豆渣水解液高密度酵母工藝的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及酶化學處理技術，具體地說是豆渣水解液高密度酵母工藝。
【背景技術】
[0002]大豆又名黃豆、青仁烏豆、泥豆，其品種多樣，有冬豆、秋豆和四季豆，大豆的形狀有球形、橢圓形等，具有多種顏色，例如:淡綠色、黑色、黃色等。大豆的用途有很多多，可加工成多種豆制品或加工成大豆油等。是一種種子含有豐富植物蛋白和糖類的作物，大豆的營養價值很高，我國主要生產于東北地區。
[0003]豆渣是豆制品如豆腐、豆奶等生產加工過程中的副產物，雖是副產物，但仍具有豐富的營養元素。目前豆渣主要是用做飼料、肥料，利用效率較低，有些甚至被作為垃圾被拋棄，直接污染環境。豆渣產量大、有利用價值，目前利用率較低。因此，如何對豆渣進行綜合利用，提高產品的附加值，
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供一種新型工藝白酒工段生產工藝。
[0005]為了解決【背景技術】問題，本發明采用以下技術方案:豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟:
[0006]I)培養基配制:酵母篩選用固體培養基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0007]酵母馴化用固體培養基;水解液200?700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L;
[0008]種子用培養基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0009]酵母發酵用培養基;水解液200?700ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L;
[0010]2)種子培養:篩選培養前經兩次傳代培養后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養。
[0011]3)生長曲線的測定:取種子培養液于新的發酵液中每隔2小時測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩定期；
[0012]4)目標菌株的篩選:選取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L6個水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養基，用微量移液槍逐個接種3ml的處于生長期的種子培養菌液于一系列濃度梯度的培養基中，28°C振蕩培養18-24小時后取菌液稀釋平板涂布培養，進一步純化，重復操作直至篩選出單個菌落，最后即可制備斜面固體培養基保藏菌種，以備后續實驗使用；
[0013]5)選取處于培養至生長期左右的種子培養液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養基中移取3ml的種子培養液，從而將酵母菌轉入液體培養基中，28°C恒溫振蕩培養18-24小時。
[0014]綜上所述，此發明有益效果如下:本發明中依據現代酶工程技術原理和輔助物理與化學處理技術，采用有針對性的高效酶制劑生物活性物質材料，高效地降解豆渣營養成分為五碳糖、氨基酸，主要作為白酒發酵主要原料。研究降解的最適酶解工藝，為豆渣的高值化利用及后期微生物發酵研究作前提優。
【具體實施方式】
[0015]實施例一
[0016]豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟:
[0017]I)培養基配制:酵母篩選用固體培養基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0018]酵母馴化用固體培養基;水解液200?700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L;
[0019]種子用培養基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0020]酵母發酵用培養基;水解液200ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L;
[0021]2)種子培養:篩選培養前經兩次傳代培養后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養。
[0022]3)生長曲線的測定:取種子培養液于新的發酵液中每隔2小時測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩定期；
[0023]4)目標菌株的篩選:選取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L6個水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養基，用微量移液槍逐個接種3ml的處于生長期的種子培養菌液于一系列濃度梯度的培養基中，28°C振蕩培養18小時后取菌液稀釋平板涂布培養，進一步純化，重復操作直至篩選出單個菌落，最后即可制備斜面固體培養基保藏菌種，以備后續實驗使用；
[0024]5)選取處于培養至生長期左右的種子培養液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養基中移取3ml的種子培養液，從而將酵母菌轉入液體培養基中，28°C恒溫振蕩培養18小時。
[0025]實施例二
[0026]豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟:
[0027]I)培養基配制:酵母篩選用固體培養基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0028]酵母馴化用固體培養基;水解液700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L;
[0029]種子用培養基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0030]酵母發酵用培養基;水解液700ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L;
[0031]2)種子培養:篩選培養前經兩次傳代培養后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養。
[0032]3)生長曲線的測定:取種子培養液于新的發酵液中每隔2小時測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩定期；
[0033]4)目標菌株的篩選:選取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L
6個水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養基，用微量移液槍逐個接種3ml的處于生長期的種子培養菌液于一系列濃度梯度的培養基中，28°C振蕩培養24小時后取菌液稀釋平板涂布培養，進一步純化，重復操作直至篩選出單個菌落，最后即可制備斜面固體培養基保藏菌種，以備后續實驗使用；
[0034]5)選取處于培養至生長期左右的種子培養液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養基中移取3ml的種子培養液，從而將酵母菌轉入液體培養基中，28°C恒溫振蕩培養24小時。
【主權項】
1.豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟: 1)培養基配制:酵母篩選用固體培養基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L; 酵母馴化用固體培養基;水解液200?700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L; 種子用培養基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L; 酵母發酵用培養基；水解液200?700ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L; 2)種子培養:篩選培養前經兩次傳代培養后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養。 3)生長曲線的測定:取種子培養液于新的發酵液中每隔2小時測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩定期； 4)目標菌株的篩選:選取2001111/1、3001111/1、40011111/1、5001111/1、6001111/1、7001111/16 個水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養基，用微量移液槍逐個接種3ml的處于生長期的種子培養菌液于一系列濃度梯度的培養基中，28°C振蕩培養18-24小時后取菌液稀釋平板涂布培養，進一步純化，重復操作直至篩選出單個菌落，最后即可制備斜面固體培養基保藏菌種，以備后續實驗使用； 5)選取處于培養至生長期左右的種子培養液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養基中移取3ml的種子培養液，從而將酵母菌轉入液體培養基中，28°C恒溫振蕩培養18-24小時。
【專利摘要】本發明公開了豆渣水解液高密度酵母工藝，依據現代酶工程技術原理和輔助物理與化學處理技術，采用有針對性的高效酶制劑生物活性物質材料，高效地降解豆渣營養成分為五碳糖、氨基酸，主要作為白酒發酵主要原料。研究降解的最適酶解工藝，為豆渣的高值化利用及后期微生物發酵研究作前提優。
【IPC分類】C12N1/16
【公開號】CN105543117
【申請號】CN201610076990
【發明人】孫傳伯, 韓邦興, 陳存武, 陳乃富
【申請人】安徽楚井坊酒業有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年1月31日