酰基哌嗪類化合物及其制備方法和用圖

酰基哌嗪類化合物及其制備方法和用圖
【專利摘要】本發明屬于生物醫藥技術領域，涉及酰基哌嗪類化合物及其制備方法和應用，化學式為：其中，X選自化學鍵或-NR1-；Y選自化學鍵或-NR1-或-CR2R3-；A選自芳基或雜芳基；L選自芳基或雜芳基，G選自雜芳基；R1選自氫原子、烷基；R2、R3各自獨立選自氫原子、烷基；R4選自氫原子、鹵素、羥基、氰基、硝基、烷氧基、烷基、環烷基、-C(O)NR2R3、芳基或雜芳基，其合成工藝簡單，操作方便，合成的化合物凝血酶受體拮抗活性強，適用于治療血小板聚集導致的心肌梗死和腦栓塞等心臟疾病中。
【專利說明】
酰基哌嗪類化合物及其制備方法和用途
技術領域：
[0001] 本發明屬于生物醫藥技術領域，涉及一類凝血酶受體拮抗劑化合物及其制備方 法，特別是酰基哌嗪類化合物及其制備方法和應用，該類化合物適用于治療血小板聚集導 致的心肌梗死和腦栓塞等心臟疾病中。
【背景技術】：
[0002] 血栓性疾病是臨床常見的心血管疾病，主要包括腦血管栓塞、心臟血管內壁血栓 形成、肺栓塞、和外周動脈血栓栓塞等，對人類的生命和健康有嚴重的危害。血栓性疾病由 血栓形成(Thrombosis)和血栓栓塞(Thromboembolism)兩種病理所引起，其中血栓形成是 指因某些誘因，血液中有形成分在血管內形成異常的血凝塊，堵塞血管，從而使得相應部位 的血液供應出現障礙的過程，是遺傳和環境因素相互作用、相互影響的變化過程;血栓栓塞 是指脫落的血栓在隨著血液流動的過程中堵塞一些血管，造成相應組織或器官缺血、缺氧、 淤血以及水腫的病理過程。血栓性疾病的發病機理與凝血、纖溶系統、血小板等有重要關 系。
[0003] 目前，抗血栓藥按其作用機制的不同，可分為抗凝血藥物、溶血栓藥物和抗血小板 類藥物三類，其中，抗血小板藥物通過抑制血小板的粘附、聚集和釋放功能來防止血栓形 成，血小板表面有許多不同受體，這些受體與相應的配體結合即可被激活，這些受體主要包 括二磷酸腺苷（Adenosine diphosphate，ADP)受體、血檢燒A2(Thromboxane A2，TXA2)受 體、凝血酶(Thrombin)受體等，目前常用的抗血小板藥物有阿司匹林和波立維。
[0004] 凝血酶是非活性凝血酶原在Xa因子的作用下通過蛋白裂解的方式產生的一種絲 氨酸蛋白酶，作用于凝血級聯的末端，對血栓的形成起著關鍵的作用，凝血酶通過激活凝血 酶受體（Thrombin receptor)而使血小板聚集，凝血酶受體也被稱為蛋白酶激活受體-1 (Protease activated receptor-1，PAR_1)，蛋白酶激活受體(PAR)屬于G蛋白偶聯受體，共 有四個亞型:PAR-1、PAR-2、PAR-3和PAR-4，其中除PAR-2是胰蛋白酶受體外，其余三個都是 凝血酶受體，PAR在人體的分布有著明顯的組織特異性，人體血小板只表達PAR-1和PAR-4受 體，并且PAR-1受體起著主要的作用，PAR-1受體在更低濃度的凝血酶存在的情況下就能發 揮其激活血小板聚集的作用，且血小板聚集的反應速度更快。
[0005] Vorapaxar(SCH 530348)是2014年在美國上市的新型凝血酶受體拮抗劑，用于治 療有心臟病發作史但無短暫腦缺血發作史或中風史的心血管疾病患者。臨床I期和II期研 究結果表明，Vorapaxar可以明顯抑制血小板的聚集，且不影響健康受試者的出血時間，與 阿司匹林、氯吡格雷聯合使用時不會增加出血風險，而后又對Vorapaxar進行了兩個大型 π I期臨床試驗。結果發現，心血管病患者服用Vorapaxar有一定的效果，心肌梗死或腦血栓 等疾病的發生率明顯降低。Atopaxar又名E5555,是Eisai研發的PAR-1拮抗劑，I期臨床研究 結果表明，E5555可以明顯地抑制血小板的聚集并且耐受性良好，同時不影響ADP誘導的血 小板的聚集、正常的出血和凝血時間，E5555進行了雙盲、安慰劑對照的II期臨床實驗，結果 表明，該化合物并未增加出血風險，并且所有劑量測試均表明它能夠抑制血小板聚集。 F16618是由法國Pierre Fabre研究所研發出的凝血酶受體拮抗劑。F16618可以抑制血小板 的聚集，這種作用具有濃度依賴性和競爭性。F16618半衰期較短，生物利用度高，從血小板 功能分析儀PAF-100的分析結果得出，在20μΜ濃度下，F16618對血小板的聚集抑制率為 49% 〇

【發明內容】
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[0006] 本發明的目的在于克服現有技術存在的缺點，尋求設計提供一類新型的具有凝血 酶受體(PAR-1)拮抗活性的酰基哌嗪化合物及其制備方法和其在心腦血管疾病藥物中的用 途。
