結晶的β-內酰胺酶抑配制品的制作方法

結晶的β-內酰胺酶抑配制品的制作方法
【專利摘要】一種式(I)的結晶化合物：式(I)。式(I)化合物是β?內酰胺酶抑配制品并且可以與抗細菌劑結合給予以用于預防或者治療細菌感染。
【專利說明】
結晶的e-內醜胺酶抑配制品
技術領域
[0001 ]本發明設及結晶的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-;挫-3-鐵-1-基） 甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物、用于制備其的方 法、包含（2S，3S，5R) -3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S 挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫 雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的藥用組合物W及該化合物的用途， 包括含有該化合物的組合物的用途，特別是在治療或者預防細菌感染中與抗細菌劑一起使 用。
【背景技術】
[0002] 通過引入抗生素，不管結構分類或者作用模式，抗性的出現和傳播是在運動中進 化動態組合的不可避免的結果（Shapiro S. 2013. Speculative strategies for new antibacterials:all roads should not lead to Rome. J. Antibiot.66: 371-386)。在臨 床相關的病原體中抗性的擴散已經對e-內酷胺抗生素(到現在為止對于嚴重的細菌感染被 認為是非常安全和有效的治療）的價值具有特別強烈的影響。新的且有效的e-內酷胺酶，特 另鳩超廣譜e-內酷胺酶化SBU及其他A類酶的出現，已經損害了 0-內酷胺抗擊侵染的能力， 突出了對于研制新產品的需要（Fisher JF,Meroueh so,MobasheiT S.2005.Bacterial resistance toP-lactam antibiotics:compelling opportunism,compelling oppo;rtunity .Chem.Rev. 105:395-424)。雖然已經將一些預防0-內酷胺抗生素水解的0-內 酷胺酶抑配制品與一些e-內酷胺結合使用，但是在過去十年期間，保留e-內酷胺的抗菌活 性的運些e-內酷胺酶抑配制品的性能已經嚴重損害，從而需要尋找新的、更加有效的e-內 酷胺酶抑配制品W恢復它們e-內酷胺搭檔的治療效用(Watkins RR，化PP-Wallace KM， Drawz SM,Bonomo RA.2013.Nove10-lactamase inhibitors:a therapeutic hope against the scourge of multidrug resistance.Front.Microbiol.4:392)。
[0003] WO 2008/010048公開了(6-內酷胺酶抑配制品（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-IH-I，2，3-S挫-3-鐵-I-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-I-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4， 4-二氧化物(式I):
[0004]
[0005] WO 2008/010048公開了式（I)的無定形化合物的形成，其是通過過濾和冷凍干燥 進行分離。
[0006] 本發明人已經發現，通過WO 2008/010048的方法制備的式（I)化合物是吸濕性的， 并且當在室溫下存儲時具有有限的穩定性。
[0007] 本發明的目的是提供式(I)化合物的更穩定形式。
[0008] 本發明的進一步的目的是提供易于純化的式(I)化合物的形式。
[0009] 本發明的進一步的目的是提供易于處理的式(I)化合物的形式。

【發明內容】

[0010] 本發明人已經開發了式(I)的結晶化合物。本發明人已經出乎意料地發現，與無定 形形式的式（I)化合物相比，式（I)的結晶化合物具有改善的熱穩定性、是更少吸濕并且更 加易于純化和處理。
[0011] 在第一方面，本發明提供了式(I)的結晶化合物：
[001
[0013] 在第一方面的第一實施方式中，提供了式（I)的結晶化合物，在下文中稱作"形式 A"，表征為包括選自具有W下20角的峰中的四個或更多個(優選五個或更多個、優選六個或 更多個、優選屯個或更多個、優選八個或更多個、優選九個或更多個、優選所有十個)峰的 XRPD光譜：8.82、12.07、14.43、14.92、16.26、18.25、19.06、19.78、20.82和23.51 ±0.1 度2 0，可選地±0.05度20。
[0014] 優選地，形式A的XRTO光譜具有選自具有W下20角的峰中的一個、兩個、S個、四個 或者所有五個峰:8.82、12.07、14.43、18.25和 19.78±0.1 度2 白。
[0015] 優選地，形式A的XRPD光譜具有包括W下2目角中的所有十個峰：8.82、12.07、 14.43、14.92、16.26、18.25、19.06、19.78、20.82和23.51 ±0.1 度2 目，可選地 ±0.05 度2 白。
[0016] 優選地，形式A具有基本上如在圖1中示出的XRTO光譜。
[0017]形式A可W進一步表征為它的熱重分析(TGA)曲線，該曲線示出了在約163°C±2°C 的吸熱現象(endothermic event)。TGA曲線可W示出至多達130°C ±2°C的約6%的重量損 失（由于水損失）。
[001引優選地，形式A具有基本上如在圖9中示出的TGA曲線。
[0019] 形式A可W進一步表征為它的差示掃描量熱(DSC)曲線，該曲線示出了在約163°C ± 2°C下具有最大值的吸熱現象。DSC曲線可W示出從約45°C ± 2°C開始的吸熱現象（由于水 損失）。
[0020] 優選地，形式A具有基本上如在圖5中示出的DSC曲線。
[0021] 在第一方面的第二實施方式中，提供了式（I)的結晶化合物，在下文中稱為"形式 B"，表征為包括選自具有W下20角的峰中的四個或更多個(優選五個或更多個、優選六個或 更多個、優選屯個或更多個、優選八個或更多個、優選九個或更多個、優選所有十個)峰的 XRPD 光譜:9.37、10.34、12.59、13.17、15.00、15.63、18.51、19.10、20.79、23.93 ±0.1 度2 白， 可選地±0.05度20。
[0022] 優選地，形式B的XRTO光譜具有選自具有W下20角的峰中的一個、兩個、S個、四個 或者所有五個峰：10.34、15. OO、15.63、18.51和23.93±O. I度2白。
[0023] 優選地，形式B的XRPD光譜具有包括W下2目角的所有十個峰:9.37、10.34、12.59、 13.17、15.00、15.63、18.51、19.10、20.79和23.93±0.1 度2 目，可選地 ±0.05 度2 白。
[0024] 優選地，形式B具有基本上如在圖2中示出的XRro光譜。
[0025] 形式B可W進一步表征為它的熱重分析(TGA)曲線，該曲線示出了在約155°C±2°C 的吸熱現象。
[00%] TGA曲線可W示出與水解吸相關的至多達120°C ±2°C的約8%的重量損失。
[0027] 優選地，形式B具有基本上如在圖10中示出的TGA曲線。
[0028] 形式B可W進一步表征為它的差示掃描量熱(DSC)曲線，該曲線示出了在約180°C ±2°C下具有最大值的吸熱現象。DSC曲線可W示出從約50°C±2°C開始的吸熱現象（由于水 損失）。
[0029] 優選地，形式B具有基本上如在圖6中示出的DSC曲線。
[0030] 在第一方面的第=實施方式中，提供了式（I)的結晶化合物，在下文中稱為"形式 C'，表征為包括選自具有W下20角的峰中的四個或更多個(優選五個或更多個、優選六個或 更多個、優選屯個或更多個、優選八個或更多個、優選九個或更多個、優選所有十個)峰的 XRPD 光譜：9.33、10.73、14.85、15.29、15.77、16.16、18.60、20.12、21.00和23.22±0.1度2 0、可選地±0.05度20。
[0031 ]優選地，形式C的XRTO光譜具有選自具有W下2 0角的峰中的一個、兩個、S個、四個 或者所有五個峰：10.73、14.85、15.29、20.12和23.22±0.1度2白。
[0032] 優選地，形式C的XRPD光譜具有包括W下2目角的所有十個峰:9.33、10.73、14.85、 15.29、15.77、16.16、18.60、20.12、21.00和23.22±0.1度2目，可選地±0.05度2白。
[0033] 優選地，形式C具有基本上如在圖3或者圖20中示出的XRro光譜。
[0034] 形式C可W進一步表征為它的熱重分析(TGA)曲線，該曲線示出了在約149°C的吸 熱現象。
[0035] TGA曲線可W示出與水解吸相關的至多達120°C ±2°C的約3%的重量損失。
[0036] 優選地，形式C具有基本上如在圖11中示出的TGA曲線。
[0037] 形式C可W進一步表征為它的差示掃描量熱(DSC)曲線，該曲線示出了在約185°C ±2°C下具有最大值的吸熱現象。
