沉香復合型誘導劑及在白木香樹內的結香方法
【專利摘要】本發明公開了一種沉香復合型誘導劑及在白木香樹內的結香方法，其特征在于采用特殊的原地採菌辦法培養得到復合菌種，然后再通過培養和擴繁制取復合菌沉香誘導劑；又可進一步利用微生物馴化的方法將生物結香與物理結香和化學結香有機的結合起來，協同作用，達到更好的效果。步驟包括1.制備特殊的微生物固體培養基和採菌器皿。2.將特殊的採菌器皿水平固定在結香的白木香樹干上(0.8?1.5)m高處。採菌24h封蓋拿回，并恒溫箱培養。3.恒溫培養至菌絲長滿培養基。4.接種到特制的液體培養基培養或培養并馴化。5.擴大培養并制取沉香復合型誘導劑。6.用輸液法按照一定的操作要求將復合型誘導劑緩施于胸徑不小于80mm的白木香樹內，3?6個月后香樹體內就會有環裝沉香香線形成，并隨時間增長而增長且質量提高。該方法簡便、實用、適應性強，適用于廣大沉香樹種植戶人工結香。
【專利說明】
沉香復合型誘導劑及在白木香樹內的結香方法
[0001]一種沉香復合型誘導劑及在白木香樹內的結香方法，本發明屬于沉香生產技術領域，其特征在于采用特殊的原地採菌辦法培養得到復合菌種，然后再通過培養和擴繁制取復合菌沉香誘導劑；又可進一步利用微生物馴化的方法將生物結香與物理結香和化學結香有機的結合起來，協同作用，達到更好的效果。
技術背景
[0002]沉香是瑞香科植物Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg含樹脂的木材,是我國、印度及其他東南亞國家的傳統名貴中藥，具有行氣止痛、納氣平喘、溫中止嘔的功效。同時它受熱會釋放出具有濃郁而獨特的香氣，常被國內外用來制造高級香料等，隨著沉香藥用及保健品用量大幅增加和普及，沉香產品越來越凸顯其巨大的市場潛能和經濟價值。
[0003]在自然界的白木香樹中，只有極少數的個體會自然產生沉香樹脂，通常的觀點是受到外傷(刀砍、蟲咬、雷擊、火燒)之后白木香樹自身的愈傷保護機制分泌出特殊的樹脂來保護自己，這種分泌出特殊的樹脂即為沉香，但這需要十幾年、幾十年乃至上百年的時間積累，這種天然沉香的偶然性及長周期性已遠不能滿足市場的需求，人們便開始使用各種人工促香的方法使白木香樹結香,并不斷對沉香形成機制進行研究探索,現有人工結香的方法有打釘法、鑿洞法、物理及化學刺激法、接菌法，用特制的採菌器皿懸固在白木香樹干上原地採菌，并將菌種與物化激素有機結合的復合型誘導劑未見報導。
【發明內容】
[0004]一種沉香復合型誘導劑及在白木香樹內的結香方法，其特征在于采用特殊的原地採菌辦法得到復合菌種制取復合菌沉香誘導劑；又可進一步利用微生物馴化的方法將生物結香與物理結香和化學結香有機的結合起來，協同作用，達到更好的效果。具體包括1、制備特殊的微生物固體培養基和採菌器皿，特殊的微生物固體培養基的制備方法是:取白木香樹干粉過40目篩100g、馬鈴薯去皮切塊200g、1500g水于不銹鋼鍋內煮沸30min，用30目篩(這樣可有一部分白木香樹干粉通過)過濾取濾下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g瓊脂溶化后趁熱攪拌倒入微生物培養皿中1/2高，培養皿要求有蓋(1mm大小為好)且方便固定在樹干上，然后將微生物培養皿同蓋滅菌后即為特制的採菌器皿。2、將特殊的採菌器皿水平固定在要結香的白木香樹干上(0.8-1.8)m高處，可用鐵絲、膠帶輔助按常規的辦法固定即可，然后採菌24h封蓋拿回恒溫箱。3、恒溫培養箱26-28度培養3_4d至菌絲張滿后接種。4、將3中的菌絲接種到特制的液體培養基三角瓶內搖床震蕩培養(溫度26-28度、120-150r/min)，4-5d后擴大培養既得沉香純生物復合誘導劑A ;如果4_5d后再加入植物激素或有機鹽進行馴化培養2-3d后擴大培養就得到沉香復合型誘導劑B。