一種從八角中提取分離莽草酸的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物技術領域的提取方法，具體說是一種從八角中提取分離莽草酸的 方法。
【背景技術】
[0002] 莽草酸分子式為C7H1QO5，相對分子量為174.15，學名是3，4，5-三羥基-1-環己稀-1-羧酸，為白色精細粉末，氣微，味辛酸，易溶于水，難容于氯仿、苯和石油醚，熔點為185°C， 旋光度為-180°。莽草酸分子結構中有三個羥基、一個羧基、一個雙鍵，具有手性異構體。它 可以成酯，也可以成鹽。莽草酸是合成生物體內、新陳代謝化合物的中間體，也是合成許多 生物堿、芳香氨基酸與吲哚衍生物、手性藥物(如抗病毒藥)的原料。莽草酸通過影響花生四 烯酸代謝，抑制血小板聚集，抑制動、靜脈血栓及腦血栓形成，具有抗炎、鎮痛作用。莽草酸 還可作為抗病毒和抗癌藥物的中間體，具有一定刺激性。
[0003] 禽流感是禽流行性感冒的簡稱，是一種由甲型流感病毒的一種亞型引起的傳染性 疾病綜合癥，被國際獸疫局定為A類傳染病。自2005年來禽流感在世界傳播速度十分驚人， 據世界衛生組織統計的數字，H5N1高治病性禽流感在全球已造成149人感染，其中80人死 亡。
[0004] "達菲"是瑞士羅氏有限公司專為治療人類感染禽流感研制的藥物，也是目前唯一 證實的有效的禽流感資料藥物，作為禽流感的治療用藥，達菲的供應量在全球非常緊缺。從 八角提取的莽草酸作為達菲的主要中間體的來源這一方法，是人類抗擊禽流感中的巨大動 力。
[0005] 現有提取分離莽草酸采用的傳統提取方法，以石油醚為有機溶劑提取，技術條件 原因使得有效成分破壞損失很大、含量指標差異很大等。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的是提供一種從八角中提取分離莽草酸的方法，具有工藝簡單，適合 生產，時間短等優點。
[0007] 本發明通過以下技術方案實現，一種從八角中提取分離莽草酸的方法，具體包括 如下步驟：
[0008] 1)前處理:將八角經過提取后得到的浸膏，加入同等重量的純凈水，放入高速分散 乳化機處理，得到高速分散乳化物；
[0009] 2)柱層析:將步驟1)得到的高速分散乳化物，通過陰離子樹脂柱，使得莽草酸被交 換吸附后，再用氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；
[0010] 3)脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉鹽；
[0011] 4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進 行重結晶。
[0012] 本發明步驟1)所述的八角經過提取后得到的浸膏，參照現有技術，優選將八角粉 碎后采用純凈水、或者醇提取后濃縮得到或者是八角茴香工業殘渣利用石油醚進行脫脂處 理后得到;所述的高速分散乳化處理，優選轉速2000-3000r/min、時間5-10min。
[0013] 步驟2)所述的陰離子樹脂優選為330弱堿性環氧系陰離子樹脂、D-941大孔弱堿陰 離子樹脂或D318大孔弱堿陰離子樹脂;所述的氫氧化鈉溶液，優選1-8% (w/w)的氫氧化鈉 溶液；
[0014] 步驟3)所述的陽離子樹脂優選732強酸性苯乙烯系陽離子樹脂、D001大孔強酸性 苯乙烯系陽離子樹脂、強酸1#陽離子樹脂或強酸42 #陽離子樹脂。
[0015] 步驟2)或者步驟3)所述的在陰離子樹脂柱吸附、洗脫以及過陽離子樹脂柱時，流 速優選為每小時樹脂體積的1/2。
[0016] 本發明得到的莽草酸，含量在99.6% (HPLC)以上。
[0017]與現有技術相比，本發明的優點：
[0018] 1、現有技術提取時，一般是對植物原料進行破碎或粉碎后提取得到浸膏，而本發 明是在在柱層析前前，通過高速分散乳化處理含有莽草酸的浸膏，高速分散乳化機的轉子 在高速旋轉時，產生很大的離心力使被處理的物料從旋轉的細長切口（狹縫）中噴出，并在 定子的共同作用下，使被處理的物料受到兩方面的作用力，迫使它通過狹縫的正作用力和 阻止它通過的阻力。同時，被處理的物料從狹縫中噴出時，還受到狹縫的剪切作用，以及由 轉定子相對運動而產生的旋轉剪切力在多種作用力的作用下使物料得到均質、乳化。處理 過的果肉具有顆粒分布范圍窄，均勻度好，無死角，物料100%通過分散乳化的特點。經過高 速分散乳化處理的浸膏，利于后續工序的處理。
[0019] 2、現有技術得到的莽草酸含量一般不超過99%，而本發明得到的莽草酸含量在 99.6%以上。
【具體實施方式】
[0020] 下面以實施例對本發明作進一步說明，但本發明并不局限于這些實施例。
[0021] 實施例1:
[0022] -種從八角中提取分離莽草酸的方法，具體包括如下步驟：
[0023] 1)前處理:將八角粉碎后采用純凈水提取后濃縮得到浸膏，加入同等重量的純凈 水，放入高速分散乳化機處理，轉速2500r/min、時間lOmin，得到高速分散乳化物；
[0024] 2)柱層析：將步驟1)得到的高速分散乳化物，通過330弱堿性環氧系陰離子樹脂 柱，使得莽草酸被交換吸附后，再用5 %氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；
[0025] 3)脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過732強酸性苯乙烯系陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉 鹽；
[0026] 4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進 行重結晶。
[0027] 實施例2:
[0028] -種從八角中提取分離莽草酸的方法，具體包括如下步驟：
[0029] 1)前處理:將八角粉碎后采用醇提取后濃縮得到浸膏，加入同等重量的純凈水，放 入高速分散乳化機處理，轉速2000r/min、時間8min，得到高速分散乳化物；