[0038] 優選地，形式C具有基本上如在圖7中示出的DSC曲線。
[0039] 在第一方面的第四實施方式中，提供了式（I)的結晶化合物，在下文中稱作"形式 護，表征為包括選自具有W下20角的峰中的四個或更多個(優選五個或更多個、優選六個或 更多個、優選屯個或更多個、優選八個或更多個、優選九個或更多個、優選所有十個峰)峰的 XRPD 光譜：6.78、15.45、16.39、17.10、20.06、20.63、23.23、23.68、26.18和32.47±0.05度2 白。
[0040] 優選地，形式D的XRTO光譜具有選自具有W下20角的峰中的一個、兩個、立個、四個 或者所有五個峰:6.78、16.39、17.10、20.63和23.23±0.05度2白。
[0041 ] 優選地，形式D的XRPD光譜具有包括W下2目角的所有十個峰:6.78、15.45、16.39、 17.10、20.06、20.63、23.23、23.68、26.18和32.47±0.05度的2白。
[0042] 優選地，形式D具有基本上如在圖25中示出的邸抑光譜。
[0043] 在第一方面的第五實施方式中，提供了式（I)的結晶化合物，在下文中稱作"形式 E"，表征為包括選自具有W下20角的值中的四個或更多個(優選五個或更多個、優選六個或 更多個、優選屯個或更多個、優選八個或更多個、優選九個或更多個、優選所有十個峰)峰的 XRPD 光譜：6.82、15.04、15.68、16.47、17.17、18.44、20.69、23.：34、23.88和25.38±0.05度2 白。
[0044] 優選地，形式E的XRTO光譜具有選自具有W下2 0角的峰中的一個、兩個、立個、四個 或者所有五個峰：15.04、15.68、16.47、20.69和23.88 ± 0.05度2 白。
[0045] 優選地，形式E的XRPD光譜具有包括W下2目角的所有十個峰:6.82、15.04、15.68、 16.47、17.17、18.44、20.69、23.：34、23.88和25.38±0.05度2白。
[0046] 優選地，形式E具有基本上如在圖27中示出的XRro光譜。
[0047] 在第一方面的第六實施方式中，提供了式（I)的結晶化合物，在下文中稱作"形式 產，表征為包括選自具有W下20角的峰中的四個或更多個(優選五個或更多個、優選六個或 更多個、優選屯個或更多個、優選八個或更多個、優選九個或更多個、優選十個或更多個、優 選所有^^一個峰)峰的 XRPD 光譜：12.73、15.36、15.95、16.42、18.12、20.48、22.85、23.22、 27.04、27.69和32.47 ± 0.05度2白。
[004引優選地，形式F的邸ro光譜具有選自具有W下2目角的峰中的一個、兩個、立個、四個 或者所有五個峰：12.73、15.36、15.95、16.42 和 20.48 ± 0.5度的2 白。
[0049] 優選地，形式。的乂3?0光譜具有包括W下2目角的所有^^一個峰：12.73、15.36、 15.95、16.42、18.12、20.48、22.85、23.22、27.04、27.69和32.47±0.05度2白。
[0050] 優選地，形式F具有基本上如在圖29中示出的XRro光譜。
[0051] 在第二方面，本發明提供了用于制備式(I)的結晶化合物的方法：
[0化2]
[0053] 該方法包括W下步驟：
[0054] 通過將式（I)的無定形化合物溶解或者懸浮在溶劑或者溶劑混合物中形成配制 品，W及
[0055] 使來自該配制品的式(I)化合物結晶。
[0056] 可W將配制品中式（I)的無定形化合物基本上全部溶解于配制品中；可W將配制 品中式(I)的無定形化合物基本上全部分散于配制品中；或者可W將配制品中式（I)的無定 形化合物部分溶解和部分分散于配制品中。
[0057] 用于本發明的第二方面的方法中的式(I)的無定形化合物的量可W低于在溶劑或 者溶劑混合物中無定形化合物的溶解度極限(在運種情況下配制品是溶液），或者可W超過 溶解度極限(在運種情況下配制品是懸浮液）。
[0058] 用于溶解式（I)的無定形化合物的溶劑可W選自在其中在20°C式（I)的無定形化 合物具有大于200mg/ml、可選大于400mg/ml的溶解度的溶劑。溶劑可W是極性的、質子的或 者偶極非質子溶劑。示例性的極性的、質子的溶劑是水、伯醇，優選甲醇、乙醇和I-丙醇。另 外示例性的偶極非質子溶劑是二甲基亞諷和N，N-二甲基甲酯胺、N-甲基化咯燒酬等。優選 是伯醇。特別優選甲醇和乙醇。伯醇溶劑的含水量優選是小于4wt%，更優選是小于2wt%。 當伯醇是甲醇時，含水量優選是小于1 %。
[0059] 通過將抗溶劑添加至包含溶解的式(I)的無定形化合物的配制品，可W促使式(I) 的結晶化合物的結晶。抗溶劑可W是在其中在20°C式（I)的無定形化合物具有小于50mg/ ml、可選地小于30mg/ml的溶解度的溶劑。
[0060] 抗溶劑可W是非質子物質。示例性的抗溶劑是丙酬、乙酸乙醋、甲基叔下基酸、庚 燒、2-丙醇、乙酸異丙醋、二異丙酸、甲基乙基酬、四氨巧喃、苯甲酸(anisole)、和乙酸叔下 醋。
[0061] 在第二方面的另一實施方式中，在用于形成配制品的溶劑或者溶劑混合物中，式 (I)的無定形化合物可W幾乎不具有或者不具有溶解度，在運種情況下配制品是懸浮液。
[0062] 可W將成核劑添加至配制品。成核劑可W是式（I)化合物的結晶晶種。
[0063] 無論是W它的無定形形式還是W-種或多種它的結晶形式，溶劑的純度都可W影 響式(I)化合物在溶劑中的溶解度。
[0064] 在形成配制品之后，可W將配制品的溫度降低。在形成配制品期間，可W將溶劑或 者溶劑混合物加熱，并且在形成配制品之后，可W進行冷卻。
[0065] 在第=方面，本發明提供了通過根據本發明的第二方面的方法制備的式（I)的結 晶化合物。
[0066] 本發明還提供了通過根據本發明的第二方面的方法制備的式(I)的結晶化合物。
[0067] 對于其中活性成分可W W多于一種的多晶型物存在的藥物，如果制造方法導致具 有不同程度的多晶型物純度的多晶型物和/或其中該方法沒有控制多晶型物的互變，則可 W導致包含該化合物的藥物組合物的溶解和/或生物利用度的問題。
[0068] 如果產生具有多晶型物雜質的晶型，那么運可W導致不穩定性并且可W加快顯著 互變至另一多晶型物。因此，制備具有高多晶型純度的晶型是有利的。
[0069] 優選地，根據本發明的第一或者第S方面，如通過XRPD或者DSC測量的，優選地如 通過XRTO測量的，式(I)的結晶化合物包含大于90%的該化合物的單個結晶的多晶型物、優 選大于95%、更加優選大于99%、更加優選大于99.5% W及最優選大于99.8%。優選地，單 個多晶型物是形式A、形式B、形式C、形式D、形式E、和形式F中的一種。
[0070] 優選地，根據本發明的第一或者第S方面，優選地如通過HPLC測量的，式（I)的結 晶化合物具有至少95wt%、更加優選至少98%、更加優選至少99%、更加優選至少99.5%、 甚至更加優選至少99.8%、并且最優選至少99.9%的化學純度。
[0071] 式（I)的結晶化合物可W適合于與用于給藥的藥用載體重建。
[0072] 在本發明的第四方面，提供了包含抗生素 W及根據本發明的第一或者第=方面的 式(I)的結晶化合物的藥物組合物。優選地，藥物組合物還包含一種或多種藥用賦形劑。
[0073] 在第五方面中，本發明提供了用于治療細菌感染的根據第四方面的藥物組合物。
[0074] 在第六方面中，本發明提供了治療細菌感染的方法，包括將治療有效量的根據本 發明的第四方面的藥物組合物給予需要它們的患者。
[0075] 在第屯方面中，本發明提供了形成包含式（I)化合物的藥物組合物的方法，該方法 包括將式(I)的結晶化合物溶解或者分散于載液(carrier Iiquid)的步驟。可選地，載液是 用于靜脈注射的藥用載體如葡萄糖、氯化鋼&葡萄糖5混合物、氯化鋼、乳酸鋼等。可選地，載 液是含水的鹽溶液。
[0076] 藥物組合物中的式（I)化合物的濃度是在Img/ml至700mg/ml、優選從100至500mg/ ml、更加優選從150至250mg/ml的范圍內。
【附圖說明】
[0077] 現參照附圖將更加詳細地描述本發明，其中：
[007引圖 1 是形式A的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末衍射 圖；
[0079] 圖 2 是形式 B 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末衍射 圖；
[0080] 圖3是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末衍射 圖；
[0081 ]圖4是無定形形式的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末 衍射圖；
[0082] 圖5是形式A的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的示差掃描量熱熱 分析圖；
[0083] 圖 6 是形式 B 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的示差掃描量熱熱 分析圖；
[0084] 圖7是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的示差掃描量熱熱 分析圖；