液體培養基的制備:A、白木香樹干粉過40目篩20%、葡萄糖10%、七水硫酸鎂0.3%、磷酸二氫鉀0.3ppm、碳酸銨0.5ppm, 125度滅菌25min即可；B、在A的基礎上加入0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)、8ppm的無機鹽(硫酸亞鐵、氯化鉀、氯化鈉、等)，可分別加一類或兩類一起力口。5、擴大培養并制取沉香復合型誘導劑:將4、中的A、B兩種培養菌劑分別接種到A、B兩種液體擴大培養基中進行擴大培養，擴大培養的條件是:接種比5% -15%，溫度26-30度，充氣有氧黑暗培養3-5d，過濾就得到A、B兩種沉香復合型誘導劑。6、用輸液法按照一定的操作要求將復合型誘導劑緩施于(胸徑一般不小于80mm的)白木香樹內，具體操作要求是:選胸徑不小于80mm的白木香樹,在距地面0.5-1.0m的高度陽面鉆直徑4_5mm的兩個孔，孔距3-5cm成八字向下傾斜30-45度角，孔深6_8cm穿過白木香樹的初生木質部而不傷到原生木質部，在干燥無雨的天氣內緩慢滴加沉香復合型誘導劑600-1000ml。3_6個月后香樹體內就會有環裝沉香香線形成并隨時間增長而增長且質量提高。
[0005]實施實例一:1、制備特殊的微生物固體培養基和採菌器皿，特殊的微生物固體培養基的制方法是:取白木香樹干粉過40目篩100g、馬鈴薯去皮切塊200g、1500g水于不銹鋼鍋內煮沸30min，用30目篩(這樣可有一部分白木香樹干粉通過)過濾取濾下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g瓊脂溶化后趁熱攪拌倒入微生物培養皿中1/2高，培養皿要求有蓋(1mm大小為好)且方便固定在樹干上，然后將微生物培養皿同蓋滅菌后即為特制的採菌器皿。2、將特殊的採菌器皿水平固定在要結香的白木香樹干上(0.8-1.8)m高處，可用鐵絲、膠帶輔助按常規的辦法固定即可，然后採菌24h封蓋拿回恒溫箱。3、恒溫培養箱26-28度培養3-4d至菌絲張滿后接種。4、將3中的菌絲接種到特制的液體培養基三角瓶內搖床震蕩培養(溫度26-28度、120-150r/min)，4_5d后擴大培養既得沉香純生物復合誘導劑A。A型液體培養基的制備:白木香樹干粉過40目篩20%、葡萄糖10%、七水硫酸鎂0.3%、磷酸二氫*鉀0.3ppm、碳酸銨0.5ppm, 125度滅菌25min即可。5、擴大培養并制取沉香復合型誘導劑:將4、中的培養菌劑接種到A型液體擴大培養基中進行擴大培養，擴大培養的條件是:接種比5 % -15 %，溫度26-30度，充氣有氧黑暗培養3-5d，過濾就得到A型沉香復合型誘導劑。6、用輸液法按照一定的操作要求將復合型誘導劑緩施于(胸徑一般不小于80mm的)白木香樹內，具體操作要求是:選胸徑不小于80mm的白木香樹，在距地面0.5-1.0m的高度陽面鉆直徑4-5mm的兩個孔,孔距3_5cm成八字向下傾斜30-45度角，孔深6_8cm穿過白木香樹的初生木質部而不傷到原生木質部，在干燥無雨的天氣內緩慢滴加沉香復合型誘導劑600-1000ml。3_6個月后香樹體內就會有環裝沉香香線形成并隨時間增長而增長且質量提聞。
[0006]實施實例二:1、制備特殊的微生物固體培養基和採菌器皿，特殊的微生物固體培養基的制方法是:取白木香樹干粉過40目篩100g、馬鈴薯去皮切塊200g、1500g水于不銹鋼鍋內煮沸30min，用30目篩(這樣可有一部分白木香樹干粉通過)過濾取濾下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g瓊脂溶化后趁熱攪拌倒入微生物培養皿中1/2高，培養皿要求有蓋(1mm大小為好)且方便固定在樹干上，然后將微生物培養皿同蓋滅菌后即為特制的採菌器皿。2、將特殊的採菌器皿水平固定在要結香的白木香樹干上(0.8-1.8)m高處，可用鐵絲、膠帶輔助按常規的辦法固定即可，然后採菌24h封蓋拿回恒溫箱。3、恒溫培養箱26-28度培養3-4d至菌絲張滿后接種。