一種同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法
【專利摘要】本發明屬于中草藥的加工領域，具體涉及一種同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法。本發明通過將巴戟天全根干粉過80目篩后，按料液比1g:37ml加入體積分數為37%的乙醇溶液進行提取，提取溫度為60℃，提取時間77min，同步獲得含有蒽醌和多糖的提取液，最后經分離純化分別得到蒽醌和多糖。在此條件下，測得巴戟天蒽醌最高提取率達到85%、多糖提取率為70%。該工藝同步提取巴戟天中的蒽醌和多糖提取率較高，同時大大提高原料利用率、縮短提取時間、減少提取成本，大規模減少試劑用量而實現環保、同步提取有效成分。
【專利說明】
-種同步提取己戟天中蔥釀和多糖的方法
技術領域
[0001] 本發明屬于中草藥的加工領域，具體設及一種同步提取己戟天中蔥釀和多糖的方 法。
【背景技術】
[0002] 己戟天(似OfficinaJis 別稱雞腸風、S角藤、雞眼藤等，為茜草科多年生 藤本植物，長3~13畑1，寬1.5~5cm，前端短漸尖，基部純形或圓形。己戟天的干燥根呈扁圓柱 形，略彎曲。盛產于福建、廣東、海南、廣西等熱帶和亞熱帶地區。生于山地疏、密林下和灌叢 中，常攀于灌木或樹干上，亦有引作家種。藥用植物，主治陽瘦遺精、宮冷不孕、月經不調、少 腹冷痛、風濕搏痛、筋骨瘦軟。其化學成分有蔥釀類化合物、糖類、氨基酸類、微量元素等。根 含蔥釀類成分有甲基異茜草素，甲基異茜草素-1-甲酸，大黃素甲酸，2-徑基徑甲基蔥釀，1- 徑基蔥釀，1-徑基-2-甲基蔥釀，1，6-二徑基-2，4-二甲氧基蔥釀，1，6-二徑基-2-甲氧基蔥 釀，2-甲基蔥釀，還含環締酸祗成分;水晶蘭武，四乙酷車葉草武。又含葡萄糖，甘露糖，0-谷 醬醇，棟桐酸及維生素C，十九燒，24義基膽醬醇。根皮含鋒、儘、鐵、銘等23種元素。
[0003] W往的工業提取，都是分別從己戟天中提取出蔥釀和多糖，運樣周期很長、材料需 求量大，化學試劑用量大，有惇節能減排的宗旨。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種同步提取己戟天中蔥釀和多糖 的方法。本發明先同時提取出蔥釀和多糖，測得己戟天蔥釀最高提取率達到85%、多糖提取 率為70%，再對提取液進行分離操作。優化后的工藝工序少、周期短、節約材料。
[0005] 為實現本發明的目的，采用如下技術方案： 一種同步提取己戟天中蔥釀和多糖的方法:將己戟天全根干粉過80目篩后，按料液比 Ig: 37ml加入體積分數為37%的乙醇溶液進行提取，提取溫度為60°C，提取時間77min，獲得 含有蔥釀和多糖的提取液，最后經分離純化分別得到蔥釀和多糖。
[0006] 所述的分離純化為將獲得的提取液W4500r/min離屯、Smin后，加入無水乙醇至提 取液中乙醇體積分數為80%，4°C條件下靜置2地后，再W4500r/min離屯、lOmin，分離得到蔥 釀溶液W及多糖沉淀物;將蔥釀溶液進行減壓蒸發濃縮至原液體積的1/100,預冷至1-3°C 后冷凍干燥并密封保存;多糖沉淀物加少量蒸饋水溶解后蒸發除乙醇，預冷至1-3°C后冷凍 干燥并密封保存。
[0007] 本發明與現有技術比較具有W下優點： 本發明對乙醇溶液同步提取己戟天中蔥釀和多糖的工藝進行了優化，先同時提取出蔥 釀和多糖，測得己戟天蔥釀最高提取率達到85%、多糖提取率為70%，再對提取液進行分離操 作，即可分別得到蔥釀和多糖。優化后的工藝工序少、周期短，并且提取率較高，同時大大提 高了原料利用率、縮短提取時間、減少提取成本。
【附圖說明】
[0008] 圖1提取溫度對蔥釀和多糖得率影響曲線圖； 圖2提取時間對蔥釀和多糖得率的影響曲線圖； 圖3乙醇溶液體積分數對蔥釀和多糖得率的影響曲線圖； 圖4料液比對蔥釀和多糖得率的影響曲線圖。
【具體實施方式】
[0009] 為進一步公開而不是限制本發明，W下結合實例對本發明作進一步的詳細說明。 [001日]單因素試驗 分別W提取溫度、提取時間、乙醇體積分數和料液比為單因素變量，提取次數為1次，提 取后計算得率，進行單因素試驗，并重復=次試驗。