[0085] 圖8是無定形形式的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的示差掃描量 熱熱分析圖；
[0086] 圖9是形式A的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的熱重曲線；
[0087] 圖 10是形式B的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的熱重曲線；
[008引圖 U是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的熱重曲線；
[0089]圖 12是對于無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1- 基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-I-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的溶液或者懸 浮液的HPLC響應區域相對于濃度的曲線；
[0090] 圖 13是形式A的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的2?放大的光學顯 微圖像；
[0091] 圖 14是形式B的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的2?放大的光學顯 微圖像；
[0092] 圖 15是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的2?放大的光學顯 微圖像。
[0093] 圖 16是形式A的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的拉曼光譜。
[0094] 圖 17是形式A的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1 -氮雜雙環[3.2.0 ]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物的FT-RT光譜。
[0095] 圖 18是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的拉曼光譜。
[0096] 圖 19是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1 -氮雜雙環[3.2.0 ]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物的FT-RT光譜。
[0097] 圖20是根據實施例13獲得的形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物 的X射線粉末衍射圖；
[009引圖21是根據實施例13獲得的形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物 的熱重曲線；
[0099] 圖22是根據實施例13獲得的形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物 的2f5x放大的光學顯微圖像；
[0100] 圖 23是形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物的Ih-NMR譜。
[0101] 圖24示出了根據實施例13獲得的形式C的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1， 2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧 化物的粒徑分布曲線；
[0102] 圖 25 是形式 D 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末衍射 圖；
[0103] 圖26是形式D的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的拉曼光譜。
[0104] 圖27是形式E的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-I-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末衍射 圖；
[0105] 圖28是形式E的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的拉曼光譜。
[0106] 圖 29是形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的X射線粉末衍射 圖；
[0107] 圖30和31 是S個批次的形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S 挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的 拉曼光譜。
[010引圖32-39是第一批次的形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫- 3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的樣 品的掃描電子顯微圖像；
[0109] 圖 40-46是第二批次的形式F 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S 挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的樣 品的掃描電子顯微圖像；
[0110] 圖 47-50 是第 S批次的形式F 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S 挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的樣 品的掃描電子顯微圖像；
[0111] 圖51是形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1 -氮雜雙環[3.2.0 ]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物的FT-RT光譜。
[0112] 圖 52 是形式 F 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的示差掃描量熱熱 分析圖；
[0113] 圖 53 是形式 F 的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的熱重曲線；
[0114] 圖54是形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的逸出氣體分析 化GA)的氣體逸出圖像；
[0115] 圖55是形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的質量變化的動態 氣相吸附(DVS)變化的曲線；W及
[0116] 圖56示出 了形式F的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的動態氣相吸 附(DVS)等溫曲線。
【具體實施方式】
[0117] 本發明提供了結晶的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物，其是非吸濕 性的、熱穩定的并且具有避免與現有技術形式有關的問題的有利特性。
[011引本發明還提供了用于形成結晶的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S 挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的 方法。該方法允許形成高多晶型純度的（2S，3S，5R) -3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物。
[0119] 用于形成式（I)的結晶化合物的合適的結晶技術包括但不限于沉淀和再結晶（包 括抗溶劑結晶)方法，包括或不包括用成核劑引晶（seeding)。在優選的實施方式中，使用抗 溶劑結晶方法。
[0120] 可W將稀釋的、飽和的或者超級飽和溶液用于結晶。
[0121] 可W將式(I)的無定形化合物的溶液冷卻W促進式(I)的結晶化合物的結晶。
[0122] 可W在20-50°C范圍內的溫度下將式(I)的無定形化合物溶解。可W將溶液冷卻至 約(TC或約10°CW促進結晶。
[0123] 制備結晶形式的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲 基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的方法包括但不限 于W下方法：
[0124] 形式A方法1:
[0125] -在20°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在96%的乙醇中的溶液，
[01%]-通過過濾收集固體。
[0127]形式A方法2:
[01%]-在20°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在96%的乙醇中的飽和溶液，
[0129] -添加作為抗溶劑的甲基叔下基酸，
[0130] -在室溫下將混合物攬拌過夜，
[0131] -通過過濾收集固體。
[0132] 形式A方法3:
[0133] -在20°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在96%的乙醇中的飽和溶液，
[0134] -用成核劑引晶，
[0135] -添加作為抗溶劑的庚燒，
[0136] -在室溫下將混合物攬拌過夜，
[0137] -通過過濾收集固體。
[013引形式A方法4
[0139] -在20°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在96%的乙醇中的飽和溶液，
[0140] -用成核劑引晶，
[0141] -添加作為抗溶劑的2-丙醇，
[0142] -在室溫下將混合物攬拌過夜，
[0143] -通過過濾收集固體。
[0144] 形式A方法5
[0145] -通過加熱至35°C，將式（I)的無定形化合物溶解在96%的乙醇中
[0146] -緩慢添加作為抗溶劑的甲基叔下基酸(時間：約1小時），
[0147] -將混合物冷卻至10°C
[0148] -在10°C下將混合物攬拌過夜，
[0149] -通過過濾收集固體。
[01加]形式A方法6
[0151] -在35°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在96%的乙醇中的飽和溶液，
[0152] -用成核劑將溶液引晶，
[0153] -在20°C下緩慢添加作為抗溶劑的甲基叔下基酸(時間：約20min)，
[0154] -將混合物冷卻至20°C過夜，
[01W]-通過過濾收集固體
[0156] -
[0157] 形式A方法7
[0158] -在40°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在96%的乙醇中的飽和溶液，
[0159] -用成核劑將溶液引晶，
[0160] -在約5小時內將混合物冷卻至20°C，
[0161] -在20°C下攬拌混合物，
[0162] -通過過濾收集固體
[0163] 形式B方法1
[0164] -在40°C下攬拌式(I)的無定形化合物在丙酬中的飽和溶液，
[01化]-通過過濾收集固體。
[0166] 形式C方法1
[0167] -在40°C下，攬拌式(I)的無定形化合物在99.8 %的乙醇中的溶液，
[016引-在36°C下用成核劑將溶液引晶
[0169] -在15°C下冷卻溶液，
[0170] -將混合物攬拌過夜
[0171] 可W通過從二甲基甲酯胺溶液結晶形成形式D、E和F。本發明人已經發現，形式D和 形式E可W最初從DMF溶液結晶，但是一旦形式F已經形成之后不再形成。在不希望受限于任 何理論的情況下，運可W是由于形式巧k形式D或者形式E具有更大的穩定性。
[0172] 出乎意料地，本發明人已經發現，（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S 挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的 一種晶型可W用于形成運種化合物的另一種晶型。晶型A、B和C中的一種可W用作在形式A、 形式B和形式C中的另一種結晶中的晶種。
[0173] 如在本文中描述的藥物組合物可W是W用于靜脈注射的可注射形式。該組合物可 W包含穩定劑。該組合物可W是W準備用于重建的合適的無菌固體形式W形成可注射的溶 液。
[0174] 可W將包含如在本文中描述的式(I)的結晶化合物的藥物組合物單獨地給予或者 可W與治療有效量的抗生素共同給予。
[0175] 如在本文中描述的藥物組合物可W包含抗生素并且可W包含一種或多種常規的 藥用賦形劑。
[0176] 示例性的抗生素是0-內酷胺抗生素，特別是青霉素類和頭抱菌素類，并且可W選 自阿莫西林、氨節西林、阿帕西林、阿洛西林、己氨西林、簇節青霉素、氯挫西林、雙氯西林、 氣氯西林、侖氨西林、美西林、甲氧西林、美洛西林、奈夫西林、苯挫西林、青霉素 G、青霉素 V、 贓拉西林、替莫西林、替卡西林、氨曲南、BAL30072、卡蘆莫南、PTX2416、替吉莫南、頭抱克 洛、頭抱徑氨節、頭抱氨節、頭抱嚷吩、頭抱徑挫、頭抱化硫、頭抱挫嘟、頭抱拉宗、頭抱地尼、 頭抱化朽、頭抱他美、頭抱克朽、頭抱甲朽、頭抱美挫、Cefrninox、頭抱尼西、頭抱贓酬、頭抱 嚷月虧、頭抱替坦、頭抱替安、頭抱嚷巧、頭抱維星、頭抱嚷吩、頭抱泊朽、頭抱丙締、頭抱哇朽、 頭抱拉定、頭抱米諾、頭抱橫晚、頭抱洛林、頭抱他晚、頭抱替挫、頭抱布締、頭抱挫朽、頭抱 化普、頭抱洛扎(Ceftolozane)、頭抱曲松、頭抱巧辛、頭抱挫喃、頭抱氨節、嚷抱霉素、氣氧 頭抱、拉氧頭抱、氯碳頭抱亞胺培南、美羅培南、多尼培南、厄他培南、比阿培南、帕尼培南、 法羅培南或者它們的衍生物。
[0177] 抗生素可W選自氨基糖巧類:阿米卡星、阿貝卡星、阿泊拉霉素、地貝卡星、正大霉 素、異帕米星、卡那霉素、新霉素、奈替米星、Plazomicin、西蘇霉素、大觀霉素、鏈霉素、托普 霉素或者它們的衍生物。
[0178] 抗生素可W選自哇諾酬類：西諾沙星、環丙沙星、伊諾沙星、加替沙星、吉米沙星、 左氧氣沙星、莫西沙星、糞晚酬酸、諾氣沙星、Oxaf loxacin、或者它們的衍生物。
[01巧]抗生素可W選自抗微生物膚(抗菌膚，antimicrobial peptide),例如粘菌素、多 粘菌素 B或者它們的衍生物。
[0180] 如在本文中描述的藥物組合物可W包含僅一種或者多于一種的抗生素。
[0181] 包含式（I)的結晶化合物的藥物組合物可W包含殺菌性或者通透性增加 g蛋白產 物(BPI)或者外排累抑制劑或者與其共同給予W改善對抗革蘭氏陰性細菌和抗微生物劑的 細菌的活性。也可W將抗病毒劑、抗寄生蟲劑、抗真菌劑與抑制劑化合物結合給予。
[0182]該藥物組合物可W包含配位劑(絡合劑，complexing agents)或者抗凝血劑、抗氧 化劑、穩定劑、氨基糖巧類、藥用鹽等等或者它們的混合物。
[0183] 特別地，該藥物組合物可W包含0-內酷胺抗生素，優選青霉素、頭抱菌素、碳青霉 締、單菌霉素，更加優選贓拉西林、頭抱化朽;頭抱曲松;美羅培南、氨曲南。
[0184] 該藥物組合物可W包含緩沖劑，例如巧樣酸鋼、乙酸鋼、酒石酸鋼、碳酸鋼、碳酸氨 鋼、嗎嘟丙橫酸、其他憐酸鹽緩沖劑等W及馨合劑如乙二胺四乙酸巧DTA)、二亞乙基S胺五 乙酸、徑基亞乙基二胺=乙酸、次氮基=乙酸、1,2-二氨基環己燒四乙酸、雙（2-氨基乙基） 乙二醇四乙酸、1,6-六亞甲基二胺四乙酸等或者它們的藥用鹽。
[0185] 可W通過任何合適的方法、優選通過靜脈注射將如在本文中描述的藥物組合物給 予至人或者溫血動物。
[0186] 實施例
[0187] W傳輸模式在具有X'celerator檢測器的X'ped Pro儀器上獲得在本文中描述的 所有的XRTO數據。使用化曲score Plus軟件使用銅作為在1.54A的波長下的放射源評估數 據。
[0188] 在TA Q2000 MDSC儀器上進行DSC分析。
[0189] 在TA Q5000儀器上進行TGA分析。使用普遍分析軟件（Universal Analysis sof tware)評估數據。
[0190] 根據WO 2008010048的實施例1制備無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-IH-I，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4， 4-二氧化物，通過引證將其內容并入本文。
[0191] 實施例1
[0192] (2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式A的制備
[0193] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)- 7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0 ]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物(200mg)溶解在96 %的乙 醇(0.5mL)中。將溶液在20°C下攬拌，在30分鐘之后，形成固體。將混合物在20°C下攬拌4小 時并且通過過濾將固體分離并且在室溫下在真空烘箱中干燥過夜。獲得的產物(30mg)是結 晶的形式A，其由在圖1中示出的并且在表1中總結的XRPD圖譜表征。
[0194]
[0195] DSC(圖5)示出了樣品在163 °C下具有最大值的烙融吸熱。在圖9中示出了 TGA熱曲 線。
[0196] 在圖13中示出了形式A的光學顯微圖像。
[0197] 實施例2
[0198] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物形式A的制備
[0199] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0 ]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物（1 g)懸浮在96 %的乙醇 (3mL)中。通過針筒式過濾器將得到的混合物過濾。用作為抗溶劑的甲基叔下基酸(0.5mL) 處理飽和溶液。添加抗溶劑導致固體沉淀。將混合物在室溫下攬拌過夜并且通過過濾將固 體分離并且在室溫下在真空烘箱中干燥過夜。回收的固體是結晶的形式A，通過與在實施例 1中給出的XRTO圖譜一致的XRTO表征。