[0007] 為了實現上述目的，本發明涉及的酰基哌嗪類化合物的化學式為：
[0009 ]其中，X選自化學鍵或-NR1-; Υ選自化學鍵或-NR1-或-CR2R3_; Α選自芳基或雜芳基； L選自芳基或雜芳基，該芳基或雜芳基可以任選有一個或多個R4取代基;G選自雜芳基;R1選 自氫原子、烷基;R 2、R3各自獨立選自氫原子、烷基;R2、R3可以任選與相連接的碳原子一起形 成環烷基;R 4選自氣原子、鹵素、羥基、氛基、硝基、烷氧基、烷基、環烷基、-C( 0 )NR2R3、芳基或 雜芳基，其中所述的烷氧基、烷基、環烷基、芳基或雜芳基能夠被一個或多個選自鹵素、羥 基、氛基、硝基、烷氧基、烷基、環烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代。
[0010] 本發明涉及通式（I)化合物或其可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠用于 制備血小板凝集抑制劑。
[0011] 本發明涉及通式（I)化合物或其可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠用于 制備治療與凝血酶受體有關的疾病的藥物中，其中所述的與凝血酶受體有關的疾病包括血 栓癥、血管再狹窄、深部靜脈血栓癥、肺栓塞癥、腦梗塞、心臟疾病、高血壓已及惡性腫瘤。
[0012] 本發明涉及通式（I)化合物或其可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠作為 抑制鈣離子轉運的藥物。
[0013] 本發明涉及通式（I)化合物或其可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠作為 抑制凝血酶受體的藥物，其中所述凝血酶受體為PAR-1受體。
[0014] 本發明所述〃烷基〃指飽和的脂族烴基團，包括1至20個碳原子的直鏈和支鏈基團， 優選含有1至12個碳原子的烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、 異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1_二甲基丙基、1，2_二甲基丙基、2,2_二甲基丙基、1-乙 基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2_三甲基丙基、1，1_二 甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2,2_二甲基丁基、1，3_二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、 3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3_二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、 5-甲基己基、2，3_二甲基戊基、2，4_二甲基戊基、2，2_二甲基戊基、3，3_二甲基戊基、2_乙基 戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3_二甲基己基、2,4_二甲基己基、2,5_二甲基己基、2,2_二甲 基己基、3,3_二甲基己基、4,4_二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基- 2-乙基戊基、2-甲基乙基戊基、正壬基、2-甲基乙基己基、2 -甲基乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3,3_二乙基己基、2,2_二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更優選的 是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁 基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1_二甲基丙基、1，2_二甲基丙基、2,2_二甲基丙基、 1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2_三甲基丙基、1， 1-二甲基丁基、1，2_二甲基丁基、2,2_二甲基丁基、1，3_二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊 基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3_二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，當被取代 時，取代基能在任何可使用的連接點上被取代。