[0011] 、提取溫度單因素試驗 準確稱取己戟天全根干粉lOOg，W體積分數40%乙醇溶液為提取液，固定料液比為1:35 (g/ml)，提取時間為70 min，提取次數為1次，并進行3次重復實驗，考察提取溫度為40°C、45 °C、50°C、55°C、60°C、65°C對蔥釀和多糖提取率的影響。
[0012] 試驗結果如圖1所示，隨著提取溫度的增加，蔥釀和多糖的溶解量都增加，由于溫 度超過60°C后，多糖的生物活性會急劇下降，故W60°C為最佳提取溫度。
[OOU]、提取時間單因素試驗 準確稱取己戟天全根干粉lOOg，W體積分數40%乙醇溶液為提取液，固定料液比為1:35 (g/ml)，水浴溫度60°C，提取次數為1次，并進行3次重復實驗，考察提取時間為40min、 5〇111111、6〇111111、7〇111111、8〇111111、9〇111111對蔥釀和多糖提取率的影響。
[0014] 試驗結果如圖2所示，隨著提取時間的延長，己戟天蔥釀和多糖逐漸溶解出來，兩 物質提取率均呈上升趨勢，溶解速度先慢后快，蔥釀在SOmin時基本達到最大值，SOmin- 90min基本保持不變，多糖提取率在70min時達到最大值。考慮到工業生產時間、成本問題， 故可選70min作為提取時間。
[0015] 、乙醇溶液體積分數試驗 準確稱取己戟天全根干粉lOOg，固定料液比為l:35(g/ml)，水浴溫度60°C，提取時間 為70min，提取次數為1次，并進行3次重復實驗，考察乙醇溶液體積分數分別為25%、30%、 35%、40%、45%、50%時，對蔥釀和多糖提取率的影響。
[0016] 試驗結果如圖3所示，隨著乙醇體積分數增加，蔥釀的提取量增加，當乙醇體積分 數為40%時達到最大值，之后隨著乙醇體積分數增加，蔥釀提取量減少。運是因為不同體積 分數的乙醇溶液具有不同的極性，根據相似相容原理，乙醇體積分數較小時，極性較強，提 取出來的物質種類比較多，所W不太利于蔥釀的提取，乙醇體積分數較大時，極性較弱，醇 溶性雜質和脂溶性雜質都被溶解出來，提取效果也不理想；另一方面，乙醇體積分數大于 40%時，水溶性蔥釀的溶解能力就會減弱。所W在乙醇體積分數為40%時，蔥釀的提取率最 大。因為多糖是水溶性物質，所W多糖在乙醇體積分數較小時溶出量比較大，隨著乙醇濃度 的增加，多糖的溶出量逐漸減少。
[0017] 、料液比單因素試驗 準確稱取己戟天全根干粉100g，W體積分數40%乙醇溶液為提取液，水浴溫度60°C，提 取時間為70min，提取次數為1次，并進行3次重復實驗，考察提取料液比為1:25、1:30、1:35、 l:40、l:45、l:50(g/ml)，對蔥釀和多糖提取率的影響。
[0018] 試驗結果如圖4所示，己戟天蔥釀和多糖逐漸溶解出來，溶解速度逐漸變緩慢，在 料液比為1:35 g/ml時蔥釀、多糖提取率達到最大值。
[0019] 單因素試驗得出的最佳提取因素條件如下表1所示。
[0020] 表1單因素試驗得出的最佳提取因素條件
5、響應面優化提取工藝 依據Box-Behnken中屯、組合實驗設計原理，結合單因素試驗的結果，選取提取溫度、提 取時間、乙醇體積分數、料液比四個主要考察因素，分別用A、B、C、D表示，W蔥釀及多糖的提 取率為響應值。試驗因素水平見表2。
[0021] 表2試驗因素與水平
實驗設計各結果見表3。 1 表3聯合提取工藝實驗方案及實驗結果
采用Design Expert軟件將響應值和各個因素進行多元回歸擬合，得出影響因素的一 次效應、二次效應及多次效應的響應面的回歸模擬方程。
[0023] 蔥釀提取率的回歸模擬方程為： Y=+77.01+10.01*A+2.73 地+1.39*C+1.98蝴-0.18*A*B-0.55*A*C+0.75*A*D+0.016 地水 C+0.10地蝴巧.265E-003*OD-l. 59*A2-1.54地2-3.58地2-1.75蝴2; 式中：Y代表蔥釀的提取率;A、B、C、D分別代表提取溫度、提取時間、乙醇體積分數和料 液比。
[0024] 多糖提取率的回歸模擬方程為： Y=+62.37+4.81*A+2.12 地-6.47*C+0.75蝴+0.45*A*B-0.59*A*C+0.27*A*D-0.36 地水 C+ 0.068地蝴-0.14*OD-l. 74*A2-2.14地2-1.87地2-2.77蝴2; 式中：Y代表多糖的提取率;A、B、C、D分別代表提取溫度、提取時間、乙醇體積分數和料 液比。