[0200] 實施例3
[0201] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物形式A的制備
[0202] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0 ]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物（1 g)懸浮在96 %的乙醇 (5mL)中。通過針筒式過濾器將得到的混合物過濾。將作為晶種的一撮形式A物質添加至溶 液。晶種是不溶解的并且用作為抗溶劑的庚燒(〇.5mL)處理飽和溶液。添加抗溶劑導致固體 沉淀。將混合物在室溫下攬拌過夜并且通過過濾將固體分離并且在室溫下在真空烘箱中干 燥過夜。回收的固體是結晶的形式A，表征為與在實施例1中給定的XRTO圖譜一致的XRPD。 [020；3] 實施例4
[0204] (2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式A的制備
[0205] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物（Ig)懸浮在96%的乙醇 (5mL)中。通過針筒式過濾器將得到的混合物過濾。將作為晶種的一撮形式A物質添加至溶 液中。晶種是不溶解的并且用作為抗溶劑的2-丙醇(0.5mL)處理飽和溶液。添加抗溶劑導致 固體沉淀。將混合物在室溫下攬拌過夜并且通過過濾將固體分離并且在室溫下在真空烘箱 中干燥過夜。回收的固體是結晶的形式A，表征為與在實施例1中給定的XRPD圖譜一致的 XRPDo
[0206] 實施例5
[0207] (2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式A的制備
[020引將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)- 7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(4g)在配備有葉輪式攬 拌器的multimax容器中稱重。將固體懸浮在96%的乙醇(32mL)中。將混合物加熱至35°C并 且在800RPM下攬拌。在35°C下，起始材料似乎是溶解的但是溶液看起來是輕微不透明的。將 作為抗溶劑的甲基叔下基酸(SmL)在1小時內添加至不澄清的溶液。添加抗溶劑導致固體形 成。將混合物在1小時內冷卻至10 °C。在線性冷卻（COO1 ing ramp)期間，該物質變為粘性的 并且大多數材料粘附至容器壁。將混合物攬拌過夜并且通過機械除去容器壁上的粘性固 體，獲得的固體從容器中排除。在真空下將獲得的混合物過濾;將濾餅在室溫下在真空烘箱 中干燥60小時W提供2.75g的白色固體。回收的固體是結晶的形式A，表征為與在實施例1中 給定的XRTO圖譜一致的XRPD。
[0209] 實施例6
[0210] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式A的制備
[0211] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(5g)在配備有葉輪式攬 拌器的multimax容器中稱重。將固體懸浮在96%的乙醇(30mL)中。將混合物加熱至35°C并 且在800RPM下攬拌。在35°C下起始材料似乎是溶解的但是溶液看起來是輕微不透明的。通 過針筒式過濾器將不澄清的溶液過濾W獲得澄清的溶液。將作為晶種的一撮形式A物質添 加至溶液；晶種是不溶解的并且將混合物在45分鐘內冷卻至20°C。在該溫度下將作為抗溶 劑的甲基叔下基酸（IOmL)在20分鐘內添加。添加抗溶劑導致了粘性固體形成，大多數材料 粘附至容器壁。將混合物攬拌過夜并且通過機械除去來自容器壁的粘性固體，將獲得的固 體從容器中釋放。在真空下將獲得的混合物過濾;將濾餅在室溫下在真空烘箱中干燥60小 時W提供3.61g的白色固體。回收的固體是結晶的形式A，表征為與在實施例1中給定的XRPD 圖譜一致的XRPD。 腳。實施例7
[0213] (2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式A的制備
[0214] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-lH-l，2,3-ミ挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(7g)在配備有葉輪式攬 拌器的mu 11imax容器中稱重。將固體懸浮在96%的乙醇（2ImL)中。將混合物加熱至40°C并 且在400RPM下攬拌。在40°C下起始材料似乎是溶解的但是溶液看起來是輕微不透明的。通 過針筒式過濾器將不澄清的溶液過濾W獲得澄清的溶液。將作為晶種的一撮形式A物質添 加至溶液；晶種是不溶解的并且將混合物在40°C下攬拌1小時。然后將混合物在5小時內冷 卻至10°C并且攬拌60小時。獲得的材料粘附至容器壁并且通過機械除去來自容器壁的粘性 固體釋放。將獲得的混合物在真空下過濾;將濾餅在室溫下在真空烘箱中干燥18小時W提 供5.5?的白色固體。回收的固體是結晶的形式A，表征為與在實施例1中給定的XRTO圖譜一 致的XRro。
[0215] 實施例8
[0216] (2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式B的制備
[0217] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物（200mg)懸浮在丙酬 (0.5mL)中并且將漿料在4(TC下攬拌4小時。通過過濾將固體分離并且在室溫下在真空烘箱 中干燥過夜。獲得的產物（150mg)是結晶的形式B，表征為如在圖2中示出的并且在表2中總 結的XRTO圖譜。
[021 引
[0219] DSC(圖6)示出樣品在180°C下具有最大值的烙融吸熱。在圖10中示出了TGA熱曲 線。
[0220] 在圖14中示出了形式B的光學顯微圖像。
[0。1] 實施例9
[0222] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物形式C的制備。
[0223] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)- 7-氧基-4-硫雜-I-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(5g)在配備有葉輪式攬 拌器的mul timax容器中稱重。將固體懸浮在HPLC等級99.8 %的乙醇（20mL)中。將混合物加 熱至40°C并且在500RPM下攬拌。在40°C下起始材料似乎是溶解的但是溶液看起來是輕微不 透明的。通過針筒式過濾器將不透明的溶液過濾W獲得澄清的溶液。將溶液在15分鐘內冷 卻至36°C并且將作為晶種的形式B物質（30mg)添加至溶液；晶種是不溶解的并且促進產物 結晶。將混合物在36°C下攬拌30分鐘并且然后在3.5小時內冷卻至15°C。將漿料老化過夜并 且然后在真空下過濾;將濾餅在室溫下在真空烘箱中干燥18小時W提供3.7g的白色固體。 獲得的產物是結晶的形式C，表征為如在圖3中示出的并且在表3中總結的XRTO圖譜。
[0224]
[0225] DSC(圖7)示出了樣品在185°C下具有最大值的烙融吸熱。
[0226] 在圖11中示出了 TGA熱曲線。
[0227] 在圖15中示出了形式C的光學顯微圖像。 帷引比較實施例
[0229] 在圖4中示出了如在WO 2008/010048中所描述而制備的無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0] 庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物的XRTO光譜。在該光譜中沒有檢測出結晶特性。 腳0] 溶解度評估
[0231] 相對于圖12中示出的HPLC響應因子計算溶劑的溶解度值。
[0232] 用W下的方法使用溶解在乙臘/水9/1中的樣品，對于式（I)的無定形化合物計算 HPLC響應因子：
[0233] 柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18(150X4.6mm、5皿）
[0234] 溫度：25°C
[02巧]流動相:A:0.05M正憐酸鋼/水，B:乙臘
[0236] 梯度:在IOmin中從5%的B至95%的B
[0237] 檢測器:UVA = 220nm 「02381

[0239] 制備在選定的溶劑中的式（I)的無定形化合物的漿料并且在20°C和40°C下攬拌4 小時。
[0240] 將每個漿料的樣品過濾并且將母液注射于HPLC中。
[0241 ]將固體殘余物分離并且通過XRTO分析。
[0242] 在W下表4中總結了結果。
[0243] 表4.式（I)的無定形化合物的溶解度
[0244]
[0245]
[02W 通過拉曼光譜和傅里葉變換紅外光譜法(FT-IR)的形式A表征
[0247] 在圖16中示出了具有在表5中的相關的峰帶清單(peak bands list)的形式A的拉 曼光譜。
[024引峰清單：