[0015] 本發明所述〃環烷基〃指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包括3至 20個碳原子，優選包括3至12個碳原子，更優選環烷基環包含3至10個碳原子。單環環烷基的 非限制性實施例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環 庚基、環庚三烯基、環辛基等。
[0016] 本發明所述〃芳基〃指6至14元全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的 環)基團，
[0017] 本發明所述具有共輒的π電子體系的多環（即其帶有相鄰對碳原子的環)基團，優 選為6至10元，例如苯基和萘基，所述芳基環可以稠合于雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中 與母體結構連接在一起的環為芳基環，包含：
[0019] 本發明所述芳基可以是取代的或未取代的。
[0020] 本發明所述〃雜芳基〃指包含1至4個雜原子，5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜 原子包括氧、硫和氮，優選為6至10元;雜芳基優選為是5元或6元，例如咲喃基、噻吩基、P比啶 基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等;所述雜芳基環可以稠合于芳 基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，包含：
[0022] 本發明所述雜芳基可以是任選取代的或未取代的。
[0023] 本發明所述〃烷氧基〃指-0-(烷基)和-0-(未取代的環烷基），其中烷基的定義如上 所述，包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基等;烷 氧基可以是任選取代的或未取代的。
[0024]本發明所述〃羥基〃指-OH基團。
[0025]本發明所述〃鹵素〃指氟、氯、溴或碘。
[0026] 本發明所述"氨基"指-NH2。
[0027] 本發明所述〃氰基〃指-CN。 [0028]本發明所述〃硝基〃指-N〇2。
[0029] 本發明的典型化合物包括：
[0030]
[0031]
[0032] 本發明的通式（I)表示的化合物或其立體異構體、互變異構體、前藥或藥學上可接 受的鹽或溶劑化物的同位素取代物，其中任何一個化合物中可以存在至少一個氫原子被氘 原子取代。
[0033] 本發明涉及通式(I)所示化合物的制備過程由下面通式所示：
[0034]
[0035] 羧酸1與哌嗪2在常用的酰胺化反應條件下發生反應生成酰胺3。中間體3與硼酸試 劑4在常用的Suzuki偶聯反應條件下進行偶聯反應，生成通式（I)化合物;或由下面通式所 示：
[0037]化合物la在堿，例如氫化鈉或雙(三甲基硅烷基)氨基鋰，的作用下與烷基化試劑， 例如碘甲烷或1，4-二溴丁烷或1，5-二溴戊烷，發生一烷基化或二烷基化或環化反應生成通 式(I)化合物;或下面通式所示：
[0039]中間體3與胺試劑6在Buchwald胺化反應條件下進行反應，生成通式lb化合物，化 合物lb進一步在堿，例如氫化鈉，的作用下與烷基化試劑，例如碘甲烷，發生烷基化反應生 成通式Ic化合物；
[0041]胺試劑7在堿，例如三乙胺，作用下與三光氣反應生成異氰酸酯8,異氰酸酯8在堿， 例如三乙胺，作用下與哌嗪2發生反應生成中間體9。中間體9與硼酸試劑進行Suzuki偶聯反 應，生成通式Id化合物;化合物Id能進一步在堿，例如氫化鈉，的作用下與烷基化試劑，例如 碘甲烷，發生烷基化反應生成通式I e化合物。
[0042] 本發明與現有技術相比，其合成工藝簡單，操作方便，合成的化合物凝血酶受體拮 抗活性強，適用于治療血小板聚集導致的心肌梗死和腦栓塞等心臟疾病中。
【具體實施方式】：
[0043] 下面通過具體實例對本發明作進一步說明。