[0025] 蔥釀提取率回歸模擬的方差分析表如下表4。
[00%]表4蔥釀提取率回歸模擬的方差分析表
多糖提取率回歸模擬的方差分析表如下表5。
[0027]表5多糖提取率回歸模擬的方差分析表
對蔥釀回歸模型進行方差分析，其結果見表4,整體模型達到了極顯著水平，即P< 0.0001，表明該二次方程具有極顯著性;模型失擬項P=O. 1434,不顯著，表明該方程式對實 驗擬合性較好;模型調整后的擬合系數R2=O. 9626〉0.85，表明該模型擬合優良度較高;模型 變異系數(CV)為2.91%，說明響應值的重復性好;信噪比為27.702〉〉4，精度足夠高。由此表 明該模型與實際實驗擬合程度良好，誤差小，可W用此模型對試驗結果進行分析和預測。 [002引由回歸模型的系數顯著性檢驗可知，模型的一次項A、B、D及二次項A2B2C 2D2對己 戟天中蔥釀提取的線性效應影響極顯著，一次項C對己戟天中蔥釀的線性效應影響顯著； 各因素對蔥釀提取率影響大小為提取溫度、提取時間、料液比、乙醇體積分數。由此表明該 回歸模型能夠較好地描述各因素與響應值之間的真實關系，可W用其確定最佳工藝條件。
[0029] 對多糖回歸模型進行方差分析，其結果見表5,整體模型達到了極顯著水平，即P< 0.0001，表明該二次方程具有高度顯著性;模型失擬項P=O.8183,不顯著，表明該方程式對 實驗擬合性較好;模型調整后的擬合系數R2=O. 8956〉0.85，表明該模型擬合優良度較高;模 型變異系數(CV)為5.04%，說明響應值的重復性好;信噪比為14.286〉〉4，精度足夠高。由此 表明該模型與實際實驗擬合程度良好，誤差小，可W用此模型對試驗結果進行分析和預測。
[0030] 由回歸模型的系數顯著性檢驗可知，模型的一次項A、C及二次項A2B2C2D 2對己戟天 中多糖提取的線性效應影響極顯著，一次項B對己戟天中多糖的線性效應影響顯著;各因素 對多糖提取率影響大小為乙醇體積分數、提取溫度、提取時間、料液比。由此表明該回歸模 型能夠較好地描述各因素與響應值之間的真實關系，可W用其確定最佳工藝條件。
[0031] 溶劑提取法是傳統方法中從成分復雜的天然藥物中提取活性成分的最主要方法。 本設計的實驗采用乙醇溶液水浴聯合提取過80目篩己戟天全根干粉中的蔥釀與多糖，經響 應面分析法優化后W水浴提取溫度60°C、提取時間77min、乙醇體積分數37%、料液比1:37 (g/ml)為最佳提取條件進行蔥釀和多糖的提取，提取后于4500r/min離屯、Smin得到的提取 液并加入無水乙醇至乙醇體積分數為80%，并于4 °C冰箱中靜置2地后4500r/min離屯、IOmin， 分離得到蔥釀溶液W及多糖沉淀物。將蔥釀溶液進行減壓蒸發濃縮至原液體積的1/100,預 冷至1-3°C后冷凍干燥并密封保存;多糖沉淀物加少量蒸饋水溶解后蒸發除乙醇，預冷至1- 3 °C后冷凍干燥并密封保存。
[0032] W上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利范圍所做的均等變化與 修飾，皆應屬本發明的涵蓋范圍。
【主權項】
1. 一種同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法，其特征在于：將巴戟天全根干粉過80目 篩后，按料液比Ig: 37ml加入體積分數37%的乙醇溶液進行提取，提取溫度為60°C，提取時間 77min，獲得含有蒽醌和多糖的提取液，最后經分離純化分別得到蒽醌和多糖。2. 根據權利要求1所述的同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法，其特征在于:所述的分 離純化為將獲得的提取液以4500r/min離心Smin后，加入無水乙醇至提取液中乙醇體積分 數為80%，4°C條件下靜置24h后，再以4500r/min離心10min，分離得到蒽醌溶液以及多糖沉 淀物。
【文檔編號】A61K36/746GK105924540SQ201610540327
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年7月11日
【發明人】黃群, 安鳳平, 宋洪波, 滕慧, 陳雷, 王藝偉, 許美玉
【申請人】福建農林大學