[0249]
[0巧0]
[0251] 3形式A的FT-IR光譜。
[0 巧 2]
[0 巧 3]
[0 巧 4]
[0 巧5]
[0256] 青單的形式C的拉曼光譜。
[0 巧 7]
[0巧引
[0 巧9]
[0260] 青單的形式C的FT-IR光譜。
[0261]
[0%2]
[0%3]
[0264] 對形式A和形式C進行的分析，包括所收集的在結晶期間含水量的影響的信息，已 經支持了 W下假設:形式A是具有與周圍環境迅速地水交換的水合形式W及形式C是更加穩 定的無水形式。因此，選擇形式C用于進一步的優化和擴大的結晶過程，并且如W下描述地 評估。
[0265] 形式C結晶的優化
[0266] 實施例10-使用形式C晶種的結晶步驟
[0267] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物形式C的制備
[0%引將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(5g)在配備有葉輪式攬 拌器的50mL的multimax容器中稱重。將固體懸浮在20mL的HPLC等級99.8%的乙醇中。將混 合物加熱至40°C并且在700RPM下攬拌。在40°C下溶解起始材料。將溶液在15分鐘內冷卻至 36°C并且將作為晶種的形式C材料(27mg)添加至溶液;晶種是不溶解的并且促進產物結晶。 將混合物在3.5小時內冷卻至15°C。將漿料老化過夜并且然后在真空下過濾;將濾餅在30°C 下在真空烘箱中干燥40小時W提供3.7g的白色固體。該固體示出了形式C的XRPD圖譜。 [0269]如在實施例11中描述的，在使用96 %的乙醇代替HPLC等級99.8 %的乙醇生產形式 C材料中，還研究了乙醇體系的質量。 腳0] 實施例11
[0271] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物形式A的制備
[0272] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)- 7-氧基-4-硫雜-I-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(5g)在配備有葉輪式攬 拌器的50mL的multimax容器中稱重。將固體懸浮在20mL的96%的乙醇中。將混合物加熱至 40°C并且在700RPM下攬拌。在40°C下起始材料似乎是溶解的但是溶液看起來是輕微不透明 的。通過針筒式過濾器將不透明的溶液過濾W獲得澄清的溶液。將溶液在15分鐘內冷卻至 35°C并且將作為晶種的形式C物質（28mg)添加至溶液。在35°C下10分鐘之后，是溶解的。將 溫度在15分鐘內降低至30°C并且添加作為晶種的更多的形式C物質（27mg)。在15分鐘之后 晶種溶解。將溶液加熱至至多達35°C并且將一撮形式B物質添加至溶液但是在幾分鐘之后 溶解。將作為晶種的一撮形式A物質添加;此時晶種不溶解并且促進產物結晶。將混合物在 3.5小時內冷卻至15°C。將漿料老化過夜并且然后在真空下過濾;將濾餅在3(TC下在真空烘 箱中干燥18小時W提供3. Ig的白色固體。該固體示出了與形式A-致的XRPD圖譜。
[0273]實施例10和11步驟證明了，在乙醇體系中的含水量通過引晶途徑可W影響形式A 和形式C的生產。形式A物質的形成可能是在96%的乙醇中，然而來自形式C晶體的形式C的 形成需要使用HPLC等級99.8%的乙醇。 腳4] 實施例12
[02巧](2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式C的制備
[0276] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(Sg)在配備有葉輪式的 攬拌器的50mL的Multimax容器中稱重。將固體懸浮在20mL的HPLC等級99.8%的乙醇中。將 混合物加熱至40°C并且在800RPM下攬拌。在40°C下起始材料溶解。將溶液在10分鐘內冷卻 至36°C并且將作為晶種的形式C物質(24mg)添加至溶液;晶種不溶解并且促進產物結晶。在 36°C下攬拌15分鐘之后，將混合物在3.5小時內冷卻至15°C。將漿料老化過夜并且然后在真 空下在氮氣氛中過濾（將連接至氮焊劑的漏斗放置在過濾器上方）。用8ml的HPLC等級 99.8%的乙醇洗涂濾餅。將濾餅在30°C下在真空烘箱中在過濾器內部干燥2小時，此后將產 物轉移至結晶器并且干燥另外的16個小時。通過Ih-NMR分析產物W檢查溶劑含量并且示出 了~1.3%w/w的乙醇的存在。將濾餅在35°C下在真空烘箱中進一步地干燥6小時。取出新樣 品并且通過Ih-NMR分析溶劑含量。將乙醇殘余物與第一樣品的是可比的。將產物存儲在-20 °C 一周，然后放入至在4(TC下的真空烘箱中24小時W產生6g的產物。該固體示出了與形式C 一致的XRro圖譜。Ih-NMR證實了在濾餅中~1.3 % w/w的乙醇殘余物的存在。
[0277] 晶種負載的減少對于產物結晶不具有任何負面的影響并且在如實施例13中所描 述的放大步驟中進行。 腳引 實施例13
[02 巧]在 36g 的規模下的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S 挫-3-鐵-1-基） 甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式C的放大制 備。
[0280]將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(36.45g)在配備有葉輪 式攬拌器的250mL的Multimax容器中稱重。將固體懸浮在146mL的HPLC等級99.8%的乙醇 中。將混合物在20分鐘內加熱至40°C。在40°C下15分鐘之后起始材料完全地溶解，并且將溶 液在10分鐘內冷卻至36°C并且將作為晶種的形式C物質（IlOmg)添加至溶液;該晶種不溶解 并且促進產物結晶。在36°C下攬拌10分鐘之后，將混合物在3.5小時內冷卻至15°C。將獲得 的混合物老化過夜，然后在真空下過濾。用40mL的HPLC等級99.8%的乙醇洗涂濾餅并且用 40mL的甲基叔下基酸洗涂S次W除去來自濾餅的殘余乙醇。將濾餅在氮氣氛(將連接至氮 焊劑的漏斗放置在過濾器上面）中在真空下脫液。將濾餅在真空烘箱中干燥24小時W產生 作為白色固體的26.Sg的最終產物。
[0281] 通過XRPD、TGA、光學顯微鏡(OM)和Ih-NMR分析固體。
[0282] 產物的XRTO分析示出了具有與形式C一致的圖譜的結晶物質（圖20)。
[0283] 產物的TGA分析（圖21)示出了至多達120°C的近似2%的重量損失（可能是由于吸 收的水和溶劑殘余物）。
[0284] 在圖22中的OM分析示出了形式C晶體。使用偏振光可W看到雙折射的顆粒。
[02 化]Ih-NMR譜（圖 23)是與（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-lH-l，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物的結構一致 的。將在1.06ppm下的乙醇信號與在1.40ppm下的API信號比較，計算乙醇殘余物。考慮到積 分值（integral value)、質子的數量W及參考信號的分子量，評估的乙醇殘余物等于相對 于 API 的 0.4%w/w。
[0286] 在生理鹽水溶液中的溶解度評估
[0287] 通過HPLC采用專用的walk-up方法計算形式C的溶解度。通過在實施例13中描述的 擴大步驟獲得的產物用于進行實驗。
[0288] 在環境溫度（~20°C)下將1.9g的產物懸浮在Iml的商用生理溶液(0.9%的化Cl) 中。在30min之后，懸浮液是輕微不透明的并且非常粘稠。此后將懸浮液取樣并且將樣品注 射在HPLC中W確定它的濃度。在攬拌化r之后，固體殘余物完全地溶解。為了避免粘稠溶液 的凝膠化，不進行添加更多的固體。取出樣品并且注射在HPLC中W確定它的濃度。將溶液攬 拌另外的化r并且再次取樣。還將化r的樣品注射于HPLC中W確定它的濃度。HPLC痕量沒有 示出顯著的雜質形成。表9示出了對于選定的時間點的溶解度結果。 「n)R〇1
[0290] 粒徑分布
[0291] 使用W下描述的步驟對通過在實施例13中所描述的擴大步驟獲得的產物進行粒 徑分析。對每各懸浮液記錄=次測量并且在圖24中和在表10中示出了結果。
[02921
[(
[0巧4] 實施例14
[02巧](2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式D的制備 [0巧6] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-( (3-甲基-1H-1，2，3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)- 7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(30g)懸浮在200mL的N， N-二甲基甲酯胺中，預加熱至+20/25°C。在攬拌5分鐘之后獲得溶液，并且在幾分鐘的攬拌 之后發生結晶。攬拌懸浮液約2小時。然后將懸浮液冷卻至0/巧°C并且攬拌約2小時。