[0044] 實施例1:3，-[2-0x0-2-(4-pyridin-2-yl-piperazin-1-yl)-ethyl ]-biphenyl- 2-carbonitrile，l-[3-(4-(2-吡啶)哌嗪-2-乙酮)苯基]-2-苯腈 1-001，的合成 [0046] 本實施例制備1-001的具體過程為：
[0047] 第一步：在250mL圓底燒瓶中，將3-溴苯乙酸（2.15g，10.0mmol)溶于二氯甲烷 (40mL)中，依次加入H0BT(1.42g，10.5mmol)，EDCI(2.01g，10.5mmol)，DIEA(2.61mL， 15mmo 1)和1 -(2-吡啶基)哌嗪（1.71 g，10.5mmo 1)，常溫下攪拌反應20小時。反應液經二氯甲 燒(80mL)稀釋后，用氫氧化鈉溶液（lmo 1/L，3 X 1 OOmL)洗滌，有機相經無水硫酸鈉干燥過夜 后過濾;減壓濃縮后，剩余物快速柱層析分離(MeOH/CH2Cl 2，3 % )，得到白色粉末狀化合物7 (3.02g，83.8%):1H NMR(CDC13,600MHz)S8.11((1, lH)，7.42(t，lH)，7.36(s，lH)，7·31(ι?， lH)，7.13(m，2H)，6.59(t，lH)，6.56(d，lH)，3.70(t，2H)，3.67(s，2H)，3.50(t，2H)，3.43(m, 4H)；MS(APCI)calcd for Ci7Hi8BrN30(M+H+) :360.06.Found:360.38；
[0048] 第二步：將化合物7(216mg，0 · 6mmol)溶于混合溶劑（甲苯/乙醇/水= 4mL: 2mL: lmL)中，依次加入四（三苯基膦）鈀（34 · 7mg，5 %mol)，碳酸鉀（248 · 8mg，1 · 8mmo 1)和2-氰基 苯硼酸（13 2mg，0.9mmo 1)，120 °C攪拌反應12小時。反應液冷卻到室溫，用二氯甲烷（3 X 20mL)萃取，合并有機相經無水硫酸鈉干燥過夜后過濾，減壓濃縮;剩余物快速柱層析分離 (乙酸乙酯/石油醚，2/1)，得到1-001(無色油狀物，18811^，82%) :1!1匪1?(00(：13,6001〇^)5 8.17(d,lH),7.76(d,lH),7.69-7.63(m,2H),7.56-7.42(m,5H),7.39(d,1H),6.64(t,lH), 6.61(d,1H)，3.87(s，2H)，3.79-3.45(m，8H);MS(APCI)calcd for C24H22N4〇(M+H+): 383.18.Found :383.33。
[0049]下列化合物的合成與1-001的合成類似，在第二步以4-氰基苯硼酸替換2-氰基苯 硼酸：
[0051 ] 1-003(無色油狀物，3，-[2-0叉0-2-(4-卩}^1(1;[11-2-：71-卩1卩6抑2；[11-1-：71)-61:1171]- biphenyl-4-carbonitrile) l-[3-(4-(2_P比啶）哌嗪_2_乙酮）苯基]_4_苯臆:4 NMR(CDCl3， 600MHz)58.18(d,lH),7.76-7.66(m,4H),7.55(t,lH),7.51-7.43(m,3H),7.33(d,lH),6.66 (t,lH),6.63(d,lH),3.86(s,2H),3.79-3.63(m,4H),3.51-3.49(m,4H)；MS(APCI)calcd for C24H22N40(M+H+) : 383.18. Found: 383.30.
[0052]下列化合物的合成與1-001的合成類似，在第一步以3-溴苯甲酸替換3-溴苯乙酸， 在第二步以4-氰基苯硼酸替換2-氰基苯硼酸：
[0054] 1-114
[0055] (3,-(4-Pyridin-2-yl-piperazine-1-carbonyl)-biphenyl-4-carbonitrile)1-[3-(4-(2-吡啶）哌嗪-1-酮)苯基]-4-苯腈:? NMR(DMS0-d6,400MHz，23°CM8.14-8.12(dd， 1H，H-6_CH of Py)，7.95(s，4H，4XCH of Ph)，7.88-7.86(m，lH，CH of Ph)，7.82-7.81(t， 1H，CH of Ph)，7.64-7.51(m，3H，2XCH of Ph and CH of Py)，6.86-6.84(d，lH，H-3-CH of Py)，6.69-6.66(m，lH，H-5-CH of Py)，3.76(m，2H，CH2NC0)，3.62-3.34(m，6H，3XCH2N); MS(ES-API)calcd for C23H2〇N4〇(M+H+) :369.43.Found:369.2.