[0030] 2)柱層析:將步驟1)得到的高速分散乳化物，通過D-941大孔弱堿陰離子樹脂柱， 使得莽草酸被交換吸附后，再用8 %氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；
[0031] 3)脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過D001大孔強酸性苯乙烯系陽離子樹脂柱脫鹽， 除去鈉鹽；
[0032] 4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進 行重結晶。
[0033] 實施例3:
[0034] -種從八角中提取分離莽草酸的方法，具體包括如下步驟：
[0035] 1)前處理:將八角茴香工業殘渣利用石油醚進行脫脂處理后得到的浸膏，加入同 等重量的純凈水，放入高速分散乳化機處理，轉速3000r/min、時間5min，得到高速分散乳化 物；
[0036] 2)柱層析:將步驟1)得到的高速分散乳化物，通過D318大孔弱堿陰離子樹脂柱，使 得莽草酸被交換吸附后，再用1 %氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；
[0037] 3)脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過強酸1#陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉鹽；
[0038] 4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進 行重結晶。
[0039] 對比例1:
[0040] 1)前處理:將八角粉碎后加入8倍量純凈水提取后得到提取液；
[0041] 2)柱層析:將步驟1)得到的提取物濃縮后，通過330弱堿性環氧系陰離子樹脂柱， 使得莽草酸被交換吸附后，再用5 %氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；
[0042] 3)脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過732強酸性苯乙烯系陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉 鹽；
[0043] 4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進 行重結晶。
[0044] 對比例2:
[0045] 1)前處理:將八角粉碎后加入同等重量的純凈水，放入高速分散乳化機處理，轉速 2500r/min、時間8min，得到高速分散乳化物，再加入5倍量純凈水提取后得到提取液；
[0046] 2)柱層析:將步驟1)得到的提取物濃縮后，通過330弱堿性環氧系陰離子樹脂柱， 使得莽草酸被交換吸附后，再用5 %氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；
[0047] 3)脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過732強酸性苯乙烯系陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉 鹽；
[0048] 4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進 行重結晶。
[0049] 結果：
【主權項】
1. 一種從八角中提取分離莽草酸的方法，其特征在于，具體包括如下步驟： 1) 前處理:將八角經過提取后得到的浸膏，加入同等重量的純凈水，放入高速分散乳化 機處理，得到高速分散乳化物； 2) 柱層析:將步驟1)得到的高速分散乳化物，通過陰離子樹脂柱，使得莽草酸被交換吸 附后，再用氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液； 3) 脫鹽:將步驟2)得到的洗脫液過陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉鹽； 4) 結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進行重 結晶。2. 根據權利要求1所述的一種從八角中提取分離莽草酸的方法，其特征在于:步驟1)所 述的高速分散乳化處理，轉速2000_3000r/min、時間5-10min。3. 根據權利要求1所述的一種從八角中提取分離莽草酸的方法，其特征在于:步驟2)所 述的陰離子樹脂為330弱堿性環氧系陰離子樹脂、D-941大孔弱堿陰離子樹脂或D318大孔弱 堿陰離子樹脂。4. 根據權利要求1所述的一種從八角中提取分離莽草酸的方法，其特征在于:步驟3)所 述的陽離子樹脂為732強酸性苯乙烯系陽離子樹脂、D001大孔強酸性苯乙烯系陽離子樹脂、 強酸1 #陽離子樹脂或強酸42#陽離子樹脂。5. 根據權利要求1所述的一種從八角中提取分離莽草酸的方法，其特征在于:步驟2)或 者步驟3)所述的在陰離子樹脂柱吸附、洗脫以及過陽離子樹脂柱時，流速為每小時樹脂體 積的1/2。
【專利摘要】本發明公開了一種從八角中提取分離莽草酸的方法，具體包括如下步驟：1)前處理：將八角經過提取后得到的浸膏，加入同等重量的純凈水，放入高速分散乳化機處理，得到高速分散乳化物；2)柱層析：將步驟1)得到的高速分散乳化物，通過陰離子樹脂柱，使得莽草酸被交換吸附后，再用氫氧化鈉溶液洗脫，得洗脫液；3)脫鹽：將步驟2)得到的洗脫液過陽離子樹脂柱脫鹽，除去鈉鹽；4)結晶：將除鹽后的洗脫液濃縮后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀結晶，再用丙酮進行重結晶。
【IPC分類】C07C51/42, C07C62/32
【公開號】CN105601498
【申請號】CN201610128508
【發明人】楊少凡, 陳思羽, 馬創偉, 雷長林, 胡林剛, 賴積南
【申請人】廣西萬山香料有限責任公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2016年3月8日