[0297]將獲得的固體過濾并且用50mL的N，N-二甲基甲酯胺洗涂，預冷卻至0/巧°C。然后 將濕的產物懸浮在300mL的二氯甲燒中并且將溫度調節至+30/32°C。攬拌懸浮液45分鐘，然 后過濾固體并且用IOOmL的二氯甲燒洗涂，預加熱至+30/32°C。將產物在真空下在+40°C下 干燥直至得到恒重。獲得的產物（19.3g)是結晶的形式D，其表征為如在圖25中示出的W及 在W下表11中總結的XRPD圖譜。
[n?9Rl
[0300]在具有在W下表12中的相關的峰帶清單的圖26中示出了形式D的拉曼光譜(使用 Raman Jasco RFT-600儀器，光源Nd-YAG，1064nm:激發波長）。
[0301]
[0302]
[030：3] 實施例15
[0304] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4，4-二氧化物形式E的制備
[0305] 將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1H-1，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物(5g)懸浮在30mL的N，N-二甲基甲酯胺中，預加熱至+20/25°C。在5分鐘的攬拌之后，獲得溶液，并且在幾分鐘之后發 生結晶。將懸浮液攬拌約2小時。
[0306] 過濾獲得的固體并且用12.5血的N，N-二甲基甲酯胺洗涂。然后將濕的產物懸浮在 IOOmL的乙酸乙醋中并且調節溫度至+40/45°C。攬拌懸浮液60分鐘，然后過濾固體并且用 SOmL的乙酸乙醋洗涂，預加熱至+40/45 °C。
[0307] 將最終的產物在真空下在+40°C下干燥直至得到恒重。
[0308] 獲得的產物(2.4g)是結晶的形式E，其表征為如在圖27中示出的并且在W下表13 中總結的XRPD圖譜。
[0309]
[0310]
[0311] 巧具巧巧h巧14甲的相天的峰巧清早的圏28甲不出J化巧E的巧叟光諧（便用 Raman Jasco RFT-600儀器，光源Nd-YAG，1064nm:激發波長）。 「03121
LUJ'"」 頭砸例ib
[0314] (25,35,51〇-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基）-7-氧基-4- 硫雜-I-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式F的制備
[031引將無定形的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-lH-l，2,3-S挫-3-鐵-1-基）甲基)- 7-氧基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物（130g)懸浮在800mL的N， N-二甲基甲酯胺中，預加熱至+20/25°C。添加 IOOmL的N，N-二甲基甲酯胺W洗涂燒瓶壁。在 攬拌5分鐘之后獲得溶液，并且在攬拌幾分鐘之后發生結晶。攬拌懸浮液約3小時。然后將懸 浮液冷卻至〇A5°C并且攬拌約3小時。
[0316]過濾獲得的固體并且用300mL的N，N-二甲基甲酯胺洗涂，預冷卻至0/+5°C。然后將 濕的產物懸浮在700mL的乙酸乙醋中并且調節溫度至+40/45°C。將懸浮液攬拌30分鐘，然后 過濾固體并且用150mL的乙酸乙醋洗涂，預加熱至+40/45°C。將具有在乙酸乙醋中懸浮的步 驟重復兩次。將最終的產物在真空下在+40°C下干燥直至得到恒重。
[0317]獲得的產物(65-66g，摩爾產率約76%，具有98-99%的試驗(assay))是結晶的形 式F，其表征為如在圖29中示出的并且在W下表15中總結的XRPD圖譜。
[0320] 在圖30和31中示出了 S個批次的形式F的拉曼光譜。
[0321] 對于不同批次的形式F產物，獲得的XRTO和拉曼光譜兩者均是重疊的。
[0322] 在圖32-50中示出了S個批次的形式F樣品的掃描電子顯微圖像。使用化化JSM 5500 LV掃描電子顯微鏡，在30kV下在低真空(30Pa)中利用反向散射電子技術操作，獲得了 樣品的沈M圖像。
[0扣引 通過FT-IR、DSC、TGA、EGA的形式F表征
[0324] 圖51示出了具有在表16中的相關的峰帶清單的形式F的FT-IR光譜。
[0325] 峰清單：
[0326]
[0327]
[0328] 在圖52中示出了形式F的DSC分布圖。DSC分布圖示出了與樣品的降解有關的在大 約18 4 °C下的放熱峰(從17 5 °C開始）。
[0329] 在圖53上示出的形式F的熱重分析(TGA)分布圖示出了與樣品的降解有關的在大 約160°C之后的顯著的重量損失。通過在圖54中示出的逸出氣體分析巧GA)進一步證實。EGA 證實，在TGA分析中觀察到的現象是由于降解產物(例如，二氧化碳、二氧化硫等）的損失所 引起的。
[0扣0] 通過動態氣相吸附(DVS)的形式F表征
[0331] 在25°C和相對濕度(RH%目標如W下）下進行動力學吸濕測量：
[0332] ?從 40% 畑至 90% 畑
[0333] ?從90 %畑至0 %畑
[0334] ?從0 %畑至90 %畑
[0335] ?從90 %畑至0 %畑
[0336] 在圖55中示出了獲得的結果，在其中紅線描繪出作為時間的函數的質量變化百分 比，同時藍線描繪出作為時間的函數的相對濕度變化。
[0337] 在圖56中報道了 DVS等溫曲線，在其中紅線描述了第一吸附階段，藍線描述了第一 解吸階段，綠線描述了第二吸附階段并且粉紅色線描述了第二解吸階段。
[0338] DVS分析示出了形式F在至多達大約50 %畑下是穩定的，并且在90 %畑下樣品示出 了大于50%w/w的重量增加。在該現象之后，樣品可逆地釋放和吸收水。
[0扣9] 形式F的穩定性
[0340] 在25°C和60%畑下一天之后W及在60°C和75%RH下一天之后，樣品變為粘稠的液 體。
[0341] 形式F的吸濕性
[0342] 使用W下方程式計算吸濕性：
[0343] %重量變化=[(W2-W1)/W1]*100
[0344] 其中，
[0345] Wl是在實驗開始時的樣品重量;并且
[0346] W2是在第一吸附循環中在25 °C和80 %畑下的樣品重量。
[0347] 獲得的結果示出，樣品是非常吸濕性的，具有大于15%的質量增加，并且在高濕度 下變為粘稠的液體。
[0348] 按照W下描述進行用于產物評估的分析方法。
[0349] 分析方法
[0350] 冊LC法
[0351] 柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18(150X4.6mm，5皿）；柱溫25°C
[0352] 流動相:A:正憐酸二氨鋼二水合物0.05M;B:乙臘 [0；353]梯度；
[0354]
[0355]
[0；356]流動：1. OmL/min [O%7]檢測器：UV DAD@220nm
[0%引獲得的（2S，3S，5R)-3-甲基-3-((3-甲基-1護1，2,3-^挫-3-鐵-1-基）甲基)-7-氧 基-4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚燒-2-簇酸醋4,4-二氧化物形式A、形式B、形式C、形式D、 形式E和形式F的結晶產物具有至少98%、優選至少99%、優選至少99.5%、優選至少 99.6 %、優選至少99.7 %、優選至少99.8 %、優選至少99.9 %的HPLC純度。
[0；359] NMR
[0360] 通過將適量的物質完全地溶解在大約0.75ml的NMR溶劑(DMS0-d6)中制備用于NMR 分析的樣品
[0361] 在25°C下使用任一配備有Varian ATB探針的Varian INOVA 400MHz NMR波譜儀記 錄Ih NMR譜。
[0362] 使用標準的采集參數，施加可變數量的掃描（16-256)。無論何時進行NMR定量，將 預獲取延遲設置為lOsec。在處理譜時，施加適當的相位和基線校正。
[036；3] XRPD
[0364] W傳輸模式在具有X ' CeIerator檢測器的分析式X'ped Pro儀器上使用標準的 Aptuit方法收集XRPD光譜。使用化曲Score Plus軟件評估數據。W下列出了使用的儀器參 數。
[03 化]
[C
[0367] 光學顯微鏡
[0368] 在配備有雙偏振器和數字照相機的Leica DM顯微鏡上進行光學顯微鏡分析。W下 列出了方法參數。 「03691
[0370] TGA 和 DSC
[0371 ] 在TA Q5000儀器上或者在Mettler Toledo Star System(形式F分析）上進行TGA 分析。在TA Q2000 MDSC上或者在DSC 200 F3 Maia(形式F分析)儀器上進行DSC分析。W下 列出了DSC和TGA方法詳情：
[0372]
[C
[0J/4」 化受
[03"7日]用具有Leica顯微鏡和數字照相機的Keiser光學系統RXNl MicroRaman進行拉曼 分析
[0376]
[
[ A
[
[
[0381 ] 粒徑分布
[0382] 在開發濕式分散法之后使用Malvern Mastersizer 2000儀器進行粒徑分布（由于 激光散射）。W下列出了方法參數。
[0383]
[0384] 使用W下的樣品制備進行實驗：
[0385] (i)在IOml管狀瓶中稱量IOOmg的材料并且將它們懸浮在5mL的分散劑中；
[0386] (ii)一旦材料全部濕潤，將懸浮液添加至元件（cell)中并且使用另外5mL的分散 劑洗涂管狀瓶；
[0387] (iii)立即測量懸浮液。
[038引 EGA
