一種細胞分離管的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物醫學領域的細胞分離技術，特別是涉及一種細胞分離管。
【背景技術】
[0002] 在臨床醫學檢驗中，針對特定細胞功能和生物學特性的檢查常常涉及到細胞的分 離技術，從外周血液和各種體液（胸水、腹水、心包積液等）中分離單個核細胞是體外進行 淋巴細胞免疫學研究和細胞學實驗的重要前處理步驟，分離的目的細胞的質和量是保證后 續實驗可靠性的重要環節。
[0003] 外周血單個核細胞（peripheralbloodmononuclearcells，PBMCs)是參與機體 免疫應答反應的一類重要免疫細胞群。PBMCs主要包含淋巴細胞和單核細胞，PBMCs中大部 分（80%~90%)為淋巴細胞，對不同淋巴細胞的分離、鑒別以及功能的研究對疾病的診斷 乃至治療都有十分重要的臨床意義。
[0004] 目前，普遍采用的是淋巴細胞分離液通過密度梯度法實現細胞分離，但是分離過 程中，特別是大批量樣本處理時，血液樣品加入淋巴細胞分離液時，二者界面很容易發生混 合，造成分離效果差，效率低。
【發明內容】
[0005] 本發明提出一種細胞分離管，其結構簡單便于制造，安全無毒且成本低廉。
[0006] 本發明的技術問題通過以下的技術方案予以解決：
[0007] -種細胞分離管，包括管體和置于所述管體內的細胞分離膠體，所述細胞分離膠 體與所述管體底部之間形成一空腔，所述細胞分離膠體在25°C時比重為1. 06-1. 09,所述 細胞分離膠體在600g-1000g的離心力作用下能觸變成液體。
[0008] 優選地：
[0009] 所述細胞分離膠體的厚度為1. 〇cm-2· 0cm。
[0010] 所述細胞分離膠體具有疏水性，由以下重量份數的各組分組成：
[0011] 雙環戊二烯樹脂：90-100份；
[0012] 海藻糖：3-4份；
[0013] 山梨糖醇：0· 8-1. 2份；
[0014] 細顆粒二氧化硅：2-2. 5份；
[0015] 聚乙二醇：0· 5-0. 8 份；
[0016] 聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：8-12份；
[0017] 有機膨潤土 ： 5-7份。
[0018] 進一步優選地：
[0019] 所述細胞分離膠體由以下重量份數的各組分組成：
[0020] 雙環戊二烯樹脂：95· 00份；
[0021] 海藻糖：3.20份；
[0022] 山梨糖醇：0.90份；
[0023] 細顆粒二氧化硅：2. 25份；
[0024]聚乙二醇：0.60份；
[0025] 聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：10份；
[0026] 有機膨潤土：5. 5份。
[0027] 所述細顆粒二氧化硅的平均粒度為0. 05-1μm。
[0028] 本發明的有益效果是：本發明中的細胞分離膠體的觸變性好、穩定性強、材料相容 性好，生物毒性小，耐輻照。由于細胞分離膠體本身具有伸縮性和觸變性，可以依靠其自身 的伸縮性而固定在管體下方，不需要任何的膠水來粘合，也可以不需要對管體做任何特殊 的結構，在加入血液進行細胞分離的時候，在特定大小的離心力作用下，細胞分離膠體發生 觸變形成液體，在分離管中向上移動，把高于和低于細胞分離膠體密度的細胞隔開。
【附圖說明】
[0029] 圖1是采用本發明的細胞分離管分離PBMCs細胞的過程示意圖。
【具體實施方式】
[0030] 下面對照附圖并結合優選的實施方式對本發明作進一步說明。
[0031] 如圖1所示，本發明提供一種細胞分離管，在一個優選實施例中，該細胞分離管包 括管體1和細胞分離膠體2,細胞分離膠體2具有伸縮性，依靠自身的伸縮性置于管體1 內，無外力作用時，不會移動，將細胞分離膠體2置于管體1的中下部位置較適宜，在細胞分 離膠體2與管體1的底部之間形成一空腔，細胞分離膠體在25°C時比重為1. 06-1. 09,在 600g-1000g的離心力作用下能觸變成液體，細胞分離膠體的厚度為1.Ocm-2. 0cm。
[0032] 本發明所用的管體，可以根據需要采用常見的各種容量規格的離心管。在優選的 實施例中，細胞分離膠體具有疏水性，并由以下重量份數的各組分組成：雙環戊二烯樹脂 (DCPD樹脂）：90-100份；海藻糖：3-4份；山梨糖醇：0. 8-1. 2份；細顆粒二氧化硅：2-2. 5 份；聚乙二醇：0. 5-0. 8份；聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：8-12份；有機膨潤土：5-7份。 其中，所述的細顆粒二氧化硅的平均粒度為〇.05-1μm。