[0056] 實施例2:2-(3，-Methoxy-biphenyl-4-yl )-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin-1-yl)-propan-l_one ,2-(4-( 3-甲氧基苯基））-1-(4-( 2-吡啶)哌嗪)-1-丙酮，1-131，的合成
[0058] 本實施例的具體制備過程為:在單口支管反應瓶中，氮氣置換，取氫化鈉(400mg， 1. Ommo 1)置于DMF中，0°C下攪拌10min后，加入化合物I_071(77mg，0.2mmo 1)，繼續攪拌1 h， 然后加入碘甲燒(498yL，0.8mmol)，10min后移除冰浴，恢復至室溫反應3h。反應液經飽和氯 化銨溶液稀釋，乙酸乙酯萃取，合并有機相，依次用水(20mL X 3)、飽和食鹽水(20mL X 3)洗， 有機相經無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，剩余物快速柱層析分離得到白色粉末狀化合物 I-131(110mg,88% ,
[0059] 2_(3，-Methoxy-biphenyl-4-y1)-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin_l-yl)-口『(^&11-1-〇116)2-(4-(3-甲氧基苯基））-1-(4-(2-吡啶）哌嗪）-1-丙酮 ：1!1匪1?(0)(：13， 400MHz)58.17(d,lH,H-6-CH of Py),7.57-7.55(d,2H,H-2-CH of Py),7.49-7.45(t,1H, CH of Ph) ,7.37-7.34(m,3H,3XCH of Ph) ,7.18-7.16(d, 1H,CH ofPh) ,7.12(s , 1H,CH ofPh),6·91-6·89(d，lH，H-3-CH ofPy),6.65-6.62(t，lH，H-5-CH ofPy),6.60-6.58((1,1H, CH of Ph)，4.01-3.96(m，lH，CHC0)，3.88(s，3H，CH30)，3.68-3.05(m，8H，4XCH2N) ,1.54-1.52 (d, 3H, CH3) ；MS(APCI) calcd for C25H27N3O2 (M+H+ ):402.2 lFound :402.2.
[0060] 實施例3:
[0061 ] 2-(3'-Methoxy-biphenyl-4-yl)-2-methyl-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin-1- yl)-propan-1-〇ne, 2-甲基-2-(4-( 3-甲氧基苯基））-1-(4-( 2-P 比啶）哌嗪）-1-丙酮，1-132， 的合成：
[0063] 在單口支管反應瓶中，氮氣置換，加入雙(三甲基硅烷基)氨基鋰(0 · 8mL，0 · 8mmo 1， 1M己燒溶液)溶于THF中，0 °C下攪拌1 Omin后，加入化合物I-071 (77mg，0.2mmo 1)，繼續攪拌 lh，然后加入鵬甲每（1.2mL，2mmol)，lOmin后移除冰浴，恢復至室溫反應3h。；乙酸乙醋稀釋 后依次用水(20mL X 3)、飽和食鹽水(20mL X 3)洗，有機相經無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃 縮，剩余物快速柱層析分離得到白色粉末狀化合物1-132(10811^，85%，2-(3'-]\^1:11(?7-biphenyl-4-yl)-2-methyl-1-(4-pyridin-2-yl-piperazin_l-yl)-propan_l-〇ne)2-甲 基-2-(4-(3-甲氧基苯基））-1-(4-(2-吡啶）哌嗪）-1-丙酮 ^HNMI^CDChdOOMHzJSrW 8.15-8.14(d，lH，H-6-CH ofPy)，7.61-7.59(d，2H，H-2-CH of Ph)，7.47-7.44(t，lH，CH of Py) ,7.39-7.33(m,2H,2XCH ofPh), 7.28(s , 1H, CH ofPh), 7.21-7.19(d, 1H,CH of Ph), 7.14(m,lH,CH of Ph),6.64-6.61(t,lH,H-3-CH of Py),6.57-6.54(d,lH,H-5-CH ofPy), 3.89(s,3H,CH30) ,3.34(m,8H,4XCH2N) , 1.62 (s , 6H, 2 X CH3) ；MS(APCI )calcd for C26H29N3O2 (M+H+): 416.23Found: 416.2.
[0064] 實施例 4: 2-[3-( 4_Pyr id in_2-yl-piperazine-1-carbonyl)-phenyl ami no]-匕61^〇11；[1：1'；[16，1-(3-(4-(2-吡啶)哌嗪-1-酮)苯胺基)-2-苯腈1-165，的合成
[0066]起始物1的合成與示例1，I-001的合成第一步類似，以3-溴苯甲酸替換3-溴苯乙 酸。
[0067]將單口帶支管茄形瓶用仏置換3次，加入化合物1 (104mg，0 · 3mmol)和化合物7 (39mg，0.33mmol)，用叔丁醇（1 . 5mL)溶解。再加入三（二亞芐基丙酮）二鈀（14mg， 0 · 015mmol)、2-環己基磷-2，4，6_三異丙基聯苯（14mg，0 · 03mmol)和無水碳酸鉀（166mg， 1.2mmo 1)，常溫攪拌后，升溫至90°C攪拌反應20h，然后用二氯甲烷稀釋，水洗，合并有機 相;有機相經無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得粗產物，粗產物快速柱層析分離得到淡黃 色粉末狀化合物1-165
[0068] (31mg,27%)：
[0069] 2-[3-(4-Pyridin-2-yl-piperazine-1-carbonyl)-phenylamino]-benzonitrilel-(3-(4-(2-吡啶）哌嗪-1-酮)苯胺基)-2-苯腈;4 NMR(CDC13,400MHz，26°C) S8.23-8.21(dd，lH，H-6-CH ofPy)，7.54-7.51(m，2H，CH of Ph and H-4-CH ofPy)，7.45-7.41(m，2H，2XCH ofPh)，7.29-7.24(m，3H，3XCH ofPh)，7.17-7.16(d，lH，H-3-CH ofPy)， 6.95-6.91(t，lH，H-5-CH ofPy)，6.72-6.68(dd，2H，2XCH ofPh)，6.32(s，lH，NH)，3.91(s， 2H，CH2NCO)，3.61(s，6H，CH2rCOand2XCH2N) ;MS(ES-API)calcdforC23H2iN5〇(M+H+): 384.45. Found：384.2.