[0389] 對TGA分析期間產生的氣體進行EGA分析。
[0390] DVS 分析
[0391] 儀器詳情
[0392] 溫度范圍：20-40°C (標準）
[0393] 最大樣品質量:（低/高質量儀器)lg/4g
[0394] 質量變化:+/-150mg
[0395] 穩定性（24小時@25 °C和0 %畑) <化g
[0396] 質量分辨率:+/-0.化g
[0397] 濕度范圍：0-98%畑
[039引 RH精確度:+/-1 %畑
[0399] 溫度穩定性:+/-0. TC
[0400] 通常的氣體流速：100/200sccm [0401 ]樣品室：40mm寬 X 50mm深 X 50mm高
[0402] 儲存器容積：100ml的儲存器容量
[0403] 加熱系統：Peltier+&;rt;ridges
[0404] 在25°C下并且在W下描述的畑％范圍中進行動力學吸濕測量：
[0405] 從40 %畑至90 %畑
[0406] 從90 %畑至0 %畑
[0407] 從0 %畑至90 %畑
[040引從90 %畑至O %畑
[0409] 對IO-ISmg的樣品進行實驗并且將平衡標準設定為在IOmin內的dm/化<0.002 %w/ W，具有240min的最大分步時間（step time)。
[0410] 穩定性測試
[0411] 將樣品置于樣品架上并且存儲于W下條件中：
[0412] 25°C 和 60% 畑中 7 天
[0413] 60°C 和 75% 畑中 3 天
[0414] 在XRro測試之后進行樣品分析。
[041引吸濕性
[0416] 使用在學術文章 "Efficient throughput method for hygroscopicity classification of an active and inactive pharmaceutical ingredients by water vapor sorption analysis''V.Murikipudi et al. ,Pharmaceutical Development and Techno I Ogy，2013，18 (2): 348-358中報道的方法測定樣品的吸濕性。
[0417] 使用下列方程式計算吸濕性：
[041引 ％重量變化=[(胖2-胖1)/胖1]*100;其中
[0419] Wl是實驗開始時樣品的重量;并且
[0420] W2是在25°C和80%^1下在第一次吸收循環中樣品的重量。
[0421 ]分類標準
[0422] 不吸濕的：質量增加小于0.2%;
[0423] 輕微吸濕性的：質量增加小于2%并且等于或者大于0.2% ;
[0424] 吸濕性的：質量增加小于15%并且等于或者大于2% ;
[0425] 非常吸濕性的：質量增加等于或者大于15% ;并且
[0426] 溶解性的：吸附充足的水W形成液體。
[0427] 雖然已經就特定的示例性實施方式描述了本發明，但是應理解的是，在不違背如 在W下權利要求中闡述的本發明的范圍的情況下，對本領域技術人員而言本文中所公開的 特征的各種修改、改變和/或組合將是顯而易見。
【主權項】
1. 一種式(I)的結晶化合物：2. 根據權利要求1所述的結晶化合物，表征為包括選自具有以下2Θ角的峰中的四個或 更多個峰的XRPD光譜：8.82、12.07、14.43、14.92、16.26、18.25、19.06、19.78、20.82和 23·51±0·1 度的 2Θ。3. 根據權利要求1所述的結晶化合物，具有基本上如圖1中所示的XRPD光譜。4. 根據權利要求2或3中任一項所述的結晶化合物，表征為在約163°C±2°C示出吸熱現 象的熱重分析(TGA)曲線。5. 根據權利要求2或3中任一項所述的結晶化合物，表征為在約163°C±2°C示出吸熱現 象的差示掃描量熱(DSC)曲線。6. 根據權利要求1所述的結晶化合物，表征為包括選自具有以下2Θ角的峰中的四個或 更多個峰的XRPD光譜：9.37、10.34、12.59、13.17、15.00、15.63、18.51、19.10、20.79和 23·93±0·10 度的 2Θ。7. 根據權利要求1所述的結晶化合物，具有基本上如圖2中所示的XRPD光譜。8. 根據權利要求6或7中任一項所述的結晶化合物，表征為在約155°C±2°C示出吸熱現 象的熱重分析(TGA)曲線。9. 根據權利要求6或7中任一項所述的結晶化合物，表征為在約180°C ± 2°C示出吸熱現 象的差示掃描量熱(DSC)曲線。10. 根據權利要求1所述的結晶化合物，表征為包括選自具有以下2Θ角的峰中的四個或 更多個峰的XRPD光譜：9.33、10.73、14.85、15.29、15.77、16.16、18.60、20.12、21.00和 23·22±0·1 度的 2Θ。11. 根據權利要求1所述的結晶化合物，具有基本上如圖3中或者圖20中示出的XRPD光 譜。12. 根據權利要求10或11中任一項所述的結晶化合物，表征為在約149°C ± 2°C示出吸 熱現象的熱重分析(TGA)曲線。13. 根據權利要求10或11中任一項所述的結晶化合物，表征為在約185°C ±2°C示出吸 熱現象的差示掃描量熱(DSC)曲線。14. 根據權利要求1所述的結晶化合物，表征為包括選自具有以下2Θ角的峰中的四個或 更多個峰的XRro光譜：6· 7824、15.4567、16.3961、17.1082、20.0651、20.6373、23.2376、 23 · 6811、26 · 1802 和 32 · 4753 ±0 · 05 度的 2Θ。15. 根據權利要求1所述的結晶化合物，具有基本上如圖25中所示的XRPD光譜。16. 根據權利要求1所述的結晶化合物，表征為包括選自具有以下2Θ角的峰中的四個或 更多個峰的XRH)光譜：6.8269、15.0475、15.6848、16.4735、17.1773、18.4488、20.6999、 23 · 3436、23 · 8843 和 25 · 3818 ±0 · 05 度的 2Θ。17. 根據權利要求1所述的結晶化合物，具有基本上如圖27中所示的XRPD光譜。18. 根據權利要求1所述的結晶化合物，表征為包括選自具有以下2Θ角的峰中的四個或 更多個峰的 XRPD 光譜：12·7398、15·3615、15·9547、16·4290、18·1207、20·4870、22·8548、 23 · 2204、27 · 0457、27 · 6934和 32 · 4785 ± 0 · 05 度的 2Θ。19. 根據權利要求1所述的結晶化合物，具有基本上如圖29中所示的XRPD光譜。20. 根據權利要求18或19中任一項所述的結晶化合物，表征為在約160 °C示出吸熱現象 的熱重分析(TGA)曲線。21. 根據權利要求18或19中任一項所述的結晶化合物，表征為在大約184°C示出放熱峰 的DSC分布圖。22. -種用于制備式（I)的結晶化合物的方法：所述方法包括以下步驟： 通過將式（I)的無定形化合物溶解或者懸浮在溶劑或者溶劑混合物中形成配制品；以 及 使來自所述配制品的式(I)化合物結晶。23. 根據權利要求22所述的方法，其中，將所述式（I)的無定形化合物溶解在其中所述 式（I)的無定形化合物在20°C具有大于200mg/ml的溶解度的溶劑或者溶劑混合物中。24. 根據權利要求23所述的方法，其中，所述溶劑或者溶劑混合物選自水、甲醇、乙醇、 1-丙醇、二甲基亞砜、N，N-二甲基甲酰胺以及它們的混合物。25. 根據權利要求23或24所述的方法，包括將抗溶劑添加至所述配制品的步驟，在所述 抗溶劑中，所述式（I)的無定形化合物在20 °C具有小于50mg/ml的溶解度。26. 根據權利要求25所述的方法，其中，所述抗溶劑選自丙酮、乙酸乙酯、甲基叔丁基 醚、庚烷、2-丙醇、乙酸異丙酯、二異丙醚、甲基乙基酮、四氫呋喃、苯甲醚、乙酸叔丁酯以及 它們的混合物。27. 根據權利要求22所述的方法，其中，將所述式（I)的無定形化合物懸浮在溶劑或者 溶劑混合物中。28. 根據權利要求22-27中任一項所述的方法，其中，將成核劑添加至所述配制品。29. 根據權利要求28所述的方法，其中，所述成核劑是式(I)化合物的結晶晶種。30. 根據權利要求22-29中任一項所述的方法，其中，在所述配制品形成之后降低所述 配制品的溫度。31. -種式(I)的結晶化合物其中，所述化合物通過根據權利要求22-30中任一項所述的方法制備。32. 根據權利要求1-21和31中任一項所述的式（I)的結晶化合物，其中，所述化合物包 含大于90 %的所述化合物的單個結晶的多晶型物。33. 根據權利要求1-21和31中任一項所述的式(I)的結晶化合物，具有至少95wt%的化 學純度。34. -種藥物組合物，包含根據權利要求1-21和31-33中任一項所述的式（I)的結晶化 合物。35. 根據權利要求34所述的藥物組合物，還包含抗生素。36. 根據權利要求34或35所述的藥物組合物，用于治療細菌感染。37. -種治療細菌感染的方法，包括將治療有效量的根據權利要求34或35所述的藥物 組合物給予需要它們的患者。38. -種治療細菌感染的方法，包括將治療有效量的根據權利要求34所述的藥物組合 物與治療有效量的抗生素共同給予需要它們的患者。
【文檔編號】A61K31/431GK105873935SQ201480071497
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2014年11月7日
【發明人】亞歷山德羅·拉莫尼卡, 馬爾科·福爾扎蒂, 斯特凡諾·比翁迪
【申請人】阿萊克拉治療股份公司