[0033] 以分離淋巴細胞為例，本發明的細胞分離管工作時的具體操作過程如圖1所示， 其中1表示管體，2表示細胞分離膠體，3表示血液樣品，4表示細胞分離液，5表示紅細胞，6 表示PBMCs細胞，7表示血漿。圖1中，左圖：將細胞分離液倒入細胞分離管內，細胞分離液 最好緊貼細胞分離膠體，不能有氣泡；圖1中的中圖：然后將血液樣品倒入細胞分離管，此 時，由于細胞分離膠體的隔離，血液樣品與細胞分離液不會混合，旋緊蓋子，放入離心機，設 置常規的離心力（600g_1000g之間的任意離心力）和常規的離心時間進行離心；圖1中的 右圖：在離心力場的作用下，細胞分離膠體觸變成液體，細胞分離管內形成具有梯度的液體 體系，根據密度的大小不同，細胞分離管內的液體分成清晰的五層，從下到上依次是：紅細 胞5、細胞分離液4、細胞分離膠體2、PBMCs細胞6以及血漿7。然后取出細胞分離管，吸去 最上層的血漿層，吸出PBMCs細胞層，清洗，離心，染色，計數。
[0034] 采用本發明的細胞分離管經過多次實驗，發現分離血液淋巴細胞的效果非常理 想，與傳統的直接使用細胞分離液進行淋巴細胞分離作了對比，具體的實驗數據見下方的 表一，其中，本實施例中所用的細胞分離膠體由以下重量份數的各組分組成：雙環戊二烯樹 脂：95. 00份；海藻糖：3. 20份；山梨糖醇：0. 90份；細顆粒二氧化硅：2. 25份；聚乙二醇： 〇.60份；聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：10份；有機膨潤土：5. 5份。
[0035] 表一：本發明的細胞分離管、傳統的細胞分離液分離全血得到的淋巴細胞得率
[0036]
[0037] 實驗表明，分離相同量的血液，本發明的細胞分離管的分離效果比傳統的細胞分 離液的分離效果好。
[0038] 以上內容是結合具體的優選實施方式對本發明所作的進一步詳細說明，不能認定 本發明的具體實施只局限于這些說明。對于本發明所屬技術領域的技術人員來說，在不脫 離本發明構思的前提下，還可以做出若干等同替代或明顯變型，而且性能或用途相同，都應 當視為屬于本發明的保護范圍。
【主權項】
1. 一種細胞分離管，包括管體，其特征在于：還包括置于所述管體內的細胞分離膠體， 所述細胞分離膠體與所述管體底部之間形成一空腔，所述細胞分離膠體在25°c時的比重為 1. 06-1. 09,所述細胞分離膠體在600g-1000g的離心力作用下能觸變成液體。2. 如權利要求1所述的細胞分離管，其特征在于：所述細胞分離膠體的厚度為 1.Ocm-2. 0cm〇3. 如權利要求1所述的細胞分離管，其特征在于：所述細胞分離膠體具有疏水性，由以 下重量份數的各組分組成： 雙環戊二烯樹脂：90-100份； 海藻糖：3_4份； 山梨糖醇：0.8-1. 2份； 細顆粒二氧化硅：2-2. 5份； 聚乙二醇：0.5-0.8份； 聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：8-12份； 有機膨潤土 ： 5-7份。4. 如權利要求3所述的細胞分離管，其特征在于：所述細胞分離膠體由以下重量份數 的各組分組成： 雙環戊二烯樹脂：95. 00份； 海藻糖：3. 20份； 山梨糖醇：0.90份； 細顆粒二氧化硅：2. 25份； 聚乙二醇：〇. 60份； 聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：1〇份； 有機膨潤土 ：5. 5份。5. 如權利要求1所述的細胞分離管，其特征在于：所述細顆粒二氧化硅的平均粒度為 0. 05-1μm〇
【專利摘要】本發明公開了一種細胞分離管，包括管體，還包括置于所述管體內的細胞分離膠體，所述細胞分離膠體與所述管體底部之間形成一空腔，所述細胞分離膠體在25℃時的比重為1.06-1.09，所述細胞分離膠體在600g-1000g的離心力作用下能觸變成液體。在加入血液進行細胞分離的時候，在特定大小的離心力作用下，本發明的細胞分離管中的細胞分離膠體發生觸變形成液體，在分離管中向上移動，把高于和低于細胞分離膠體密度的細胞隔開。
【IPC分類】C12M1/24
【公開號】CN105420088
【申請號】CN201510765755
【發明人】周翔, 吳慶軍
【申請人】深圳市達科為生物工程有限公司
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年11月11日