[0070]實施例 5:2-{Methyl-[3-(4-pyridin-2-yl-piperazine-1-carbonyl )_phenyl ]_ &1]1；[110}-匕6112011；[1：1'；[16，1^-甲基-1-(3-(4-(2-吡啶）哌嗪-1-酮)苯胺基)-2-苯臆，1-168，的 合成
[0072] 在單口帶支管茄形瓶中，N2置換3次，加入化合物I-165(54m g，0.14mmol)，DMF (2mL)溶解，冰浴冷卻至0°C。然后加入氫化鈉(6.8mg，0.28mmol)攪拌反應lOmin，最后加入 碘甲燒(27yL，0.42mmol)，攪拌lOmin后再在室溫下攪拌lOmin。加入10mL水淬滅，乙酸乙酯 萃取，再用飽和食鹽水洗。有機相經無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得粗產物，粗產物經快 速柱層析分離得到淡黃色粉末狀化合物1-168(3911^，69%) :2-{161:1171-[3-(4171^(1;[11-2-y 1-piperazine-1-carbony 1)-phenyl]-amino}-benzonitrile N_甲基-1-(3-(4-(2_P比啶） 哌嗪-1-酮）苯胺基）-2-苯腈；4 MMR(CDC13，400MHz，29°C )δ8.23-8.22((1，1H，H-6_CH of Py)，7.68-7.65(d，lH，CH of Ph)，7.62-7.58(t，lH，H-4-CH of Py)，7.55-7.50(t，lH，CH of Ph)，7.34-7.28(m，2H，2XCH of Ph)，7.24-7.22(t，lH，C H of Ph)，6.97-6.96(d，lH， H-3-CH of Py)，6.92-6.90(d，2H，2XCH of Ph)，6.70-6.66(m，2H，CH of Ph and H-5-CH of Py)，3.88(s，2H，CH2NC0)，3.59(s，6H，CH2NC0 and 2XCH2N)，3.42(s，3H，CH3);MS(ES-API)calcd for C24H23N5〇(M+H+) :398.47.Found:398.2.
[0073] 實施例6 :4_Pyridin-2-yl-piperazine-1-carboxylic acid(2，-carbamoyl-biphenyl-3-yl)-amide，2-(3-(4-(2-吡啶)哌嗪）甲酰胺基)苯甲酰胺，1-173,的合成
[0075] 3-溴苯胺在三乙胺的作用下與三光氣反應生成異氰酸酯1，然后生成的異氰酸酯1 在三乙胺的作用下與哌嗪2反應而生成化合物3;化合物3和2-氰基苯硼酸在實施例1，第二 步反應條件下生成化合物 1-173(4_Pyridin-2-yl-piperazine-1-carboxylic acid(2'-〇&1^&111〇71-131卩1161171-3-：71)-&1111(16)2-(3-(4-(2-[1比啶）哌嗪）甲酰胺基）苯甲酰胺： 1!1匪1? (DMS0-d6，400MHz，30 °C )δ8·15-8·13(dd，1H，H-6-CH ofPy)，7·57-7·40(m，9H，8 X CH ofPh and H-4-CH ofPy)，7.35-7.23(m，2H，NH2)，7.03-7.01(d，lH，NH)，6.89-6.87(d，lH，H-3-CH ofPy)，6.66(t，lH，H-5-CH ofPy)，3.59-3.35(t，8H，4XCH2) ;MS(ES-API)calcd for C23H23N5O2 (M+H+) :402.46. Found :401.9.