4、將3中的菌絲接種到特制的液體培養基三角瓶內搖床震蕩培養(溫度26-28度、120-150r/min)，液體培養基的制備:白木香樹干粉過40目篩20%、葡萄糖10%、七水硫酸鎂0.3%、磷酸二氫鉀0.3ppm、碳酸銨0.5ppm, 125度滅菌25min即可，震蕩培養4-5d后再加入0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)或Sppm的無機鹽(硫酸亞鐵、氯化鉀、氯化鈉、等)進行馴化培養2-3d后，再擴大培養就得到沉香復合型誘導劑B，植物激素或有機鹽可分別加一類，或兩類一起先后加入。5、擴大培養并制取沉香復合型誘導劑:將4中的B型培養菌劑分別接種到B型液體擴大培養基中進行擴大培養，擴大培養的條件是:接種比5% -15%，溫度26-30度，充氣有氧黑暗培養3-5d，過濾就得到B型沉香復合型誘導劑。B型液體擴大培養基的制備:白木香樹干粉過40目篩20%、葡萄糖10%、七水硫酸鎂0.3%、磷酸二氫鉀0.3ppm、碳酸銨0.5ppm，0.2ppm植物激素(吲哚乙酸、三十烷醇、等)或Sppm的無機鹽(硫酸亞鐵、氯化鉀、氯化鈉、等)，植物激素或有機鹽可分別加一類，或兩類一起先后加入，125度滅菌25min即可，6、用輸液法按照一定的操作要求將復合型誘導劑緩施于(胸徑一般不小于80mm的)白木香樹內，具體操作要求是:選胸徑不小于80mm的白木香樹,在距地面0.5-1.0m的高度陽面鉆直徑4_5mm的兩個孔,孔距3_5cm成八字向下傾斜30-45度角，孔深6-8cm穿過白木香樹的初生木質部而不傷到原生木質部，在干燥無雨的天氣內緩慢滴加沉香復合型誘導劑600-1000ml。3_6個月后香樹體內就會有環裝沉香香線形成并隨時間增長而增長且質量提高。
【主權項】
1.制備特殊的微生物固體培養基和採菌器血，特殊的微生物固體培養基的制備方法是:取白木香樹干粉過40目篩100g、馬鈴薯去皮切塊200g、1500g水于不銹鋼鍋內煮沸30min，用30目篩(這樣可有一部分白木香樹干粉通過)過濾取濾下物1000ml，加入20g葡萄糖、20g瓊脂溶化后趁熱攪拌倒入微生物培養器皿中，然后滅菌封蓋。2.將特殊的採菌器皿水平固定在要結香的白木香樹樹干上(0.8-1.8)m高處，可用鐵絲、膠帶輔助按常規的的辦法固定既可，然后採菌24h封蓋拿回恒溫箱。3.恒溫培養箱26-28度培養3-4d至菌絲長滿后接種。4.將3中的菌絲接種到特制的液體培養基三角瓶內搖床振蕩培養(溫度26-28度，120-150r/min) 4-5d后擴大培養既得沉香純生物復合誘導劑A ;如果4_5d后再加入植物激素或有機鹽進行馴化培養，2-3d后擴大培養就得到沉香復合型誘導劑B。5.液體培養基的制備: A、白木香樹干粉過40目篩20%、葡萄糖10%、七水硫酸鎂0.3%、磷酸二氫鉀0.3ppm、碳酸銨0.5ppm, 125度滅菌25min既可； B、在A的基礎上加入0.2ppm植物激素(卩引噪乙酸、二十燒醇、等)、8ppm的無機鹽(硫酸亞鐵、氯化鉀、氯化鈉、等)，可分別加一類或兩類一起加。6.擴大培養并制取沉香復合型誘導劑:將4、中的A、B兩種培養菌劑分別接種到A、B兩種液體擴大培養基中進行擴大培養，擴大培養的條件是:接種比:5% -15%，溫度26-30度，充氣有氧黑暗培養3-5d，過濾就得到A、B兩種沉香復合型誘導劑。7.用輸液法按照一定的操作要求將復合型誘導劑緩施于(胸徑一般不小于80mm的)白木香樹內，具體操作要求是:選胸徑不小于80mm的白木香樹，在距地面0.5-1.0m的高度陽面鉆直徑4-5mm的兩個孔,孔距3_5cm成八字向下傾斜30-45度角，孔深6_8cm穿過白木香樹的初生木質部而不傷到原生木質部，在干燥無雨的天氣內緩慢滴加沉香復合型誘導劑600-1000mlo
【文檔編號】A01G7/06GK105886401SQ201410467878
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2014年9月15日
【發明人】徐風
【申請人】徐風