、浙江西湖、福建建寧、江蘇太湖等地； 性味苦、寒，去熱止血，治心煩，口渴，平和五臟之氣。研究表明蓮子心中含有蓮心堿、異蓮心 堿、甲基蓮心堿、荷葉堿、前荷葉堿、牛角花素、去甲烏藥堿等生物堿類化合物，該類化合物 具有較強的降低血壓，擴張血管，降脂，抗氧化，保護神經細胞、清除自由基抗炎以及癌癥增 敏等藥理作用。但是目前甲基蓮心堿的提取方法復雜，收率低，純度低。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供一種方法易行，操作簡便，成本低廉，甲基蓮心堿提取率和 純度較高的從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法。
[0006] 本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的 方法，包括如下工藝步驟：
[0007] 1)提取:于蓮子心中加入體積百分濃度為40%~90%的含醇水溶液，料液比為1:
[0008] 10~20,經超聲或閃式提取，過濾，濾液減壓回收至無醇味，用水混懸，得到蓮子心
[0009] 提取液；
[0010] 2)酸提:用酸調節蓮子心提取液的pH至2~5,離心，取上清液；
[0011] 3)堿沉:用堿調節上清液的pH至7~10,取沉淀部分，減壓蒸餾得濃縮提取液，加入 水或含醇水溶液至溶解，過濾，取濾液；
[0012] 4)吸附：將濾液上樣于填充有吸附材料的吸附柱吸附；所述的吸附材料為大孔吸 附樹脂；
[0013] 5)洗脫:用體積百分濃度為10 %~70 %的含醇水溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液減 壓蒸餾回收醇，得產物。
[0014] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，所述的含醇水溶液中所用的醇為 乙醇或甲醇。
[0015] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，超聲或閃式提取的時間為2~ 3min〇
[0016] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，步驟4)中，所述濾液的pH為9。
[0017] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，步驟4)中，上樣的濾液中，藥物與 大孔吸附樹脂的質量比為〇. 4~1.2:1。
[0018] 上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，所述的大孔吸附樹脂是D101大孔 吸附樹脂、AB-8大孔吸附樹脂或HPD-600大孔吸附樹脂。
[0019]上述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，洗脫流速為1~2.5BV/h。
[0020] 本發明與現有技術相比，具有以下優點和效果：
[0021] 1.本發明，甲基蓮心堿的制備不用有毒的有機溶劑，不污染環境，耗時少，效率高， 提取工藝簡單，成本低廉，可進行產業化生產，并達到了環保的要求。
[0022] 2.本發明，乙醇可以回收重復使用，大孔吸附樹脂也可以處理后再應用，降低了生 產成本，便于推廣，因此，在國內外市場上有強勁的競爭力。
[0023] 3.本發明，蓮子心取自天然資源，蓮子心中提取的甲基蓮心堿毒副作用較小，安全 可靠，具有多種生物活性，其強烈的神經元細胞保護作用和降壓作用，對治療或預防老年癡 呆等神經退化性疾病和高血壓等心腦血管疾病十分有益。蓮子心在我國自然資源十分豐 富，從蓮子心中提取甲基蓮心堿用于新藥研制，是有效利用自然資源的一項有力措施。 [0024] 4.采用本發明的方法，甲基蓮心堿提取率可達0.61 %，純度可達50~90%。
[0025] 5.本發明，簡化了提取純化步驟與時間，可達到高效率的生產，很大程度的縮短了 生產周期，增加了有效產物的收率百分比，減少了藥材的成本損耗，達到了資源最大化利用 的目的。
【附圖說明】
[0026] 圖1是制備的甲基蓮心堿的液相譜圖。
【具體實施方式】
[0027] 實施例1 一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法
[0028] 大孔吸附樹脂的預處理：取D101大孔吸附樹脂，用95%乙醇浸泡24h，使其充分膨 脹，濕法裝入吸附柱后，用95%乙醇液洗至流出液加適量純水無白色渾濁現象，再用去離子 水洗凈乙醇，直至流出液無醇味無渾濁為止。
[0029]方法如下：
[0030] 1)提取:稱取蓮子心干燥藥材10g，加入180ml濃度為60% (v/v)的乙醇水溶液，閃 式提取三次，每次2~3min，過濾，合并三次提取濾液，濾液減壓回收至無乙醇味，用水混懸， 得到蓮子心提取液；