[0076] 實施例7:
[0077]本實施例對化合物1-003、1-114、實施例2、3、4制備的酰基哌嗪類化合物的凝血酶 受體(PAR-1)拮抗活性進行測定，測定原理為:在細胞(比如HEK293細胞）內含PAR-1，它可被 TRAP-6(凝血酶受體活性肽-6)激活，從而引發細胞內鈣離子的釋放，鈣離子的釋放多少可 通過熒光來測定，加入凝血酶受體拮抗劑會抑制TRAP-6對PAR-1的激活，因此通過熒光方法 測試鈣離子的釋放量可以測定凝血酶受體拮抗劑對PAR-1的抑制活性，具體實驗步驟為： [0078] 將已培養好的基質液以每孔30yL加入96孔透明底黑板中，30min后通過離心除去 基質液，然后用細胞解離液消化HEK293/Gal5/PAR1細胞，以45000細胞/孔來鋪板，于溫度為 37C、C0 2含量為5%的環境下孵育24h，孵育完成后去除培養基，將配置好的加載染料緩沖液 以每孔100yL的量迅速加入孔中，仍在溫度為37C、C0 2含量為5%的環境下避光孵育lh;將實 施例2、3和4制備的目標化合物分別溶于二甲基亞砜，用HBSS緩沖液稀釋其濃度為4%，再向 每個孔中加入25yL此稀釋液，常溫下避光孵育15min;完成孵育后，向每個孔中加入25yL的 TRAP-6,同時將該板置于Flex Station讀板機上，此外，還可檢測鈣流信號，測試結果取三 次測試平均值;PAR-1抑制率計算公式：
[0079] PAR-1的抑制率％ =(空白對照組孔的熒光強度-樣品化合物孔的熒光強度)/空白 對照組孔的熒光強度X 100%，測試化合物的半數抑制濃度IC5Q可以通過不同濃度下的抑制 率計算得出，化合物1-003、1-114、實施例2、3和4制備的化合物在在ΙΟμΜ的抑制率分別為 55%、47%、27%、45%和21%。
【主權項】
1. 一種酰基哌嗪類化合物，其特征在于化學式為：其中，X選自化學鍵或-NR1-; Y選自化學鍵或-NR1-或-CR2R3-; A選自芳基或雜芳基;L選自 芳基或雜芳基，該芳基或雜芳基能由一個或多個R4取代基;G選自雜芳基;R1選自氫原子、烷 基;R 2、R3各自獨立選自氫原子、烷基;R2、R3能與相連接的碳原子一起形成環烷基;R 4選自氫 原子、鹵素、羥基、氛基、硝基、烷氧基、烷基、環烷基、-c(o)nr2r 3、芳基或雜芳基，所述的燒氧 基、烷基、環烷基、芳基或雜芳基能夠被一個或多個選自鹵素、羥基、氰基、硝基、烷氧基、烷 基、環烷基、芳基、雜芳基的取代基所取代。2. 如權利要求1所述酰基哌嗪類化合物的應用，其特征在于所述通式（I)化合物或其可 藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠用于制備血小板凝集抑制劑。3. 根據權利要求2所述酰基哌嗪類化合物的應用，其特征在于所述通式（I)化合物或其 可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠用于制備治療與凝血酶受體有關的疾病的藥物 中，其中所述與凝血酶受體有關的疾病包括血栓癥、血管再狹窄、深部靜脈血栓癥、肺栓塞 癥、腦梗塞、心臟疾病、高血壓已及惡性腫瘤。4. 根據權利要求2所述酰基哌嗪類化合物的應用，其特征在于所述通式（I)化合物或其 可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠作為抑制鈣離子轉運的藥物。5. 根據權利要求2所述酰基哌嗪類化合物的應用，其特征在于所述通式（I)化合物或其 可藥用的鹽，或含有它們的藥物組合物能夠作為抑制凝血酶受體的藥物，其中所述凝血酶 受體為PAR-1受體。6. 如權利要求2所述酰基哌嗪類化合物的制備方法，其特征在于制備過程由下面通式 所示：或由下面通式所示：
【文檔編號】A61K31/496GK105949116SQ201610401989
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月8日
【發明人】夏巖, 譚偉強
【申請人】青島理工大學