[0031] 2)酸提:用HC1溶液調節蓮子心提取液的pH至3,離心，取上清液；
[0032] 3)堿沉:用NaOH溶液調節上清液的pH至9，取沉淀部分，減壓蒸餾得濃縮提取液。取 290mg濃縮提取液溶解于20mL蒸餾水中，完全溶解后，過濾，濾液加水配置濃度為14.5mg/mL 的溶液；
[0033] 4)吸附：將濃度為14.5mg/mL的溶液上樣于填充有D101大孔吸附樹脂的吸附柱進 行吸附;上樣量為，樹脂(g):濾液中藥物(g) = 1: 〇. 4~1.2，上樣液的pH為3~11;
[0034] 5)洗脫：用濃度為10%~70% (v/v)的乙醇水溶液洗脫，洗脫液用量為5BV，洗脫流 速為1~2.5BV/h，收集洗脫液，洗脫液減壓蒸餾回收乙醇，得含有甲基蓮心堿的產物。
[0035]含有甲基蓮心堿的產物用甲醇復溶，點薄層板并使用碘化鉍鉀顯色，確認顯橘色 斑點后，取少量使用孔徑為0.22μπι的微孔濾膜將其過濾，使用Agilentl200儀器利用HPLC測 定產物中甲基蓮心堿的純度，純度為90%。
[0036](一)洗脫溶劑對產率的影響
[0037]方法同上，改變洗脫溶劑中乙醇水比例，上樣液pH為9,上樣液中，樹脂(g):濾液中 藥物(g) = 1: . 4，洗脫流速為2Bv/h，結果如表1。
[0038]表1
[0040](二)上樣液pH對產率的影響
[00411方法同上，改變上樣液pH，使用60 % (v/v)的乙醇水溶液洗脫，上樣液中，樹脂(g): 濾液中藥物(g) = 1:0.4，洗脫流速為2Bv/h，結果如表2
[0042]表 2
[0044](三)上樣量對產率純度的影響
[0045] 方法同上，改變上樣量樹脂（g):濾液中藥物(g)，使用60 % (v/v)的乙醇水溶液洗 脫，上樣液pH調整為9，洗脫流速為2Bv/h，結果如表3。
[0046] 表 3
[0048] (四）洗脫流速對產率純度的影響
[0049] 方法同上，改變洗脫流速，使用60 % (v/v)的乙醇洗脫，上樣液pH調整為9，上樣量 為樹脂(g):濾液中藥物(g) = 1:0.4,結果如表4。
[0050] 表 4
【主權項】
1. 一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于，包括如下步驟： 1) 提取:于蓮子心中加入體積百分濃度為40 %~90 %的含醇水溶液，料液比為1:10~ 20,經超聲或閃式提取，過濾，濾液減壓回收至無醇味，用水混懸，得到蓮子心提取液； 2) 酸提:用酸調節蓮子心提取液的pH至2~5,離心，取上清液； 3) 堿沉:用堿調節上清液的pH至7~10,取沉淀部分，減壓蒸餾得濃縮提取液，加入水或 含醇水溶液至溶解，過濾，取濾液； 4) 吸附：將濾液上樣于填充有吸附材料的吸附柱吸附；所述的吸附材料為大孔吸附樹 脂； 5) 洗脫：用體積百分濃度為10 %~70 %的含醇水溶液洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓蒸 餾回收醇，得產物。2. 根據權利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:所述的 含醇水溶液中所用的醇為乙醇或甲醇。3. 根據權利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:超聲或 閃式提取的時間為2~3min。4. 根據權利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:步驟4) 中，所述濾液的pH為9。5. 根據權利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:步驟4) 中，上樣的濾液中，藥物與大孔吸附樹脂的質量比為0.4~1.2:1。6. 根據權利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:所述的 大孔吸附樹脂是DlOl大孔吸附樹脂、AB-8大孔吸附樹脂或HPD-600大孔吸附樹脂。7. 根據權利要求1所述的一種從蓮子心中提取甲基蓮心堿的方法，其特征在于:洗脫流 速為1~2.5BV/h。8. 按照權利要求1-7任一所述的方法提取的甲基蓮心堿在制備治療或預防老年癡呆藥 物中的應用。
【文檔編號】C07D217/20GK105949121SQ201610388847
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月2日
【發明人】陳長蘭, 呂晶, 孫嬋, 于夏, 孟雪蓮, 劉玥辰, 陳皓月, 劉武, 蔡明星, 馮樂言
【申請人】遼寧大學